固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸭蛋中4种硝基咪唑类药物残留

为建立并优化一种同位素-高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸭蛋中4种硝基咪唑类药物（甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑）残留的检测方法,将样品经柠檬酸缓冲液和乙腈提取,超声波助提,平行蒸发仪减压浓缩后,用混合强阳离子固相萃取柱（MCX）净化。以Kinetex F5五氟苯基色谱柱分离,0.1%甲酸水和甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源（ESI）正离子模式下,采用多反应监测模式（MRM）进行检测,以同位素内标法定量分析。结果显示:4种硝基咪唑类药物在0.5～200.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.997,加标回收率为90%-110%,相对标准偏差（RSDs）为4.76%～7.17%。结果表明,该方法回收率高、准确性好,可完全满足对4种硝基咪唑类药物残留检测的定性、定量需求,为食品中污染物监测提供了有效的技术支撑。     

应用液相色谱技术检测饲料中硝基呋喃类药物的方法研究

硝基呋喃类抗生素被广泛应用于大肠杆菌和沙门氏菌的预防和治疗中,也会对动物的增长有促进作用。但世界卫生组织(WHO)和欧盟只允许非常低的残留量,因其过多会对人体产生危害,所以在动物饲养过程中被禁止使用。我国目前有该类药物的检测标准《NY/T 727-2003饲料中呋喃唑酮的测定—高效液相色谱法》,但该方法仅能测定一种硝基呋喃类药物,远远不能满足我国对饲料中该类药物实际监控的需要。因此,研究建立饲料中多种硝基呋喃类药物的快速、准确、灵敏的检测方法十分迫切。本研究拟建立饲料中4种最常见的硝基呋喃类药物的同步检测HPLC分析方法标准。用乙腈提取试样中的硝基呋喃类药物,浓缩近干,用2%甲酸溶解,经混合型阳离子交换柱净化,高效液相色谱法测定,外标法定量。经试验:在10μg/g、50μg/g和500μg/g三个浓度添加水平,添加剂预混合饲料中NFZ、NFT、FTD和FZD的平均回收率在86.77%~98.50%之间,日内变异系数在1.85%~8.44%之间,日间变异系数在3.19%~9.65%之间。配合饲料中NFZ、NFT、FTD和FZD的平均回收率在86.16%~98.52%之间,日内变异系数在1.24%~8.99%之间,日间变异系数在2.53%~10.26%之间。     

高效液相色谱法检测饲料中的硝基呋喃类药物

硝基呋喃类抗生素被广泛应用于大肠杆菌和沙门氏菌的预防和治疗中．也会对动物的增长有促进作用。但世界卫生组织（WHO）和欧盟只允许非常低的残留量．因其过多会对人体产生危害．所以在动物饲养过程中被禁止使用。本研究拟建立饲料中4种最常见的硝基呋喃类药物的同步检测HPLC分析方法标准。用乙腈提取试样中的硝基呋喃类药物。浓缩近干,用2％甲酸溶解,经混合型阳离子交换柱净化．高效液相色谱法测定,外标法定量。经试验：在10、50和500mg／kg3个浓度添加水平,添加剂预混合饲料中呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮和呋喃唑酮的平均回收率在90．1％。98．5％．日内变异系数在2．0％～6．0％．日间变异系数在5．2％～8．2％。配合饲料中呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮和呋喃唑酮的平均回收率在87．0％～97．8％．日内变异系数在2．0％～7．6％之间．日间变异系数在4．2％～8．7％。     

固相萃取-高效液相色谱同时测定中兽药中8种氟喹诺酮类药物

为了同时检测中兽药中非法添加的8种氟喹诺酮类药物,试验采用磷酸盐缓冲液提取、HLB固相萃取柱净化、以磷酸-纯水-三乙胺-乙腈体系为流动相、梯度洗脱、荧光检测器进行高效液相色谱测定。结果表明:该方法线性良好(相关系数r>0.999 0),平均回收率为75.6%～91.8%,相对标准偏差为1.6%～9.2%。说明该方法操作简便,检测成本低,准确度高,适用于大量中兽药样品的初筛及检测。     

