猪嵴病毒流行概况及诊断方法的研究进展

近年来,我国仔猪腹泻情况爆发频繁,给我国养猪业造成了严重的经济损失。研究人员在检测病原时发现仔猪腹泻中猪嵴病毒呈现很高的检出率,这引起了兽医研究者的广泛关注。文章根据国内外最新研究资料,首先对猪嵴病毒病原学的研究进展进行了介绍;其次,针对目前猪嵴病毒流行病学概况进行了阐述,对猪嵴病毒流行病学特点进行了讨论;再次,对比猪嵴病毒的几种诊断方法,探讨了各自的优势和不足;最后,展望了猪嵴病毒的未来研究趋势和方向,希望能为猪嵴病毒的进一步研究提供一些有意义的信息。     

2株弱血凝活性H9N2亚型禽流感病毒特性的研究

试验旨在对2株血凝活性较弱的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)进行病毒特性的研究。采用HA/HI、电镜观察、HA和NA测序等方法对2株分离株进行了病毒的鉴定;采用形态学、化学和生物学方法对这2株分离株进行研究。2株病毒被确定为A型H9N2亚型AIV;病毒粒子在透射电镜下为圆形、椭圆形、杆状并呈多型性,大小为80~120 nm;血凝素(HA)均为中等耐热型;病毒50 ℃均耐热;均能凝集公鸡和人O型红细胞,但凝集作用开始并未出现,而是随着病毒的传代逐渐恢复;均不凝集猪、牛、羊、兔和马红细胞;2株病毒均对乙醚、氯仿不敏感,只有1株病毒对酸敏感;病毒对鸡胚无致死性,EID₅₀均为1×10^-7/0.2 mL;经鼻腔途径感染小白鼠,均未导致小鼠出现症状和死亡,接种后第14天在小鼠血清中可检出相应病毒的抗体。研究结果表明,上海地区活禽交易市场存在对环境条件具有较强耐受性的H9N2亚型AIV。     

蚀斑克隆技术纯化猪传染性胃肠炎病毒分离株

为了研究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)体外分离纯化方法,试验采用蚀斑技术对TGEV进行克隆纯化,建立了TGEV蚀斑形成方法,并利用该方法对含有TGEV的混合感染病毒进行3次克隆筛选,并对纯化后的病毒进行了一系列检测试验。结果表明:纯化后的病毒产生的蚀斑大小一致且RT-PCR检测TGEV阳性率为100%;对不同代次细胞毒进行RT-PCR检测结果均为阳性;间接免疫荧光试验中,病毒组有特异性荧光产生;直接负染法可看到典型的病毒结构,证明该克隆毒株在ST细胞上能够稳定增殖;纯化后的病毒效价有所提高。说明试验初步建立的TGEV蚀斑形成方法可用于分离毒基础生物学特性及病毒相关应用研究。     

鹅副黏病毒ZJ1人工感染鸡的病理组织学研究

<正>鹅副黏病毒属于副黏病毒科副黏病毒亚科腮腺炎病毒属[1]。过去对鹅副黏病毒的研究非常有限,因为很多人认为鹅不会感染副黏病毒,即使感染也不会发病[2]。但近期的研究发现,鹅副黏病毒不仅会感染鹅,还会感染鸡,而且发病率和死亡率都可达到100%,这就引起了人们对鹅副黏病毒的关注,但有关该病的发病机理和病理组织学方面的研究依然欠缺。试验是以江苏省动物流行病学研究中心实验室分离的鹅副黏病毒ZJ1株进行鸡的人工感染,在观察     

猪圆环病毒的复制

猪圆环病毒是环状的单链DNA病毒,可以感染家猪和野猪。猪圆环病毒有两种型。猪圆环病毒2型可以引起断奶后多系统衰竭综合征,与此相反,猪圆环病毒1型没有致病性。猪圆环病毒DNA通过滚环复制机制进行复制。另有研究显示,质粒和单链病毒有类似的滚环复制机制,如双生病毒。滚环复制中重要的3种元件:①编码启动蛋白的基因;②双链起始位点;③单链起始位点。但是病毒与质粒之间以及不同的病毒之间存在着不同。猪圆环病毒的复制是采用融合型滚环复制机制,而不是交叉型滚环复制机制。作者对当前有关以猪圆环病毒复制作为圆环病毒属模型的研究进展进行了总结。通过多方面的研究,确定了影响复制的因素,并对复制不同时期的机制进行了描述或提出了假设。     

