鸭疫里默氏菌感染对鸭生长发育及肠黏膜屏障功能的影响

为了为鸭疫里默氏菌与机体的相互作用及作用机制研究提供基础数据,以雏鸭为研究对象,开展鸭人工感染鸭疫里默氏菌试验,分别测定感染组和对照组1、2、3、5、9、14 d等不同时间段的体质量、小肠各肠段的长度以及血浆中内毒素和血清中乳酸脱氢酶含量;荧光定量PCR法检测肠黏膜屏障功能相关基因MUC2和MYLK的表达量,探讨鸭疫里默氏菌感染对鸭生长发育和肠黏膜屏障功能的影响。结果表明,与对照组相比,感染组5、9 d体质量显著降低;感染鸭疫里默氏菌5 d十二指肠和空肠的长度显著降低;感染鸭疫里默氏菌1 d血浆中内毒素和血清中乳酸脱氢酶的含量均显著增加;鸭人工感染鸭疫里默氏菌的MUC2和MYLK表达量在十二指肠和空肠主要表现为下调,而在回肠MUC2的表达量表现为先下降再上调,MYLK的表达量表现为先下调再恢复至对照水平。综上,鸭人工感染鸭疫里默氏菌会减缓鸭的体质量增长和小肠生长,引起鸭的肠黏膜屏障功能相关基因的表达发生变化。     

参芪花粉片对低氧暴露下大鼠胃肠黏膜屏障损伤的保护作用观察

目的 探讨低氧暴露下胃肠黏膜屏障损伤的机制及参芪花粉片对其产生的保护作用,为胃肠黏膜的应激损伤防治提供科学依据。方法 60只SD大鼠随机分为平原对照组（PCT）、单纯低氧暴露组（SHE）和低氧暴露+参芪花粉片保护组（GAP）,在模拟海拔7 000 m的低压舱内暴露72 h,观察各组大鼠小肠黏膜厚度改变、肠上皮细胞凋亡、肠道细菌移位情况,检测血清和小肠的TNF-α和IL-6水平,以及TLR4 mRNA表达水平。结果 低氧暴露组大鼠肠黏膜损伤严重,紧密连接间隙增宽,硝酸镧颗粒进入上皮细胞紧密连接间隙内以及周围组织间隙或细胞内,肠系膜淋巴结和脾脏有细菌移位;低氧暴露+参芪花粉保护组肠黏膜损伤减轻,黏膜厚度增加,硝酸镧颗粒很少进入组织间隙和细胞内,移位细菌明显减少。与平原对照组比较,低氧暴露组血清内毒素、TNF-α和IL-6水平显著增高,参芪花粉片保护组血清内毒素、TNF-α和IL-6水平显著降低;低氧暴露后空肠组织TLR4 mRNA表达量显著增加,给予参芪花粉片后TLR4表达量明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 低氧暴露能引起严重的肠黏膜屏障功能损伤,给予参芪花粉片后可以降低肠黏膜通透性,对肠黏膜损伤具有一定的保护作用。     

银杏叶提取物对断奶仔猪小肠黏膜免疫屏障的影响

旨在研究银杏叶提取物(EGB)对断奶仔猪小肠黏膜免疫屏障的影响。将80头25日龄的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪随机分为2组,每组4个重复,每个重复10头;对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.2%EGB;试验期为28 d;测定断奶仔猪小肠黏膜免疫相关细胞数量、黏膜免疫球蛋白含量和细胞因子含量。结果表明,与对照组相比,日粮中添加0.2%EGB可显著提高断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量(P0.05),显著提高仔猪十二指肠、空肠和回肠黏膜Ig A、IL-2、IL-4、IFN-γ含量(P0.05)。本试验表明日粮中添加0.2%EGB可提高断奶仔猪小肠黏膜免疫屏障功能。     

栀子苷对酵母多糖致大鼠肠黏膜屏障损害作用的研究

目的 探讨栀子苷对酵母多糖（zymosan,Zym）致大鼠肠黏膜屏障损害的作用。方法 通过腹腔注射Zym-石蜡混悬液建立大鼠肠黏膜屏障损害模型,将模型大鼠随机分为模型组、栀子苷组、乌司他丁组,腹腔注射Zym后即刻干预,12 h后重复干预1次。另设正常对照组。造模24 h后测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-10（interleukin-10,IL-10）、D-乳酸（D-lactate,D-LA）、二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）、内毒素（endotoxin,ET）水平,并取小肠进行病理组织学检查。结果 模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、D-LA、DAO、ET水平较正常对照组显著增高（P<0.01）;病理组织学检查可见黏膜上皮水肿,黏膜上皮细胞排列紊乱,黏膜上皮炎症细胞增多,固有层松散、充血;与模型组比较,栀子苷可降低肠黏膜屏障损害大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、D-LA、DAO及ET水平,增加IL-10水平（P<0.05,P<0.01）,减轻肠组织病理性损伤。结论 栀子苷可以减轻Zym导致的大鼠炎症反应,对Zym引起的肠黏膜屏障损害具有保护作用。     