HPLC法检测饲料中4种硝基呋喃类药物

时饲料中四种硝基呋喃类药物呋喃西林(NFZ)、呋喃妥因(NFT)、呋喃它酮(FTD)和呋喃唑酮(FZD)的高效液相色谱(HPLC)检测方法进行了研究.采用50 mL乙腈于65℃下超声提取药物.经MCX固相萃取小柱净化后进行液相色谱-紫外检测,检测波长为370 nm对饲料进行10～500μg/g硝基呋喃类药物的添加回收实验,结果表明,4种药物的平均回收率为80.6%～99.9%(n=4),日内变异系数为0.68%～8.99%(n=4),日间变异系数为1.85%～8.44%(n=3).配合饲料中NFZ、NFT、FTD、FZD的检测限分别90、69、56μg/g和148 μg/g,定量限分别为180、137、112μg/g和296 μg/g;预混合饲料中NFZ、NFT、FTD、FZD的检测限分别为59、132、66μg/g和88 μg/g,定量限分别118、265、132μg/g和176μg/g.     

固相萃取-高效液相色谱法同时检测奶牛粪污中5种磺胺类抗生素

建立的固相萃取-高效液相色谱法具有灵敏度高、检测限低的特点,可同时定量检测奶牛粪污中磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹噁啉的残留。采用C18色谱柱(500 mm×4.6 nm, 5μm),以0.3%的乙酸-乙腈溶液为流动相,在流速1.0 mL/min、检测波长270 nm、柱温30℃条件下,5种抗生素均能达到基线分离;3倍信噪比下,5种抗生素的检出限均为20μg/kg。在加标浓度50μg/kg条件下,奶牛粪污样品经前处理、MCX固相萃取小柱富集净化后,五种磺胺类抗生素回收率达到75%～80%,相对标准偏差为2.8%～3.9%。此方法检测了某规模化奶牛场粪污中磺胺类抗生素残留,结果显示,磺胺嘧啶的浓度范围在45～50μg/kg,其他抗生素无检出。     

饲料中硝基呋喃类药物的检测研究进展

硝基呋喃类药物(Nitrofurans)是一类合成的抗菌药物,硝基呋喃类药物主要有:呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林;其作用机制为干扰细菌氧化还原酶从而阻断细菌的正常代谢。硝基呋喃类抗生素被广泛应用于大肠杆菌和沙门氏菌的预防和治疗中,也会对动物的增长有促进作用。长期使用会使此类药物残留在被饲喂动物的肌肉组织与内脏组织中,人在食用这些动物性食品后也会出现类似于药物过敏的症状,重者会出现心动过速、血压升高、胸闷、烦燥等。孕妇在长时间食用这些肉食品后还有可能造成新生儿畸形的风险。由此可见,对饲料中硝基呋喃类药物进行监测是保障人类食品安全的重要组成部分,是保障人类身体健康与生命安全的重要措施。文章从高效液相色谱法(HPLC)、联用技术分析法、超高效液相色谱法(UPLC)、免疫分析法(IA)、分光光度法的检测技术手段分别加以讨论。     

固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中的地西泮

本文建立了固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中地西泮的方法。在碱性条件下,以二氯甲烷和正己烷(3∶7,v/v)提取饲料中的地西泮,再经SLB固相萃取柱净化,以甲醇和水为流动相,利用反相高效液相色谱-紫外检测法检测。此方法平均回收率为94.0%,变异系数为7.0%。     

