青花菜衰老过程中叶绿素降解相关基因的表达分析

以两个耐贮性不同的青花菜高代自交系‘8554’和‘90196’为试验材料,分析其在贮藏过程中叶绿素含量的变化差异,利用实时荧光定量PCR技术对叶绿素降解相关基因的表达量进行研究。结果表明,在4 ℃贮藏期间,‘8554’和‘90196’的叶绿素含量均呈下降趋势,但耐贮藏材料‘8554’下降缓慢,且始终高于不耐贮材料‘90196’。BoCLH1（叶绿素酶1）的表达量变化在上述两种材料中表现一致,均只在初始时检测到较高表达,后期表达量很低。BoCLH2（叶绿素酶2）的表达量在‘8554’中变化较小,在‘90196’中变化较大,且高于‘8554’。BoPPH（脱镁叶绿素酶）在‘8554’中一直呈下降趋势,而在‘90196’中贮藏14 d时有显著上升过程。BoPaO（脱镁叶绿酸a加氧酶）的表达量变化在二者中均有急剧增加的过程,但是在‘8554’中出现急剧增加的时期明显滞后于‘90196’。BoRCCR（红色叶绿素代谢产物还原酶）在‘90196’中于贮藏21 d时出现一个明显的表达高峰,而在‘8554’中未出现。上述结果表明耐贮藏性不同的青花菜叶绿素降解机制不同,其衰老过程中叶绿素含量的变化主要通过BoCLH2、BoPPH、BoPaO以及BoRCCR的表达量变化来调节,BoCLH1主要在青花菜初始衰老中起降解叶绿素的作用。     

不同溶质桃果实的软化与乙烯合成相关基因的差异表达

以八成熟Stonyhard型桃‘霞脆’和‘有名白桃’、软溶质桃‘银花露’、硬溶质桃‘湖景蜜露’、不溶质桃‘金童6号’的果实为试材,研究了25 ℃和4 ℃贮藏条件下果实软化及乙烯生物合成途径相关基因表达水平的差异。结果显示：两种贮藏温度下,Stonyhard型桃‘有名白桃’和‘霞脆’果实释放极少量乙烯;25 ℃常温条件下,Stonyhard型桃果实硬度保持较高水平,但4 ℃低温诱导了‘有名白桃’果实软化。实时荧光定量PCR表明,软溶质、硬溶质和不溶质桃的PpACS1基因均具有高表达丰度,而Stonyhard型‘霞脆’和‘有名白桃’的表达水平极低;两种贮藏温度下,5个桃品种果实在整个贮藏期间均未检测到PpACS2和PpACS3基因的表达。此外,低温诱导了PpACO1基因在Stonyhard型桃‘霞脆’和‘有名白桃’中的表达,‘有名白桃’果实endo-PG基因受低温刺激表达也上调。说明不同肉质类型的桃贮藏期间果实软化与乙烯的生物合成关系密切,不同温度下通过调节相关基因的表达水平进而调控果实软化进程。     

脐橙晚熟突变体及其野生型果实柠檬酸代谢基因表达分析

‘奉节晚橙’（Citrus sinensis L. Osbeck）是来源于‘奉节72-1’脐橙的晚熟芽变。采用qRT-PCR方法测定了‘奉节72-1’与其晚熟突变体果实4个发育时期柠檬酸代谢相关基因的表达。结果表明,糖酵解途径中‘奉节72-1’脐橙基因的表达高于‘奉节晚橙’;但是柠檬酸合成相关基因CsCS4、CsPEPC1、CsPEPC2、CsPEPC4、CsME1、CsME4的表达水平低于‘奉节晚橙’。果实发育后期,‘奉节72-1’脐橙中CsACO1、CsGAD4、CsGS1等柠檬酸降解相关基因表达水平逐渐升高,且表达量高于‘奉节晚橙’。两者间柠檬酸含量的差异是代谢途径中多种基因共同作用的结果。通过相关性分析,推断CsME1、CsME4可能是影响柠檬酸含量差异的关键基因。     

