利用PCR技术检测草莓镶脉病毒

 采用特异引物的PCR 扩增方法, 对30 个草莓品种进行了草莓镶脉病毒的检测, 同时用指示植物小叶嫁接法对被检植株进行了病毒检测, 两种方法结果一致。回收、克隆PCR 扩增出的特异DNA 片段,获得了携有草莓镶脉病毒CP 基因片段的载体。测序结果表明, 得到的特异DNA 片段同美国草莓镶脉病毒的株系ATCC 45058 CP 基因片段相比, 同源性为90. 94 %。     

利用NASBA技术检测草莓斑驳病毒

依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence based amplification,NASBA)技术是以cDNA为中介体在等温条件下直接扩增单链RNA特异序列的核酸扩增技术,研究探索利用NASBA技术检测草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)。在对14个SMoV分离物序列分析的基础上,设计和筛选出适于SMoV检测的NASBA引物。NASBA检测SMoV的适宜反应温度为40℃。在9份草莓样品上检测SMoV的结果显示,NASBA检测结果与RT-PCR的检测结果一致,这表明初步建立了利用NASBA技术检测SMoV的技术体系。这是利用NASBA检测SMoV的首次报道。     

草莓病毒病研究进展

综述了草莓皱缩病毒(SCV)、草莓斑驳病毒(SMV)、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓轻型黄边伴随病毒(SMYEaV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)和草莓潜隐环斑病毒(SLRSV)等6种主要草莓病毒的分类地位、地理分布、传播途径、理化及分子生物学特性,介绍了23种草莓病毒病检测方法、控制手段。应用指示植物小叶嫁接法检测草莓病毒病仍是特异、灵敏的标准方法,但更快捷、准确、灵敏的血清学检测(ELISA)和分子生物学检测(PCR)近年来取得了很大进展。目前,草莓病毒病的控制方法主要有培育无病毒苗木、选育抗蚜虫、抗病毒品种和应用转基因技术获得抗病毒植株。     

草莓脱病毒及无病毒苗繁育

本文阐述了草莓病毒病的危害,介绍了几种脱除草莓病毒的方法及效果,包括热处理、茎尖培养、热处理结合茎尖培养、花药培养,并提出了无病毒苗繁育技术和无病毒苗保存圃的建设要求等。     

草莓无病毒栽培增产效果显著

草莓无病毒栽培增产效果显著杨振英，薛光荣，李玉华（中国农科院果树研究所·辽宁兴城·１２５１００）草莓属小桨果，其鲜果柔嫩多汁，成熟上市早，色泽鲜艳，酸甜适口，营养丰富，成为水果淡季之佳品，深受广大消费者喜爱。我国草莓近年来发展很快，种植面积迅速扩大。...     

草莓热处理脱病毒的研究

试验研究了草莓盆栽苗及茎尖组培苗热处理的脱毒效果,并对盆栽苗热处理致死原因作了初步探索。结果表明,影响草莓盆栽苗热处理寿命的一个重要因素是根际温度。采用根系保护变温法(39℃/18℃昼/夜),由于根际温度变低(29℃/14℃/昼/夜),“绿色种子”品种苗寿命达30—90天。经90天热处理后,脱毒率达66％。热处理期间,分期取母株上原有的匍匐茎进行茎尖培养(外植体为1.0毫米),其组培苗脱毒效果(y)与热处理天数(x)呈极显著的正相关(y=24.45+1.33x,r=0.9388匍匐茎最长寿命达30天,相应的茎尘组培苗脱毒率为88.9％。采用茎尖组培苗进行热处理脱毒,“女峰”39℃/18℃变温30天结合38℃恒温30天;“明晶”,“女峰”38℃恒温46天的脱毒率均达到100％;“80—9—4”,“女峰”39℃/18℃变温60天,脱毒率分别为82％和88％。     

PCR检测草莓镶脉病毒的稳定性研究

利用改进的CTAB法提取了优质的草莓总DNA,可以稳定地进行草莓植株中SVBV的PCR检测。对PCR检测草莓植株中SVBV的反应体系进行了优化,结果表明,Promega公司的Taq酶与TaKaRa公司的PCR反应缓冲液配合使用效果较好,适宜引物浓度为0.5μmol/L,退火温度为53℃。20μLPCR反应液中包含0.001μL总DNA时能扩增出SVBV特异谱带,相当于能够从不足1μg的草莓新鲜叶片中检测出SVBV。基于对SVBV中国分离物外壳蛋白基因的序列分析比较,设计并筛选了检测SVBV的理想引物,提高了利用PCR检测草莓植株中SVBV方法的稳定性。     

草莓高产的基础—草莓脱病毒苗的应用

草莓是营养丰富的保健水果,具有栽培容易、当年结果、产量高、经济效益好等优点,各地发展很快。但是草莓在生产上容易感染多种病毒病,感染了病毒病的草莓果子一年比一年小,畸形,品质差,叶子皱缩,生长缓慢,一般减产30％～80％,并逐年加重。对病毒病目前还没有     

