壳聚糖对不结球白菜叶片氮代谢关键酶的调节作用

研究了壳聚糖（chitosan）对氮代谢关键酶[谷氨酰胺合成酶（GS）、谷氨酸合酶（GOGAT）和谷氨酸脱氢酶（GDH）]和可溶性蛋白质含量的影响。结果表明:0.8mg·mL-1壳聚糖溶液喷洒不结球白菜叶片后,GS对NH4+的KM值增大,而GDH对NH4+的KM值变小;在酶活性检测中,GS比活性受到了抑制,而GDH比活性则被提高,GOGAT比活性则表现为先上升后下降;削弱了不结球白菜叶片中的氨同化过程的GS-GOGAT途径,加强了GDH途径;同时,提高了叶片可溶性蛋白含量。     

茶氨酸酶促生物合成研究进展

茶氨酸系茶树（Camellia sinensis）特征性成分,具有放松镇静、增强记忆、保护神经、化疗调节等诸多生理活性。目前发现能催化茶氨酸生物合成的酶有7种,它们分别是茶氨酸合成酶、谷氨酰胺合成酶、γ-谷氨酰甲胺合成酶、谷氨酸合成酶、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、谷氨酰胺酶和γ-谷氨酰转肽酶。茶氨酸生物合成反应有两种代表类型：（1）谷氨酸和乙胺为底物的连接合成反应（需ATP供能）;（2）谷氨酰胺和乙胺为底物的酰基转移反应。本文对茶氨酸酶促合成途径进行了综述,以此为茶氨酸微生物合成技术的开发应用提供参考依据。     

高温对水稻灌浆期籽粒氮代谢关键酶活性及蛋白质含量的影响

 选用粳稻品种越光与籼稻品种IR72为材料,研究了高温对水稻灌浆期籽粒谷氨酰胺合成酶（GS）、谷氨酸合酶（GOGAT）、谷氨酸 草酰乙酸转氨酶（GOT）、谷氨酸 丙酮酸转氨酶（GPT）的活性及蛋白质与氨基酸含量的影响。结果表明,灌浆期高温下水稻籽粒GOGAT、GOT与GPT活性显著或极显著升高,但籽粒GS活性显著或极显著降低;籽粒蛋白质及氨基酸各组分含量极显著增加。高温下籽粒GS活性显著降低并未影响籽粒蛋白质的合成,认为籽粒GS不是限制水稻蛋白质合成的关键酶。     

茶氨酸合成酶基因的全长cDNA克隆及序列分析

采用SMART RACE技术成功克隆了安吉白茶茶氨酸合成酶基因（TS）的全长cDNA序列,并将其登录Genbank,登录号为JN226569。TS基因的cDNA全长为1503bp,开放阅读框（ORF）为1071bp,编码356个氨基酸。经生物信息学分析,TS蛋白的氨基酸残基数为356,分子量为39250.3Da,理论等电点（PI）为5.79,其氨基酸序列中可能不存在卷曲螺旋结构。TS蛋白不存在信号肽序列,不发生跨膜运动,属于亲水性的非分泌蛋白,其磷酸化位点有26个。通过亚细胞定位预测,安吉白茶TS蛋白是一种细胞质蛋白。克隆茶氨酸合成酶基因的全长cDNA序列,对于利用生物技术手段改良茶树品种,以调控茶树中茶氨酸的含量具有重要意义。     

硫肥不同用量对花生氮代谢的影响

为探讨花生在不同硫素水平下氮素代谢特点,选用606为试验材料,硫素设四个水平,测定不同生育时期主要氮代谢酶(硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)和谷氨酸脱氢酶(GDH))活性和各器官蛋白质含量.结果表明,施用硫肥显著提高花生不同生育时期叶片中NR、GS、GOGAT和GDH活性;显著增加花生营养器官中蛋白质积累量和转移量,提高籽仁中蛋白质含量.其中施硫量为40kg/hm2时,氮代谢酶活性最大,籽仁蛋白质含量最高.     

