金莲花愈伤组织诱导与分化

以金莲花无菌种子苗为试材,采用组织培养的方法,研究了外植体种类、基本培养基和外源激素等对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响,以期建立其快速繁殖体系。结果表明:金莲花无菌种子苗的子叶为最佳外植体;MS是诱导愈伤组织的最佳基本培养基;附加6-BA和2,4-D的浓度分别为2.0 mg·L^-1和1.0 mg·L^-1时,愈伤组织的生长量最大,达到72.00%,长势最好;30 g·L^-1芽麦糖作为碳源优于蔗糖;培养基添加75 mg·L^-1的活性炭可有效的抑制褐化现象;金莲花愈伤组织分化的最佳附加植物生长调节剂为NAA 0.5 mg·L^-1和KT 1.0 mg·L^-1。     

蒙古黄芪植株再生及增殖体系建立

以蒙古黄芪种子繁育而来的无菌苗获得的外植体(根、叶片、胚轴)为试材,通过设定不同浓度的生长调控激素6-BA、2,4-D、NAA,研究不同外植体在不同浓度激素的培养条件下对其愈伤组织诱导率、试管苗增殖及生根情况的影响,以期为蒙古黄芪不同组织外植体的愈伤组织诱导、植株分化及增殖培养条件提供参考依据。结果表明：以根、胚轴、叶片为外植体材料均可诱导愈伤组织产生,其中以胚轴为外植体为最优选择,愈伤组织诱导率最高达97.92%,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0 mg·L^-1+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖3.0%;试管苗增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+KT 0.5 mg·L^-1+蔗糖3.0%,再生植株平均分化率最高为92.67%;生根培养时,最适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+白砂糖3.0%。该试验建立了蒙古黄芪植株再生及增殖体系,在黄芪生产实践中具有重要推广价值。     

大百合子房的离体培养

以大百合的子房为外植体, 研究了小鳞茎诱导及植株再生的方法。结果表明: BA和KT是影响大百合子房分化途径的关键因素, 其浓度分别为0.1～1.0 mg/L、2.0～4.0 mg/L和高于4.0 mg/L 时,外植体分别分化为愈伤组织、芽和叶。外植体分化的基本培养基以N6、B5为佳。愈伤组织诱导小鳞茎的最佳培养基为MS + 0.1～0.5 mg/L NAA + 2.5 mg/L BA + 2.5 mg/L KT + 10%蔗糖+ 0.7%琼脂。在1/2MS+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂+ 1%活性炭的生根培养基上, 生根率为100%。炼苗一周后移栽, 长势良好。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。     

海南三七的组织培养和快速繁殖

以海南三七的芽和假茎基部为试材,采用组织培养的方法,研究了不同激素浓度的培养基对芽增殖以及愈伤组织的诱导、增殖和分化的影响,以期为直接和间接植株组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：在“以芽繁芽”的直接再生体系中,芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1。在以愈伤组织诱导与植株再生的间接再生体系中,假茎基部作为外植体接种在MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+2,4-D 1.0 mg·L^-1的愈伤诱导培养基上愈伤诱导率最高,40 d后可达78.43%;愈伤增殖最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mg·L^-1,愈伤分化的最佳培养基为MS+6-BA 4.0 mg·L^-1+NAA 0.6 mg·L^-1,分化率可以达到66.67%;将组培苗移栽至基质中,成活率90%以上。海南三七直接和间接快繁体系的建立,为其工厂化生产、遗传育种及特定药用成...     

‘凤丹’牡丹幼胚愈伤组织诱导的优化和再生体系的建立

以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容易获得高质量的愈伤组织,且褐化率较低;MS基本培养基添加0.162μmol·L^-1 H₂O₂可提高幼胚愈伤组织诱导率,但会增加褐化率,而在WPM基本培养基中添加不同浓度的H₂O₂,对愈伤诱导率和褐化率的影响不大;WPM基本培养基比MS更适于‘凤丹’牡丹幼胚再生;WPM+2.5 mg·L^-1 2,4-D+0.1 mg·L^-1 6-BA是诱导愈伤的最佳植物生长调节剂组合,诱导率可达93.33%;不定芽和不定根诱导的最佳组合分别为WPM+30 g·L^-1蔗糖+3 g·L^-1植物凝胶+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1     

君子兰花器官离体培养的初步研究

以君子兰品种‘油匠’的花瓣、花丝、胚珠等花器官为外植体进行离体培养,结果表明：采用0.1%升汞消毒10 min,花器官外植体污染率较低,仅为9.9%;不同花器官外植体愈伤组织诱导与分化能力不同,花瓣的愈伤组织诱导率和分化率最高,分别达到15.6%和57.1%;花瓣外植体诱导愈伤组织和分化成苗的能力与花蕾大小、植物生长调节剂及蔗糖浓度等因素有关,最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg·L^-1+BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖3.0%,适宜的花蕾长度为0.6~1.0 cm。蔗糖浓度为3%时,花器官外植体愈伤组织诱导率与分化成苗率较高。     

