中国石蒜花粉活力测定研究

为了解中国石蒜的花粉活力及其最佳体外萌发条件,分别采用TTC染色法和离体萌发法对中国石蒜的新鲜花粉的活力进行了测定。pH 7.0,5%TTC在35℃条件下染色结果显示99%的中国石蒜花粉具有活力。对影响中国石蒜花粉萌发和花粉管伸长的3个因素（蔗糖、硼酸和氯化钙）进行单因素实验,发现三者的最适浓度分别为蔗糖150 g/L、硼酸60 mg/L、氯化钙50 mg/L。3种浓度的培养液中,中国石蒜的花粉萌发率分别为36.7%、77.6%和44.2%。在中国石蒜花粉萌发最适蔗糖浓度(150 g/L)的基础上,正交设计硼酸和氯化钙浓度,实验结果表明,其最适浓度与单因素实验相同,但花粉萌发率达87%,花粉管伸长量达897 μm,远远高于单因素实验的结果,表明三者协同作用,促进中国石蒜花粉的萌发和花粉管的伸长。上述实验证实中国石蒜花粉具有较高的活力。为中国石蒜与其他石蒜属植物的种间杂交可行性提供了实验依据。     

培养基pH值及蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉体外萌发的影响

为明确培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉离体萌发的影响,筛选出花粉体外萌发的适宜条件、优化液体培养基组分,本研究以'台农一号'百香果花粉为材料,采用液体培养基离体培养的方法,开展单因素及正交试验,并用'台农一号'及'黄果'百香果的花粉验证了最适宜培养基的萌发率.结果 显示:培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对花粉萌发率及花粉管生长均有显著的影响.培养时间为4h,培养基pH值为5.5时萌发率最高,蔗糖、硼酸、PEG-4000为百香果花粉离体萌发的必需物质,适当的浓度可促进花粉萌发及花粉管的生长,但浓度过高起抑制作用,因素间存在明显的互作效应.百香果花粉离体萌发的最佳培养基为:150 g/L蔗糖+150 g/L PEG-4000+25 mg/LH3BO3+300 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+200 mg/L MgSO4·7H2O+ 100 mg/L KNO3,'台农一号'百香果及'黄果'百香果花粉在该培养基中的离体萌发率分别为95.99％及92.35％.本研究筛选到的适宜百香果花粉体外萌发的培养条件及萌发率高的液体培养基,为生产及杂交育种中的人工授粉及百香果孢粉学研究提供参考.     

大豆花粉活力测定方法的比较研究

为研究不同方法测定大豆花粉活力的问题,选取‘绥农4’、‘吉林47’和‘CK-P’为研究对象,通过蔗糖、琼脂、硼酸、温度单因子正交试验筛选出的培养基进行离体萌发,比较I2-KI染色法、TTC染色法和离体萌发法3种花粉活力测定方法的不同。结果表明:I2-KI染色法容易操作,因这种方法较离体萌发法简单,测定结果比较准确,成本低,所需时间短,常用来观测大豆花粉活力。TTC法染色效果与I2-KI染色法接近,没有差异,也可作为检测大豆花粉活力的方法。离体萌发法测定大豆花粉活力的方法和很多因素有关,与I2-KI染色法和TTC染色法有显著差异,且其培养基的配制繁琐,所以用I2-KI染色法和TTC染色法来测定大豆的花粉活力。     

洋水仙花粉生活力的测定方法初探

以洋水仙品种‘Albany’、‘Mount Hood’、‘Geranium’的新鲜花粉为试材,采用TTC染色法、醋酸洋红染色法和离体萌发测定法来测定其生活力,以探寻测定水仙花粉生活力的最适方法。结果表明：醋酸洋红染色法和离体萌发测定法均能够准确测定出水仙花粉生活力,而TTC染色法不适合用于洋水仙花粉活力的测定,其中醋酸洋红染色法适用于洋水仙的花粉生活力快速测定,而离体萌发测定法则适合于洋水仙的花粉生活力准确测定。经过对9种培养液组合的方差分析显示：0.1g/ml蔗糖+0.1×10-3g/ml硼酸为最佳培养液组合。     

辣木花粉离体萌发研究

为筛选出适宜不同辣木材料花粉的离体萌发培养基,本研究以辣木花粉为试材,采用单因素试验和正交试验研究氯化钙、蔗糖及硼酸浓度对辣木花粉萌发的影响,并观测不同辣木材料的花粉萌发率。研究结果表明,各试验因素对辣木花粉萌发的影响程度依次为蔗糖>氯化钙>硼酸,蔗糖和氯化钙浓度对辣木花粉萌发率的影响显著,而硼酸浓度影响不显著;辣木花粉在175 g/L蔗糖,400 mg/L氯化钙,150 mg/L硼酸的培养基中,花粉平均萌发率显著高于其他处理。对不同辣木材料的花粉萌发率进行测定,发现美国种源的辣木花粉活力较高,肯尼亚种源的花粉活力较低。本研究结果可为辣木杂交育种的父本选择提供参考,提高人工杂交授粉的效率。     

硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长的影响

为明确硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发特性的影响,本研究以新鲜花粉为材料,采用液体培养基离体培养法,结合单因子与正交设计试验,以期优化液体培养基组分。结果表明,蔗糖、硼酸和pH值三因素均对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长产生极显著影响,因素间存在交互作用。其中,对花粉离体萌发率的作用大小表现为硼酸×蔗糖蔗糖蔗糖×pH硼酸硼酸×蔗糖×pHpH硼酸×pH,对花粉管长度影响程度为蔗糖pH硼酸×蔗糖硼酸硼酸×pH蔗糖×pH硼酸×蔗糖×pH。促进花粉萌发的最佳组分为500 mg/L硼酸+25%蔗糖+pH 6.5,促进花粉管伸长的最佳组分为300 mg/L硼酸+20%蔗糖+pH 7.5。本研究为建立最佳火龙果花粉离体萌发的液体培养基配方奠定基础,也为生产中提高辅助授粉效率、加快人工杂交育种进程提供参考。     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基组分的优化

筛选适合白菜型油菜花粉管生长的最佳液体培养基,为测定白菜型油菜花粉活力提供一种有效方法。本研究以白菜型油菜陇油4号的新鲜花粉为材料,采用液体培养法,研究了以BK培养基为基础在其中添加不同浓度PEG6000、蔗糖、赤霉素(GA3)和VB1;采用不同pH值、培养时间对白菜型油菜花粉离体萌发生长的影响。研究显示PEG6000可促进花粉萌发生长,最适为50 g/L;蔗糖浓度为150 g/L时最利于花粉萌发和花粉管生长且高浓度蔗糖对花粉萌发有明显抑制作用;2 mg/L的赤霉素明显地促进花粉萌发生长;10 mg/L的VB1可加快花粉萌发速度。本研究表明以BK+150 g/L蔗糖+50 g/L PEG6000+2 mg/L赤霉素+10 mg/L VB1(pH为6.5,35℃恒温)组成的培养基效果最佳。     

基于花粉人工培养法下的含笑花粉活力研究

以含笑(Michelia figo)花粉为供试材料,采用花粉人工培养法研究了含笑花粉离体萌发的最优条件。结果表明:在一定浓度范围内,蔗糖和硼酸均可促进含笑花粉萌发,其最适浓度分别为100g/L和50 mg/L,含笑花粉萌发率分别为23.33%和48.62%;花粉最佳萌发温度为25℃,萌发率达50.18%。此外,花粉萌发L933正交试验结果表明,花粉萌发的最佳组合为130g/L蔗糖+80mg/L硼酸+28℃,萌发率可达67.57%。     

台湾桤木花粉生活力的测定方法初探

【研究目的】探讨台湾桤木花粉萌发的适宜培养基组成、培养温度及台湾桤木花粉生活力的快速测定方法。【方法】以台湾桤木新鲜花粉为试材,采用花粉离体培养萌芽法及TTC染色法、I2-KI染色法、过氧化物酶沉淀法等方法进行研究。【结果】台湾桤木花粉离体培养的适宜培养液为：10%蔗糖+100mg/L硼酸;最适培养温度为25℃。过氧化物酶沉淀法是快速测定台湾桤木花粉生活力的适宜方法。【结论】蔗糖和硼是台湾桤木花粉萌发的必要条件     

中国樱桃花粉活力检测方法的比较

利用TTC法、I-IK法及离体萌发法对红枫湖(Prunus pseudocerasuL.‘Hongfenghu’)、百花湖(Prunus pseudocerasu L.‘Baihuahu’)、赫章(Prunus pseudocerasu L.‘Hezhang’)及黑珍珠樱桃(Prunus pseudocerasu L.‘Blackpearl’)的花粉活力进行了检测,并对蔗糖和硼酸浓度的影响进行了研究.结果表明:Ⅰ-IK法及离体萌发法均适合红枫湖樱桃花粉活力检测,而其余3种樱桃以离体萌发法较为准确；4种樱桃花粉离体萌发所需的蔗糖浓度不一样,而0.5 g/L硼酸均可获得最高萌发率.     

木槿花粉活力检测方法筛选

摘 要：以2个木槿（Hibiscus syriacus）品种花粉为材料,用TTC法和离体萌发法对木槿花粉活力进行了检测。结果表明：木槿花粉活力检测不适合用TTC法;以木槿花粉为外植体,采用蔗糖悬浮溶液为培养基,确定适合木槿花粉萌发的条件为15%蔗糖溶液+15 mg/L硼酸在30 ℃恒温培养箱中培育0.5 h即开始开始萌发。     