利用GS基因构建茶氨酸生物合成工程菌的研究

为了高效合成茶氨酸,本研究通过将荧光假单胞菌GS基因转接入pET32a质粒中,再将重组质粒转化到E.coli BL21中,构建了一种生物合成茶氨酸的基因工程菌。工程菌株经0.1mmol/LIPTG,28℃诱导表达,湿菌体的酶活达到41.79U/mg prot,大约是出发菌株E.coli BL21的126.64倍。工程菌催化L-谷氨酸钠和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到6.2g/L,其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力较出发菌株E.coliBL21有显著提高。     

不同水分条件下AM真菌对福鼎大白茶生长和茶叶品质的影响

为研究不同水分条件下丛枝菌根（Arbuscular mycorrhizal,AM）真菌对茶树生长和茶叶品质的影响,试验以福鼎大白茶（Fuding Dabaicha）为材料,采用温室盆栽法,分别设置正常水分（WW）和干旱胁迫（DS）两个水分条件,研究单接种AM真菌幼套近明球囊霉（Clariodeoglous etunicatum）（+AMF）与不接种（-AMF）处理对福鼎大白茶实生苗叶片数、生物量等生长指标和蔗糖、果糖、儿茶素、氨基酸等品质指标的影响。结果显示,无论水分条件如何,接种AM真菌处理均显著促进了福鼎大白茶实生苗生长,增加了叶片数量和各部分（叶片、茎、根系）生物量,并提高了茶叶品质;与不接种AM真菌（-AMF）相比,茶树叶片蔗糖、葡萄糖、果糖、儿茶素、氨基酸和茶多酚的含量分别增加了7.73%~21.92%、28.49%~53.44%、6.13%~9.59%、18.97%~23.48%、31.29%~39.11%和6.77%~26.32%。接种AM真菌处理在干旱（DS）条件下效果更为显著,干旱抑制了AM真菌对茶苗根系的侵染和茶苗生长,降低了茶叶品质。接种AM真菌能显著缓解这种抑制效应,同时促进茶叶有机物质积累。此外,接种AM真菌还显著上调了干旱胁迫（DS）下茶树叶片谷氨酰胺脱氢酶基因（CsGDH）、谷氨酰胺α-酮戊二酸氨基转移酶基因（CsGOGAT）和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因（CsHGMR）的表达。研究结果表明,接种AM真菌在不同水分条件,特别是干旱（DS）条件下,可通过显著上调相关基因的表达来促进茶树的生长,改善茶叶品质。     

水杨酸对铁观音茶树幼苗生理特性及茶氨酸代谢的影响

为研究水杨酸对茶树光合性能、抗氧化特性及茶氨酸代谢生理特性的影响,以乌龙茶品种铁观音的幼苗为试验材料,对茶树进行叶面喷施水杨酸处理,对经水杨酸处理后茶苗的茶树光合性能、抗氧化特性、茶氨酸含量以及茶氨酸合成酶基因表达的影响进行测定。研究表明,喷施外源水杨酸处理后,茶苗叶绿素、可溶性糖和蛋白质含量均有显著升高（P <0.05）;茶苗的过氧化物酶（POD）活性提高,其中,3.0 mmol/L水杨酸能显著提高POD活性（P <0.05）;丙二醛（MDA）和脯氨酸含量降低;茶苗的茶氨酸代谢对水杨酸具有浓度效应;喷施适宜浓度外源水杨酸后,可提高茶苗茶氨酸的合成,从而提高茶苗茶氨酸含量。     

茶树新品系春梢生育期观测初报

以福鼎大白茶作对照种,2011～2013年对福建省农业科学院茶叶研究所选育的25个茶树新品系连续进行3年（树龄对应为4～6年）春梢生育期调查。结果表明,0312B为特早生种质（春梢生育期比CK早10 d以上）;0314I、0318G、0318H1、0318H2、0318E、0213-1、0309C等为早生茶树种质（春梢生育期比CK早5 d以上）。     

