仔猪大肠菌腹泻基因工程活菌苗质量检测

仔猪大肠菌腹泻基因工程活菌苗质量检测张群伟，王叙甫，于公义，冯尔玲，周艳荣，凌辉英（军事医学科学院生物工程研究所，北京１００８５０）预防仔猪大肠菌腹泻Ｋ＿（８８）－ＬＴＢ基因工程活菌苗（简称ＭＭ活菌苗）是用生物高技术研制成功的新型菌苗，通过免疫母猪哺...     

仔猪大肠杆菌病的防治

从本省４个县６４窝具有典型大肠杆菌病症状的仔猪粪便中，分离出６１析ＥＴＥＣ，经鉴定主要为Ｋ８８，其次是Ｋ９９和Ｋ９１，用含Ｋ８８０－ＬＴＢ的双价工程菌苗免疫１６６头母猪所产１５８８头仔猪，３０日龄内腹泻发病率为１０．９１％，对照组为５５．４２％；扩大试验免疫组发病率，也大大低于对照调查组的发病率；用庐菌苗二次免疫优于一次免疫，差异极显著；用微生态制剂促菌生预防该病后发病率为２．４５％来１１．６１％     

猪霍乱沙门氏菌─大肠杆菌K88ac、LT（A~－B~＋）二联基因工程菌对仔猪的

猪霍乱沙门氏菌─大肠杆菌Ｋ８８ａｃ、ＬＴ（Ａ~－Ｂ~＋）二联基因工程菌对仔猪的免疫保护试验陈陆平（长春市农业科学院长春１３０１１１）韩文瑜，梁焕春（农牧大学基础部）将表达大肠杆菌Ｋ８８ａｃ、ＬＴ（Ａ－Ｂ＋）的双表达质粒，导入猪霍乱沙门氏菌弱毒疫苗株构建...     

二种仔猪腹泻基因工程苗应用效果观察

据我场的疫情统计，１９９３～１９９７年共１０２９６头发生仔猪黄痢、白痢性腹泻，发病率占仔猪数的２８６％；死亡３２１４头，致死率为８９３％。为预防该病流行，我们引进了两种仔猪腹泻基因工程苗，并对其效果进行了观察。１　材料与方法　１１　疫苗　仔猪腹泻双价基因工程（Ｋ８８—ＬＴＢ）菌苗，作为试验Ⅰ组，由北京军事医学科学院生物工程所研制提供；仔猪腹泻基因工程双价Ｋ８８Ｋ９９灭活疫苗，作为试验Ⅱ组，由上海联盈基因工程有限公司和上海松江兽医生物药品厂联合生产、提供。１２　免疫母猪　选择其仔猪有黄痢、…     

表达大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合蛋白双价基因工程菌株的构建

重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后,其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测,结果表明重组菌株可以高效表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１－ＬＴＢ 融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的３３．２１％ ,而且已失去天然ＳＴ１肠毒素生物毒性。用从ＩＰＴＧ 诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗１．５ＭＬＤ 的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ,ＳＴ＋ ,ＬＴ＋ ）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ＳＴ１肠毒素的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株     

大肠杆菌肠毒素ST1—LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究

已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原,免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗１５ＭＬＤ的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ,ＳＴ＋,ＬＴ＋）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ＳＴ１的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。     

仔猪腹泻基因工程双价苗预防试验

某猪场饲养的哺乳仔猪黄痢发病率高达６０％以上，死亡率２０％以上，而白痢却无发生或零垦存在，因引发仔猪黄痢的大肠杆菌大多具有Ｋ８８、Ｋ９９表面抗原，所以，用仔猪腹泻基因工程双价Ｋ８８、Ｋ９９灭活疫苗进行预防抗体，从而降低黄痢的发病率、死亡率。现将试验报告如下： １材料与方法： １．１选择年龄相同的“长大”生产母猪２６头，随机分成Ａ、Ｂ两组，Ａ组为试验组，Ｂ组为对照组，经检疫２６头母猪均健康无病。 １．２疫苗。 由上海联盈基因工程有限公司和上海松江兽医生物药品厂联合生产的“仔猪腹泻基因工程双价Ｋ８８、Ｋ…     

仔猪大肠杆菌腹泻、K88、K99、987P三价灭活菌苗的免疫效果

将１４０头妊娠后期的母猪分成试验组与对照组，用仔猪大肠杆菌腹泻Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ三价灭活菌苗免疫试验组母猪，对照组不接种菌苗。结果表明，试验组母猪所生仔猪黄痢的发病率、死亡率明显降低。     

K88─LTB双价工程疫苗预防仔猪黄白痢效果的观察

Ｋ８８─ＬＴＢ双价工程疫苗预防仔猪黄白痢效果的观察巩晓荣甘肃省甘谷县畜牧兽医服务中心（７４１２００）何董代甘肃省甘谷县城关良种养殖场仔猪黄白痢是由产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）引起，以腹泻为特征的哺乳仔猪急性肠道传染病。从对全县养猪场（户）的调查来看，...     