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)对猪小肠黏膜上皮细胞活性的影响

观察猪传染性胃肠炎病毒对猪小肠黏膜上皮细胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,细胞增殖和凋亡的影响。将猪传染性胃肠炎病毒接种于体外培养猪小肠黏膜上皮细胞24、48和72 h后,检测细胞的ATP酶(Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪测定细胞周期,PI染色法检测细胞凋亡。与空白组相比较,试验组小肠黏膜上皮细胞的Na+-K+-ATP酶活性降低(P<0.05),Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P>0.05),细胞增殖能力降低,S期细胞比例降低,细胞凋亡明显。猪传染性胃肠炎病毒可以降低猪小肠黏膜上皮细胞的Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,减弱细胞的增殖能力并引起细胞凋亡。     

丙氨酰谷氨酰胺对重度急性胰腺炎患者血浆内毒素、C反应蛋白水平及肠黏膜屏障功能的影响

目的 探讨丙氨酰谷氨酰胺在重度急性胰腺炎(SAP)治疗中的应用价值.方法 78例SAP患者随机分为观察组和对照组,每组39例.对照组接受常规治疗,观察组常规治疗基础上联合应用丙氨酰谷氨酰胺治疗.对比两组血浆内毒素水平、C反应蛋白(CRP)及肠黏膜屏障功能情况,并分析两组治疗效果.结果 入组时两组间内毒素、CRP、二胺氧化酶、丙二醛及肠黏膜通透性水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗7d后,观察组的内毒素、CRP、二胺氧化酶、丙二醛及肠黏膜通透性水平均低于对照组(P＜0.01或0.05).同时,观察组腹痛时间、腹胀时间、腹部压痛时间及血淀粉酶恢复正常时间均短于对照组(P＜0.01).结论 丙氨酰谷氨酰胺可有效地改善重度急性胰腺炎患者的血清学指标及肠黏膜屏障功能.     

大豆异黄酮对大鼠肠道上皮内淋巴细胞、杯状细胞及瘦素长型受体的影响

大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;然后将筛选出的肥胖大鼠分别灌胃剂量为对照(I:0mg/kg)、低(Ⅱ:50mg/kg)、中(Ⅲ:150mg/kg)、高剂量(Ⅳ:450mg/kg)的大豆异黄酮,并设置基础对照组(Ⅴ:溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),连续4周用HE、PAS染色观察小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量和分布变化;用免疫组织化学SABC法测定瘦素受体(长型)水平。结果表明:大鼠上皮内淋巴细胞以小型淋巴细胞为主,主要分布于上皮的基底膜附近;大鼠杯状细胞分布在肠黏膜上皮层;瘦素受体(长型)阳性细胞分布于黏膜层。应用大豆异黄酮高剂量组较对照组大鼠的肠黏膜上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜瘦素受体(长型)水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明大豆异黄酮在一定程度上可促进大鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。     

降脂理肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠肠黏膜屏障的影响

目的 观察降脂理肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠肠黏膜屏障的影响,探讨降脂理肝汤干预非酒精性脂肪肝的机制。方法 40只SD雄性大鼠随机分为正常组（10只）和造模组（30只）,采用高脂饮食喂养复制非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）大鼠模型,造模组大鼠再随机分为高脂饮食模型组、降脂理肝汤低剂量及高剂量组（4.6、9.2 g/kg）,分别予以相应干预6周后取小肠和门静脉血液,检测肠黏膜结构、紧密连接蛋白（Occludin）和ZO-1蛋白水平以及血浆内毒素水平。结果 与正常组比较,高脂饮食大鼠小肠绒毛稀疏且排列不整齐、小肠绒毛高度明显降低（P<0.01）,Occludin和ZO-1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,血浆内毒素水平显著上升（P<0.01）。与高脂饮食模型组比较,高剂量降脂理肝汤组小肠绒毛排列较整齐,断裂较少,绒毛高度显著升高（P<0.01）,Occludin和ZO-1蛋白水平显著上升（P<0.05）,血浆内毒素水平明显降低（P<0.01）;而低剂量降脂理肝汤组仅显著降低了血浆内毒素水平（P<0.01）。结论 降脂理肝汤干预非酒精性脂肪肝的机制可能与其改善小肠绒毛结构,恢复Occludin和ZO-1蛋白水平从而减轻肠黏膜屏障损伤,降低血浆中的内毒素水平有关。     