RIP和TCS双价转基因草莓抗草莓镶脉病毒鉴定

用小叶嫁接法对农杆菌转化RIP和TCS双价抗病毒基因所获得的草莓品种森嘎拉和戈雷拉转基因植株接种草莓镶脉病毒,采用PCR方法检测嫁接成活后的转基因草莓苗草莓镶脉病毒。结果表明:这2个品种的转基因植株均有部分植株未扩增出草莓镶脉病毒特异条带,说明转入的外源基因具有一定的抗草莓镶脉病毒作用。     

黑龙江省草莓病毒种类及侵染程度研究

草莓是一年中最早上市的鲜果,种植范围普及地球的各条温带,用作栽培的草莓苗,都用无性繁殖,病毒的侵染和积累逐年增多并随病苗逐年扩散(据J.P Fulton 1970年著书介绍,草莓蚜传病毒是10种,线虫传播病毒是1种,嫁接传染或传染途径不明的是5种,共计16种)。根据各国的资料报导,在草莓病毒病害中,危害性大,分布广,经济     

草莓镶脉病毒的PCR检测及特异片段的序列分析

用CTAB法从感病的草莓叶片中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增获得与预期片段大小一致长约600bp的扩增产物,同时优化PCR反应程序,获得单一特异条带;通过总DNA浓度梯度稀释,进行PCR扩增,结果表明能检测到2.5μg叶组织中病毒的存在。回收PCR特异扩增产物,与pMD18-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。扩增片段序列与已报道SVBVCP基因序列(序列号:Nc_001725)的核苷酸同源性为89.2%,氨基酸同源性为96.3%。该特异片段序列在GenBank中的登记号为AY862389。     

高效农业的首选经济作物—脱病毒草莓

根据目前各种经济作物的市场行情和经济效 益，我们向广大农村乡镇干部、农业科技开发集团和广大农业专业户推荐我们的高新技术成果──大果型脱毒草莓作为发展高效农业的首选经济作物，脱毒草莓项目具有科技含量高，栽培容易，增产效果显著，周期短和经济效益高的特色。根据我们多年的调查研究和脱病毒草莓示范推广，一般草莓目前由于普遍严重感染病毒病，果子变小，品质下降，畸形，叶子皱缩，生长缓慢，并逐年加重。经济效益大幅度下降，产值平均每667m2最高只能达到2000元，而脱病毒草莓的产值平均每667m2可以达到3000-4000元，尤其是大…     

草莓分生组织培养脱病毒技术及其应用

草莓是营养丰富的保健水果,果实中所含的鞣花酸具有抗癌效果,草莓具有栽培容易、当年结果、产量高、经济效益好等优点,各地发展很快.但是草莓在生产上容易感染多种病毒病,感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差,叶子皱缩,生长缓慢,一般减产30%～80%,并逐年加重.对病毒病目前还没有药剂可以防治.     

草莓无病毒苗匍匐茎繁殖技术

草莓为蔷薇科草莓属,是多年生浆果类草本植物,世界各地普遍栽培.草莓是一种营养十分丰富的水果,果实含糖量达11%左右;有机酸含量为1%～1.5%.     

杭州地区设施大棚草莓主要病虫害绿色防控技术

为减少草莓栽培生产过程中化学农药使用量,降低草莓果品农药残留,以满足消费者日益增长的果品品质安全的需求,并提高草莓病虫害防治效率,降低防治成本,采用物理防治及生物防治方法,对草莓炭疽病、斜纹夜蛾、灰霉病及红蜘蛛等病虫害绿色防控技术方面进行了初步探索,总结了杭州地区发生范围广、防治难度大的病虫害绿色防控技术措施,供广大草莓种植户参考。     

草莓病毒1山东分离物全基因组分析

草莓病毒1(strawberry virus 1,StrV-1)属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)细胞质弹状病毒属(Cytorhabdovirus),可侵染草莓。利用高通量测序(high-throughput sequencing,HTS)结合RT-PCR和RACE技术从采自山东省烟台市乳山市草莓种植基地的草莓品种‘全明星’上获得了StrV-1山东分离物(StrV-1-CN)的基因组全长(GenBank登录号:MW795715)。该分离物基因组全长为14 051 nt,3’和5’非编码区序列分别为181和767nt,其负义链含有9个开放阅读框(open reading frame,ORF),从3’到5’端分别编码N、P’、P、P3、M、G、P6、P7和L等9个蛋白。序列分析表明,StrV-1-CN与已报道的StrV-1分离物基因组全长核苷酸序列一致性为77%～88%。系统发育分析结果表明,StrV-1-CN与捷克分离物B和1/2017聚在一个分支,亲缘性最近。     

草莓炭疽病研究进展

从草莓炭疽病的分类、病原菌生物学特性、病害症状、发生规律及防控方法等方面全面阐述了国内外草莓炭疽病的
研究进展，从农业、化学、生物防治、遗传等方面介绍了目前草莓炭疽病的主要防控方法，并对今后的研究方向进行了展望。     

草莓病毒与类菌质体的鉴定方法

草莓病毒与类菌质体的鉴定方法王挥应，陈雯有多种病毒和类菌质体可以侵染草莓．目前已报道有２９种，其中，有少数病毒侵染草莓后引起植株枯死，大多数造成减产，而植株不表现特殊的症状。草莓是无性繁殖栽培，除通过症状鉴定外，草莓病毒的特性测定技术是必要的．草莓病...