鸡马立克氏病活疫苗免疫效力比较试验

用ＨＶＴ冻干苗、ＨＶＴ细胞结合苗、ＣＶＩ９８８细胞结合苗、ＳＢ１＋ＦＣ１２６双价活疫苗、３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６双价活疫苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）疫苗免疫ＳＰＦ白来航鸡或普通伊莎鸡，用鸡马立克氏病病毒（ＭＤＶ）强毒ＧＡ株、京－１血毒以及鸡马立克氏病超强毒ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株分别攻击进行免疫效力比较试验。试验表明，ＭＤ单价苗的免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８、ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗，这３种ＭＤ单价苗均能给免疫鸡群提供有效的免疫保护力。ＳＢ１＋ＦＣ１２６、Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６等３种ＭＤ双价苗免疫效力显著高于ＭＤ单价苗，均能给免疫鸡群提供较强的免疫保护力，并能有效地抵抗ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株的致瘤作用。Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６ＭＤ双价苗免疫效力无显著差异     

仔猪腹泻K88—LTB双价工程疫苗应用效果观察

仔猪腹泻Ｋ８８—ＬＴＢ双价工程疫苗应用效果观察陈联荣，张志聪（大田县畜牧兽医站）肠毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）引起的新生仔猪腹泻。是一种常见的、对仔猪危害性很大的传染病．发病率很高，尤其黄痢导致仔猪大量死亡为了寻找预防本病的新途径，我们于１９９３年４月引...     

仔猪大肠杆菌病的防治

从本省４个县（市）６４窝具有典型大肠杆菌病症状的仔猪粪便中，分离出６１株ＥＴＥＣ，经鉴定主要为Ｋ８８（３４／６１），其次是Ｋ９９（１１／６１）和Ｋ９１（８／６１）；用含Ｋ８８－ＬＴＢ的双价工程菌苗免疫１６６头母猪所产１５８８头仔猪，３０日龄内腹泻发病率为１０．９１％，对照组为５５．４２％；扩大试验免疫组发病率（１．７２％），也大大低于对照调查组的发病率（６．８％）；用该菌苗二次免疫优于一次免疫（仔猪发病率分别为：１０．９６％和３２．５１％），差异极显著（Ｐ＜０．０１）；用微生态制剂促菌生预防该病后发病率为２．４５％，对照组为１１．６２％，且试验组比对照组２８日龄时个体增重高０．６ｋｇ；证明促菌生对防治大肠杆菌病有较大的潜力。本试验用四种药物进行了治疗对比试验，痢菌净治愈率为７７．３７％、链霉素为９５．７％、庆大霉素复合剂为９６．８％、促菌为生８２．９６％。用痢菌净治疗免疫母猪所产病仔猪２５７头，治疗２３５头，治疗率为９１．４３％。通过本试验我们认为，目前疫苗与药物结合是防治仔猪大肠杆菌的最佳措施     

中药口服液治疗仔猪黄白痢试验研究

中药口服液治疗仔猪黄白痢试验研究朱兆荣刘娟吕国金＊吴涛＊周洪蓉（四川畜牧兽医学院动物医学系，荣昌６３２４６０）仔猪黄白痢是由致病性大肠杆菌引起的仔猪常见肠道传染病。由于该病的诱发因素多，病原血清型复杂，变异性大，Ｋ８８－ＬＴＢ、ＭＭ－３工程等菌苗处于...     

仔猪腹泻k88－LTB遗传工程菌苗免疫效果观察

仔猪腹泻ｋ８８－ＬＴＢ遗传工程菌苗免疫效果观察新生仔猪腹泻主要是因肠霉素索性大肠杆菌（ＥＦＥＣ）引起１周内仔猪发生黄痢、２－８周内仔猪发生白痢的多发性传染病。我市仔猪黄白痢发病率为６０％，死亡率２０％左右，严重影响仔猪成活，阻碍生长发育，对养猪业的危...     

