家兔脾虚证动物模型血浆环核苷酸与血清胆碱酯酶活性的研究

脾虚症是中医和中兽医临床常见症型之一。为了探讨其发生机理，试验以中兽医学的理论为指导，应用大黄水煎液，给家兔胃管投眼，复制出家兔脾虚证模型，测定其血浆环核苷酸（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ）及血清胆碱酯酶活性（ＡＣＨＥ）变化。结果表明，脾虚模型组与对照组和造模前比较，血浆ｃＡＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ显著下降（Ｐ〈０．０５）；血浆ｃＧＭＰ有升高的趋势，但无统计学意义（Ｐ〉０．０５），血清Ａ     

水牛血液与肝组织中cAMP、cGMP与cAMP/cGMP的正常水平及其在感染肝片吸虫后的动态变化

选择２ ～３ 岁，体重３００～４００ ｋｇ 雄性健康去势水牛２０ 头。用放射免疫方法测定水牛血清和肝组织中ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ水平及其在感染肝片吸虫后的动态变化。结果表明：水牛血清ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ正常水平分别为（２－１１ ±０．４６） ｎｍｏｌ／Ｌ，（０．８２ ±０．０７） ｎｍｏｌ／Ｌ和２．２０ ±０．４１ 。肝组织匀浆三者水平值分别为（０－３５±０－０４） ｎｍｏｌ／ｇ，（０－１５ ±０－０１） ｎｍｏｌ／ｇ，２－３８±０－３４。慢性感染条件下，感染后２ ～１１ 周，血清ｃＡＭＰ与ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ在高于对照组的范围内波动，ｃＧＭＰ水平则与对照组相近；肝组织匀浆的ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ均高于对照组。急性感染水牛血清ｃＡＭＰ在感染后３～７ 周期间低于或显著低于对照组，而ｃＧＭＰ在高于对照组波动，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值在感染后１～１５ 周低于对照组；肝组织匀浆中的ｃＧＭＰ显著高于对照组，而ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ则显著低于对照组。结果提示，肝片吸虫感染能导致宿主的ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值紊乱。     

801对肉鸡血浆和肝脏环核苷酸含量影响的研究

用放射免疫分析法研究了添加５００ｍｇ／ｋｇ８０１生物活性添加剂（简称８０１）对艾维茵鸡血浆和肝脏ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量的影响。结果表明,８０１能极显著地升高肉鸡血浆和肝脏ｃＡＭＰ水平,显著升高血浆和肝脏ｃＧＭＰ水平,ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值增大,血浆和肝脏ｃＡＭＰ呈显著的正相关（ｒ＝０．６１６５,ｎ＝１６）。鉴于环核苷酸是重要的第二信使,因而,本项研究为８０１作用机制的探讨提供了分子生物学水平的依据。     

雏鸡在感梁IBDV后血浆cAMP,cGMP和IL—2水平变化

在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０－５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ－２水平动态变化。结果表明：示免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ＣＡＭＰ和ＣＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组,ＣＡＭＰ／ＣＧＭＰ幽会同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组,ＩＬ－２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内,Ｂ和Ｃ组ＣＡＭＰ明显升高,而Ａ组     

新生反刍动物血浆cAMP和cGMP水平变化初探

初步观察了６头黑白花犊牛和３只湖羊羔生后２４ｈ内血浆环腺苷酸（ｃＡＭＰ）和环鸟苷酸（ｃＧＭＰ）水平变化。结果表明：犊牛出生时ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ分别为１．１２±０．１０ｐＭ／ｍｌ和０．８７±０．０４ｐＭ／ｍｌ，羔羊生后１ｈ分别为１．２０±０．０１ｐＭ／ｍｌ和０．３９±０．０１ｐＭ／ｍｌ，在生后２～４ｈ内犊牛和羔羊ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ均呈上升趋势，以后在相对高水平波动直至２４ｈ，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值生后较高，２ｈ内下降，以后处于较低的比值直至２４ｈ     

