应用间接荧光抗体技术检测兔波氏杆菌

以兔波氏杆菌为免疫原,强化免疫家兔,制备兔抗血清为第一抗体;以标准的羊抗兔IgG-FITC荧光抗体为第二抗体,建立了检验兔败血波氏杆菌的间接荧光抗体技术.用火焰、甲醇、丙酮三种方法固定标本,分别经过10 min和20 min两种不同时间固定,然后滴加不同稀释倍数的兔抗血清,滴加羊抗兔IgG-FITC,于荧光显微镜下观察.结果表明甲醇固定10 min和火焰固定,兔抗血清抗体效价为1:80时效果最好.     

直接荧光抗体法检测禽波氏杆菌

制备了兔抗禽波氏杆菌特异性荧光抗体并建立了直接荧光抗体检测方法 ,对禽波氏杆菌在人工感染雏鸡内的致病机理作了初步研究。结果 ,该荧光抗体只与其相应菌株发生特异性荧光反应 ,而不与其他病原菌株发生反应。对人工感染发病雏鸡的检测结果表明 ,禽波氏杆菌主要定植于上呼吸道黏膜 ,并造成损害。该技术具有简便、快速、敏感和特异性强等优点     

应用间接荧光抗体技术诊断兔病毒性出血症

一、试验材料(一)毒(菌)种1.兔瘟肝传代毒:某生药厂肝传代毒L1/5以及对人 O 型红细胞凝集价在1:1280以上的自然野毒(肝悬液),于-25℃低温冰箱保存。2.巴氏杆菌菌种:中国兽医药品监察所提供的 C51—6菌种以及自然病例分离的巴氏杆菌。(二)异硫氰荧光素标记的绵羊抗兔球蛋白荧光抗体卫生部上海生物制品研究所产品(特异性染色单位1:16),临用前用0.01M PBS 做1:16倍的稀释。     

兔支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立及应用

根据支气管败血波氏杆菌菌毛蛋白基因(fimN)序列设计了一对引物,扩增出大小为648bp的目的基因片段,建立了快速检测兔支气管败血波氏杆菌的PCR方法。特异性和敏感性试验表明,该方法对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和巴氏杆菌均无交叉性反应。用该PCR法检测了从杨凌、咸阳采集的50份表现临床症状的兔呼吸道分泌物检出支气管败血波氏杆菌阳性35例,阳性率为70%。同时与传统的细菌检查法、微量凝集法进行了比较,结果显示,该PCR法的检出率是细菌检查法的3.89倍,是微量凝集法的1.94倍。     

联合检测兔巴氏杆菌和波氏杆菌病血清抗体的Dot-ELISA方法研究

兔多杀性巴氏杆菌病(Pm)和兔支气管败血波氏杆菌病(Bb)是家兔的两种主要细菌性传染病。兔波氏杆菌病可引起家兔的慢性鼻炎,兔巴氏杆菌病也可引起包括呼吸道在内的多种疾病。试验旨在建立一种简便、快速、经济、准确的联合检测Pm和Bb抗体水平的方法,可用于这两种疾病的免疫监测及流行病学调查。1材料1.1菌种兔巴氏杆菌Pm90株、兔支气管败血波氏杆菌Bb82株,为山东省农业科学院畜牧兽医研究所分离保存[1]。1.2血清大肠杆菌多因子血清、沙门菌多因子血清,购自中国兽药监察所;魏氏梭菌、兔瘟、Pm和Bb阳性血清,山东省农业科学院畜牧兽医研究所…     

兔波氏杆菌病的诊治

２０００年１２月，大连市甘井子区营城镇在４２日龄幼兔群中发生了波氏杆菌病。诊治结果报告如下：１临床症状该场存栏兔８０００余只，在４个兔舍中有５６只４２日龄以下幼兔于１０日龄左右相继发病并陆续死亡２０只。临床表现：精神萎靡，食欲不振，鼻腔内及外周有浆液性及脓性鼻汁。有的呼吸急促，偶有打喷嚏。２病理变化解剖病死兔１０只，均有支气管充血、管腔内有脓性分泌物，肺脏内有多个黄豆大至蚕豆大脓疱，切开脓疮，流出如奶油样脓汁。有的病兔胸腔有多量脓性积液，胸膜及心包呈纤维化脓性炎症，心肌有大量灰白色坏死灶。有的病…     

兔波氏杆菌的分离与鉴定

为了分离鉴定重庆市开县某肉兔场种兔和幼兔发生鼻炎的病原菌及筛选敏感的药物,试验采用细菌分离培养、形态学鉴定、生化试验、PCR扩增及基因测序、动物接种试验、药物敏感试验。结果表明:从发病种兔和幼兔鼻分泌物中分离到两株致病菌,都属支气管败血波氏杆菌;两株菌对氟苯尼考、阿奇霉素、菌必治、丁胺卡那霉素、卡那霉素高度敏感;兔场立即选用氟苯尼考注射液治疗,并实施消毒、隔离等综合防制措施,使疫情得到有效控制。     

间接荧光抗体技术检测鸭疫里氏杆菌

鸭疫里氏杆菌是危害养鸭业的重要的传染病之一,主要侵害１～８周龄肉鸭。自然感染情况下主要表现为心包炎、肝周炎,发病和死亡随着饲养环境条件有所差异,平均死亡率在２０％左右。该病在我国养鸭地区普遍存在,由于该细菌的分离和鉴定方法未能够被广大的兽医工作人员所...     

