卵泡发育和卵母细胞成熟

本文简要叙述了卵泡发生的生理过程。着重讨论了卵泡发生期间的内分泌调节及影响卵母细胞成熟因素的研究现状。随着动物胚胎工程技术的发展，对胚胎的需求日益增多。充分利用卵母细胞的体外成熟和体外受精技术，可提供大量的优质胚胎。卵母细胞体外成熟的历史已有三十余年，并已在小鼠（１９６５）、大鼠（１９７４）、仓鼠（１９９３）、兔（１９８７）、猪（１９８６）、山羊（１９８４）、绵羊（１９７８）、牛（１９６５）、恒河     

卵泡发育和卵母细胞成熟

本文简要叙述了卵泡发生的生理过程。着重讨论了卵泡发生期间的内分泌调节及影响卵母细胞成熟因素的研究现状。     

山羊卵巢无腔卵泡卵母细胞的体外生长

山羊卵巢无腔卵泡卵母细胞在以ＤＭＥＭ为基础,添加ＨＥＰＥＳ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＦＣＳ（１０％）、ＦＳＨ（４０ｍｇ／Ｌ）、次黄嘌呤（２ｍｍｏｌ／Ｌ）、异双丁酰环腺苷酸（２ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＩＧＦ－Ｉ（５０μｇ／Ｌ）、氢化可的松（４０μｇ／Ｌ）和ＩＴＳ（５０μｇ／Ｌ）的培养液中得以存活并生长。在二维培养体系中,卵泡在体外的生长模式和体内有很大差别。最显著的特征是卵泡不像在体内那样保持完整的立体结构一直到结束。绝大部分卵泡不同程度地发生基膜溶解和破裂,颗粒细胞向四周扩展并贴壁,形成单层。由于卵泡原有三维立体结构的破坏,易于导致卵母细胞的迁移。在生长方式上以数个卵泡聚集生长对其卵母细胞的生长似乎较为有利。卵泡卵母细胞在体外培养９ｄ,其直径可达１５０μｍ以上,达到了成熟时体积,存活率为５３％。实验证明,山羊无腔卵泡卵母细胞在合适的培养体系中,能在体外存活并生长,并能发育到成熟时的大小。     

屠宰母牛卵巢卵母细胞体外受精与发育的研究

将从屠宰母牛卵巢采得的卵母细胞用含有LH或hCG的M199培养24～26小时,然后用经钙离子载体Ionophore A23187诱导获能的牛新鲜或冷冻精子进行授精处理。授精6～7小时后再用含有乳酸钠和EDTA的M199培养至48～60小时后观察受精及受精卵的发育情况。结果表明,卵子的受精率及受精卵的发育率与卵母细胞成熟用培养基、授精用精子(新鲜或冷冻)以及供卵牛的品种均有关系。将用含有hCG的M199培养成熟的卵子,以获能处理过的新鲜精子授精后,其受精率和受精卵子中单精子受精并发育为2～8细胞期胚的比率在蒙古牛为91.4％(265/200)和19.6％(52/265),在黑白花奶牛为69.7％(62/89)和4.8％(3/62)。     

牛卵泡卵母细胞体外受精和发育的研究

利用屠宰黄牛卵巢作为供试材料 ,对卵巢表面 2～8mm卵泡卵母细胞体外受精(IVF) -受精卵的体外发育 (IVD)进行了系列研究 ,采用上游法、Percoll法和本实验室沿用的直接洗涤法处理牛冻精 ,观察 3种精子处理方法处理牛冷冻精子对卵母细胞体外受精胚胎发育的影响。实验结果 ,就卵裂率指标 ,采用Percoll法处理的精子进行卵母细胞体外受精 ,和上游法及洗涤法分别比较 ,差异均不显著 (P >0 .0 5 ) ;桑囊率指标 ,只有上游法比洗涤法高 ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ,其余差异均不显著。以FERT -TALP液作为受精液采用常规培养方法 ,精卵作用 18～ 2 0h后分开 ,与精卵作用 6～ 8h后分开卵母细胞受精后的 8-细胞发育率及桑囊率变化不大 (P >0 .0 5 ) ;卵裂率指标 ,18～ 2 0h处理组高于 6～ 8h处理组 ,但两组之间差异也不显著。表明 ,在生产中采用FERT -TALP液做为受精液 ,应用上游法处理精子 ,不需要另购试剂 ,精卵孵育时间由 18～ 2 4h缩短至 6～ 8h是可行的 ,其现实意义是可以简化胚胎体外生产的程序 ,节省人力 ,降低成本     

