体细胞克隆牛的研究进展

体细胞核移植是目前生物技术领域研究的热点之一,具有重大的科学意义和应用价值.牛有产奶量高等独特优势,具有巨大的应用潜力,不同国家已相继诞生了体细胞克隆牛及转基因牛.本文回顾了牛体细胞核移植简史,对体细胞核移植方法、体细胞供核细胞的种类、受体卵母细胞去核方法、重构胚的激活、体外培养体系以及限制牛体细胞核移植应用的因素等进行了综述,并展望了牛体细胞核移植的应用前景.     

转GFP基因核移植牛胚胎的研究

试验采用脂质体转染法与电穿孔法,以携带绿色荧光蛋白（GFP）-新霉抗性（neo-）双标记基因的pMSCV质粒转染胎牛耳成纤维细胞为供体与体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚。研究了体外成熟培养液中添加EGF（表皮生长因子）对转基因胚的影响,不同转染方法构建供体细胞对重构胚发育的影响和在不同体外培养系统中的发育效果。结果显示,体外成熟培养液中添加EGF 30 ng/mL组的卵母细胞成熟率最高,但对后期转基因重构胚的囊胚发育率的影响,以添加EGF 20 ng/mL组的最高;以胎牛耳成纤维细胞为供体细胞,不同转染方法转染供体细胞构建重构胚,其囊胚发育率差异不显著（P>〖JP2〗0.05）;mSOFaa+颗粒细胞单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率最好,该体系更适合体细胞核移植法生产转基因牛胚胎。     

转GFP基因核移植牛胚胎的研究

试验采用脂质体转染法与电穿孔法,以携带绿色荧光蛋白(GFP)-新霉抗性(neo)双标记基因的pMSCV质粒转染胎牛耳成纤维细胞为供体与体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚.研究了体外成熟培养液中添加EGF(表皮生长因子)对转基因胚的影响,不同转染方法构建供体细胞对重构胚发育的影响和在不同体外培养系统中的发育效果.结果显示,体外成熟培养液中添加EGF 30 ng/mL组的卵母细胞成熟率最高.但对后期转基因重构胚的囊胚发育率的影响,以添加EGF 20ng/mL组的最高;以胎牛耳成纤维细胞为供体细胞,不同转染方法转染供体细胞构建重构胚,其囊胚发育率差异不显著(P＞0.05);mSOFaa+颗粒细胞单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率最好,该体系更适合体细胞核移植法生产转基因牛胚胎.     

科技

“体细胞克隆牛和转基因克隆牛技术研究”通过鉴定，我国玉米转化技术获得新突破，带抗疯牛病转基因体细胞克隆牛降生，俄罗斯拟研制首种可掺在饲料中的抗禽流感疫苗。[编者按]     

转基因鲜胚和冻胚对黄牛受胎率的影响

本试验对转基因体细胞克隆胚胎经两种方式(鲜胚体温长途运送和冷冻胚胎复苏)移植到受体牛妊娠和产犊情况进行比较.结果为两组的妊娠率为33.08%和29.32%,出生率为5.70%和5.54%,差异均不显著(P>0.05),说明冻胚解冻后移植与鲜胚长途运输移植的效果无差异,转基因体细胞克隆胚胎低温冻存可应用于实际生产.     

动物体细胞克隆研究概况

介绍了动物体细胞克隆技术的方法、研究现状，指出体细胞克隆动物虽然存在成功率低、死亡率高、生长发育不正常等缺陷，但在快速扩繁优良种畜和转基因动物、保护动物遗传资源、生产用于器官移植的克隆器官等方面有很大的应用潜力。     

转基因山羊研究进展

近年来,动物转基因技术发展日淅完善,在牛、羊、猪等家畜上的应用日益增多.为全面了解山羊转基因技术的研究进展,论文简要回顾了国内外转基因山羊生产的里程碑事件,总结了生产转基因山羊的方法和原理,并对转基因山羊研究状况、应用前景及存在问题进行了较为系统的概括和分析,从而为借助现代生物技术丰富我国山羊育种手段,加快山羊新良种培...     

