花生胚小叶体细胞植株再生系统的建立

[目的]研究花生胚小叶体细胞植株再生体系,为利用胚小叶进行外源基因遗传转化提供试验依据。[方法]以花生品种四粒红和改良海花的胚小叶为外植体,2种外植体取材方式(预培养和直接取材)为培养背景,探讨了不同取材方式下各个培养要素(基因型、培养基等)与脱分化、再分化的关系,初步建立了花生胚小叶体细胞植株再生体系。[结果]在预培养取材条件下,预培养6d的四粒红外植体在2号培养基(MS+3mg/L6-BA+1mg/LNAA)上分化得最好,每愈伤组织再生芽2.34个,预培养5d的改良海花外植体在1号培养基(MS+5mg/L6-BA+3mg/LNAA)上分化最佳,每愈伤组织再生芽2.08个。直接取材条件下,改良海花在1号培养基上每愈伤组织出芽数为6个,而四粒红为3个。直接取材在诱导愈伤组织及器官分化方面都好于预培养取材。[结论]直接取材条件下,不同培养基对诱导愈伤组织及芽分化的作用差异较大,而基因型在诱导愈伤组织上的作用有显著差异,在出芽率上的作用差异并不显著。     

花生高效离体再生体系的建立

建立了以花生胚轴为外植体,通过器官发生途径高效率诱导丛生芽发生的技术体系。该体系芽分化诱导率高达83%,外植体平均出芽数为6.8个,重复性好。同时建立了花生幼胚离体培养再生体系,通过胚状体发生途径获得理想的体胚,并再生出正常的植株。     

花生悬浮培养再生体系初探

以花生胚小叶为外植体，在不同激素配比的培养基中进行悬浮培养，探索适合花生成熟胚的悬浮培养体系，结果表明：3种培养基均能诱导出愈伤组织并分化出芽，只是不同培养基上诱导出的愈伤组织和芽点的质量及生长速率有较大差别，以MS＋5mg／L6-BA＋3mg／LNAA为最佳培养基；两品种间以四粒红的诱导分化效果较好。     

花生再生体系的建立

取4 d龄花生(鲁花14)的胚轴、小叶和成熟子叶为外植体,对其进行离体组织培养研究。结果表明:在培养1个月后,胚轴在MS+8.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上可以诱导产生丛生芽,诱导率达到80%,平均每个外植体可以产生10~20个芽点;小叶在MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上能诱导出胚性愈伤组织,进一步诱导分化形成芽点并伸长;诱导出的丛生芽接种在MS+5mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA+50.0 mg/LAD的培养基上可以扩繁和伸长;花生成熟种子的子叶在MS+20 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0mg/LAgNO3培养基上可直接诱导形成颗粒状、表面光滑、干燥的体细胞胚,每个外植体可以诱导出8个左右的体细胞胚。     

用于遗传转化的花生植株再生体系研究

以广西花生主栽品种桂花17和桂花22的成熟种子胚小叶为外植体,探讨外植体处理方式、不同激素组合和蔗糖浓度对外植体不定芽诱导、继代、生根培养的影响。结果表明,在MS培养基中预培养0、4d的花生种子的胚小叶利于不定芽的诱导,具有较高的分化率;近叶柄1/3处横切的小叶不定芽分化率较远离叶柄部位的高。适宜小叶不定芽分化的蔗糖浓度为40～50g/L,40、50g/L蔗糖分别利于桂花22、桂花17不定芽的分化。培养基MS＋4.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3对桂花17不定芽的分化效果较佳,MS＋6.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3利于桂花22不定芽的分化,两者的不定芽分化率均达100%;继代培养基MS＋1.5mg/L 6-BA＋0.4mg/L NAA有利于促进两个花生品种的不定芽成苗,而最佳生根培养基为1/2 MS＋0.5mg/L 6-BA＋2.0mg/L NAA。已构建的花生植株再生体系,不定芽分化率高,再生植株多,适合进行花生的遗传转化。     

