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杨树溃疡病病原的多重PCR检测技术 总被引:2,自引:0,他引:2
利用真菌通用引物ITS1/ITS4,EF1-728F/EF1-986R对4种杨树溃疡病病原菌株和环境样本的核糖体DNA内部转录间隔区ITS序列和转录延伸因子EF-1α基因序列分别进行普通和多重PCR检测,再进行测序比对分析。结果表明:退火温度为55.6℃,各引物终浓度为0.2μmol·L-1,可以成功地扩增出菌株和环境样本的目的条带,并通过测序比对鉴定出多种来自培养和环境病害组织中的溃疡病病菌,多重PCR能够检测到1ng的基因组DNA。研究结果将为建立溃疡病病原多重PCR鉴定技术和以环境溃疡病病害样本为直接检测鉴定对象的高通量的基因芯片检测方法奠定基础。 相似文献
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笔者近年来对阜新地区杨树溃疡病的成因和综合防治技术进行了试验研究。基本摸清了阜新地区杨树溃疡病有五种类型,即杨树水泡型溃疡病Dothiorella gregariaSacc、杨树疡壳孢溃疡病Dothichiza populea Sacc Briard、杨树球二孢型溃疡病Botryo-diplodia populea Zhong、杨树烂皮病Cytospora chrysosperm a(Pers.)Fr.、杨树拟茎点菌溃疡病Phom opsissp.;通过对杨树抗病优良品种的造林栽培试验,选出彰武小钻杨为抗病性最强的树种;对杨树溃疡病的防治筛选试验表明,50% 多菌灵、70% 甲基托布津200倍液防治效果最好,防效达80% 以上;经采用造林综合技术措施(浸泡苗木48 小时、换客土、挖大穴、灌水、栽后喷药、管护等)栽植病苗,成活率高达98% 。 相似文献
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【目的】杨树溃疡病是中国杨树人工林重大生物灾害之一,采用生物防治的方法控制杨树溃疡病是持续有效的手段。本研究旨在从杨树林地土壤中分离出对杨树溃疡病菌有良好生防效果的拮抗微生物。【方法】以杨树溃疡病病原菌葡萄座腔菌为靶标,进行土壤中生防微生物的分离、筛选和鉴定。土壤微生物的分离采用稀释平板涂布法;拮抗微生物的筛选分为初筛、发酵液复筛和拮抗菌株离体复筛3步,初筛采用平板对峙法,拮抗菌发酵液复筛选择三明治法和改良琼脂扩散法相结合的方法,最终通过离体组织防治效果测定确定目的生防菌株;生防菌株的鉴定采用形态学观察和分子生物学鉴定相结合的方法。【结果】在河北省廊坊市和河南省原阳县的杨树林地中按上、中、下3层共采集48份土样,从土样中共分离得到微生物259株,其中细菌122株;放线菌106株;真菌31株,各土层微生物数量规律整体符合上层>中层>下层;通过平板对峙法初筛选择出8株抑菌带直径>4 mm的细菌和放线菌以及8株拮抗菌菌落直径>40 mm的真菌;再通过发酵液三明治法和改良琼脂扩散法复筛,筛选出8株对杨树溃疡病有良好抑制作用的拮抗菌,分别是细菌TYZ1B3和YX5B1,真菌LS10F1,LX5F1,LZ10F1,LS6F1,LX6F2和 TLZ2F2;最终通过离体组织防治效果测定,从这8株拮抗菌株中筛选出1株土壤生防真菌LX6F2,其对杨树离体组织溃疡病的防治效果可达76.04%;经过形态学观察,菌株LX6F2的菌落、菌丝及孢子形态符合镰刀菌的特征,通过 rDNA-ITS序列及其系统发育分析,测得生防菌株 LX6F2的序列长度为563 bp,序列登录号为 FR872729.1,其与编号为 JN038467的木贼镰刀菌相似度高达100%,从而鉴定该菌株为木贼镰刀菌。【结论】该菌株的发现为杨树溃疡病的生物防治提供了新的原材料,对杨树溃疡病的可持续控制具有重要意义,可在后续研究中将进一步对其抑菌机理、有效拮抗成分及菌剂研制等进行研究。 相似文献
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我国杨树溃疡病研究进展 总被引:20,自引:1,他引:20
杨树溃疡病主要由真菌侵染所致,该真菌是一类世界性分布的真菌,寄主范围十分广泛,可危害多种林木和果树的树干及果实,引起枯枝、溃疡、流胶和果腐等。另外,还可以引起根腐,导致整株树的枯死。发生病害的林木,用材林材性降低,经济林产量降低,造成严重危害和经济损失。文中对其病害分布、致病机理、抗病机制以及抗病育种等进行了综述。 相似文献
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利用克隆得到的毛白杨c3h1基因构建其RNAi抑制表达载体,通过根癌农杆菌介导的叶盘法转化银腺杨无性系84 K,Realtime PCR检测表明其转基因株系323、325和322中c3h1基因表达量较野生型植株分别下调89.04%、82.22%和68.38%;茎横切片组化染色和显微结构观察表明转基因植株木质部发育和木质素沉积方式发生了改变;木质素、纤维素含量测定及苯酚—硫酸法总糖含量与HPLC法可溶性总糖和单糖含量检测结果表明:转基因植株木质素含量平均降低23.00%,最高可达39.71%;酸前处理效率最高提高了41.39%;未经酸处理直接酶解的糖化效率是对照植株的2.34~2.72倍,322株系和323株系比对照植株经酸前处理后再酶解的糖化效率高出81.18%和375.53%。 相似文献