固相萃取/UPLC-MS/MS法检测饲料中18种喹诺酮类药物的研究

为了建立超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中18种喹诺酮类药物的分析方法,以0.1%乙酸乙腈提取饲料样品中的待测物,HLB柱净化,超高效液相色谱-串联质谱法测定,氘代同位素内标法定量。18种喹诺酮类药物在线性范围为0~1.0 mg/L,线性关系良好,相关系数分别在0.9989~0.9999之间,方法的检测限为0.005~0.2 mg/kg。在不同饲料中添加浓度范围为0.1~5.0 mg/kg,平均回收率为43.0%~101%,相对标准偏差小于11.2%。结果表明,该方法灵敏、高效、抗干扰力强,适用于饲料中的18种喹诺酮类药物的测定。     

固相萃取/UPLC-MS/MS法检测饲料中18种喹诺酮类药物的研究

为了建立超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中18种喹诺酮类药物的分析方法,以0.1%乙酸乙腈提取饲料样品中的待测物,HLB柱净化,超高效液相色谱-串联质谱法测定,氘代同位素内标法定量。18种喹诺酮类药物在线性范围为0~1.0 mg/L,线性关系良好,相关系数分别在0.9989~0.9999之间,方法的检测限为0.005~0.2 mg/kg。在不同饲料中添加浓度范围为0.1~5.0 mg/kg,平均回收率为43.0%~101%,相对标准偏差小于11.2%。结果表明,该方法灵敏、高效、抗干扰力强,适用于饲料中的18种喹诺酮类药物的测定。     

正交试验法优选宫衣净酊渗漉提取工艺研究

为了优选宫衣净酊的渗漉提取工艺条件,以主药红花有效成分羟基红花黄色素A（HSYA）含量和渗漉浸膏得率为考察指标,选择乙醇体积分数、溶媒用量、渗漉速度和浸渍时间为考察因素,采用L9（34）正交实验法对宫衣净酊渗漉提取工艺进行优化筛选.结果表明,宫衣净酊优选工艺为加入10倍量70％乙醇,浸渍24 h,以2 mL/（min·kg）进行渗漉提取.优选的工艺条件稳定、可行、有效成分浸出率高.     

高效液相色谱法测定饲料中七种水溶性色素

应用高效液相色谱法建立了饲料中柠檬黄、桔黄、胭脂红、食品红、苋菜红、亮蓝、靛蓝7种水溶性色素测定的新方法。样品经40 mL乙腈-丙二醇-水-氨水(25:5:19:1)分两次提取,PWAX柱净化处理后,以0.02 mol/L乙酸铵溶液(pH=5.0)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,7种水溶性色素经C18柱得到良好分离。7种水溶性色素在0.5(1.0) ~ 50 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数均不小于0.999。亮蓝的检出限为0.25 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg;柠檬黄、苋菜红、胭脂红、桔黄、食品红的检出限为0.5 mg/kg,定量限为1.0 mg/kg;靛蓝的检出限为1.0 mg/kg,定量限为2.0 mg/kg。饲料样品在定量限、低、中、高4个加标浓度下,7种水溶性色素的回收率为60.6% ～ 116.1%,相对标准偏差为0.9% ~ 7.3%,结果表明方法适用于饲料中7种水溶性色素的检测要求。该方法操作简单、准确、杂质干扰少。     

采用固相分离与反相色谱法制备柞蚕蛹虫草虫草素

虫草素是蛹虫草中具有药用功能的活性成分。采用超声波技术获得柞蚕蛹虫草虫草素萃取液后,利用固相萃取柱对虫草素进行预分离,再利用反相制备型高效液相色谱监测制备虫草素。试验结果表明,采用固相萃取柱可以高效地分离柞蚕蛹虫草萃取液中的虫草素,虫草素洗脱液中的虫草素质量分数达47.05%,经反相高效液相色谱监测制备的虫草素样品纯度达到99%以上,其萃取、分离、制备工艺简单,具有实用价值。     