c-Fos参与羊驼小肠黏膜淋巴细胞生发中心的调控

【目的】研究转录因子c-Fos与凋亡相关蛋白Caspase3在羊驼小肠黏膜淋巴组织的表达,探索c-Fos与羊驼小肠黏膜淋巴细胞生发中心的关系。【方法】用免疫组织化学技术研究c-Fos蛋白与Caspase3蛋白在羊驼十二指肠和空肠淋巴组织的表达。【结果】免疫组织化学结果显示羊驼十二指肠黏膜淋巴细胞较少,c-Fos蛋白主要表达于空肠黏膜下淋巴组织生发中心,在黏膜下淋巴组织向固有层淋巴组织过渡区域有散在表达,在固有层弥散淋巴组织中c-Fos阳性表达细胞较少。Caspase3蛋白主要表达于空肠黏膜固有层淋巴组织,在黏膜下淋巴组织生发中心很少表达,在黏膜下淋巴组织向固有层弥散淋巴组织过渡区域Caspase3有散在表达。【结论】c-Fos参与羊驼空肠黏膜下淋巴组织生发中心增殖与分化的调控。     

内毒素诱导的细胞凋亡和阳离子A的保护效应

为揭示内毒素（ET）诱导体内细胞凋亡的现象和阳离子A（CA）的保护效应,从家兔耳缘静脉注射400U／kgET建立内毒素休克模型,并设对照组和cA保护组,在第3、4、8和12h分别收集外周血淋巴细胞（PBL）和肝细胞,电子显微镜观察PBL发生凋亡的形态学特征;运用缺口末端标记技术（TUNEL）观察肝细胞凋亡的形态学变化并计算肝细胞凋亡指数;采用流式细胞术（FCM）检测肝细胞的凋亡率。结果显示,PBL发生凋亡的超微结构特征表现为核染色质浓缩呈“新月体”状、“八字形”状或“花瓣”状等,在休克晚期出现凋亡小体;与对照组相比,TUNEL法检测到的肝细胞凋亡指数先上升到70％,然后下降到59％,后又上升到最高值86％,肝细胞及肝脏组织的损害程度也与此类似;FCM检测到肝细胞的凋亡率随着注射ET后时间的延长而增加（从10％增加到20％）。CA保护组中PBL的细胞病变较轻微、肝细胞的凋亡指数和肝细胞的凋亡率均出现不同程度的降低（P〈0．01,P〈0．05）。试验提示,ET能够诱导PBL和肝细胞的凋亡及功能损害,导致了内毒素性休克;而cA可有效地中和血循环中的ET,减少PBL和肝细胞的凋亡,对内毒素休克有一定的保护作用。     

冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉抗焦虑活性研究

[目的]研究冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉的抗焦虑作用.[方法]取健康雄性SD大鼠70只,按体重随机分为7组,模型对照组,冬虫夏草低剂量组（8.4 mg/kg WECS-1）,冬虫夏草高剂量组（16.8 mg/kg WECS-h）,冬虫夏草水提取物低剂量＋速溶芦笋粉（8.4mg/kg WECS-1 ＋400 mg/kg IAP）,冬虫夏草高剂量＋速溶芦笋粉（16.8 mg/kg WECS-h ＋400 mg/kg IAP）,速溶芦笋粉（400 mg/kgIAP）,空白对照组.采用慢性情绪应激模型,从行为学观察和内分泌水平角度研究速溶芦笋粉的抗焦虑作用.[结果]行为学观察表明,与模型对照组比较,在此焦虑模型上WECS-h ＋IAP剂量组的攻击行为显著降低（P＜0.05）,WECS-1＋ IAP剂量组的探究行为和修饰行为显著降低（P＜0.05）,其他各个处理组与模型对照组比较统计结果均没有显著的差异（P＞0.05）.内分泌水平检测结果表明,与模型对照组比较,在此焦虑模型上冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉（WECS-h ＋IAP）剂量组能显著降低血清种皮质醇（CORT）、肾上腺素（E）和去甲肾上腺素（NA）浓度（P＜0.05）,并能显著升高血清中5-羟色氨酸（5-HT）和多巴胺（DA）水平（P＜0.05）.[结论]冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉联用具有增强抗焦虑作用.     

