牛血清白蛋白在锁阳RAPD分析中的作用

[目的]为了研究牛血清白蛋白(BSA)在RAPD分析技术中的作用。[方法]通过锁阳RAPD分析中添加BSA,观察其对RAPD扩增的改善情况。[结果]结果表明,在锁阳RAPD分析过程中,添加BSA可显著改善锁阳的PCR扩增效果,并降低Taq酶的用量,BSA最佳使用浓度为2μg/μl。[结论]添加BSA以改善植物RAPD分析的方法是可行的;该研究为BSA在RAPD分析技术中的应用提供依据。     

牛血清白蛋白与叶酸相互作用的荧光光谱法在蛋白质含量测定中的应用

研究了不同质量浓度蛋白质与同质量浓度叶酸相互作用的荧光光谱和产生的荧光强度变化.结果表明,随蛋白质质量浓度的增加产生的荧光强度也逐渐增加,且蛋白质质量浓度与荧光强度之间具有良好的线性关系.还研究了三聚氰氨对蛋白质质量浓度测量的影响,以及用此方法测奶粉中蛋白质含量的可行性.据此建立了有效测量蛋白质质量浓度的以荧光光谱为基础的新方法.该法最低检测限为5×10-6 mg·L-1,检测范围广,线性范围是3.77×10-2~827 mg·L-1(827 mg·L-1不是最大范围,最大值未测定),相关系数为0.998 9,加标回收率为93.71%~106.2%.     

光谱法研究丙烯酰胺与牛血清白蛋白的相互作用

本文从光谱学的角度研究了有毒物质丙烯酰胺(AA)与牛血清白蛋白(BSA)间的相互作用.实验结果表明,在pH =7.0和室温条件下,AA可通过静态猝灭的方式有效地猝灭BSA的荧光,AA的加入影响了BSA的构象.通过荧光数据计算可得到AA与BSA的结合位点数(n=0.933)及表观绑定常数(KA=5.55×103 mol·...     

土大黄苷与牛血清白蛋白结合反应机制及金属离子的介导作用

应用荧光光谱法结合紫外-可见分光光度法研究了中药分子土大黄苷(rhaponticin,RT)与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的结合反应机制,并考察了金属离子的介导作用.依据不同理论模型测定了反应体系的结合常数K、结合位点数n,并进行了分析比较,探讨了荧光猝灭机制.根据 Fōrster 非辐射能量转移机制确定了授体-受体间结合距离和能量转移效率.采用同步荧光技术考察了RT对BSA分子构象的影响.结果表明:不同理论模型计算的结合参数基本相符并显示出RT与BSA结合反应形成了稳定的静态复合物,RT对BSA分子的结构域微区构象产生了影响,导致BSA相应结构微区疏水环境改变.金属离子钴(Ⅱ),镍(Ⅱ)竞争RT与BSA的结合反应,使BSA-RT的结合距离发生改变.同时,提出了一个新变量-伸展度ED的计算公式,以此定量表征药物分子对蛋白质分子微区构象的影响.     

采用荧光光谱法研究烟酸与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法研究了烟酸(NTA)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.结果表明,NTA主要以动态猝灭的方式使BSA的内源性荧光下降.通过计算得出了在测定温度(T)为293和310 K时,NTA与BSA的结合常数(KA)分别为31.9和72.9 L·mol-1.根据热力学参数确定了NTA与BSA之间以疏水力相互作用.同步荧光光谱与紫外光谱技术分析表明,NTA对BSA的构象几乎没有影响.     

荧光光谱法研究头孢硫脒与牛血清白蛋白的相互作用

在模拟生理条件下,用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究头孢硫脒和牛血清白蛋白(BSA)结合反应的特征。研究表明:头孢硫脒与牛血清白蛋白形成复合物,从而猝灭BSA的内源性荧光,该过程为静态猝灭过程。根据Stern-Volmer方程得出了不同温度下结合位点数n和结合常数Ka;结合位点位于BSA的亚结构ⅡA中。通过计算相应的热力学参数,确定了头孢硫脒与牛血清白蛋白之间的作用力主要为氢键和范德华力。利用同步荧光光谱探讨了头孢硫脒与BSA作用前后BSA的构型变化。Hill系数nH<1,表明头孢硫脒有弱的负协同作用。此研究不仅对于揭示体内药物动力学问题和指导临床合理用药具有一定意义,而且对药物分子设计及新药开发等也具有重要指导意义。     

