转基因牛研究进展

综述了显微注射转基因牛和体细胞核移植转基因牛的国内外进展,介绍了基因打靶、RNA干扰和微细胞介导转染色体等新技术在转基因牛生产中的应用及转基因牛的安全评价,最后指出了当前转基因牛存在的问题及未来的发展前景。     

体细胞核移植生产转基因牛胚胎的研究

为了优化利用体细胞核移植生产转基因牛早期胚胎的体系,以携带绿色荧光蛋白-新霉抗性双标记基因的pMSCV质粒转染的胎牛耳成纤维细胞为供体,以体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚,研究供体细胞的传代次数对转基因胚的影响和重构胚在不同电场条件下（电场强度、直流电脉冲次数）融合效率及其在不同体外培养系统中的发育效果。结果表明：传代5次的细胞做核供体较有利于转基因胚的发育;在电场条件为电场强度1.6 kV/cm、直流脉冲1次的融合率最高;负压单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率较好,与未转基因体细胞核移植胚的发育相比无显著差异（P〉0.05）。     

动物体细胞克隆技术的研究进展

体细胞克隆绵羊“多莉”(Dolly)的诞生,表明成年哺乳动物体细胞具有基因组的全能性。本文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展。     

动物体细胞克隆技术的研究进展

体细胞克隆绵羊“多莉”（Dolly）的诞生,表明成年哺乳动物体细胞具有基因组的全能性。本文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展。     

山羊体细胞转基因方法的探讨

转基因体细胞核移植是制备高效表达转基因动物的主要手段与方法,但由于插入位点、拷贝数不同常使外源基因的表达受到一定影响。本试验以双正向选择标记的pLoxP M为转基因结构,以磷酸钙法、脂质体介导法、电击转染三种方法对山羊胎儿成纤维细胞进行转染。电击(1 70×10-4)和脂质体(1 36×10-4)法明显高于磷酸氢钙法(4 6×10-5),而且三方法的转染效率与细胞类型无关,但电击转染方法简单并适合于不同大小的转基因结构,对长片段更为实用。随机整合的转基因细胞系绿色荧光蛋白的表达水平有很大差异,主要与外源基因的拷贝数和插入位点有关。双正向选择标记不但可以筛选重组体而且可以体外监控外源基因的表达情况,为高表达转基因动物的制备提供了良好的手段与方法。     

动物转基因技术在转基因牛中的研究进展及其应用

动物转基因技术已应用于生命科学的各个领域,特别是在研究基因功能、转基因动物培育、生物制药、提高畜禽的生产性能和防治疾病等方面得到了广泛应用。文章就动物转基因技术在转基因牛中的研究进展,以及在牛的基因功能研究、生物制药、防治疾病和改良品种等领域的应用和前景进行了综述,以期推进动物转基因技术在牛生产中的进一步发展。     

动物体细胞克隆技术的研究进展

本文就体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展.     

哺乳动物细胞核移植(克隆)研究进展(上)

细胞核移植是一种有效的动物克隆技术。本文谨将哺乳动物胚胎核移植和体细胞核移植技术及其历史现状、价值意义、存在问题和应用前景作以综述和评述。     

转基因动物研究进展

转基因动物技术是将已知的外源基因导入动物细胞并整合到基因组中,从而使其得以表达的技术。此技术将分子、细胞和个体水平统一起来,标志着基因工程已由离体操作发展到离体与载体相结合的新阶段。目前,转基因动物的制作方法主要有反转录病毒感染法、显微注射法、胚胎干细胞法和精子载体法等,每种方法都有其优缺点。转基因动物技术主要应用在人类疾病模型、生物反应器、异体器官移植和改良动物品种与性状等方面。同时转基因动物技术也存在一些技术难题和安全性问题,但发展前景被普遍看好。     

转基因克隆牛外源基因整合位点的检测

确定外源基因的整合位点是获得转基因动物后的首要任务。本试验应用TAIL-PCR得到了2头转入人溶菌酶基因克隆牛外源基因的整合位点,结果表明:2头转基因个体中外源基因均整合在受体基因组上,其中WS个体外源基因整合在牛24号染色体的基因组克隆（NW₀03104566.1）中。YW个体中外源基因整合在牛16号染色体的基因组克隆（NW₀03104440.1）中,整合位点位于LOC10030和RGL1基因之间。综上表明,在WS和YW个体中,外源基因的整合分别造成受体染色体238和228bp核苷酸的缺失。4个整合片段（InS1^InS4）的末端均与拓扑异构酶I作用位点的共有序列相连。在WS个体中外源基因与染色体的整合连接处（InS1^InS3）存在1nt的同源序列。在整合片段InS2、InS3、InS4中表现出共同的相似处,即均存在具有间隔的短的同源序列。     