茶氨酸合成酶基因的SNP挖掘和遗传定位

茶氨酸合成酶(Theanine synthetase,TS)基因是茶树茶氨酸代谢过程中的关键酶基因。本研究以氨基酸含量差异明显的亲本及其杂交所得F_1子代为研究材料,克隆TS基因的c DNA序列,挖掘其SNPs位点,并成功将杂合SNP位点定位在遗传连锁群上。研究结果显示,通过序列比对在亲本间检测到3个SNPs,验证得到1个杂合的位点SNP735。将此位点成功转化为dCAPS标记,该标记在子代中的基因型分离比为1∶1,利用该群体已构建的茶树遗传图谱进行遗传定位,将dCAPS标记定位在连锁群LG03上,相邻标记为TM299和TM517。联合此标记及其相邻标记与游离氨基酸总含量和茶氨酸含量进行统计分析,表明具有显著的相关性。     

黑茶不同样品氨基酸组分的分析

本文采用HPLC对近100个黑茶样品中包括茶氨酸在内的18种氨基酸含量进行检测与分析,结果表明:黑茶原料越嫩氨基酸含量越高,茶氨酸含量相应也较高;黑茶样品的类别不同与氨基酸含量没有明显相关性;年代越老的样品其氨基酸含量越低;各系列黑茶样品氨基酸组成存在差异,但差异不大。     

土壤酸度对茶叶产量及品质成分含量的影响

为了分析土壤酸度对茶叶产量及品质成分的影响,本研究选择4个不同酸度土壤的茶园(pH分别为3.29、4.74、5.32、6.38)为研究点,于2016年4月种植铁观音茶树,于2018年5月、2019年5月(春茶采摘时间)和2018年10月、2019年10月(秋茶采摘时间)采样测定茶叶鲜叶产量及鲜叶品质成分(茶多酚、茶氨酸...     

类茶氨酸合成酶基因家族在番茄中的鉴定及表达研究

茶树体内的茶氨酸合成酶(Theanine synthetase synthetase,TS)和部分谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)家族成员都具有催化乙胺和谷氨酸合成茶氨酸的活性.我们将植物中这类与茶树TS序列高度相似,且具有茶氨酸合成活性的酶,统称为类茶氨酸合成酶(Analogue th...     

保靖黄金茶品质季节变化规律初探

以保靖黄金茶1号品种为实验材料,测定分析了不同季节保靖黄金茶1号绿茶中水浸出物、茶多酚、游离氨基酸、儿茶素、咖啡碱、可溶性糖、黄酮、茶氨酸的含量。结果表明,保靖黄金茶1号绿茶中的茶多酚、游离氨基酸、茶氨酸、儿茶素等品质成分季节变化明显。春茶品质明显优于夏、秋茶,秋茶品质优于夏茶。     

GC-MS及GC测定茶叶中主要游离氨基酸的方法研究

研究了N-（特丁基二甲基硅烷）-N-甲基三氟乙酰胺（≥95%;MTBSTFA）含叔丁基二甲基氯硅烷（1%;TBDMSCl）衍生、气相色谱（GC）和气相质谱联用仪（GC-MS）测定茶叶中游离氨基酸的方法,比较了衍生温度、时间、酸度及辅助试剂等对衍生效率的影响。以正缬氨酸为内标,乙腈为辅助衍生试剂,衍生温度110℃,衍生时间30 min,可以定量检测茶叶中主要的游离氨基酸。茶氨酸产生3个衍生峰,经质谱鉴定第1个峰（按出峰时间）为环状衍生峰,第2个峰为一个N端没有衍生,第3个峰为完全衍生峰。各氨基酸在10~1 000 nmol范围内线性良好（相关系数均大于0.99）,对茶叶样品测定结果与氨基酸自动分析仪基本一致,添加回收试验表明,茶氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、天冬氨酸等的回收率为85%~108%。结果表明,试验建立的GC-MS及GC-FID方法操作简便、准确,重现性好,适用于茶叶中主要游离氨基酸的分离检测,同时GC-MS方法还可用于¹⁵N标记的氨基酸的检测,为吸收代谢实验提供研究基础。     

茶氨酸的生理功能制备方法及应用

茶氨酸是茶叶中特有的、游离的非蛋白质氨基酸,其含量与茶叶品质呈正相关。本文就国内外有关茶氨酸的生理功能、制备方法及应用等方面的研究进展进行了综述。