雏鸡在感染IBDV后血浆cAMP、cGMP和IL-2水平变化

在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ２水平动态变化。结果表明：未免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组,ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组,ＩＬ２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内,Ｂ和Ｃ组ｃＡＭＰ明显升高,而Ａ组没有类似的变化,第５天明显低于Ｂ和Ｃ组,以后Ｂ和Ｃ组仍高于或显著高于攻毒前和同期Ａ组水平。在攻毒后Ａ和Ｂ组ｃＧＭＰ均呈波动性上升趋势,第７天明显高于攻毒前水平并高于Ｃ组,以后Ａ、Ｂ、Ｃ三组均下降,但Ａ组比Ｂ和Ｃ组下降更快。在攻毒后２８天内,Ａ组ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值无明显变化,Ｂ组波动上升,Ｃ组处于高水平上,Ｂ和Ｃ组均高于或明显高于Ａ组。血浆ＩＬ２水平Ａ和Ｂ组在ＩＢＤＶ攻毒后的头７天内呈逐渐下降趋势,但Ａ组下降的更剧烈,Ｃ组无明显差异性变化,三组相比,Ｂ和Ｃ组均高于或明显高于Ａ组,以后Ａ和Ｂ组逐渐回升。     

白细胞介素-1α调节仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的机制

本实验利用体外培养的２～３周龄仔猪睾丸间质细胞，研究了ＩＬ１α调节间质细胞睾酮分泌的机制。结果表明，ＩＬ１α能抑制ｈＣＧ刺激间质细胞分泌睾酮，其睾酮产生量随ＩＬ１α剂量增大（０～１００μ／ｍｌ）及刺激时间延长（０～４８ｈ）而下降。用２０μ／ｍｌ和５０μ／ｍｌ的ＩＬ１α刺激４８ｈ，可分别抑制６０％和６５％的睾酮产生。ＩＬ１α同样抑制ｃＡＭＰ（３μｍｏｌ／ｍｌ）诱导的间质细胞睾酮的分泌，但不影响ｈＣＧ与间质细胞膜受体的结合量及ｈＣＧ诱导的第二信使ｃＡＭＰ的增加。说明ＩＬ１α抑制ｈＣＧ促睾酮分泌的作用，其抑制点不在ｈＣＧ与受体的结合及第二信使ｃＡＭＰ的聚集上，而在ｃＡＭＰ产生之后的某个环节。     

IGF-Ⅰ对山羊睾丸间质细胞分泌睾酮的调节机理

以３０～４０日龄山羊的睾丸间质细胞为研究对象,采用体外细胞培养的方法,用胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）和ｈＣＧ进行不同的处理,用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定了睾酮和ｃＡＭＰ的含量,用荧光分光光度分析法测定了ＤＮＡ含量。结果表明,ＩＧＦ－Ⅰ能促进体外培养的山羊睾丸间质细胞ｃＡＭＰ生成、睾酮分泌及ＤＮＡ合成,以上作用随ＩＧＦ－Ⅰ剂量的增大而加强,并且与ｈＣＧ有协同作用。根据以上结果首次提出ＩＧＦ－Ⅰ调节山羊睾丸间质细胞分泌睾酮机理的假设：ＩＧＦ－Ⅰ与其膜受体结合引起ｃＡＭＰ增多,ｃＡＭＰ通过激活一系列合成ＤＮＡ和睾酮所需酶类而使ＤＮＡ和睾酮的合成增加。这与催乳素（ＰＲＬ）和白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）等含氮激素（因子）调节间质细胞分泌睾酮的机理不同,而与ＦＳＨ、ＬＨ等含氮激素调节性腺分泌类固醇激素的作用机理相似。     

