应用ISSR分子标记对茶树种质资源进行分子鉴定

ISSR标记是一种基于微卫星序列发展起来的十分有效的分子标记,已在植物种质鉴定和遗传多样性等方面广泛应用。本文采用ISSR分子标记法对分布于重庆、四川的14份茶树种质资源进行了分子鉴定,通过构建指纹图谱、特殊标记的存在或缺失和标记组合来可将它们区别开。结果显示ISSR分子标记在鉴定茶树种质资源方面非常快捷和有效。     

24份杜鹃属植物的ISSR分子鉴定

采用ISSR分子标记对24份杜鹃属植物进行亲缘关系分析, 7个ISSR引物共扩增出92条谱带,其中89条为多态性谱带,多态性比率达96.7%。利用NTSYS-pc2.10e软件计算24份杜鹃属植物间的遗传相似系数,变化范围在0.456 5~0.782 6之间,平均相似系数为0.613 4。通过UPGMA聚类分析发现,24份杜鹃属植物被划分为3大类,聚类结果与地理分布存在一定的相关性,其中第2类与形态学分类基本吻合,表明24份杜鹃属植物的ISSR扩增图谱差异较大,易于区分,可用于杜鹃属植物的鉴定。     

应用ISSR分子标记研究茶树种质资源遗传多样性

采用ISSR分子标记技术对川渝茶树资源进行了遗传多态性分析。结果表明川渝茶树资源遗传多态性丰富,12条ISSR引物共产生100条扩增带,其中多态性条带90条(占90.0%)。ISSR标记遗传相似系数(GS)变异范围为0.41~0.87。通过类平均聚类(UPGMA)法,可将14份材料分为2个大类,第1大类主要为保持了较多原始性状的乔木大叶型,第2大类又可分成4个亚类群,主要为小乔木或灌木中小叶型,多为川渝各地栽培的地方群体品种。由此认为:ISSR标记可以有效地评价茶树种质的遗传多样性,并为其系统学研究提供分子依据。     

27份核桃种质资源亲缘关系的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对4个种的27份核桃种质进行亲缘关系分析。从120条ISSR引物中筛选出扩增条带清晰稳定、重复性好的10条引物对27份核桃种质基因组DNA进行扩增,共扩增出129条带,其中91条呈现多态性,多态性条带的比例平均为70.54%。不同核桃种质间遗传相似性系数在0.496 1～1.000 0之间。研究结果表明:27份核桃种质具有较为丰富的遗传多样性,铁核桃与核桃的亲缘关系较近(最近),与野核桃的亲缘关系最远。基于遗传相似性系数的UPGMA聚类结果表明,27份核桃种质按照种的划分被明显地分成4大组,与传统形态分类一致。该结果为核桃种质资源的进一步研究和利用提供参考。     

罗田甜柿种质资源ISSR分子标记初步鉴定

分别采集湖北省罗田县、麻城市自然分布的28、8株罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb cv.Oriental persimmon)古树优系及小涩柿、无核、宝盖、秋焰甜柿优系为研究材料,利用简单重复序列间扩增分子标记(Inter simple sequence repeat,ISSR)技术对40个甜柿优系进行初步认证及亲缘关系分析。结果表明:1从21条ISSR引物中筛选出了9条能够扩增出清晰、稳定条带的引物,9条引物共扩增出185条谱带,其中多态性条带有185条,多态性条带比率为100%;2应用NTSYS2.10e软件对扩增结果进行非加权组平均法(Unweighted pair-group method with arithmetic means,UPGMA)聚类分析,40个甜柿优系大致被分为两大类,遗传相似系数从0.39到0.92;3罗田甜柿古树基因资源丰富,每个基因型都有其独特的指纹图谱,遗传多样性高。罗田甜柿优系间的亲缘关系与地理来源有一定的相关性,麻城市与罗田县地理位置交界区域的罗田甜柿资源相对集中在A区,其他地理位置采集优系集中在B区。分析结果可为罗田甜柿种质资源开发、基因资源保存、后期品种审定及鉴别提供理论依据。     

利用ISSR标记对恩施州茶树种质资源亲缘关系鉴定的研究

为更好地收集、保存和研究茶树品种资源,从2008年开始应用ISSR分子标记技术,对恩施州茶树资源的亲缘关系和遗传多样性进行了研究。结果表明：采用CTAB法提取DNA,探索出茶树PCR扩增效果较好的反应体系及反应程序,筛选出28条左右多态性较高的ISSR引物,用类平均法进行聚类分析,得出供试品种遗传关系树状图。基于遗传相...     