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中金系列杨树是杨柳科杨属白杨派植物,选择其腋芽(或顶芽)、嫩茎段、嫩叶片等为外植体,进行愈伤组织诱导试验、不定芽分化试验、生根试验,筛选出了适合植株分化、生根的培养基成分;对生根试管苗进行移栽基质配比试验,确定组培苗最佳生长环境。总结出适合中金系列杨树组培的技术流程,保证了杨树的遗传稳定性,降低了培养成本,加快了培养速度。 相似文献
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利用田间试验方法,对山东省莒县沭河流域杨树多代经营人工林产区不同林地间作农作物、林地抽沙换土、杨树人工林品种间轮作等措施对杨树人工林多代连作地力维持效果进行研究。结果表明:抽沙换土有利于胸径和树高生长,土壤有机质、速效氮、速效磷、速效钾和微量元素Cu、Zn、Mn的含量增加,土壤脲酶、过氧化物酶、多酚氧化酶活性和土壤微生物总量增加,其中真菌、细菌、放线菌分别增长了1.55倍、2.05倍和1.24倍;主伐更新更换不同品种以后,土壤有机质、土壤速效氮和速效钾含量3年保持增长,土壤脲酶、过氧化物酶、多酚氧化酶活性增加,土壤微生物总量提高,其中真菌、细菌、放线菌分别增长了3.18~23.91倍、3.40~28.71倍和0.71~2.80倍;林地间作有利于提高土壤有机质、速效磷、速效钾和微量元素Fe、Mn含量,土壤酶活性和土壤微生物数量增加,其中真菌、细菌、放线菌分别增长了1.38~3.39倍、1.28~7.73倍和0.79~3.11倍。间作林地的胸径和树高较对照分别提高了15.25%~37.84%和8.17%~29.12%。 相似文献
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以辽北地区美×青、中绥12、银中杨等3种杨树无性苗作为试材,对其生长状况做了6年观测记录,对辽北地区3种杨树培育技术和生长过程进行研究,通过研究造林密度与胸径、材积的关系,试图找出更适宜的造林方法。同时对林内间种农作物做了试验。 相似文献
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在山东营建杨树主要品种抗溃疡病 Dothiorella gregaira Sacc试验林 ,田间测定自然发病率和感病程度 ,同时室内测定杨树树皮含水量、两种同功酶活性和主要酚类化合物含量 ,探讨上述三项指标与溃疡病发生的关系 ,明确主要杨树品种的抗病性。结果表明 ,杨树树皮含水量、过氧化物酶和酯酶同功酶活性、对羟基苯甲酸和邻苯二酚含量与杨树对溃疡病的抗性有着密切关系。田间表现抗病的品种 ,如 I-69/5 5、I-72 /5 8和毛白杨 ,其上述三项指标高 ;感病品种 80 3杨 ,三项指标低 ;中林 2 3、2 8、46杨和 2 88-3 79杨的上述指标介于两种情况之间 ,属于中抗品种。田间和室内测定结果基本吻合。 相似文献
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烟雾载药技术防治杨树食叶害虫研究初报 总被引:7,自引:0,他引:7
利用烟雾载药技术防治杨树食叶害虫,克服了因杨树树体高大等原因用常规喷药方式难以达到最佳防治效果。其中4.5%氯氰菊酯乳油,2.5%溴氰菊酯乳油(又名敌杀死)分别与柴油按1:10,1:20两种配比混合后放烟24 h,害虫校正死亡率分别达到100.00%、97.40%; 100.00%、98.27%。3.0%高渗苯氧威与柴油按1:10配比混合后放烟72 h,死亡率达到 90.40%。在生产中可大力推广,而且操作简便有效。 相似文献
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The volatiles release behavior of poplar powder has been studied by TD-GC/MS online technique at different temperatures.The results show that the proportion of main harmful components was higher than that of beneficial in the volatiles of poplar powder at 40℃ and 90℃,the harmful components was 1.7 times higher than beneficial components. The proportions of main beneficial and harmful components were equivalent at 60℃,while the main beneficial components was 5.42 times higher than that of harmful.Taking poplar wood powder as substrate to prepare wood powder-based composites by high-pressure no-gel molding compaction between the temperature of lignin softening point and wood materials carbonization(about 150-180℃) can present a satisfactory environmental friendliness. 相似文献