牦牛、黄牛卵巢卵泡发育及卵母细胞体外成熟培养的比较研究

对53头成年黄牛和44头成年牦牛卵巢形态、表面卵泡数量、黄体状况以及卵母细胞体外成熟培养等进行了比对研究,探讨牦牛和黄牛卵巢的形态学差异和卵泡卵母细胞发育变化规律。结果表明,成年黄牛卵巢的体积(11.12±5.77vs.6.92±7.0)和重量(5.85±2.98vs.3.19±1.58)显著大于成年牦牛卵巢(P0.05);成年黄牛Ⅰ级卵泡数(13.04±8.12vs.7.97±3.72)、Ⅲ级卵泡数(0.42±0.52vs.0.02±0.15)、总卵泡数(14.46±8.92vs.8.98±3.87)和卵巢黄体直径(1.54±0.44vs.1.2±0.51)显著大于牦牛(P0.05);采集卵巢卵母细胞,黄牛卵母细胞数量显著多于牦牛,经体外成熟培养A级卵母细胞培养24h第一极体的排除率显著高于B级和C级卵母细胞,同一体外成熟时间和相同分级的黄牛和牦牛卵母细胞第一极体的排除率差异不显著。     

母牛卵泡发育和超数排卵的神经内分泌调控

本文综合国内外有关母牛卵泡发育、发情、排卵和超数排卵及其生殖内分泌变化的文献资料，介绍了该领域的研究动态与进展，分析了影响母牛发情排卵和超数排卵效果的因素，探讨了母牛超排效果和人工孪生率的规律。     

山羊卵泡卵母细胞体外受精及受精卵的体外发育

对山羊卵泡卵母细胞的体外成熟、体外受精及受精卵体外培养的系列研究表明,在成熟培养液中添加１５μｇ／Ｌ重组牛生长激素（ｒｂＧＨ）,与ＦＳＨ和ＬＨ配合使用,卵泡卵母细胞的成熟率（６７．９％）显著高于不含ｒｂＧＨ的培养组（５３．１％,Ｐ＜０．０５）;３８．５℃和３９．０℃的培养温度对卵泡卵母细胞体外成熟培养的影响无显著差异（Ｐ＞０．０５）;ＢＯ液上浮法对山羊冷冻精子的活精子分离效果优于Ｐｅｒｃｏｌ分层液法,并得到较高的受精率（６４．３％∶４９．０％,Ｐ＜０．０５）;颗粒细胞单层和输卵管上皮细胞单层的共同培养体系均有益于受精卵的体外发育。     

犬卵泡和卵母细胞发育相关调控激素研究进展

正在犬科动物中,人们通常选择犬作为研究对象来探讨雌性犬科动物的生殖生物学。犬卵泡、卵母细胞的发生和形成都是高度协调的生理过程,这些过程除了受传统观念上的促性腺激素和性腺类固醇激素的调节外,还受卵巢内部其他多种激素的调控。近年来,有关调控犬卵泡和卵母细胞生长发育相关激素的报道相继出现,使人们更进一步了解了犬发情周期过     

miRNA调控哺乳动物卵泡发育和卵母细胞成熟的研究进展

雌性哺乳动物的卵泡发育和卵母细胞成熟受繁殖关键基因的时空调控,miRNA作为一类小的非编码RNA,调节大部分此类基因的表达。近十几年来,研究者通过高通量测序、敲除miRNA生成过程中的关键基因以及过表达或抑制miRNA表达等方法找到了大量与哺乳动物卵泡发育和卵母细胞生长相关的miRNAs。通过研究这些miRNAs及其靶基因的互作关系,最终确定其在哺乳动物卵泡发育和卵母细胞成熟中的作用。本文综述了雌性哺乳动物主要生殖细胞及细胞外miRNAs在卵泡发育和卵母细胞成熟过程中的表达及潜在作用,以期为深入探究雌性哺乳动物繁殖调控机制提供参考。     