猕猴桃3 个品种果实耐冷性差异研究

 以猕猴桃早熟红肉品种‘红阳’、中熟黄肉品种‘华优’和晚熟绿肉品种‘徐香’的果实为 试材,研究其在0 ℃（RH 90% ~ 95%）低温贮藏过程中冷害发生情况及相关生理生化变化。结果表明： 不同品种耐冷性不同,中华猕猴桃‘红阳’和‘华优’耐冷性较弱且冷害表现早于美味猕猴桃‘徐香’。 贮藏后期‘红阳’和‘华优’冷害指数、冷害率、MDA 含量和LOX 活性显著高于‘徐香’,且乙烯释放 量及前期的呼吸速率也较高;而‘徐香’冷害程度较轻,整个贮期始终保持较高的POD 活性和较低的PPO 活性,好果率高且失重率低,贮藏效果好于‘红阳’和‘华优’,且‘华优’硬度下降较快。表明‘红阳’ 和‘华优’对低温的耐性弱于‘徐香’,这种耐冷性差异为今后选育耐冷性品种提供一定的依据。     

猕猴桃花青素合成途径基因AcCHS 和AcLDOX的克隆与表达分析

 根据物种水平上蛋白保守序列设计特异引物,扩增获得‘红阳’猕猴桃花青素合成途径中查尔酮合成酶（chalcone synthase,CHS）和无色花青素双加氧酶（leucoanthocyanidin dioxygenase,LDOX）基因的特异片段,用RACE（rapid-amplification of cDNA ends）技术克隆出这两个基因的cDNA全长,长度分别为1501 bp（AcCHS）和1381 bp（AcLDOX）,分别编码389个和355个氨基酸。通过比对发现AcCHS与棉花（Gossypium hirsutum）、山茶（Camellia japonica）和黄蜀魁（Abelmoschus manihot）的CHS序列相似性较高,达到95%,与葡萄（Vitis vinifera）和苹果（Malus × domestica）的相似性分别为94%和93%;AcLDOX与山葡萄（Vitis amurensis）和葡葡的相似性分别高达94%和93%。用实时荧光定量PCR分析AcCHS和AcLDOX在‘红阳’（红肉）、‘金魁’（绿肉）和‘金农’（黄肉）3种不同果肉颜色的猕猴桃内果皮中的表达,发现AcCHS的表达量在‘红阳’果实转色期（花后65 d）较高,而在‘金农’开花后表达量呈持续下降趋势;AcLDOX在‘红阳’果实发育早期呈上升趋势,花后65 d后迅速下降,在‘金魁’果实发育后期呈明显上升趋势,在‘金农’开花后呈持续下降趋势。     

十个葡萄品种耐贮性及相关浆果性状观察比较

以"美人指"、"红地球"、"红高"、"水晶"、"温克"、"摩尔多瓦"、"红富士"、"巴拉迪"、"红玫瑰"、"南玉"葡萄品种为试材,室内观察测定了葡萄果柄耐拉力、果实耐压力、果蒂面积、皮厚、贮存性等指标,以期为筛选优良葡萄品种提供参考。结果表明:供试的10个葡萄品种间存在性状差异,果柄耐拉力范围在141.20～1 073.00g,果实耐压力范围在230.50～4 304.30g间,果蒂面积范围在4.94～40.53mm2,皮厚范围在0.06～0.16mm,耐拉力、耐压力、果蒂面积、果皮厚度与品种耐贮性呈正相关;果蒂面积、单果重与耐压力、耐拉力呈正相关。     

‘南通小方柿’乙醇脱氢酶基因DkADH1的克隆及表达分析

以‘南通小方柿’果实为材料,采用同源克隆的方法,获得了柿乙醇脱氢酶基因DkADH1,其全长为1 377 bp,开放阅读框为1 137个核苷酸,编码379个氨基酸,具有ADH基因典型的结构域和功能域,与番茄、苹果等双子叶植物亲缘性较近。以‘南通小方柿’不同组织为材料,采用qRT-PCR方法对DkADH1及单宁生物合成途径中的相关基因的表达进行分析,同时测定了不同时期果实的单宁含量,结果表明在果实发育过程中,可溶性单宁含量逐渐降低,而不溶性单宁含量不断升高;DkADH1基因在茎、叶、花、果实等器官中均有表达,在果皮中表达量最高。随着果实的成熟,DkADH1表达量总体呈上升趋势。柿果实中单宁合成途径中的相关基因DkF3′5′H和DkMYB4随着乙醇处理果实时间的延长表达量呈下降趋势,推测‘南通小方柿’DkADH1能够抑制单宁合成相关基因的表达,从而降低果实可溶性单宁含量。     

鲜食葡萄新品种‘郑葡2号’