兔颈总动脉球囊损伤后17β-雌二醇介导iNOS及NO对血管新生内膜增殖抑制的作用

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOs）及一氧化氮（NO）对17β-雌二醇抑制兔颈总动脉球囊损伤反应中新生内膜及中膜增殖的影响。方法在去势雌性兔中建立右颈总动脉球囊损伤模型,实验分为假手术组（sham）、单纯去势组（Ovx）、去势后球囊损伤组（OYX＋Inj）、去势球囊损伤后补充雌激素组（OVX＋Inj＋E2）。分别检测各组血管壁新生内膜及中膜的厚度、血浆中NO含量、血管组织中iNOS含量及活性。结果与sham组相比,OVX＋Inj组血管组织新生内膜增厚,中膜增生明显,血浆中NO含量及血管组织中iNOS活性降低,E2（estrogen）补充治疗后,可明显增加NO含量及i—NOS活性;westernblot结果显示,OVX＋Inj组iNOS蛋白表达明显降低,而雌激素替代治疗后iNOS蛋白表达显著增加。结论E2可通过增加血管组织iNOS活性及蛋白表达,促进NO合成,抑制血管损伤后新生内膜及中膜增殖,发挥其血管保护作用。     

妊娠高血压疾病患者免疫功能和C-反应蛋白水平变化及其临床意义

目的 观察妊娠高血压疾病患者免疫功能和C-反应蛋白(CPR)水平变化.方法 采用流式细胞术、ELISA、全自动生化分析仪、散射比浊法分别检测88例妊娠高血压患者(轻型62例、重型26例)和60例正常孕妇外周血T细胞亚群、NK田胞、IL-2、IL-4、IgA、IgG、IgM、CRP水平.结果 与正常孕妇比较,妊娠高血压疾...     

环孢菌素A和苯磺酸氨氯地平对慢性缺氧致大鼠右心室肥厚的作用

目的探讨环孢菌素A（Cs A）和苯磺酸氨氯地平片（Norvasc）对大鼠慢性缺氧所致右心室肥厚的作用。方法48只SD大鼠随机分为慢性缺氧组、Cs A处理组、Norvasc处理组及正常对照组。慢性缺氧组、Cs A处理组、Norvasc处理组大鼠均置于缺氧仓内连续缺氧21 d,缺氧第1天始每天分别用生理盐水和Cs A10 mg/（kg·d）腹腔注射、Norvasc 30 mg/2＋（kg·d）灌胃,共21 d。检测右心室（RV）、左心室（LV）、室间隔（S）和体质量（BW）、Ca N和[Ca]i活性、以及Cn A、-MHC表达水平。结果慢性缺氧组RV/（LV＋S）、RV/BW比值、-MHC表达高于Cs A和Norvasc处理组、正常对照组（P〈0.01）;2＋Norvasc处理组[Ca]i、Ca N活性低于慢性缺氧组（P〈0.01）,而Cs A处理组仅有Ca N活性低于慢性缺氧组（P〈0.01）。结论2＋Cs A和Norvasc可能通过抑制[Ca]i、Ca N活性来防止慢性缺氧致大鼠右心室肥厚。     

谷氨酰胺对肉仔鸡小肠发育及吸收功能的影响

240只1日龄艾维茵肉仔鸡,随机分为4组,1组为对照组,2～4组为试验组,各组分别在基础日粮中添加0、0.2%、0.4%及0.8%的谷氨酰胺(Gln),研究Gln对肉鸡小肠发育、结构及吸收功能的影响。结果表明,饲料中添加Gln可明显提高肉鸡小肠的长度、重量及指数,2周龄时高剂量组(0.8%)效果较好,3、4周龄时则低剂量组(0.2%)较好,其中,空肠受日粮Gln影响最大,回肠次之,十二指肠最小;对肠道形态、结构的组织学观察发现,日粮中添加0.2%的Gln可显著提高试验期间空肠绒毛的高度,降低绒毛的宽度和固有膜厚度;以D-木糖吸收率为代表的小肠主动吸收功能试验表明,试验组肉鸡血清木糖浓度均高于同期对照组肉鸡。上述结果显示,外源性Gln作为肠粘膜细胞的能量来源,对促进小肠发育、维持小肠粘膜的完整性以及提高小肠的主动吸收功能有着重要作用。     