牛血清白蛋白在锁阳RAPD分析中的作用

由于植物DNA常含有内源多酚化合物，影响其PCR扩增。而研究表明，牛血清白蛋白（Bovine serum albumin，BSA）被应用于酶及PCR反应系统中，可以起到减少内源抑制物的干扰作用。为此，笔者研究了BSA在锁阳RAPD分析中的作用。     

三聚氰胺与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究

在模拟生理条件下,采用紫外吸收光谱法、荧光光谱法和圆二色谱法研究了三聚氰胺与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,简称BSA)之间的相互作用。紫外吸收光谱法和荧光光谱法的研究结果表明,三聚氰胺与牛血清白蛋白相互作用可在基态时形成一种新的复合物从而导致牛血清白蛋白的荧光猝灭,其猝灭方式为静态猝灭。经过计算可得出,在28、32、37℃其猝灭常数分别为1.618×10¹²、1.614×10¹²、1.620×10¹²L/(mol·s);其结合常数分别为2.64×10³、7.59×10³、9.80×10³L/mol,结合位点数约为1,结合距离为3.7 nm,说明三聚氰胺不仅可以和BSA结合形成新的复合物,而且BSA上的1个位点只结合1个三聚氰胺药物分子,不同结合位点之间的结合距离为3.7 nm。而圆二色谱法的研究结果显示,三聚氰胺对牛血清白蛋白的二级结构具有较大的影响。     

三氮唑类西佛碱与牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究

用荧光光谱及紫外吸收光谱方法,研究了一种三氮唑类西佛碱与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用,分析了不同温度下西佛碱对BSA的荧光猝灭作用。研究表明三氮唑类西佛碱对BSA有较强的荧光猝灭作用,西佛碱对BSA的荧光猝灭作用属于静态猝灭。并根据修正的Stern-Volmer方程,计算了西佛碱与BSA间的结合常数Ka,根据非辐射能量转移理论求得了西佛碱与BSA间的结合距离r;用Van,t Hoff方程计算了热力学参数,用三维荧光光谱研究了BSA构象的变化和用分子对接方法研究了西佛碱与BSA的结合位点,热力学数据表明二者主要以氢键和范德华作用力结合。     

尼古丁猝灭牛血清蛋白荧光机制的研究

研究了尼古丁对牛血清蛋白荧光光谱变化,以及牛血清蛋白荧光猝灭机制,同时利用同步荧光研究了尼古丁对酪氨酸和色氨酸的影响,结果表明:尼古丁猝灭牛血清蛋白荧光是通过静态机制,形成常数为KA=2.1×107 L.mol-1,每一个牛血清蛋白分子结合尼古丁的位点数为0.22,牛血清蛋白与尼古丁的这种结合是很弱的,没有影响分子的构象,酪氨酸残基荧光没有变化,只是色氨酸荧光强度降低,荧光峰位置不变。     

白藜芦醇与牛血清白蛋白相互作用的研究

采用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,研究了白藜芦醇与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明白藜芦醇对BSA有较强的荧光猝灭作用,荧光猝灭机理属于二者形成复合物所引起的静态猝灭和非辐射能量转移;根据不同温度下防己诺林碱对BSA的荧光猝灭作用,利用Stern-Volmer方程处理实验数据,得到白藜芦醇与BSA之间的结合常数KA为6.11×104(25℃)、4.46×104(35℃)和3.84×104(45℃)。根据F rster非辐射能量转移理论,求出了白藜芦醇与BSA之间的结合距离为2.36 nm(25℃)、2.73 nm(35℃)和2.48 nm(45℃)。通过计算热力学参数,可知该药物与牛血清白蛋白的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且二者之间的主要作用力类型为疏水作用力,同时用同步荧光光谱探讨了白藜芦醇对BSA构象的影响。     

1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚与牛血清白蛋白相互作用研究

用荧光光谱法结合紫外可见吸收光谱法、圆二色谱法(CD)研究了1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(PAN)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。研究表明,PAN与BSA发生了生成复合物的静态猝灭作用;紫外可见吸收光谱辅证了PAN对牛血清白蛋白的猝灭机制属于静态猝灭;利用Van’t Hoff方程计算体系的热力学参数焓变(ΔH)和熵变(ΔS),ΔH和ΔS的值均小于0,表明两者主要以氢键和范德华力作用力结合;圆二色谱法研究表明,PAN指示剂引起BSA二级结构的改变。     