‘郑葡2号’是以‘红地球’与‘早玫瑰’杂交选育出的中熟鲜食葡萄二倍体新品种。果穗圆锥形,平均单穗质量918.0 g。果粒圆形,紫黑色,平均单粒质量12.0 g,无香味,每果粒含种子2 ~ 5粒,多为3粒,平均可溶性固形物含量为17.0%。在河南省郑州地区,8月中旬果实成熟。丰产稳产性好,叶片对霜霉病较为敏感,但强于‘红地球’。     

两种不同肉色枇杷果实类胡萝卜素积累及合成#br# 相关基因的表达

 以‘早钟6 号’（黄肉）和‘白玉’（白肉）两类枇杷为材料,测定不同发育阶段果实果皮 和果肉中类胡萝卜素含量,并对15 个生物合成相关基因的表达进行了分析。随着果实发育成熟,β–胡 萝卜素含量在黄肉‘早钟6 号’果皮和果肉中增加,到成熟期达到最高值,分别为68.53 和11.92 μg ? g-1 FW; 在白肉的‘白玉’果皮中也呈增加趋势,到成熟期最高,为38.89 μg ? g-1 FW,但果肉中略有下降,从最 初的0.47 μg ? g-1 FW 降低至0.29 μg ? g-1 FW。两个品种果皮和果肉的β–隐黄质含量表现为持续增加,均 在成熟期达到最高值。叶黄质含量在‘早钟6 号’果皮中表现为下降,在果肉中则持续上升;在‘白玉’ 果皮中表现为先降后升,在果肉中变化不大,维持较低水平。‘早钟6 号’进入转色期后,与‘白玉’相 比,在果皮中的PSY 和CYCB 表达量较高,而在果肉中CYCB 和BCH 的表达量较高,提示枇杷不同发育 阶段类胡萝卜素的积累主要受PSY、CYCB、BCH 基因的共同调控。     

晚熟鲜食桃新品种‘秋硕’

 ‘秋硕’是以日本品种‘大久保’为母本,河北满城地方品种‘雪桃’为父本杂交育成的晚熟鲜食桃新品种。果实大,平均单果质量350 g,着色早,色泽艳丽,肉质致密,风味浓甜,香气浓郁;果实硬度大,耐贮运,室温条件下可贮放7 d;离核。在河南郑州地区8 月上旬成熟,丰产性强。     

利用葡萄氮代谢基因的表达评价不同氮肥肥效

以‘夏黑’葡萄(Vitis labruscana‘Black Summer’)为试材,选择两个生长关键时期(成花期与转色期),利用半定量RT-PCR和荧光定量PCR技术对5个氮代谢基因(VvGHD、VvNiR、VvNR、VvGS和VvAS)在叶面喷施不同氮肥处理后的表达情况进行分析,并对葡萄新梢增长量、叶面积增长量、落花落果率、果实大小等指标进行统计分析。两个时期叶面喷施不同浓度5种氮肥后,5个基因的表达量整体呈现出增高趋势,因喷施氮肥不同,同一基因在响应强度和时间上存在差异,基因响应强度大、时间长的肥料对葡萄生理性状的提高也较显著。综合基因表达与生理变化两方面验证,得出尿素、硝酸铵对葡萄生长发育所起肥效最好,硝酸钙有助于减少落花落果率,硫酸铵与硝酸钠相对肥效较差。     

毛欧杂种葡萄‘NW196’花色苷组成与相关基因表达分析

以不同发育期毛欧杂种葡萄‘NW196’为试验材料,利用HPLC–MS检测其果皮中花色苷的组成及含量,Real-time PCR检测花色苷合成相关基因表达水平,并与欧亚种‘赤霞珠’比较。结果表明,成熟后期‘NW196’果皮中花色苷总量显著高于‘赤霞珠’;采收期‘NW196’葡萄果皮中共检测到23种花色苷,成熟后期单糖苷所占比例高于双糖苷,其中含量最高的是花翠素–3–O–葡萄糖苷,3’5’–羟基取代花色苷比例高于3’–羟基取代花色苷;与欧亚种‘赤霞珠’相比,‘NW196’果皮中酰化和甲基化花色苷比例较低。结论:毛欧杂种‘NW196’花色苷组成与欧亚种‘赤霞珠’差异明显,这与其品种特性有关,并受到类黄酮代谢路径相关基因的调控;此外,花色素双糖苷主要在转色初期合成。     