树莓叶黄酮提取的正交试验和响应曲面法工艺优化对比

旨在为树莓叶黄酮的开发应用提供数据参考,通过正交试验与响应曲面法设计改良乙醇提取工艺,并通过HPLC建立树莓叶黄酮的色谱分离条件为:Agilent ZorBax SB色谱柱,流动相为1mg/mL乙酸-乙腈=72.5∶27.5,等度分离,柱温30℃,检测波长:257nm,完成树莓叶黄酮的初步分离,以及黄酮中芦丁含量的准确测定和验证。最佳提取工艺为:646mL/mL乙醇,料液比1∶12.5,41.9℃加热回流173.3min,最佳工艺所得提取率1.127%,响应曲面法最佳工艺提取率略高于正交试验法,且其工艺条件均较优于正交试验所得工艺,可为后期研发树莓叶芦丁兽用中药制剂提供理论参考。     

高效液相色谱法同时测定鱼肉中四种喹诺酮类药物残留

建立了同时测定鱼肉中氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星4种喹诺酮类药物残留量的高效液相色谱方法（HPLC）,并对样品提取条件和色谱条件进行了优化分析,确定使用四丁基溴化铵溶液提取、固相萃取净化、高效液相色谱-荧光检测器检测、外标法定量的分析方法。本方法对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星标准曲线的线性回9-5系数均在0．999以上,线性范围为0．002～0．5μg／mL,定量限为4μg／kg。在草鱼、鳙鱼、大黄鱼中进行4种喹诺酮类药物加标回收率的验证实验,回收率在68．5％～106．6％之间,相对标准偏差为0．80％～9．16％,说明本方法简单、灵敏,结果可靠。     

Detection of Doxycycline in Soil Using Solid Phase Extraction and High Performance Liquid Chromatography-Ultraviolet

In order to investigate the pollution status of DOX in soil and reduce the detection cost,a detection method of DOX in three soils was established by solid phase extraction and high performance liquid chromatography (HPLC-UV) in this study.The mixture of acetonitrile and Na₂EDTA-Mcllvaine (1:1,V/V) was used as extraction reagent for soil samples.HLB solid phase extraction column was used for enrichment and purification.Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm×5 μm) column was used for separation.0.01 mol/L oxalic acid (A),acetonitrile (B) and methanol (C) were used as mobile phase system for HPLC detection at 355 nm.The limit of detection (LOD) was determined by 3 times S/N and the limit of quantitation (LOQ) was determined by 10 times S/N.The results showed that DOX peaked in 10 min.In the range of 0.1-10 μg/mL,the linear relationship between the peak area of DOX and the concentration was good.The regression equation was y=22 747x+3.3256,and the correlation coefficient was 0.9999.The LOD and LOQ of DOX in this method were 0.05 and 0.1 mg/kg,respectively.When the added concentration of DOX was 0.1 μg/g in soil,the recoveries of DOX in loam,sandy loam and sandy were 58.96%,75.84% and 83.06%,respectively,and the coefficient of variation(CV) was 1.00%-9.54%.The recoveries of DOX in loam,sandy loam and sandy were 63.89%,70.48% and 81.07%,respectively,and the CV 2.40%-8.83% when added 0.2 μg/g.The recoveries of DOX in loam,sandy loam and sandy soil was 59.02%,76.16% and 81.29% respectively,and the CV was 1.52%-5.89% when added 0.4 μg/g.This method was efficient,stable and specific.It could be used for the detection and quantification of DOX in different types of soil,which was helpful for the establishment of the detection method of DOX in the environment.     