利用ISSR分子标记分析44份红麻种质资源的遗传多样性

1材料与方法1．1材料征集并选取红麻材料44份,分别来自11个国家和地区,其中包括野生种及半野生种12份,栽培品种32份．品种来源及类型见表1。     

利用ISSR与SRAP分子标记分析金线莲种质资源遗传多样性

  目的  研究浙江与福建等地引种、杂交与野生的金线莲Anoectochilus roxburghii样品间遗传多样性和亲缘关系,为金线莲种质资源鉴定及优良新品种(系)选育提供科学依据。  方法  以48份新鲜金线莲叶片为材料,分别采用简单重复序列扩增多态性(ISSR)与序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记技术,各挑选11条(对)多态性好、扩增条带清晰的引物。经琼脂糖凝胶电泳成像后,统计其扩增条带数,运用NTSYS-PC 2.1和POPGENE 32软件进行非加权组平均法(UPGMA)聚类分析。  结果  ISSR分子标记技术共扩增出86条条带,其中多态性条带84条,多态位点百分率为97.67%;SRAP分子标记技术共扩增出88条条带,其中多态性条带86条,多态位点百分率为97.73%,ISSR和SRAP标记均表现出较高的多态性。不同样本间的遗传距离和遗传一致度表明:浙江省与福建省的金线莲种质混杂严重,而遗传多样性结果显示:福建省的金线莲种群遗传多样性更高。此外,基于ISSR和SRAP标记的UPGMA聚类结果显示:48份不同种源的金线莲依亲缘关系的远近可分为四大类,聚类的划分受到一定地域性的影响,但各地域的金线莲品种在这四大类中均互有混杂。  结论  金线莲在物种水平上遗传多样性较高,在各地区、各品种(系)间遗传交流频繁,ISSR与SRAP分子标记技术可以从分子水平上揭示浙江与福建等地金线莲的遗传多样性,且结合ISSR标记与SRAP标记的分析结果要优于单一的分子标记结果。图4表3参24     

甘薯种质资源遗传多样性的ISSR分析

[目的]利用ISSR分子标记分析不同类型甘薯种质的遗传多样性,为甘薯种质资源的传播途径分析、分类鉴定、有效利用及杂交亲本选择等提供参考依据.[方法]从100条ISSR引物中筛选出多态性好、扩增条带清晰且重复性好的ISSR引物,利用其对129份甘薯种质材料进行扩增,通过DPS 7.05计算不同种质间的遗传距离,并采用非加权配对算术平均法(UPGMA)进行聚类分析.[结果]以筛选获得的20条ISSR引物对129份甘薯种质材料进行扩增,共获得232条条带,其中多态性条带230条,多态性条带比例达99.14%,平均每条ISSR引物扩增出11.60条条带.基于ISSR分子标记的5份野生种平均遗传距离为0.4637,124份甘薯栽培种平均遗传距离为0.1805.野生种与地方品种、引进品种和育成品种间的平均遗传距离分别为0.4688、0.4618和0.4643;而在124份栽培种中,地方品种与引进品种间的平均遗传距离最大(0.2024),引进品种与育成品种间的平均遗传距离最小(0.1673),地方品种与育成品种间的平均遗传距离为0.1978.聚类分析结果表明,当在遗传距离为0.3200时可将野生种与栽培种完全区分开;5份野生种在遗传距离为0.3200时又被划分为4个类别;124份栽培种在遗传距离为0.2000时可划分为6个类别,其中,新种花、福菜薯18号和黄皮9号3个品种各自单独组成一个类群(第Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ类),金山57、豫薯8号和瑞薯1号组成第Ⅲ类;第Ⅳ类包含93个地方品种和育成品种;第Ⅵ类由25个地方品种和育成品种组成.[结论]不同类型和不同来源地的甘薯种质资源间存在较大遗传差异,以野生种与栽培种间的遗传差异最大,而栽培种间又以地方品种和引进品种间差异较大,即地方品种资源在我国甘薯育种亲本选择利用方面还具有很大的应用潜力.ISSR分子标记是一种适用于甘薯资源遗传多样性分析的理想分子标记.     

基于ISSR分子标记的广西香蕉种质资源遗传多样性分析

[目的]采用ISSR分子标记对13份广西收集引进和选育的香蕉种质资源进行遗传多样性分析,为广西香蕉品种改良及枯萎病抗性育种提供参考依据.[方法]从100条ISSR引物中筛选出多态性引物进行PCR扩增,利用PoPgen 1.32计算遗传多样性指数,DICE法计算遗传相似系数.利用非加权平均距离法(UPGMA)进行聚类分析.[结果]共筛选出8条扩增产物条带清晰、多态性好的ISSR引物,利用其从13份香蕉种质材料中扩增出234条条带,平均每条引物扩增出29.25条条带,其中多态性条带229条,多态性比率97.86%,平均观察等位基因数(Na)1.9786、有效等位基因数(Ne)1.4023、Shannon多样性信息指数(I)0.2603、Nei's基因多样性指数(H′)0.4135.13份香蕉种质材料的遗传相似系数为0.50~0.90,其中,巴贝多与GK1的遗传相似系数最小,为0.50,抗枯1号与抗枯5号的遗传相似系数最大,为0.90.在遗传相似系数0.59处可将13份香蕉种质资源聚成四大组,其中第Ⅱ组在相似系数0.74处被分为a和b亚组.在遗传相似系数0.90处可将13份香蕉种质材料完全区分开.[结论]广西香蕉种质资源的遗传多样性非常丰富.利用ISSR分子标记可将遗传背景及形态特征不同的香蕉种质资源进行有效分类,可用于香蕉种质资源分类、亲缘关系鉴定及辅助育种等研究.     