不同花生品种对卡那霉素的敏感性研究

以花生胚小叶为外植体,观察花生胚小叶在添加不同浓度卡那霉素的分化培养基上的生长状况,研究不同花生品种对卡那霉素的敏感性,以确定各品种的卡那霉素临界浓度。结果表明,在供试品种中,D16对卡那霉素最敏感,其临界浓度为100 mg/L;花育22对卡那霉素的耐受性最高,其临界浓度为200 mg/L;J11及鲁花11的卡那霉素临界浓度均为150 mg/L。     

葡萄柚不定芽再生体系建立研究

为建立葡萄柚上胚轴离体再生体系,且为遗传转化技术在葡萄柚上的应用提供产参考,以葡萄柚种子实生苗上胚轴为材料,研究了不同激素种类与浓度对上胚轴愈伤组织诱导与分化及无菌苗生根的影响。结果表明:在添加KT 1.5～2.0 mg/L的MT培养基上,上胚轴切口愈伤发生率及对应的不定芽发生率均高于对照及其它处理;在KT 2.0 mg/L的基础上,添加浓度为0.2～0.3 mg/L的NAA对愈伤分化无增加作用,但对不定芽分化率有较大的提高作用,不定芽分化率达87.23%;3种激素比较,ABT 1.0 mg/L的生根效果高于其它处理,生根率达81.3%;卡那霉素对上胚轴的选择压力为60mg/L。综上所述,MT基本培养基中添加KT 2 mg/L及NAA 0.2～0.3 mg/L对葡萄柚上胚轴的不定芽发生率有显著的促进作用;ABT是无菌苗生根的较合适激素;卡那霉素对上胚轴的选择压力为60 mg/L。     

花生高效再生体系的建立初报

为了建立花生高效再生体系,选用外引及自选共8个花生品种(系)胚小叶作外植体,研究愈伤组织诱导率和不定芽分化率。结果表明:品种间愈伤组织诱导率和不定芽分化率均差异显著。品种冀花4号愈伤组织诱导率最高,为98%;太空1号、唐油4号、豫花9626、花育20较高,泉花646、阜花13次之;品系452-2最低,为43%。不定芽分化率为5%~73%,其中冀花4号最高,为73%;太空1号68%较高;豫花9626次之,为35%;花育20、泉花646和452-2较低,分别为13%、11%和10%;阜花13、唐油4号最低,均为5%。     

金桔上胚轴组织培养及植株再生

金桔（Fortunella mrgarita)为柑桔属观赏常绿树，具有顶芽自剪的习性，果实小，成熟桔红色，可供观赏，食用和入药，目前市场上小包装出售，经济价值高，是较好的观果花木，其繁殖方式主要采用嫁接等方法，生产季节性强，技术要求高，限制了良种的发展，用组培的广阔赤金桔良种的繁殖提供新的途径。用成熟株带腋芽茎段为外植体组培，材料木质化程度高，易污染，为此我们采用种胚培养无菌苗，取其上胚轴培养，污染率为零，通过种胚，上胚轴培养无疑是其繁殖方式的另一种新途径。     

花生体胚诱导及植株再生

以成熟种子胚小叶为外植体,对花生体胚诱导及植株再生进行了研究,旨在为花生体细胞杂交、离体诱变及遗传转化提供培养方法。将花生5大类型17个品种的胚小叶外植体分别培养在添加10 mg/L 2,4-D的培养基上诱导体胚形成。培养4周后将形成体胚的外植体转移到添加4 mg/L BAP的培养基上进行培养,促使体胚萌发成苗。结果表明,不同类型间体胚诱导率和植株再生率存在明显差异,中间型供试品种获得了较高的胚诱导率(84.1%~91.2%)和植株再生率(81.1%~97.0%);珍珠豆型和普通型内供试品种间体胚诱导率差异较大,分别为43.9%~85.0%和42.2%~82.2%,而植株再生率均较高,分别为94.3%~96.5%和88.1%~98.7%;多粒型品种体胚诱导率(32.2%~50.0%)和植株再生率(41.2%~55.1%)均最低;而龙生型体胚诱导率(61.1%~87.8%)和植株再生率(63.7%~87.6%)均表现为中间。再生苗经嫁接驯化后移栽于田间,植株正常生长和结实。本研究结果说明,花生不同类型间再生能力存在显著差异,多粒型品种再生能力最低。     