兔波氏杆菌病病原的分离与鉴定

从不同日龄病、死兔的肺部病变组织中分离到３株细菌，经形态特征、培养及生化特性、药敏试验以及动物接种回归试验等，结果表明，分离的３株细菌都是有鞭毛、能运动、无芽胞的革兰氏阴性小杆菌，在血平板上呈β溶血，在包－姜氏基上能产生棕色色素，且能与兔支气管败血波氏杆菌参考菌株Ｓ８０１０３抗血清发生凝集，用波氏杆菌参考菌株Ｓ８０１０３免疫过的兔不能抵抗波氏杆菌分离菌株的攻击，发病死亡，并且可从死亡兔体内分离到相应的细菌，而用波氏杆菌分离菌株Ｂｒ－Ｓ９５免疫的兔全部获得保护。     

间接荧光抗体法快速检测中国淡水鱼主要病原菌

本研究制作了６种兔抗中国淡水鱼主要病原菌（鳗弧菌,弧菌Ⅰ组淡水亚弧菌,嗜水气单胞菌,柱状嗜胞菌,荧光假单胞菌和鲁克氏耶尔森菌）的纯化抗体,用间接荧光抗体法与各病原菌以及来源于水环境和鱼体分离菌发生反应。结果,抗各病原菌抗体在１∶５００稀释后,只与其相应菌株发生特异性荧光反应,而不与其它病原菌株以及水环境和鱼体分离菌株发生特异性反应,并可在１００ｍｉｎ内定性检出抗原。作者推测,此法能用于检测中国鱼类病原菌的并发、继发和混合性感染。     

兔波氏杆菌病的诊治

兔波氏杆菌病又称"支气管败血波氏杆菌病",是由支气管败血波氏杆菌引起兔的一种以慢性鼻炎、支气管炎及咽炎为特征的呼吸道疾病。讷河市某养兔户饲养的40日龄幼兔发生波氏杆菌病,现将诊断及防治结果报告如下。1流行情况及临床症状该养兔户饲养兔120多只,2006年11月在2个兔舍中有21只40日龄以下的幼兔在     

兔波氏杆菌病的诊断与防治

兔波氏杆菌病的诊断与防治金璐娟王海珊张春岱贾丽娟（黑龙江省畜牧兽医学校·双城·１５０１１１）（双城市双城镇畜牧站１９９５年１１月，双城某兔场在４０日龄幼兔群中流行波氏杆菌病，现将诊断及防治结果报告如下。１临床症状该场存栏兔１００００多只，当时在三个兔...     

兔波氏杆菌病的诊治

1 流行状况 我市郊区某养兔场有2500多只肉兔，分5群饲养。2000年4月20日，在第一群兔中发现出生不久的仔兔发病，经3～4天后死亡。此后，各兔群中每天均有5～6只肉兔发病死亡。各种年龄、性别的兔均有发病，而以未断奶的仔兔发病死亡最多。     

禽波氏杆菌免疫荧光检测和抗体检测ELISA方法的建立与应用

采用改良的Wooldridge法提取了禽波氏杆菌外膜蛋白（0MP）,通过Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量为320μg／mL,SDS-PAGE电泳检测发现禽波氏杆菌P5株OMP含有5种成分,相对分子质量分别为58、47、41、36、24ku;P8株OMP含有6种成分,相对分子质量分别为58、47、41、38、21、16ku。将提取的禽波氏杆菌OMP免疫健康青紫兰兔,每周免疫1次,共免疫4次,获得了兔抗禽波氏杆菌OMP高免血清,以此高免血清建立了检测禽波氏杆菌的间接ELISA和间接免疫荧光（IFA）方法,并对其工作条件进行了优化和筛选,试验结果表明间接ELISA抗原、抗血清最佳工作浓度分别为10μg／mL、1：12800,酶标二抗工作浓度为1：5000,最佳包被条件为4℃、24h,最佳封闭条件为37℃、1h;间接免疫荧光（IFA）兔高免血清释释度为1：20,FITC标记羊抗兔IgG稀释度为1：10,感作时间为45min时,禽波氏杆菌特异性黄绿色荧光最清晰,非特异性荧光最弱。经临床检测证明该两种方法均具有简便、快速、特异性强的特点,为禽波氏杆菌病的流行病学、血清学调查和临床快速诊断奠定了基础。     

间接荧光抗体法快速检测病禽组织中的新城疫抗原

利用间接荧光抗体法(IFA)对用新城疫病毒(NDV)攻毒鸡胚的卵黄、胚体、尿囊液、尿囊膜和人工感染鸡、自然病死鸡的心、肝、脾、肺、肾、脑、盲肠扁桃体、法氏囊等8种脏器进行检测。结果鸡胚收集液、6例人工感染和15例自然病例的脏器检测结果均为阳性;脏器以肝、脾、肺、脑的检出率最高,检出效果最好。