哺乳动物体细胞核移植技术研究进展

本文综述了哺乳动物核移植研究的历史、现状、意义及存在问题，对其发展趋势也提出了自己的一些看法。     

转基因牛的研究进展

21世纪是生命科学突飞猛进的时代，生命科学在人类生活中占有极突出的位置。一是生命科学的发展促进了其他学科的发展；二是生命科学的发展带动的产业将加速经济的发展。医学和医药学是人类健康的有力保障，农牧生物学可以极大提高农业和畜牧业产品的数量和质量，为人类提供丰富的衣食之源。利用转基因动物技术既可以加快家畜品种的改良速度，提高肉、奶、蛋的产量和品质，又可以生产珍贵的药用蛋白，为广大患者造福。可以说转基因动物技术对于人们千百年来追求的丰衣足食，延年益寿两大目标都将做出巨大的贡献。作为一门生物高新技术，转基因动物研究既具有深远的理论价值，又有重大的应用价值，因而成为近年来生物工程领域研究的热点之一。     

哺乳动物克隆技术研究进展及前景

本文简要回顾了动物克隆技术研究的历史，重点介绍了当代哺乳动物细胞核移植方法和进展情况、体细胞核移植的应用前景。     

基因打靶用于哺乳动物体细胞核移植技术研究进展

哺乳动物体细胞核移植技术以其供核效率高而在动物克隆技术中占有明显的优势；基因打靶技术通过外源DNA与染色体DNA间的重组可达到定点修饰，改造基因组的目的，它与体细胞核移植技术相结合具有巨大的技术优势和广阔的应用前景。将为畜牧生产和医学生物学的研究带来前所未有的价值。     

四大哺乳动物转基因技术简介

动物转基因技术是指通过遗传工程的手段对动物基因组进行人为的改造,有目的地对生物的遗传基因进行修饰,并通过相应的动物育种技术使得这些经修饰改造后的基因在世代间得以稳定遗传和表达的一种技术手段.     

转基因动物研究进展

自８０年代初，美国科学家首次用微注射法将ＤＮＡ序列导入原核培育出转基因动物以来，这项技术引起了许多学者和生物工程公司的极大兴趣。导入人生长激素（ｈＧＨ）基因的小鼠培育成功，此后转基因猪、鱼、兔和羊等相继问世，为动物基因工程开辟了新的途径。现就转基因动...     

人转铁蛋白转基因克隆牛整合位点检测

为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%~86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛的11号、15号和19号染色体的相应位置;另外采用定量PCR方法对杂交信号强弱不同的转基因克隆牛个体进行整合位点拷贝数的检测,结果显示拷贝数的多少与杂交信号强弱直接有关。     

犬体细胞核移植研究进展

犬作为人类最友好的伙伴,目前广泛应用于各个方面。如宠物犬、导盲犬、军用搜毒搜爆犬和医学实验用犬等,它们在我们现代生活中发挥着重要作用。犬核移植技术目前处于起步阶段,各技术环节均需质的突破。本文从犬体细胞核移植的各个技术环节出发,如卵母细胞和供体细胞来源、去核注核方法、融合和激活方法以及胚胎移植等,详尽叙述近年来犬体细胞核移植技术的最新进展,以期为相关科技工作者提供参考。     

不同核移植方法对牛体细胞核移植效率的影响

以牛皮肤成纤维细胞为供体细胞,比较了电融合法和细胞质内注射法2种核移植方法对体细胞核移植效率的影响.电融合法构建重组胚的效率显著低于细胞质内注射法(47.1%比89.0%,P＜0.01);重组胚培养36 h后的裂卵率和培养8 d时囊胚发育率无明显差异(76.4%比73.2%,11.2%比12.3%;P＞0.05),但相对于操作的卵母细胞总数而言,电融合法得到的总囊胚发育率显著低于细胞质内注射法(5.6%比10.9%,P＜0.01).结果表明,用细胞质内注射法进行体细胞核移植效率更高.将发育到桑椹胚和囊胚期的95枚核移植胚胎移植到33头受体牛,其中31头受体牛在移植后第2个情期前返情;1头受体牛在移植后75 d返情,但未进行直肠检查,无法确定妊娠情况;1头受体牛在移植后60 d未见返情,直肠检查确证妊娠,93 d受体牛流产.胚胎移植结果表明,用细胞质内注射法构建的体细胞核移植胚胎至少可以维持早期妊娠.     

动物克隆技术研究进展

1 震惊世界的克隆“多利” 1997-02-27，英国《Nature》杂志，报道了英国罗斯林研究所Roslin Institute，Uk的威尔穆特（I．Wilmut）博士及其同事的题为“从胚胎和成年哺乳动物细胞繁衍后代”（Viable offspring derived from fetal and adult msmmalian cells）的研究论文，宣布了首次成功地运用成年母羊乳腺上皮细胞作为细胞核的供体的移植技术，克隆了1头名叫“多利”的小绵羊。