甲氧氯普胺与奶山羊泌乳

通过以不同剂量的甲氧氯普胺饲喂泌乳期奶山羊试验，结果显示，高剂量（每只羊２００ｍｇ／日）及低剂量（每只羊１００ｍｇ／日）均有显著增乳作用，净增乳量分别达１３．３０％和１２、８４％，添加期乳中ｃＧＭＰ和ｃＡＭＰ水平均升高，ｃＧＭＰ达显著水平且与产奶量呈强正相关，乳品质无明显改变。     

类固醇激素对牛输卵管上皮细胞分泌的调节及其分泌物对小鼠胚…

模拟发情期（０～６ｄ）母牛外周血浆雌激素和孕酮变化水平，在添加相应水平１７β雌二醇和孕酮的ＴＣＭ－１９９液中，培养间情期牛输卵管上皮细胞（ＢＯＥＣ），５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＢＯＥＣ分泌物，发现上皮细胞受类固醇激素作用分泌的２类蛋白质分子量与自然发情期（０～６ｄ）分泌的特异蛋白相似。证明类固醇激素可以调节和启动间情期ＢＯＥＣ的分泌活动，当雌二醇浓度高达１ｍｇ／Ｌ时，即使不加孕酮，ＢＯＥＣ仍能分泌这     

8301多糖配合柔嫩艾美耳球虫免疫对鸡血浆cAMP和cGMP含量的影响

用放射免疫法测定了８３０１多糖配合鸡柔嫩艾美耳球虫活卵囊免疫后第１４、２８、４２及５６ｄ鸡血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量。结果表明，８３０１多糖配合柔嫩艾美耳球虫免疫后第１４～５６ｄ，鸡血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量维持在较高水平，至５６ｄ时与单一多糖免疫组、单一球虫活卵囊免疫组有显著差异（Ｐ＜０．０５），且ｃＧＭＰ含量与多糖免疫组亦有显著差异（Ｐ＜０．０５）。证明８３０１多糖配合鸡柔嫩艾美耳球虫活卵囊免疫对激发ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ升高以促进抗体生成和细胞免疫功能优于单纯活卵囊。     

类固醇激素对牛输卵管上皮细胞分泌的调节及其分泌物对小鼠胚胎发育的影响

模拟发情期（０～６ｄ）母牛外周血浆雌激素和孕酮变化水平，在添加相应水平１７β－雌二醇和孕酮的ＴＣＭ－１９９液中，培养间情期牛输卵管上皮细胞（ＢＯＥＣ）。５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＢＯＥＣ分泌物，发现上皮细胞受类固醇激素作用分泌的２类蛋白质分子量与自然发情期（０～６ｄ）分泌的特异蛋白相似。证明类固醇激素可以调节和启动间情期ＢＯＥＣ的分泌活动。当雌二醇浓度高达１ｍｇ／Ｌ时，即使不加孕酮，ＢＯＥＣ仍能分泌这２类蛋白质。在培养小鼠原核胚的ＣＺＢ培养液内添加牛输卵管上皮细胞分泌蛋白（ＢＯＥＰ），与添加间情期牛输卵管冲洗蛋白（ＢＯＰ）和小牛输卵管冲洗蛋白（ＣＯＰ）相比，能显著提高通过２－细胞阶段胚胎的百分率和桑囊形成率，表明ＢＯＥＰ能较好地促进胚胎的分裂和发育。但ＢＯＥＰ组的桑囊形成率显著低于对照组，表明ＢＯＥＰ中可能缺少某些低于Ｍｒ１．０×１０４的蛋白因子的协调作用，以及含有Ｍｒ３．０×１０４～５．６×１０４的分泌蛋白的抑制作用而阻碍胚胎分裂与发育。     

