家蚕蛹虫草多糖的提取及纯化工艺研究

蚕蛹虫草[Cordceps militaris(L.)Link]又称北冬虫夏草,是一种潜在的中药和具有滋补作用保健营养品.其有效活性成分虫草多糖(CMPS)被认为是非特异性免疫调节剂,可激活肌体的免疫活性细胞,虫草多糖的纯化为其功能、性质的研究提供材料,为虫草多糖的规模提取提供依据及产品的深度开发(例虫草多糖注射针剂)开辟了新路.     

真菌多糖激发子的筛选及对蛹虫草多糖激发条件的优化

选取7种药用真菌多糖作为激发子,以蛹虫草多糖含量为评价指标,筛选出对蛹虫草多糖产生有显著诱导作用的多糖激发子CM-JS,该激发子可使蛹虫草干菌丝中的多糖含量提高54.16%。进一步以蛹虫草多糖含量为响应值,用响应曲面分析法研究多糖激发子CM-JS的浓度、添加时间和激发时间等因素对多糖激发效果的影响,得出各因素的影响作用依次为多糖激发子浓度>添加时间>激发时间,CM-JS多糖激发子激发蛹虫草多糖产生的最优条件为:CM-JS的添加质量浓度70.328μg/mL,加入时间为菌种发酵第2天,激发时间3 d。在此优化条件下,加入CM-JS多糖激发子生产蛹虫草干菌丝中的多糖质量比可达342.5 mg/g。     

蛹虫草多糖提取工艺研究

为优化蛹虫草多糖的提取工艺,以蛹虫草多糖得率和相对标准偏差为指标,测试超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法蛹虫草多糖提取效果,确定最佳提取方法;再用正交试验方法检测水热回流法中4个因素(温度、次数、时间、料液比)对虫草多糖提取效率的影响,确定虫草多糖提取条件。结果表明:水热回流法虫草多糖得率6.2%,相对标准偏差RSD(%)1.39,是提取虫草多糖的最佳方法;提取温度100℃、提取时间90min,提取次数3次,料液比1∶20,为蛹虫草多糖提取的最佳工艺条件。     

人工培养蛹虫草与冬虫夏草的主要活性成分比较

蛹虫草为珍稀中药材,基于为培养出含有类似天然冬虫夏草主要活性物质的蛹虫草提供基础依据的目的,对人工培养蛹虫草及菌丝体、子实体和冬虫夏草及菌丝体中的氨基酸、多糖、虫草素等活性物质含量与组成进行了测定,结果表明:人工培养蛹虫草与冬虫夏草在氨基酸种类上完全一致,但人工培养蛹虫草中赖氨酸、酪氨酸含量显著升高,组氨酸则显著降低;二者组成的多糖基本一致,但冬虫夏草特有一个分子质量约100 kD的组分,该组分占多糖总量的1.38%,人工培养的蛹虫草的虫草素含量显著高于冬虫夏草。以上成分的细微变化是否是造成二者药理活性差异的原因还有待研究。     

多糖对小鼠免疫功能的影响

为了探讨黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖对动物免疫功能的影响,本试验分为对照组和黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖组,每组选用昆明种40只,对照组灌胃1m L生理盐水,黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖组,每只小鼠分别灌胃多糖140mg/kg体重,每隔10d取一次样,分别检测增重率、免疫器官指数和Ig G。结果表明:黄芪多糖、酵母胞壁多糖和虫草菌丝体多糖均可显著提高小鼠增重率、免疫器官指数及外周血Ig G含量(P0.05),说明3种多糖均能提高小鼠免疫力。     

三种多糖对小鼠免疫功能的影响

为探讨黄芪多糖、酵母胞壁多糖和虫草菌丝体多糖对动物免疫功能的影响,本试验分为对照组和黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖,3种多糖等量复配4个试验组。每组选用昆明种小鼠40只,对照组小鼠每只灌胃1mL生理盐水,黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖和3种多糖等量复配组小鼠每只灌胃量为140mg多糖/kg体重,每隔10d取样1次,分别检测增重率、免疫器官指数、血细胞数和外周血IgG含量。结果表明,黄芪多糖组、酵母胞壁多糖组和虫草菌丝体多糖组均可显著提高小鼠增重率、免疫器官指数、血细胞数目及外周血IgG含量(P<0.05),复合多糖组则与单多糖组相比差异显著(P<0.05)。说明3种多糖组及其混合多糖组均能提高小鼠免疫力,且最好的为混合多糖组。     

蚕蛹虫草干燥工艺的研究

蚕蛹虫草是中国特有的新资源食品之一,业已证明在抗肿瘤、提高免疫力等方面具有较好的功效,已形成产业化趋势,其干燥工艺尚未有系统性的研究报道。本研究基于本单位培育的蚕蛹虫草为研究材料,采用不同的处理温度和时间,检测蚕蛹虫草水分含量变化,有效成分虫草素和虫草多糖在处理过程中的损失,正交法处理数据。结果显示,虫草自然阴干后或含水率14%的蚕蛹虫草,在恒温干燥器中处理,在满足蚕蛹虫草样品含水率达标的前提下,即虫草产品含水率在10%以下时,70℃温度处理2 h处理条件下,有效成分虫草素含量损失最少,80℃温度处理2 h处理条件下,有效成分虫草多糖含量损失最少。本研究为蚕蛹虫草综合开发提供技术依据。     

家蚕蛹巴西虫草多糖的分离纯化及其组成的初步分析

以家蚕蛹巴西虫草(Cordyceps brasiliensis Henn.)为材料提取水溶性多糖,并采用DEAE-52和Sephadex G-100柱色谱进行了分离纯化,获得了BCPS-1和BCPS-2两种多糖。BCPS-1多糖主要由葡萄糖、山梨糖、半乳糖和甘露糖组成;BCPS-2多糖主要由葡萄糖和山梨糖组成。两种多糖均为白色粉末,不溶于氯仿、丙酮等有机溶剂及高浓度乙醇,其相对分子量分别为41000和33000。     

北冬虫夏草多糖的研究概述

北冬虫夏草是我国药用价值较高的虫草菌之一,其主要活性物质北冬虫夏草多糖近年来受到科学工作者的普遍关注并做了大量实验研究。本文主要从北冬虫夏草多糖的提取工艺、药理作用和目前存在的问题做简要概述,为进一步开发北冬虫夏草产品提供依据。     

蛹虫草多糖对四氯化碳诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用研究

蛹虫草是一种药用真菌。从人工培养的蛹虫草中提取蛹虫草多糖(CMPS),采用Ⅳ型胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养,研究蛹虫草多糖对CCl4诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用。结果表明:蛹虫草的子实体和基质都含有丰富的多糖,其中基质中的多糖含量最高,约为子实体的2～4倍;CMPS可明显降低由CCl4诱导的损伤肝细胞培养上清液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的活性水平和丙二醛(MDA)的含量水平,显著提高由CCl4诱导的损伤肝细胞培养上清液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和诱导损伤肝细胞的存活率。试验结果提示CMPS对大鼠原代培养肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。