固相萃取-高效液相色谱-紫外检测土壤中多西环素

为了了解多西环素（DOX）在土壤中的污染现状,降低检测成本,本研究建立了固相萃取-高效液相色谱-紫外（HPLC-UV）检测3种土壤中DOX的分析方法。土壤样品通过采用乙腈和Na₂EDTA-Mcllvaine（1：1,V/V,pH 4.88）的混合溶液作为提取试剂,HLB固相萃取小柱进行富集净化,Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm×5 μm）色谱柱分离,以0.01 mol/L草酸（A）、乙腈（B）和甲醇（C）为流动相系统,在355 nm波长下进行高效液相色谱检测时提取效果最佳。以3倍信噪比确定方法检测限,以10倍信噪比确定方法定量限。结果表明,DOX在10 min出峰,在0.1~10 μg/mL范围内,DOX的峰面积与浓度线性关系良好,回归方程为y=22 747x+3.3256,相关系数是0.9999。本方法DOX的检测限为0.05 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg。当土壤添加浓度为0.1 μg/g时,DOX在壤土、砂壤土及砂土中的回收率分别为58.96%、75.84%和83.06%,变异系数为1.00%~9.54%;当土壤添加浓度为0.2 μg/g时,DOX在壤土、砂壤土及砂土中的回收率分别为63.89%、70.48%和81.07%,变异系数为2.40%~8.83%;当土壤添加浓度为0.4 μg/g时,DOX在壤土、砂壤土及砂土中的回收率分别为59.02%、76.16%和81.29%,变异系数为1.52%~5.89%。本检测方法高效、稳定、特异性好,可以用于不同类型土壤中DOX的检测与定量,有助于环境中DOX检测方法的建立。     

氟苯尼考PEG6000固体分散体的无溶剂熔融法制备与分析

采用无溶剂熔融法,对难溶性药物氟苯尼考的水溶性粉进行了研究。以聚乙二醇6000（PEG6000）为载体,制备氟苯尼考（florfenicol,FF）固体分散体,用X-射线衍射法、红外光谱法、电子显微镜扫描法和溶出速率法对固体分散体进行了表征,比较氟苯尼考原粉、氟苯尼考PEG6000固体分散体、氟苯尼考-PEG6000物理混合物的溶出速率,并用高效液相法测定固体分散体的溶解度。结果显示,氟苯尼考原粉、固体分散体和混合物的X-射线衍射图谱、红外光谱、电镜结果和溶出速率存在明显差异,氟苯尼考原粉是晶体态的片层结构,固体分散体则为无定形态,固体分散体的溶出速率高于氟苯尼考原粉和物理混合物,固体分散体的溶解度达到3．441mg／mL。无溶剂熔融法制备氟苯尼考PEG6000固体分散体可以提高氟苯尼考溶解度,且方法简单,易于推广。     

高效液相色谱法测定鱼粉中7种生物胺含量

试验以0.4 mol/L高氯酸溶液为样品提取溶剂,以丹磺酰氯为衍生剂,以乙腈和0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相,采用梯度洗脱,于波长254 nm处紫外检测,同时建立检测鱼粉中7种生物胺的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）。结果表明,在45 min内各种生物胺得到很好分离,经方法学验证线性关系良好,回收率在85%~105%之间,精密度相对标准偏差（RSD）均小于4%。所建立方法灵敏度高,重现性好,是测定鱼粉中生物胺含量的有效方法。     

高效液相色谱法测定草地早熟禾4种内源激素的方法

建立了高效液相色谱法测定草地早熟禾中玉米素（ZT）、吲哚乙酸（IAA）、脱落酸（ABA）和赤霉素（GA₃）的方法。样品用80%甲醇水溶液冷浸提取。色谱柱为Extend-C₈（4.6×150 mm,5 μm）色谱柱,流速为1 mL·min^-1,进样量均为20 μL。前3种激素的流动相为甲醇和0.6%冰乙酸梯度洗脱;检测波长为254 nm。GA₃流动相为乙腈：0.6%冰乙酸=60：40等度洗脱;检测波长为208 nm。4种激素在一定检测范围内具有良好的线性关系,相关系数均达0.99以上;平均回收率为83.78%～99.09%;相对标准偏差均小于5%。结果表明：该方法灵敏度、精密度和准确度好,可以满足草地早熟禾ZT,IAA,ABA和GA₃ 4种激素的检测。