勒杜鹃扦插繁殖技术研究

研究了不同IBA浓度、插条成熟度、插条部位以及不同品种对勒杜鹃扦插生根效果的影响.结果表明:50、100、150 mg/L IBA均有促进勒杜鹃插条生根的效果,其中以100 mg/L IBA处理的效果最好,且木质化插条的生根效果优于半木质化插条,以枝条基部作捅条的生根效果优于枝条中部和顶部;在橙黄、水红、普通紫和双色等4个供试品种中,以普通紫勒杜鹃的插条生根率最高,达88%.     

叶子花属(南美紫茉莉)植物的品种引进现状及其景观应用研究

笔者系统论述了叶子花属(南美紫茉莉)植物的生物学特性,概括介绍了我国叶子花属植物的种质资源状况,总结了现有的3个种,2个杂交种,35个园艺品种。根据花色、叶色、枝条形态等特征划分了观赏品种,并对其在园林中的应用形式进行介绍,认为可建立植物专类园,或用于装饰花架、拱门,用于屋顶、阳台绿化等。     

三角梅在咸宁市生态适应性研究

试验以紫色三角梅为材料,研究了三角梅在咸宁市的耐热性、干旱胁迫表现、无风条件的耐寒越冬及有风条件的耐寒越冬表现等生态适应性,结果发现紫色三角梅在冬季无风条件下可以忍耐咸宁市的最低气温,低温和冷风成为咸宁市引种三角梅的最大障碍;同时发现紫色三角梅具有一定的耐旱性,在生长期重度干旱的环境下,老叶先萎蔫下垂并卷曲、幼嫩叶后萎蔫下垂,但此时补充水分可使其恢复正常.     

三角梅硬枝扦插生根的影响因子分析

为提高木质化插穗生根质量,培育三角梅健壮扦插种苗,摸索培育优良种苗的扦插方法,比较不同生根剂、生根剂不同浓度、不同扦插基质对插穗生根率、生根数量、生根鲜重、移栽成活率的影响,并监测扦插池空气温湿度。结果表明,三角梅‘绿叶大红’的木质化枝条扦插,以河沙为扦插基质、100 mg/L双吉尔生根粉(GGR-6)与750 mg/L吲哚丁酸(IBA)混合液浸泡15 min,扦插池气温在25~40℃,前期湿度在97%以上时,平均生根数量可达107条,生根率可达98%,移栽成活率达96%。生根率与后期种苗移栽成活率不相关,生根数量、生根鲜重与种苗移栽成活率极显著相关,可作为扦插生根效果的衡量指标。     

三角梅在咸宁市的生活习性研究

试验以紫花三角梅为材料,通过对紫花三角梅在成宁市的休眠习性、营养生长习性、生殖生长习性、扦插繁殖特点等进行研究后发现,紫花三角梅在成宁市的发芽时间是3月下旬～4月上旬,发芽期随2月份的平均气温升高而提早;花期在5～6月和8～12月;进入休眠的时期因表现型不同而异,有的在10月、有的在12月;休眠期如有持续的低温会使叶片冻伤和脱落.     

叶子花组织培养育苗技术研究

以叶子花单芽茎段为繁殖村料进行组织培养育苗研究,结果表明:适宜芽诱导和增殖的培养基为MS BA1～2(mg/L) NAA0.4～1(mg/L),不同品种附加BA和NAA的浓度不同;适宜生根的培养基为1:2MS NAA0.3(mg/L)或MS BAO.5(mg/L) IBA0.5(mg/L)。     

三角梅组织培养外植体再生体系建立研究

以三角梅 (Bougainvilleaglabra)的带芽茎段、茎尖、叶片等营养器官为外植体进行组织培养 ,着重研究三角梅的最佳外植体类型 ,最佳培养基配方及植株再生的可能途径。研究表明 :①不同类型的外植体再生能力大小为 :茎段 >茎尖 >叶片 ;②初代培养最佳的诱导培养基为MS +6 -BA 1 0mg/L +IBA 0 5mg/L ;③继代培养丛芽增殖最佳培养基为MS +BA 2 0mg/L +IBA 0 1mg/L。     

三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。     

九节茶ISSR反应体系的建立及优化

以九节茶叶片提取的基因组DNA为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,诸如dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量、退火温度以及循环次数等指标进行筛选和优化.结果表明:20μL ISSR反应体系含10×PCR Buffer、0.4 mmol.L-1dNTPs、2 UTaqDNA聚合酶、0.6μmol.μL-1引物、5 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30 s,44.8℃退火30 s,72℃延伸1 min,35个循环,最后于72℃延伸7 min,置4℃保存.应用该ISSR体系对10份九节茶种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性.     

咸宁地区三角梅当年扦插育花技术

介绍咸宁地区三角梅当年扦插育苗技术,包括品种选择、温室越冬保叶、春季带叶扦插、温室管理、室外管理等方面内容,以供种植者参考。