禽网状内皮组织增生症病毒MD-2株感染性克隆的构建与突变分析

为构建禽网状内皮组织增生症病毒(REV)MD-2株的感染性克隆,将MD-2株的前病毒基因组全长克隆至pMD18-T Simple载体中构建MD-2全长质粒,经转染CEF细胞后进行病毒拯救及鉴定,并对拯救病毒进行了生物学特性研究。结果表明,成功构建了MD-2全长质粒,拯救病毒感染CEF细胞后用间接免疫荧光试验检测到病毒抗原;拯救病毒的生长特性与亲本病毒相比无明显差异。随后对env基因进行了多个位点的定点突变,并拯救出相应的突变株,结果显示env基因第1433位碱基突变后不能拯救出病毒,推断1433位的突变为致死性突变。MD-2株感染性克隆的构建和病毒拯救的研究为继续研究REV基因和蛋白功能提供了技术支持。     

猪流行性腹泻病毒可在污水池中存活数月

<正>根据加拿大研究人员的研究表明,猪流行性腹泻病毒(PEDV)可以在污水池中存活超过9个月。研究报告中指出,加拿大马尼托巴的2个猪场在这项研究开展前20周被感染猪流行性腹泻病毒;去年秋季他们连续7周对污水池1和2进行采样,研究、检测是否会出现具有活性的猪流行性腹泻病毒。     

PCV2 ORF2蛋白重组PRV病毒PGO株的生物学特性

PCV2ORF2蛋白重组PRV病毒生物学试验研究表明:重组病毒PGO株在PK15细胞、ST细胞、VERO细胞、IBRS-2细胞上病毒增殖滴度分别为104.125/0.1、106.125/0.1、104.625/0.1、106.25/0.1mL。RT-PCR、倒置荧光显微镜观察、IPMA试验结果表明插入基因在重组病毒中进行表达。该重组病毒具有PRV病毒的通性;安全性试验结果表明该重组病毒对小鼠是安全的;遗传稳定性研究表明包含有PCV2ORF2基因的重组伪狂犬病毒具有稳定的遗传性状;这些研究为研发PCV2病毒重组伪狂犬病毒疫苗奠定了基础。     

丁达尔效应定位伪狂犬病病毒密度梯度离心区带

在病毒密度梯度离心纯化过程中,利用光对不同大小粒子发生散射的强弱,即丁达尔效应,定位超速离心后形成的离心区带;以伪狂犬病毒为研究对象,以不连续梯度蔗糖为介质,超速离心后,通过光束对离心区带生的丁达尔效应进行精确分层取样,并对处理后的离心区带样品分别进行透射电镜观察,发现区带3中存在大量符合伪狂犬病病毒形态学特征的病毒颗粒。本研究将光学物理现象与经典病毒纯化方法相结合,大大提高了病毒纯化成功率,对密度梯度离心法提纯各种病毒或者蛋白的实验操作均有指导意义。     

鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB 荧光定量RT-PCR检测方法的建立

本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验,探讨荧光定量RT-PCR与EID₅₀方法测定病毒含量的相关性,并通过体外转录技术对病毒基因拷贝数进行定量分析。该方法特异性强,与其他禽源病毒均无交叉反应;该方法可检测到5.60×10¹拷贝/μL的病毒核酸,与常规PCR相比,敏感性高10倍;重复性试验的变异系数为0.9%~3.2%;与EID₅₀检测结果的相关系数r＝0.934,两种方法在检测H52株病毒效价上具有很好的相关性。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法,适合于对鸡传染性支气管炎病毒H52株病毒含量的快速定量检测。     

猫传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定

采用直接免疫荧光和测序方法对5株病毒分离株进行了病毒的鉴定;并采用免疫学、化学和生物学方法对这5株病毒分离株进行了研究。结果显示,5株病毒分离株被鉴定为猫疱疹病毒I型;g D序列未发生变化;病毒仅在F81细胞中增殖,能引起F81细胞明显的细胞病变;猫、公鸡、人O型、牛、猪、兔、绵羊的红细胞不具有凝集作用;病毒对pH3.0、有机溶剂和60℃高温敏感;病毒蚀斑形成单位为3×10~6个PFU/m L,纯化株TCID50值为10~(-5.0)TCID_(50)/0.1m L。该研究结果表明,上海地区宠物猫存在猫传染性鼻气管炎流行风险,其病原为猫疱疹病毒I型且部分病原特性未发生变化。     

羊痘病毒

羊痘为我国法定的一类传染病,目前针对羊痘病毒尚无特效药。研究人员对羊痘病毒基因组进行了深入的研究,并建立了一系列针对羊痘病毒的检测方法。文章就近年来对羊痘病毒及其基因结构和检测方法的研究进行总结,为防治羊痘病毒提供理论依据。     

上海地区犬细小病毒的分离及VP2基因序列分析

为了解上海地区犬细小病毒流行毒株的情况,本研究使用病毒分离和PCR技术对上海某犬养殖场采集内脏样品进行了形态学、分子病毒学等鉴定.结果显示,病毒能在MDCK细胞上生长,并产生细胞变圆、破碎、脱落等细胞病变;能凝集猪红细胞.用犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)特异性引物对病毒进行PCR扩增,能够扩增出CPV特异性片段,经序列测定分析与GenBank FJ432316相近.本研究对了解和掌握犬细小病毒流行病学及其变异趋势具有重要的作用.     