火百合子房薄层培养器官发生的细胞组织学研究

 以火百合(Lilium ‘Star Gazer’) 子房薄层组织为外植体, 接种在附加BA 2.0 mg·L ^-1和NAA 0.2 mg·L ^-1的MS培养基上, 诱导出愈伤组织及器官。经细胞组织学观察表明: 细胞启动及愈伤组织产生于外植体近轴面和侧面的切口边缘及内方, 继而形成瘤状、棒状及胚珠状的突起, 之后从这些愈伤组织分化形成器官。火百合子房薄层培养中器官发生有3种方式: ①在愈伤组织表面形成芽; ②在愈伤组织内部或近表面形成根; ③在同一块愈伤组织表面形成芽, 内部形成根, 再通过维管系统连成1个完整的植株原始体。     

秦岭石蝴蝶叶片离体组织培养技术

以秦岭石蝴蝶（Petrocosmea qinlingensis）幼嫩叶片为试材,采用离体组织培养方法,研究了外植体消毒、初代培养、愈伤组织继代分化、不定芽增殖、生根炼苗对秦岭石蝴蝶离体再生的影响,以期为建立秦岭石蝴蝶组织培养快繁体系提供参考依据。结果表明：0.1%氯化汞处理2 min+无菌水洗涤7～8次为最适灭菌方法;最适愈伤组织诱导与继代培养基为MS+2.0 mg·L^-1 IBA;愈伤组织分化的合适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IBA;正交实验结果表明MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 ZT为最适增殖培养基,最大增殖系数达14.06;最适生根炼苗条件为珍珠岩、蛭石和泥炭（2∶1∶1）基质+MS营养液1 mL+200 mg·L^-1 IBA 0.5 mL。     

枣77个品种果肉愈伤组织诱导培养研究

果肉愈伤组织的大量培养可为悬浮细胞体系的建立、原生质体的分离与培养、遗传转化体系的建立及次生代谢产物的研究提供物质基础。以5个发育阶段的枣果肉为试材,共计77个枣品种,选用10种培养基进行枣果肉愈伤组织诱导研究。结果表明,基因型、果实发育阶段、培养基种类及其植物生长调节剂配比对枣果肉愈伤组织诱导效果均具有显著影响。在启动培养阶段,有42个品种分别筛选出1～6种可诱导出愈伤组织的培养基;有8种培养基可以成功诱导出愈伤组织,其中G1(4.41 g·L^-1 MS+6 g·L^-1琼脂+20 g·L^-1蔗糖+0.5 mg·L^-1 6-BA+2.5 mg·L^-1 2,4-D)和G7(4.41 g·L^-1 MS+6 g·L^-1琼脂+20 g·L^-1蔗糖+0.8 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 2,4-D)培养基的适用性最高,达60%,其次为G5(4.41 g·L     

秦岭石蝴蝶叶片离体组织培养技术

以秦岭石蝴蝶（Petrocosmea qinlingensis）幼嫩叶片为试材，采用离体组织培养方法，研究了外植体消毒、初代培养、愈伤组织继代分化、不定芽增殖、生根炼苗对秦岭石蝴蝶离体再生的影响，以期为建立秦岭石蝴蝶组织培养快繁体系提供参考依据。结果表明：0.1%氯化汞处理2 min+无菌水洗涤7～8次为最适灭菌方法；最适愈伤组织诱导与继代培养基为MS+2.0 mg·L^-1 IBA;愈伤组织分化的合适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IBA;正交实验结果表明MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 ZT为最适增殖培养基，最大增殖系数达14.06;最适生根炼苗条件为珍珠岩、蛭石和泥炭（2∶1∶1）基质+MS营养液1 mL+200 mg·L^-1 IBA 0.5 mL。     

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。     

东方百合高效转基因体系构建及EPSP基因的导入

以东方百合‘西伯利亚’无菌鳞茎超薄切片(0.5～1.0 mm)为试材，通过PIC和2,4-D不同浓度筛选愈伤诱导培养条件，采用超薄鳞片直接分化及愈伤分化2种转化方式，测试对Cef、Kan及Hgy的耐受性，分析不同干燥预处理以及MES、AS对转化效果的影响，并通过EPSP基因的导入，验证基因转化阳性率及转化效果，以期优化百合遗传转化的技术参数，建立高效遗传转化体系并进行EPSP基因的导入。结果表明：PIC对百合愈伤诱导有良好效果，MS+1 mg·L^-1 PIC+0.3 mg·L^-1 NAA为最佳愈伤诱导培养基；抗生素敏感性测试发现，培养基添加75 mg·L^-1 Kan或20 mg·L^-1 Hyg结合250 mg·L^-1 Cef适宜抗性筛选；超薄鳞片及愈伤在60 min和30 min的干燥预培养下，阳性率均显著提高；MS+10 mmol·L^-1 MES+200μmol·L^-1 AS为重悬液处理，超薄鳞片获得48.3%的高效转化率，优于愈伤...     