花生不同外植体丛生芽的诱导和植株再生

分别以花生胚轴、子叶、幼叶为外植体,接种于诱导丛生芽培养基上,在25±1℃和3500 lx光照条件下培养,就不同外植体、激素配比等对丛生芽诱导的影响及其幼苗的成活率进行了对比研究。     

花生幼叶丛生芽成苗高频再生体系的建立

以花生品种豫花14号4 d苗龄的幼叶诱导的丛生芽为研究对象,对丛生芽的伸长和植株再生进行了研究。分别将丛生芽继代到4种不同的培养基上促进芽伸长,其中,以继代培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.4 mg/L+AgNO32 mg/L植株再生率最高。当丛生芽长至3 cm左右时,移入生根培养基诱导生根,获得完整的再生植株。     

玉米花生高效间作模式及适宜花生品种筛选研究(英文)

[目的]探索适宜云贵高原的玉米花生最佳间作模式并筛选适合该模式的花生品种。[方法]通过随机区组设计,设置6种种植方式,成熟期收获测产,测量数据采用Excel和DPS数据统计分析软件进行分析。[结果]玉米花生间作体系较单作相比,具有明显的间作优势,土地当量比(LER)均大于1。玉米与云花生3号在2﹕2间作模式下LER为1.40,复合产量达到9 036 kg/hm2,玉米与云花生3号在2﹕2间作模式下玉米籽粒、鲜花生荚果及与干花生荚果净产值,分别比玉米单作增加182.63%、140.59%。云花生3号在单作及间作模式下较砚山当地常规种植花生品种相比,其产值分别比砚山当地常规种植花生品种最高可增加5 069、3 272 yuan/hm2。[结论]云贵高原玉米花生间作采用2﹕2间作模式,间作花生品种采用云花生3号,具有最高间作产量及经济效益优势,能最大限度提高土地利用率。     

不同品种花生秧营养价值分析

以冀花9742、冀花7号、冀花9801、冀花6号、冀花4号、冀花5号和冀花2号为试材,对花生秧的营养成分进行了分析和比较。结果表明：不同品种花生秧的营养成分存在显著差异。其中,冀花2号粗蛋白含量最高,冀花5号粗脂肪含量最高,冀花9801中性洗涤纤维含量最高,冀花6号酸性洗涤纤维和粗灰分含量最高。综合分析认为,冀花2号和冀花6号花生秧的营养价值较高。     

不同花生品种（系）抗蛴螬能力的研究

对15个花生品种（系）的抗蛴螬能力进行了研究。结果表明：参试花生品种（系）均不同程度地受到蛴螬为害,品种间对蛴螬的抗性差异极显著。其中,漯花1号和远育16-8对蛴螬的抗性较强,产量损失和经济损失较小。选用抗蛴螬能力强的花生品种,可有效减轻蛴螬的为害。     

3个杨树品种叶片再生体系的建立

以中林2001杨、南林95杨、南抗杨等3个杨树品种叶片为材料，选用15种诱导愈伤组织培养基、9种分化培养基和7种生根培养基，研究不同基因型、激素组合以及外植体状态对再生体系建立的影响。结果表明：3个品种的愈伤组织诱导、分化效果与NAA／6．BA比值有一定相关性．在愈伤组织诱导中NAA／6-BA比值在4：1～5：1之间，愈伤组织分化中NAA／6．BA比值大体在1：4-1：10之间：不同品种在上下表皮气孔数、诱导愈伤、分化再生培养上都存在一定的基因型差异；接种叶片的不同放置方式、叶片上的不同部分对愈伤组织诱导具有显著影响．