猪瘟病毒受体与配体研究进展

<正>病毒受体与病毒配体的结合是病毒吸附和侵染靶细胞的关键步骤,阻断病毒受体与病毒配体的结合,可以有效阻止病毒吸附靶细胞,从而控制病毒感染。因此,开展病毒受体与病毒配体的研究对病毒性疾病防控具有重要意义,目前已经成为病毒学的热点研究领域,从病毒受体和配体角度阐明病毒分子感染机制,为进一步研发病毒性疾病的新型药物和疫苗奠定基础。本文从病毒受体与病毒配体的概念、猪瘟病毒(CSFV)受体和配体的研究进展以及病毒受体与病毒配体相互作用在治疗病毒性疾病中的应用3个方面进行介绍,为预防和控制CSFV     

应用电子显微镜技术对畜禽多种病毒的检查

我们应用电子显微镜技术,经过十多年的工作,对一些畜禽传染病的病原进行了形态学研究。这些病原中包括马传染性贫血强毒及其弱毒;鸡马立克氏病病毒、火鸡疱疹病毒;猪传染性胃肠炎病毒;牛流行热病毒;鸡传染性支气管炎强毒及其弱毒;鸡喉     

影响家蚕表达外源基因效率的几个重要因子的比较研究

本研究以重组病毒rSj14NPV为感染病毒,通过比较纯化蛋白的产量,对家蚕作为生物反应器生产基因工 程产品的适宜蚕品种与相关的重组病毒接种技术进行了比较研究。研究结果表明:871×872、秋风×白玉为表达 Sj14的适宜蚕品种;重组病毒接种量与蛋白表达量有关,适宜接种量为4～5μL/蚕;适宜接种时间以5龄2日龄为 优;以家蚕表达外源基因,最好将重组病毒以家蚕细胞复苏后再接种家蚕以保证获得较高的表达效果。     

猪蓝耳病病毒感染野猪病例的实验室检测

应用猪蓝耳病、猪瘟RT-PCR检测试剂盒对疑似猪蓝耳病病毒、猪瘟病毒混合感染野猪病料进行检测,并对阳性材料进行病原特征基因序列测定与分析,结果显示:送检病料存在猪蓝耳病病毒感染,但不存在猪瘟病毒感染;对猪蓝耳病病毒流行株NPS2基因分析表明,野猪源蓝耳病病毒NPS2基因与家猪源同源性达95.2%以上,是存在基因缺失的高致病性猪蓝耳病病毒。研究结果说明,高致病性猪蓝耳病病毒可引起野猪发病,应采取相应疫苗免疫进行防控。     

犊牛呼吸道合胞体病毒和巴氏杆菌混合感染的调查研究

为了对疑似牛呼吸道合胞体病毒和巴氏杆菌混合感染的犊牛进行病原鉴定,本研究采用常规病毒经细菌分离鉴定和PCR方法分别进行分离与鉴定。结果表明,该病毒株能在BT细胞上增殖并产生特征性合胞体形态的细胞病变;无血凝性和血吸附特性;能被牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)标准阳性血清中和;分离的病毒经RT-PCR鉴定为牛呼吸道合胞体病毒;根据菌落形态、细菌染色特性及生化特性,鉴定分离的细菌为巴氏杆菌。提示,该牛场为牛呼吸道合胞体病毒和巴氏杆菌混合感染。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5/6和ORF6/7重叠区的分离(人工)改造病毒的构建及鉴定

为了研究重叠序列在病毒繁殖周期中所起的作用以及更好地操作感染性克隆,将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染性克隆ORF间（ORF5／6和ORF6／7）重叠区域分离并插入酶切位点,成功构建两个突变的全长质粒,随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明：（1）两个全长质粒均能够进行病毒拯救,并产生明显细胞病变;（2）突变病毒具遗传稳定性;（3）病毒空斑形态及生长曲线与亲本毒株近似。表明PRRSVORF间重叠碱基的安排方式对病毒的感染性是非必需的,获得的两株突变病毒为进一步研制PRRSV基因标识疫苗、研究PRRSV各编码蛋白功能奠定了基础。     

病毒细胞受体研究技术及其应用现状

病毒感染宿主细胞的过程实质是病毒受体与配体之间的相互作用。病毒受体和配体的研究是明确病毒致病机理的关键,因此关于病毒细胞受体的研究一直是近年来病毒学研究的重点领域。病毒受体的鉴定可通过多种生物技术手段进行,如酵母双杂交法、病毒覆盖蛋白结合技术等。文章对当前的病毒细胞受体研究技术及其应用现状进行了综述,以期为今后的相关研究提供参考。