大蒜未受精子房离体诱导单倍体的研究

 以苍山大蒜品种‘糙蒜’为试材,通过花茎离体培养获得发育健壮的花器官。以其未受精子房为外植体进行离体培养,研究不同培养基（MS、B5、N6）及外源植物生长调节剂对单倍体诱导的影响,以建立大蒜单倍体诱导体系。结果表明,诱导未受精子房产生愈伤组织的适宜培养基为B5 + 2 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,愈伤组织及雌核发育胚总诱导率可达12.24%;诱导愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为B5 + 3 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,不定芽分化频率可达46.15%;将不定芽转移至B5 + 0.05 mg · L^-1 NAA培养基中可诱导生根,发育成完整植株。以再生植株叶片为材料,采用流式细胞仪进行倍性鉴定,所得18株再生植株中有16株为单倍体植株。     

费约果不同花器官愈伤组织培养初报

探讨费约果(Feijoa sallowiana Berg.)的有效快繁,用费约果的不同花器官为外植体,利用正交试验设计分析比较了2,4-D、NAA、KT 3种激素浓度及其组合对费约果4种外植体的愈伤组织诱导的影响.结果表明:4种外植体均能形成愈伤组织,但愈伤组织发生率的表现存在差异.子房、花瓣、花萼、雄蕊愈伤组织诱导最优培养基分别:MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L;MS+2,4-D 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg+KT 1.0 mg/L;MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L;MS+2,4-D 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L.     

白姜花胚性愈伤组织的诱导与植株再生体系的建立

将白姜花（Hedychium coronarium）未成熟花丝接种在MS + 4 mg ? L^-1 2,4-D + 4 mg ? L^-1 NAA + 1 mg ? L^-1 6-BA的培养基上,经过180 d的培养,诱导出3种愈伤组织：Ⅰ,浅黄色松散易碎;Ⅱ,白色疏松半透明水渍状;Ⅲ,黄色致密颗粒状。对愈伤组织继代培养基中的2,4-D、NAA和6-BA浓度进行优化,结果表明培养基中含有1 mg ? L^-1 2,4-D、0.25 mg ? L^-1 NAA、0.25 mg ? L^-1 6-BA时可获得胚性状态良好的愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + 0.25 mg ? L^-1 NAA + 0.5 mg ? L^-1 TDZ + 维生素B₅ + 100 mg ? L^-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L^-1脯氨酸 + 100 mg ? L^-1麦芽提取物 + 45 g ? L^-1蔗糖的体胚诱导培养基中培养20 d后,转移到MS基本培养基上培养30 d,1 g胚性愈伤组织可获得50 ~ 60个体胚。成熟体胚在MS + 0.2 mg ? L^-1 IAA + 0. 5 mg ? L^-1 6-BA的萌发培养基上培养20 d时,体胚萌发率为85%。萌发的体胚转移到1/2 MS + 1 g ? L^-1活性炭的成苗培养基中可发育成正常植株,植株室外栽培成活率达90%。对100株再生植株的染色体数进行分析,发现3株三倍体（2n = 3x = 51）、6株四倍体（2n = 4x = 68）和2株六倍体（2n = 6x = 102）。     

亚洲百合“普瑞头”叶片组织培养技术研究

以亚洲百合普瑞头组培苗的叶片为外植体,对其组织培养技术进行了研究。结果表明:不同激素组合对愈伤组织的诱导和分化效果差异显著,诱导叶片愈伤组织的最适培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.2mg/L KT+0.1mg/L 2,4-D,诱导率为73.3%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+0.1mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,生根效果最好的培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

洋葱高频离体再生体系的建立

 以洋葱（Allium cepa L.）品种‘W465’的幼嫩花序和不同发育时期的幼蕾为外植体材料,研究激素配比对其愈伤组织诱导、再生和生根驯化的影响,以建立洋葱高频离体再生体系。研究结果表明,洋葱幼嫩花序为最佳外植体材料,在含有1.0 mg · L^-1 2,4-D + 1.0 mg · L^-1 6-BA 的B5 培养基上愈伤诱导率为100%,在添加1.0 mg · L^-1 TDZ 的B5 培养基上再生芽分化率为78.13%,在1/2 MS + 0.01 mg · L^-1 NAA 培养基上可诱导生根,驯化移栽成活率达到95%。     

番茄真叶愈伤组织诱导及植株再生研究

对番茄外植体诱导愈伤组织、愈伤组织分化和根的诱导条件进行研究.结果表明:适合外植体形成愈伤组织的培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适合愈伤分化的培养基为MS+BA 3.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L;适合生根的培养基为1/2MS+IAA 0.1 mg/L.