‘徐香’与‘海沃德’猕猴桃冷藏期间组织结构与生理变化差异

以猕猴桃‘徐香’（较不耐贮藏）和‘海沃德’（耐贮藏）果实为试材,研究其在0 ℃贮藏期间生理及组织结构的变化差异,从而探究其与耐贮性的关系。结果表明：贮藏期间两品种果肉硬度均不断下将,‘海沃德’果肉硬度降至10 N的时间为150 d,而‘徐香’仅为95 d;‘徐香’的呼吸高峰和乙烯释放高峰的出现分别较‘海沃德’早20 d和10 d,且峰值分别高出16%和250%。贮藏期间‘徐香’果实的质量减少率也显著高于‘海沃德’。在整个贮藏期间,‘海沃德’果实的淀粉、原果胶、纤维素含量均高于‘徐香’,而淀粉酶（AM）、果胶代谢相关酶（多聚半乳糖醛酸酶PG、果胶甲酯酶PE、β–半乳糖苷酶β-Gal）和纤维素酶（Cx）的活性高峰值均低于‘徐香’。‘海沃德’的表皮毛极显著细短于‘徐香’;且角质层厚度及表皮细胞层数都大于‘徐香’;贮藏期间果肉细胞的形变程度‘海沃德’小于‘徐香’;‘海沃德’的细胞壁厚于‘徐香’,且贮藏期间中胶层分裂缓慢,线粒体较完整。总之,耐贮性好的猕猴桃品种角质层和表皮细胞厚,质量减少率较低,呼吸速率和乙烯释放速率慢,细胞壁酶活性低。     

不同需冷量桃休眠相关DAM基因表达特性及激素调控的响应分析

以"南山甜桃"(需冷量200 h)、"瑞光51号"(需冷量400 h)和"春美"(需冷量600 h)为试材,从大量落叶期开始至花芽萌动期间,约每15 d采样一次,RT-PCR分析DAM基因在不同冷量积累时期花芽中的表达量,PLC-MS-MS测定相同时期吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)含量变化,以期了解不同需冷量桃休眠过程中DAM基因的表达特性及激素的调控机理。结果表明:DAM基因在不同需冷量桃休眠过程中的表达趋势一致,随着休眠的深入,"春美"中DAM基因的表达水平呈先升后降趋势;"南山甜桃"和"瑞光51号"在进入休眠期以后DAM基因表达水平急剧下降,与低温积累量呈负相关。"春美"中DAM基因表达量明显高于"瑞光51号"和"南山甜桃"。"春美"中DAM基因表达水平比"南山甜桃"和"瑞光51号"开始下调约晚30 d,但"瑞光51号"和"南山甜桃"中DAM基因下调的时间一致。IAA、ZT在不同需冷量桃休眠过程中的含量变化差异不显著,ABA含量变化差异显著,可能在休眠解除过程中起重要调控作用。     

鲜食葡萄新品种‘学苑红’

‘学苑红’葡萄是从以匈牙利品种‘罗萨卡’为母本、‘艾多米尼克’为父本的杂交后代中选育出的新品种。成龄叶片很大，果穗中等。果粒着生紧密，椭圆形，极大，平均质量12.9 g。果皮红色，薄，涩。果实无特殊香气，通常有2粒种子。有一定的耐挂性，耐贮运。在北京地区3月下旬开始萌芽，5月中旬开花，7月中下旬开始成熟，8月中上旬充分成熟。     

外源硒调控盐胁迫下小白菜种子萌发特性和生理特性研究

以"四季小白菜""京新1号""鲁抗快菜"小白菜种子为试材,采用水培法,研究了NaCl和Na_2SeO_3处理对小白菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、相对盐害率、耐盐指数、苗长以及丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响,以探讨不同品种小白菜耐盐性差异并揭示硒元素缓解小白菜盐胁迫的作用效果。结果表明:150mmol·L^-1和200mmol·L^-1 NaCl处理中"四季小白菜"种子的相对盐害率为3.33%和30.00%,"京新1号"种子的相对盐害率为-8.22%和27.4%,"鲁抗快菜"种子的相对盐害率为25.34%和56.36%,表明"鲁抗快菜"耐盐性最弱。同时,150mmol·L^-1 NaCl处理和1mg·L^-1 Na_2SeO_3+150mmol·L^-1 NaCl处理中小白菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和株高均显著低于对照,但1 mg·L^-1Na_2SeO_3+150mmol·L^-1 NaCl处理中小白菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和株高较150 mmol·L^-1 NaCl处理分别提高17.37%、5.52%、5.36%、159.87%和143.91%,相对盐害率降低为8.28%,耐盐指数增加到77.07%。此外,与150mmol·L^-1NaCl处理相比,1mg·L^-1 Na_2SeO_3+150mmol·L^-1 NaCl处理中小白菜幼苗MDA含量显著降低,POD活性和CAT活性均显著升高,故1mg·L^-1 Na_2SeO_3能够缓解盐胁迫对小白菜幼苗的毒害。     