不同动物油脂对大鼠血糖血脂及血液相关因子的影响研究

研究羊油、猪油、牛油、马油4种油脂对大鼠血糖、血脂及血液相关因子的影响研究。130只雄性健康SD大鼠随机分为对照组、羊油脂组、猪油脂组、牛油脂组和马油脂组共5组。各油脂组再分为高（2mL／100g体重）、中（1mL／100g体重）、低（0．5mL／100g体重）剂量3个灌胃组,对照组灌胃纯净水（1mL／100g体重）。灌胃56d后,测定各组动物体重、内脏脂肪重量、血糖（GLU）、血脂4项[高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）3的变化以及脂代谢相关血液因子[血浆胰岛素（INS）、瘦素（LEP）、一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）]的变化。结果表明,与对照相比,4种油脂对大鼠的体重、LEP、NO影响不明显（P〉0．05）;4种动物油脂的高剂量组以及猪油脂和马油脂的中剂量组均能显著增加内脏脂肪的重量（P〈0．05）;羊油脂中剂量组、马油脂高剂量和中剂量组的GLU值均极显著升高（P〈0．01）;羊油脂高剂量组HDL—C水平显著升高（P〈0．05）,猪油脂高剂量组HDL—C水平极显著升高（P〈0．01）;牛油脂高剂量组LDL—C水平显著升高（P〈0．05）;牛油脂和马油脂的各剂量组TC水平均极显著升高（P〈0．01）;仅羊油脂高剂量组TG水平显著升高（P〈0．05）;马油脂的高、中剂量组的血浆INS水平极显著降低（P〈0．01）;羊油脂和猪油脂的各剂量组MDA水平均极显著升高（P〈0．01）;牛油脂和马油脂的各剂量组SOD水平均极显著升高（P〈0．01）;4种油脂对大鼠的体重、血浆LEP、血浆NO没有明显影响;灌服猪油脂对大鼠GLU水平影响不明显;灌服高剂量羊油脂可明显升高大鼠血液HDL-C和TG水平;猪油脂主要表现为升高HDL-C水平;而牛油脂和马油脂各剂量组则可极显著升高血浆总胆固醇。羊油脂和猪油脂均能升高大鼠的MDA水平;牛油脂和马油脂均能升高大鼠的SOD水平,推测牛油脂和马油脂具有抗氧化的作用。     

小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达

目的研究小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3表达。方法提取C57/BL6J小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4-＋CD62L-＋T细胞,分为对照组及Th17分化组。对照组用RPMI1640培养;Th17分化组加抗小鼠CD3ε、CD28、IFN-γ、IL-4单抗及IL-6、TGF-β1、IL-23孵育。培养48 h后,采用Real-time PCR检测两组细胞IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达。结果 Th17分化组IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达明显高于对照组（P〈0.01）。结论小鼠脾Th17细胞分化过程中伴有RORα、Stat3 mRNA表达上调。     

Generation of gut-homing IgA-secreting B cells by intestinal dendritic cells

Normal intestinal mucosa contains abundant immunoglobulin A (IgA)-secreting cells, which are generated from B cells in gut-associated lymphoid tissues (GALT). We show that dendritic cells (DC) from GALT induce T cell-independent expression of IgA and gut-homing receptors on B cells. GALT-DC-derived retinoic acid (RA) alone conferred gut tropism but could not promote IgA secretion. However, RA potently synergized with GALT-DC-derived interleukin-6 (IL-6) or IL-5 to induce IgA secretion. Consequently, mice deficient in the RA precursor vitamin A lacked IgA-secreting cells in the small intestine. Thus, GALT-DC shape mucosal immunity by modulating B cell migration and effector activity through synergistically acting mediators.     

DBP与DBAA低剂量联合作用对雄性大鼠生殖功能的影响

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯（DBP）与溴乙酸（DBAA）联合作用对雄性大鼠睾丸功能影响．方法将28只6周龄清洁级雄性Sprague—Dawley大鼠随机分为阴性对照组（玉米油）、DBP组（DBP250mg／kg，1／32LD50）、DBAA组（DBAAl25mg／kg，1／32LD50）、联合组（DBP250mg／kg＋DBAA125mr,／kg）；灌胃量为10mL／kg体质量，1次／d，连续灌胃5周；对睾丸脏器系数、附睾脏器系数及精子质量进行检测．结果DBP和DBAA联合组的睾丸、附睾脏器系数与对照组比较均下降（P〈0．05）；DBP和DBAA联合组的精子密度、精子活率与对照组比较均下降（P〈0．05）；各组精子畸形率分别与对照组比较均升高（P〈0．05）．析因分析结果显示：DBP和DBAA可致大鼠脏器系数降低及精子畸形率升高，并存在交互作用．结论DBP和DBAA均能影响大鼠睾丸功能，且DBP与DBAA联合损伤作用更强，表现为协同损伤作用．