牛卵巢内卵泡及卵母细胞生长发育的组织学研究

随机摘取牛离体卵巢18枚,常规石蜡切片,光镜下共观察卵泡5 818个,并测得卵泡、卵母细胞直径和透明带厚度（平均值）。结果:在整个卵泡发育过程中,卵泡与卵母细胞发育是完全显著正相关（P<0.01,R=0.9906）,其中腔前期P<0.01,R=0.9917,有腔期P<0.01,R=0.9951。腔前卵泡时期,卵泡和其卵母细胞直径增长幅度大体相等,而从有腔卵泡始,卵泡生长速度远远大于其卵母细胞。透明带与卵母细胞发育呈不显著正相关（P>0.05,R=0.9521）。     

浅谈母牛的发情、卵泡发育和适时输精

在牛的人工授精技术过程中,为了提高受胎率,适时输精是决定母牛受胎的主要条件,而准确地掌握母牛的发情鉴定和卵泡发育规律则是关键。牛的冷冻精液配种在我省已普遍推广,但冷冻精液不同于鲜精或常低温保存精液;解冻的精子存活时间和生命力相对地缩短,更要求技术人员熟练掌握母牛的发情鉴定。为此需要研究了解母牛的发情周期和卵泡发育规律,特别在发情期间的生理变化,以及发情临床表现,来加深对母牛发情规律的认识,这在牛的繁殖理论和实践     

掌握母牛卵泡发育情况适时输精

母牛发情期内 ,用手触摸卵巢 ,会发现卵巢上有形状差异较大的突起 (卵泡 ) ,按卵泡发育的大小 ,可分为大型、中型、小型卵泡。下面就结合各种类型卵泡的发育情况 ,具体谈一下适时输精的问题。1　大型卵泡有硬球形和软球形之别。1 1　硬球形卵泡　实质硬 ,发育卵泡占卵巢体积 2 /3～ 3/ 4 ,泡壁厚 ,发育持续时间长 ,初产母牛可达 4 0～ 5 0ｈ ,经产牛达 38～ 4 0ｈ。多见于育成牛、营养不良的母牛和处于 2 5℃以上高温天气的母牛。输精时机 :卵泡硬、无弹性 ,不可以输精 ;卵泡变软 ,泡液充盈 ,有弹性 ,可在 8～ 15ｈ后输精 ;卵泡壁变薄 ,有紧…     

大雁卵巢及卵泡的发育情况观察

大雁属雁形目,鸭科,雁属.大雁是鸿雁、灰雁、豆雁、黑雁等的总称,为大型候鸟,国家二级保护动物,是我国重要的狩猎水禽之一.为了研究大雁的繁殖性能,对大雁卵巢及卵泡的发育情况进行了初步的观察与分析研究,以期为综合利用开发大雁提供科学依据.……     