在家畜的急性应激模式中下丘脑—垂体—肾上腺轴和交感神经系统的功能

在对应激物的反应中，家畜（和其它哺乳动物）的中枢神经系统最终引起下丘脑－垂体－肾上腺皮质（ＨＰＡ）轴和交感－肾上腺轴的激活。据推测，在应激期间这些系统的反应在调节机体适应性和体内平衡中有重要作用。调节肾上腺糖皮质激素合成和分泌的主要激素是促肾上腺皮质素（ＡＣＴＨ）。在绵羊、牛和猪，促肾上腺皮质素释放激素（ＣＲＨ）和加压素（ＶＰ）都参与调节ＡＣＴＨ的分泌，这两种肽似乎通过互相作用来促进其分泌。ＣＲＨ     

囊虫病循环抗原酶联免疫试剂检测盒的研制

以部分纯化囊虫抗原免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠,取其脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合制备抗囊虫循环抗原（ Ｃ Ａ） Ｍｃ Ａｂ ,共获得 ８ 株分泌抗囊虫 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ 细胞株。经鉴定,筛选出组合后能获得最佳检测效果的 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ细胞株 Ｍ ｃ Ａｂ １ Ｃ７（包被）和 Ｈ Ｒ Ｐ１ Ｂ５ 作为检测用的 Ｍ ｃ Ａｂ,用其建立了检测囊虫 Ｃ Ａ 的双抗体夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法,并研制了囊虫病 Ｃ Ａ 检测试剂盒。试剂盒用于检测囊虫病 Ｃ Ａ,敏感、特异、快速、简便,囊虫病血清 Ｃ Ａ的检出率为 ９１．４３％ ,脑脊液 Ｃ Ａ 的检出率为 ９４．４４％ 。     

氯霉素间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法的建立

以人工合成的氯霉素－牛血清白蛋白（ＣＡＰ－ＢＳＡ）为包被抗原,氯霉素（Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ,ＣＡＰ）为竞争的半抗原,两者与一定量的抗ＣＡＰ单抗（ＣＡＰ－ＭｃＡｂ）反应。实验结果表明,理想的包被抗原浓度为１．２５μｇ／ｍｌ,抗ＣＡＰ－ＭｃＡｂ工作浓度为１：１２０００,酶标二抗工作浓度为 １： ５０００,可测最适范围为 １ｎｇ／ｍｌ－１００ｎｇ／ｍｌ,最小检测量为０．１ｎｇ／ｍｌ,批内和批间变异系数分别为３． ６２％和 ５． １９％。得到回归方程 ｙ ＝１．２７３０－ ０．６７４５ｘ（ｒ２＝ ０． ９７７９）和标准曲线,从而建立了快速定量测定 ＣＡＰ含量的间接竞争酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）。整个测定时间为６小时。     

分泌抗猪细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

将猪细小病毒（ＰＰＶ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／０细胞在聚乙二醇作用下融合，用血凝抑制试验（ＨＩ）筛选，以有限稀释法克隆３次，得到５株分泌抗ＰＰＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ），选择抗体分泌较高的４Ｆ４、Ａ４或Ｅ８进行较详细的研究，结果表明，其核内染色体数为９３和８７，抗体属性为ＩｇＧ１，其中１株为Ｋ轻链，用交叉ＨＩ法对２株ＭｃＡｂ作特异性分析，该ＭｃＡｂ只特异地与ＰＰＶ发生反应，而不与日本乙     

第二信使因子对牛卵母细胞体外成熟的影响

本研究旨在确定第二信使因子对牛卵母细胞体外成熟的影响，并探讨通过添加双丁酰ｃＡＭＰ及其激活剂、延长成熟时间，以提高卵母细胞胞质成熟质量的可行性。成熟液添加０．１ｍｍｏｌ／Ｌ的ｄｂｃＣＭＰ对牛卵母细胞成熟后的囊胚发育率有促进作用（４６．５％比３８．５％，Ｐ〈０．０８）。当成熟培养时间为２２ｈ时，０．１ｍｍｏｌ／Ｌ的ｄｂｃＡＭＰ或ｄｂｃＧＭＰ对卵母细胞的分裂率、囊胚发育率及其囊胚的孵化率均无明显影响（     