动物体细胞克隆研究概况

介绍了动物体细胞克隆技术的方法，研究现状，指出体细胞克隆动物虽然存在成功率低，死亡率高，生长发育不正常等缺陷，但在快速扩敏优良种畜和转基因动物，保护动物遗传资源，生产用于器官移植的克隆器官等方面有很大的应用潜力。     

动物转基因技术在转基因牛中的研究进展及其应用

动物转基因技术已应用于生命科学的各个领域,特别是在研究基因功能、转基因动物培育、生物制药、提高畜禽的生产性能和防治疾病等方面得到了广泛应用。文章就动物转基因技术在转基因牛中的研究进展,以及在牛的基因功能研究、生物制药、防治疾病和改良品种等领域的应用和前景进行了综述,以期推进动物转基因技术在牛生产中的进一步发展。     

转基因牛研究进展

综述了显微注射转基因牛和体细胞核移植转基因牛的国内外进展,介绍了基因打靶、RNA干扰和微细胞介导转染色体等新技术在转基因牛生产中的应用及转基因牛的安全评价,最后指出了当前转基因牛存在的问题及未来的发展前景。     

转基因技术在奶牛育种中的应用

转基因动物在现代生物技术领域中极其重要,目前已有转基因鼠、兔、猪、牛、鱼、鸡等多种转基因动物相继问世。文章论述了转基因技术的原理、技术方法以及转基因技术在奶牛育种中的应用,同时也指出了转基因动物存在的不足,展望了其发展前景。     

转乳铁蛋白肽和α干扰素基因的牛胎儿成纤维细胞的制备

旨在构建含有乳铁蛋白肽基因和a干扰素基因的载体,并制备转基因牛胎儿成纤维细胞,为研制抗乳房炎和口蹄疫转基因克隆牛提供供体细胞.本研究构建了由山羊β-酪蛋白启动子启动的牛乳铁蛋白肽基因和由CMV启动子调控的人α干扰素基因的载体,以EGFP基因作为报告基因,neo基因作为筛选基因;分别采用脂质体和电击法转染牛胎儿成纤维细胞,G418筛选得到转基因阳性细胞,并用PCR方法检测转基因细胞中目的基因的整合情况,用Western blotting检测α干扰素蛋白的表达.结果,得到了同时含有牛乳铁蛋白肽基因和人α干扰素基因的转基因牛胎儿成纤维细胞,并且α干扰素蛋白在转基因细胞中能有效表达.     

我国转基因猪的研究进展

自1997年首例体细胞克隆羊“多莉”获得成功以后,转基因家畜在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜．所以转基因猪的研究越来越受重视。该文综述了我国转基因猪在生产性能改良、器官移植和疾病模型等方面的研究进展。     

我国转基因猪的研究进展

自1997年首例体细胞克隆羊“多莉”获得成功以后,转基因家畜在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜．所以转基因猪的研究越来越受重视。该文综述了我国转基因猪在生产性能改良、器官移植和疾病模型等方面的研究进展。     

转基因猪技术整体效率达到国际领先水平

中国农业大学李宁院士课题组“体细胞克隆猪和转基因体细胞克隆猪技术平台的建立与应用”项目新近经教育部组织国内有关专家鉴定,中国克隆猪和转基因猪技术整体效率达国际先进水平。     

我国克隆转基因猪技术达世界先进水平

中国农业大学李宁院士课题组“体细胞克隆猪和转基因体细胞克隆猪技术平台的建立与应用”项目最近经教育部组织国内有关专家鉴定，中国克隆猪和转基因猪技术整体效率达国际先进水平。     

我国克隆转基因猪技术达世界先进水平

中国农业大学李宁院士课题组“体细胞克隆猪和转基因体细胞克隆猪技术平台的建立与应用”项目最近经教育部组织国内有关专家鉴定，中国克隆猪和转基因猪技术整体效率达国际先进水平。     

我国克隆转基因猪技术达世界先进水平

中国农业大学李宁院士课题组“体细胞克隆猪和转基因体细胞克隆猪技术平台的建立与应用”项目最近经教育部组织国内有关专家鉴定．中国克隆猪和转基因猪技术整体效率达国际先进水平。     

我国首批克隆牛在中国农业大学再克隆获成功

由中国农业大学李宁教授领导的研究小组经过一年多的技术攻关，我国首批转基因体细胞克隆牛的再克隆体日前在山东梁山基地成功降生。     

靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究

为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性。结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段。与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36 h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6%。表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性。本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础。