仔猪黄白痢的综合防治措施

1预防措施 1．1免疫接种 按程序对母猪进行免疫接种，以提高其初乳中特异性母源抗体的水平，从而使仔猪获得被动免疫力．可用大肠杆菌K88、K99双价基因工程菌苗和大肠杆菌苗K88、K99、987P三价灭活菌苗等对临产前母猪按说明书进行免疫。     

重组牛白细胞介素-2增强小鼠对伊氏锥虫可溶性抗原免疫应答的研究

使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠，研究了同时注射重组牛白细胞介素－２（ｒＢＩＬ－２）对ＮＫ细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为４组：Ａｇ组，ｒＢＩＬ－２组，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组和ＰＢＳ对照组。以ＬＤＨ释放法和间接ＥＬＩＳＡ法分别检测脾ＮＫ细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明，首次免疫后２４ｄ，Ａｇ组ＮＫ细胞杀伤活性为３１．６％，ｒＢＩＬ－２组为９９．６６％，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为９８．９８％，对照组为１９．７３％；抗体效价Ａｇ组为２４，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为２６。说明ｒＢＩＬ－２可显著提高ＮＫ细胞杀伤活性及促进抗体生成，提高宿主免疫力。     

巴氏杆菌弱毒苗和鸡新城疫弱毒苗饮水免疫蛋鸡后分泌型免疫球 …

用巴氏杆菌弱菌苗和鸡新城疫弱毒苗通过饮水分别免疫１２月龄的蛋鸡，以葡萄球菌Ａ蛋白－辣根过氧化酶（ＳＰＡ－ＨＲＰ）和兔抗鸡分泌免疫球蛋白Ａ（ＳＩｇＡ）间接组分染色，显示消化道相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）呼吸道相关淋巴组织（ＲＡＬＴ）和脾ＳＩｇＡ细胞的产生和分布，结果显示：巴氏杆菌弱毒苗免疫组的蛋鸡在十二指肠和盲肠扁桃体中ＳＩｇＡ阳性细胞于首免后３５天出现国多，并一直持续增加到首免后５６天，鸡新城疫弱毒苗     

仔猪黄痢五价苗对苏太猪的免疫效果观察

本场是江苏省规模最大的苏太猪扩繁场 ,现有能繁苏太母猪 52 8头 ,苏太种公猪 1 0头。近年来采用仔猪黄痢基因工程五价苗免疫母猪 ,乳猪成活率不断提高。仔猪黄痢是由致病性大肠杆菌引起的新生仔猪的一种传染病。引起仔猪黄白痢的肠毒性大肠杆菌对诱发腹泻的粘附因子主要有Ｋ88、Ｋ99、987Ｐ、Ｆ4 1、ＬＴＢ等。而目前多数疫苗仅含有Ｋ88、Ｋ99两种因子。为了验证仔猪黄痢基因工程五价苗 (以下简称五价苗 )的效果 ,1 999年 1 2月至 2 0 0 0年 6月在我场进行本试验 ,现将试验情况报告如下 :1　试验材料与方法1 .1　试验疫苗 :为不带毒素的Ｋ8…     

规模化猪场4种猪瘟免疫程序的免疫效果比较

采用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测猪瘟母源抗体消长规律和４种猪瘟免疫程序的免疫效果。结果，在７，１４，２１，２８和３５日龄时，猪瘟母源抗体阳性率分别为８０％、６０．０％，１３．４％和６．７％，其抗体效价几何平均值（ＧＭＴ）分别为１；８８、１：６９、１：５９、１：４０和１：３５。     

弓形虫病免疫的研究：弓形虫排泄分泌抗原制备及其对怀孕母羊免疫效…

弓形虫ＧＪＳ株速殖子通过传代细胞（ＢＨＫ－２１）培养，制备排泄分泌抗原（Ｅ／ＳＡ），蛋白含量为２．０９５ｍｇ／ｍｌ；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳分析显示２１条区带，分子量在１８～１２０ＫＤ，其中６８ＫＤ为主带，次带７条。用Ｅ／ＳＡ与佐剂（Ｍ－２０６）制备Ｅ／ＳＡ疫苗，对３０只（２公，２８母）弓形虫血检抗体阴性，混群自然交配５０天的适龄健康绵羊随机分组进行免疫，间隔２０天再加强免疫１次。第１组于混群后８