家兔脾虚动物模型免疫功能的变化

经胃管给家兔投服苦寒中药大黄,复制家兔脾虚动物模型,用四君子汤治疗,研究其免疫功能变化。结果表明：脾虚模型组家兔的体重、外周血淋巴细胞转化率、Ｅ－玫瑰花环形成率及血浆ｃＡＭＰ和ｃＣＡＭＰ／ｃＧＭＰ较对照组显著下降（Ｐ＜０．０５或０．０１）;经四君子汤治疗后以上指标均显著升高（Ｐ＜０．０５或０．０１）。说明脾虚时机体免疫功能降低,四君子汤治疗对脾虚时的免疫功能有促进作用。     

ＡＭ真菌摩西球囊霉对盐胁迫条件下高羊茅生长特性的影响

 随着全球变化,土壤次生盐渍化日益加重,直接影响到植物的生长发育。高羊茅是重要草坪绿化植物,如何提高其耐盐性是当前亟待解决的问题之一。本研究旨在前期试验的基础上,评价丛枝菌根（ａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌ,ＡＭ）真菌改善高羊茅耐盐性的效应,探索ＡＭ真菌增强高羊茅耐盐性的作用机制。在盆栽条件下,对高羊茅接种摩西球囊霉并用不同浓度ＮａＣｌ（０％,０．８％,１．２％ 和１．６％）溶液进行处理。结果表明,接种摩西球囊霉能增加高羊茅叶片抗氧化酶（ＳＯＤ、ＰＯＤ 和ＣＡＴ）活性和抗氧化剂（抗坏血酸）含量、渗透调节物质（可溶性糖和脯氨酸）含量、矿质元素（Ｎ、Ｐ、Ｓ、Ｚｎ、Ｋ、Ｃａ和Ｍｇ）含量、Ｋ／Ｎａ、Ｍｇ／Ｎａ、Ｃａ／Ｎａ和植物内源激素脱落酸（ＡＢＡ）、细胞分裂素（ＩＰＡ）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）和赤霉素（ＧＡ）含量;降低丙二醛（ＭＤＡ）、Ｎａ^＋、Ｃｌ^－含量和膜透性。认为ＡＭ真菌能通过增强植物抗氧化系统的反应,降低氧化胁迫造成的伤害,减缓Ｎａ^＋ 和Ｃｌ^－ 毒害,改善养分的吸收,强化渗透调节作用,维持激素平衡等来提高其耐盐能力。     

抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与中和效应

用提取的 Ａ 型产气荚膜梭菌 α毒素包涵体免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠后， 取小鼠脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 骨髓瘤细胞进行融合和克隆化，经间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 筛选，共获得 １ Ａ８、１ Ｃ３、１ Ｄ５、１ Ｄ８、１ Ｆ１、１ Ｈ１ 和 ２ Ｅ３ ７ 株稳定分泌单克隆抗体（ Ｍ ｃ Ａｂ）的杂交瘤细胞株。经鉴定，７ 株 Ｍ ｃ Ａｂ 的 Ｉｇ 亚类有 Ｉｇ Ｇ１（１ Ｄ８）、 Ｉｇ Ｇ３（１ Ａ８、１ Ｃ３ 和 ２ Ｅ３）和 Ｉｇ Ｍ（１ Ｄ５、１ Ｆ１ 和 １ Ｈ１）。细胞培养上清和腹水抗体效价分别为 １∶５１２～１∶１ ０２４ 和 １∶１０６ ～１∶１０８ 。尤为重要的是，２ Ｅ３ 杂交瘤细胞株分泌的 Ｍ ｃ Ａｂ 不仅能够中和 α毒素的磷脂酶 Ｃ活性和溶血活性，而且能够对致死性腹腔感染小鼠产生良好的被动保护作用。