紫萁孢子的无菌培养

以紫萁孢子为外植体,研究了不同培养基对紫萁离体培养各阶段的影响。结果表明：以孢子囊为外植估接种比直接种孢子效果更理想;孢子萌发最佳培养基是1/2MS 0.3％活性炭;对原叶俸增殖效果最好的是1/2MS培养基;对孢子体诱导最佳方案是以灭菌河沙为基质的不完全培养基;激素处理对孢子体诱导有促进作用。     

紫萁孢子叶组织培养技术研究

【目的】建立紫萁(Osmunda japonica Thunb.)孢子叶组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以紫萁孢子叶穗为外植体,研究乙醇和HgCl_2处理不同时间对外植体的消毒效果;在加入0.3 mg/L NAA的1/4MS培养基中,再分别加入0.5 mg/L的2,4-D、IBA和KT,比较各处理对原叶体的诱导效果;在1/2MS基础培养基上,采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨不同质量浓度KT、GA_3、NAA和6-BA组合对原叶体增殖的影响;同时,研究光合酵素稀释300,500和700倍对紫萁孢子体诱导的影响,以及1/2MS培养基中加入0.1,0.5,1.0 mg/L IBA或NAA对紫萁组培苗生根的影响。【结果】使用1 g/L HgCl_2对紫萁孢子叶穗消毒8 min的效果较好,萌发率为61.11%;紫萁原叶体最适宜的诱导培养基为1/4MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率为88.55%;紫萁原叶体最适宜的增殖培养基为1/2MS+KT 5 mg/L+GA_3 3 mg/L+NAA 1 mg/L,增殖系数为9.6;稀释500倍的光合酵素对紫萁孢子体苗的转化及生长有促进作用,孢子体转化率为57.23%,孢子体高度为2.33 cm;1/2MS培养基中加入0.5 mg/L IBA,紫萁组培苗生根率与长势俱佳,生根率可达93.33%。【结论】初步建立了紫萁孢子适宜的组织培养体系,在相应条件下组培苗长势良好。     

芒萁组织培养和快繁技术研究

以孢子为外植体对芒萁进行组织培养。在基本培养基中添加不同生长调节物质对孢子萌发和孢子体进行诱导。结果表明,孢子体萌发阶段最适培养基组合是1/2MS培养基+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,pH值5.8~6.0;原叶体增殖阶段,最佳培养基组合为1/2MS+NAA 1.0 mg/L+6·BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L;孢子体的诱导最适培养基组合是1/2MS培养基+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L。     

鸟巢蕨组培快繁技术研究

以鸟巢蕨(Neottopteris nidus)孢子为原材料进行组培快繁,考察了孢子处理方式、基本培养基、激素及孢子体诱导方式等条件对培养效果的影响.结果表明,把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下,破碎取出孢子后接种到1/2MS培养基上,孢子萌发较快,萌发率高.萌发后的原叶体接种到不添加激素的MS培养基上能得到较大的增殖系数.原叶体在试管内诱导孢子体难度较大,可采用1g/L的KH2PO4溶液作诱导剂在试管外诱导,有利于原叶体向孢子体的转化.     

光亮瘤蕨(Phynatodes cuspidatus)离体培养微繁殖技术研究

为保护光亮瘤蕨野生资源,并进行合理的开发和利用,以光亮瘤蕨的孢子为外植体,建立快繁体系。结果表明:光亮瘤蕨孢子最佳灭菌方式为HgCl_2处理3min,最适孢子萌发培养基为1/2MS+1%蔗糖。增殖期间,最适增殖培养基为1/2MS+1%蔗糖。以1/2MS+2%蔗糖为培养基,采用转接继代法诱导孢子为最佳孢子体诱导方法。待幼孢子体长至2~3cm时即可出瓶炼苗。     

鱼尾星蕨组织培养与快速繁殖的研究

利用鱼尾星蕨的孢子为外植体,研究了不同培养基、不同激素以及浓度对其孢子萌发、原叶体增殖、孢子体诱导和增殖的影响。结果表明,鱼尾星蕨的成熟孢子在1/2MS培养基上萌发速度最快,萌发率最高;鱼尾星蕨的原叶体在1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上增殖速度较快,但增殖过程中不能形成孢子体;在1/2MS+AgNO31.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基上成功诱导出孢子体;孢子体可再进行分株扩增,从而获得大量的孢子无菌苗。     

紫萁试管苗生产技术研究

以紫萁孢子叶小段为接种材料,研究了影响孢子叶小段萌发的培养基组成及影响紫萁原叶体增殖的各项因素、孢子体苗分化的条件和孢子体试管苗的炼苗技术,结果表明:在温度25℃、光照12h·d-1、光照强度2000lx、培养基pH5.8等条件下,较适合原叶体增殖的培养基是1/2MS KT5.0mg·L-1 IBA1.0mg·L-1 KH2PO4200mg·L-1 活性炭0.5%。其分化出的孢子体苗的原叶体具有质地疏松、片状体大且肉质厚等性状。在温度20～28℃、湿度90%～100%的荫棚或林下,选择基质椰茸进行炼苗,根系粗壮3条以上、叶3片、叶长3cm以上的幼苗成活率可高达97.6%。     

野雉尾金粉蕨微繁殖技术

以野雉尾金粉蕨的孢子为外植体,建立快繁体系。结果表明,野雉尾金粉蕨孢子HgCl_2最佳处理时间为3 min,孢子最适萌发培养基为1/2MS+2%蔗糖。增殖期间,降低糖浓度更有利于配子体的快速增殖,最适增殖培养基为1/2MS+1%蔗糖。1/2MS+2%蔗糖为最适孢子体诱导培养基,待幼孢子体长至3~5 cm时,即可出瓶炼苗,炼苗最优基质为草炭+蛭石(1∶1)。     

不同因素对石韦孢子萌发及生长的影响

以石韦孢子为外植体,研究不同蔗糖浓度、生长调节剂和培养基等对石韦孢子萌发生长的影响.结果表明,1%-2%蔗糖有利于孢子的萌发生长,萌发率达80%以上;无机盐浓度较低的1/8MS和Knop's培养基较利于孢子的萌发,萌发时间仅为6d,萌发率分别为83.2%、84.1%;在培养基中加入1.0mg/L NAA、0.5mg/L 6-BA,可以缩短孢子萌发时间,并获得最高的萌发率.此外,1/2MS培养基比较适合原叶体的增殖;以河沙为基质的不完全培养基比较适合孢子体诱导,诱导率达90%以上.     

铁线蕨组培快繁技术研究

以孢子作为外植体进行铁线蕨组培技术研究,结果表明：把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下,进行破碎取出孢子后接种到1／2MS培养基上,孢子萌发较快,萌发后的叶原体接种到MS培养基上能得到较大的扩繁速率,叶原体诱导孢子体在试管内诱导难度较大,可采用0．1％KH2P04诱导剂在试管外诱导,更适合叶原体向孢予体的转化。