6月龄和成年牦牛卵巢及卵泡发育状况研究

为了研究6月龄牦牛和成年牦牛卵巢及表面卵泡发育状况,试验比较了6月龄和成年牦牛卵巢长度、宽度、厚度、重量、卵泡数量以及卵母细胞体外成熟培养效果。结果表明:成年牦牛卵巢长度(2.29±0.43)cm、宽度(1.91±1.31)cm和厚度(1.60±1.90)cm均显著大于6月龄牦牛[(1.65±0.30)cm、(1.14±0.25)cm、(0.79±0.26)cm](P<0.05),成年牦牛卵巢体积(6.92±7.00)cm3和重量(3.19±1.58)g极显著大于6月龄牦牛体积(1.63±0.93)cm3和重量(0.87±0.44)g(P<0.01)。6月龄牦牛Ⅰ级卵泡数(14.47±8.74)枚和平均总卵泡数(15.17±8.87)枚极显著高于成年牦牛Ⅰ级卵泡数(7.97±3.72)枚和平均总卵泡数(8.98±3.87)枚(P<0.01),Ⅱ级卵泡数差异不显著(P>0.05),成年牦牛平均每头含(0.02±0.15)枚Ⅲ级卵泡,而6月龄牦牛无Ⅲ级卵泡。成年牦牛有黄体卵巢重量显著大于无黄体卵巢重量(P<0.05),有黄体卵巢含(0.06±0.24)枚Ⅲ级卵泡,而无黄体卵巢不含Ⅲ级卵泡。6月龄和成年牦牛A、B级卵母细胞体外培养成熟率分别为(81.39±3.53)%、(80.44±4.50)%,差异不显著(P>0.05),而6月龄牦牛卵巢的平均卵母细胞数和平均A、B级卵母细胞数均显著高于成年牦牛(P<0.05)。     

卵泡表面直径判断山羊卵母细胞的发育能力

试验探讨了山羊卵泡表面直径与实际直径的相关性及卵泡直径与卵母细胞直径和卵母细胞发育能力的关系。结果显示:(1)山羊卵巢表面直径1.5～2.5mm以上卵泡,其表面直径和实测直径相关性显著(r=0.72),可以利用表面直径对这群卵泡进行分类;(2)表面直径1.5～2.5mm以上卵泡,其卵母细胞已经达到最大直径(约130μm),透明带体积也达到最大(约7×105μm3);在此之前的有腔卵泡,卵母细胞直径和透明带体积均随着卵泡直径增加而增加;(3)不同直径卵泡其卵母细胞减数分裂能力不同:≤0.5mm直径卵泡卵母细胞未获得恢复减数分裂的能力;0.8～1.2mm直径卵泡卵母细胞可恢复减数分裂,但只能发育到M 期;1.5～2.5mm和3.0～5.0mm直径卵泡卵母细胞可恢复减数分裂并发育到M 期,24h时M 期比率分别为93%和91%。     

牛卵泡卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究

对用３种不同方法（Ａ法：１．０ｍｏｌ／Ｌ甘油平衡，从２０℃开始以１℃／ｍｉｎ的速度降至－℃，植冰，１０ｍｉｎ后以０．３℃／ｍｉｎ降至－３０℃，再以０．１℃／ｍｉｎ降至－３３℃，投入液氮；Ｂ法：１．６ｍｏｌ／Ｌ丙二醇＋０．ｌｍｏ１／Ｌ蔗糖平衡，５℃冰箱中保存１５ｍｉｎ，从Ｏ℃开始按Ａ法中的程序降温；Ｃ法：即玻璃化法）冷冻保存的牛ＧＶ期卵母细胞的发育潜力进行了研究。解冻后，Ｃ组卵母细胞形态正常率显著高于Ａ、Ｂ两组。３种方法冷冻的卵母细胞成熟培养后，平均卵丘扩展率为６０％，其中Ｃ组最高（６９．９％）。卵丘扩展的卵母细胞中，７９．３％发生ＧＶＢＤ，但大多数没有达到ＭＩ期。３组冷冻卵母细胞的体外成熟率、体外受精率分别为１４．２％、８．３％、２０．０％和１０．０％、７．１％、１２．１％，其中Ａ组中有１枚卵裂。     

山羊卵巢无腔卵泡的体外发育

在三维琼脂凝胶培养体系中 ,山羊无腔卵泡的生长模式类似于体内。在一定培养时间内能善为保持其完整的立体结构和形态。原始卵泡能在体外启动 ,并得到一定程度的生长。初级卵泡能发育为次级卵泡 ,次级卵泡发育为有腔卵泡。卵泡在体外发育过程中 ,表现出了明显的优势化。本试验首次初步揭示了山羊无腔卵泡的体外发育基本过程和规律。