转扁桃AcCBF1基因对烟草光合及叶绿素荧光特性的影响

【目的】扁桃AcCBF1基因对光合作用的影响,为扁桃新品种选育提供科学依据。【方法】采用农杆菌介导法获得转AcCBF1基因烟草,在经过连续室外37℃高温天气一周后,以野生烟草为对照,测定和分析试验烟草的光合参数和叶绿素荧光参数日变化特性。【结果】利用农杆菌介导法成功获得3株转基因烟草,经PCR检测证明AcCBF1基因已稳定地整合到烟草基因组中。转基因烟草和野生烟草的Pn、Gs均呈现“双峰”曲线,且峰值出现时间一致。12:00达到第一个峰值,16:00出现光合“午休”,18:00达到第二个峰值。二者的Pn日均值分别为6.496 、4.553 μmol/(m²·s);Gs日均值分别为157.357 、133.371 μmol/(m²·s)。转基因烟草和野生烟草的Fo均呈现出先上升后下降的趋势,Fm呈现先下降后上升的趋势。Fv/Fm、Fv/Fo、ΦPSII与Fm日变化趋势一致,均呈现先下降后上升的趋势,二者的Fv/Fm日均值分别为0.821、0.736;Fv/Fo日均值分别为5.044、3.391、ΦPSII日均值分别为0.763、0.600。【结论】与野生烟草相比,转AcCBF1基因烟草同化CO₂能力较高,光合能力较强,光合反应中心较稳定,对高温的适应能力较强。扁桃AcCBF1基因能够有效改善烟草的光合作用,维护光合反应中心的稳定;选育扁桃AcCBF1高表达品种应对夏季的干旱高温。     

基于MOD13Q1的永州近15年植被变化研究

以永州地区为研究区域,利用NASA提供的MOD13Q1-NDVI数据(2000—2014年)研究其植被变化特征。结果表明,永州地区植被指数处在0.6~0.8段的受外部条件的影响较小,而植被指数在0.8~1.0段的受外部条件的影响较大。植被指数在0.4~0.6段的走势与0.8~1.0段的大多数年份相反,植被指数在0.2~0.4和0~0.2两段所占比重一直处于一个比较低的水平。总体来说,永州地区的植被指数历年一直比较高,历年平均值为0.701。     

多重荧光标记结合拉曼光谱原位研究多粘芽胞杆菌降解秸秆的生物膜特征

利用多粘芽胞杆菌（Paenibacillus polymyxa SYX-1）快速降解稻草秸秆,用多重荧光标记技术进行标记,共聚焦激光显微镜观察（CLSM）并结合激光拉曼光谱（Raman）,原位研究纤维素降解过程中形成的生物膜特征,进一步探究植物纤维的酶解机制。共聚焦激光扫描跟踪结果表明：在0~13 d的降解过程中,SYX-1菌株定殖的稻草秸秆表面物质成分呈复杂化趋势,表明在秸秆表面有良好的生物膜形成;拉曼光谱结果显示SYX-1菌株对稻草秸秆的降解主要发生在拉曼强度1580~1590 cm-1处,证实了相关秸秆纤维素降解酶主要以β-折叠构象和无规卷曲构象共存。多重荧光标记技术和拉曼光谱手段相结合,可以作为深入研究纤维素降解过程中生物膜的形成特征及探究植物纤维酶解机制的有效手段。     

陕北白绒山羊DGAT1基因外显子14多态性及其与部分生长和胴体性状的关系

【目的】探讨陕北白绒山羊DGAT1基因的SNPs及其与部分生长、胴体性状的相关性,为陕北白绒山羊分子标记辅助选择提供理论依据。【方法】测定234只陕北白绒山羊的部分生长、胴体指标,利用PCR-SSCP技术分析其DGAT1基因外显子14的多态性及与生长和胴体性状的关系。【结果】该座位存在一个突变位点(G→A),此SNPs导致甘氨酸(G)突变为谷氨酸(E);该群体的该位点有1对等位基因A和B以及3种基因型AA、AB和BB,A基因为优势等位基因,AA型为优势基因型,群体处于Hardy-Weinberg非平衡状态;AA型与BB型之间、AB型与BB型之间均在断奶重、周岁重、胸围和管围4个性状上差异极显著(P<0.01),但AA型与AB型之间在此4个性状上差异不显著(P>0.05);3种基因型间在其他性状上差异均不显著(P>0.05);在初生重、周岁重和胸围上均表现为BB型>AA型>AB型,在断奶重、体高和管围上均表现为BB型>AB型>AA型。【结论】该基因的此突变位点与绒山羊育种指标具有一定的相关性,通过提高BB型的频率可望改善绒山羊的生长发育及胴体性状;DGAT1基因可作为陕北白绒山羊生长及胴体性状的候选基因,也可作为绒山羊肉用性能的分子标记。