藤稔葡萄主枝环剥对果实着色及相关基因表达的影响

 对藤稔葡萄主枝环剥促进其果实着色的效果以及对花青苷合成相关重要基因的表达等进行了分析。研究结果表明,主枝环剥不仅可提高果肉中可溶性固形物的含量,并且明显改善果实着色,使外观颜色加深,果皮花青苷含量增加,果面光泽明亮度（L*值）和颜色组分b*值下降,颜色组分a*值以及红色葡萄果实颜色指数（CIRG值）增大。环剥处理还明显促进了UFGT、MYBA1和MYBA2的表达,MYBA1和MYBA2于环剥处理后的第2周（花后63 d）表达水平明显上调,相对表达量达到最高值。UFGT的表达水平与花青苷的积累趋势具有很好的一致性,环剥处理使UFGT的相对表达高峰提前1周左右。     

乙烯对‘班克海尔’和‘杨妃出浴’芍药切花开放和衰老的影响

以‘班克海尔’和‘杨妃出浴’芍药切花为试材,研究了乙烯利处理对切花开放和衰老的影响;同时从中克隆得到乙烯生物合成和信号转导的9个关键基因PlACS、PlACO、PlACO5、PlETR1、PlERS1、PlETR2、PlEIN4、PlCTR1和PlEIN3,利用qRT-PCR分析这些基因的表达模式。结果表明：‘班克海尔’正常瓶插寿命长于‘杨妃出浴’,两品种均对乙烯敏感;乙烯利明显促进‘班克海尔’花朵开放和衰老进程,抑制‘杨妃出浴’花朵开放进程,并且出现僵花、衰老萎蔫。基因序列分析表明,乙烯合成和信号转导基因在两种切花品种中高度保守,保守性在98%以上。qRT-PCR分析表明,瓶插12 ~ 36 h,乙烯诱导两品种中除PlEIN3外的所有基因上调。瓶插0 ~ 12 h,‘杨妃出浴’中9个基因表达量均较高,内源乙烯合成和乙烯信号转导较为活跃,而在24 ~ 36 h,外源乙烯使‘班克海尔’乙烯生物合成基因表达量升高,乙烯信号转导基因表达量普遍高于‘杨妃出浴’。推测‘杨妃出浴’自身合成乙烯的时间较早,对乙烯的反应比‘班克海尔’更为敏感,‘班克海尔’乙烯反应类型可能为末期上升型,而‘杨妃出浴’为乙烯跃变型;两种芍药切花对乙烯的敏感程度以及花朵开放和衰老进程不同,可能与其乙烯生物合成和信号转导相关基因表达模式不同有关。     

盐胁迫下胡萝卜肉质根中木质素响应机理研究

以'红福七寸'和'红芯七寸'胡萝卜为材料,测定了不同浓度NaCl处理下肉质根木质素含量以及根和叶中胁迫相关的生理指标,并利用实时荧光定量PCR方法测定了13个木质素合成相关基因在肉质根中的表达水平.结果显示:在不同浓度盐胁迫下,胡萝卜肉质根中木质素含量均显著高于对照(蒸馏水处理),且在100 mmol·L-1 NaCl...     

水分胁迫对蔓生紫薇和亮叶忍冬生长及生理特性的影响

 采用盆栽试验法, 研究水分胁迫对蔓生紫薇(Lagerstroemia indica‘Summer and summer’) 和亮叶忍冬(Lonicera nitida‘Maigrun’) 两种木本地被植物生长及生理特性的影响。结果表明: 水分胁迫下,两种植物的生长受到明显抑制, 蔓生紫薇受抑制程度高于亮叶忍冬, 其相对生长量远小于亮叶忍冬。水分胁迫使两种植物净光合速率、蒸腾速率、气孔导度下降, 胞间CO₂浓度则前期下降后期上升, 且表现为蔓生紫薇各生理指标的变化幅度大于亮叶忍冬。综合评价两种植物的抗旱性为: 亮叶忍冬> 蔓生紫薇。