红宝石海棠花粉萌发和花粉管生长的特性

为明确红宝石海棠花粉离体萌发及花粉管生长的特性,以新鲜花粉为材料,采用液体培养法,研究不同浓度的蔗糖、氯化钙、硼酸、PEG-6000及不同培养时间对其萌发率及花粉管生长的影响。结果表明,蔗糖、氯化钙、硼酸和PEG-6000均对红宝石海棠花粉萌发和花粉管生长影响显著,最适钙和硼酸浓度均为0.1 g/L,蔗糖浓度为150 g/L,PEG-6000为50 g/L,最佳培养时间为2 h,花粉萌发率达92.31%,花粉管长度达582.96μm。本试验探讨液体培养基中不同组分对红宝石海棠花粉萌发和花粉管生长的影响,筛选出红宝石海棠花粉离体萌发的最佳培养基组合,为海棠的新品种选育及理论研究提供了科学依据。     

香榧花粉活性检测及离体培养条件筛选

以香榧花粉为供试材料,采用TTC染色法、花粉离体培养等方法研究香榧花粉活力。结果表明:1) TTC测定法:相同0.5%TTC染液浓度,不同pH、不同培养温度下的染色率不同。由统计分析得出pH为6.0时,25℃下活力率最低,为17%;pH为7.0时,30℃下活力率最高,为52%;随着TTC染液pH的增加,花粉活力率反而下降,pH为7.5时,30℃下活力率下降至46%。2)离体培养法下的花粉萌发结果,在一定浓度和温度(28℃)范围内,蔗糖和硼酸均可促进香榧花粉萌发,最适浓度分别为100 g·L~(-1)和100 mg·L~(-1),花粉萌发率分别为46.89%和48.31%。通过萌发L_9(3~3)正交试验筛选最优条件为100 g·L~(-1)蔗糖+50 mg·L~(-1)硼酸+28℃,萌发率可达49.97%。     

烟草花粉离体萌发液体培养基的筛选和优化

以云烟97和红花大金元花粉为试验材料,研究了液体培养基配方、花粉浓度对花粉离体萌发的影响.结果表明,浓度配比10％～15％蔗糖、25 mg/L硼酸的液体培养基为最佳培养基;培养基中的花粉浓度以2.5 g/L为宜.     

大丽花花粉活力及离体萌发研究

为筛选大丽花花粉活力有效的测定方法,了解大丽花不同品种的花粉活力,以大丽花栽培品种为试验材料,采用4种方法检测大丽花花粉活力,在此基础上,采用单因素试验和正交设计试验分别对大丽花花粉的离体萌发培养条件及培养基组分进行优化,得到最优方案后进一步检测、比较不同品种之间的花粉活力。研究结果显示,TTC染色法不能使花粉着色,I₂-KI和孢粉染色法不能有效区分有活力和无活力花粉,离体萌发法效果良好,可准确直观地反映大丽花花粉活力状况, 是测定大丽花花粉活力的有效方法。当培养条件为pH 6.0、温度25℃、培养时间2.5 h时,花粉萌发率最高。培养基组分对大丽花花粉萌发的影响程度依次为PEG>蔗糖>硼酸,实际最佳处理组合为A₃B₄C₂,即PEG4000 25 g/L、蔗糖60 g/L、硼酸50 mg/L的处理组合下,大丽花花粉萌发率最高达62.1%。采用上述获得的最优方案检测22个大丽花品种的花粉活力,花粉萌发率为11.75%~78.72%,不同品种的花粉萌发率差异大,其中,‘兰花公主’的花粉萌发率最低,‘波彻儿’最高。大丽花品种的花粉活力多样性丰富,所测定的22个大丽花品种有14个品种正常可育,杂交时可用作父本;8个品种为半不育或低不育,杂交时更适合作母本。     

星点设计-响应面法优化丹参花粉离体萌发培养条件的研究

以BK为基本培养基,在单因素试验的基础上,采用星点设计-响应面优化山东丹参、川丹参花粉离体培养,以花粉萌发率为响应指标,研究培养温度、蔗糖浓度、硼酸浓度与萌发率之间的响应面关系,优化花粉离体培养的条件。研究结果:温度、蔗糖浓度和硼酸浓度对山东丹参和川丹参花粉萌发率的影响均达到极显著水平(p0.05),响应面优化后的最佳培养条件为:山东丹参BK+温度21.87℃+蔗糖151.20 g/L+硼酸273.83 mg/L,花粉萌发率的理论值为90.30%;川丹参BK+温度26.28℃+蔗糖133.81 g/L+硼酸237.71 mg/L,花粉萌发率的理论值为68.19%。验证得到二者萌发率分别为89.65%、66.31%。试验确立的数学模型的实测值与预测值相对偏差较小分别为-1.8%、-2.2%,可正确预测培养条件对花粉萌发率的影响,同时验证了星点设计-响应面优化丹参花粉离体培养条件优化方法模型的可靠性。该研究结果为今后进一步开展丹参花粉体外保存、人工控制授粉、选育优良杂交新品种以及川丹参不育机制的研究等提供了理论基础。     

PEG和钙对栀子花粉萌发的影响

以栀子（Gardenia jasminoides Ellis）花粉为试验材料,采用花粉人工培养法研究了培养基中PEG和钙对栀子花粉萌发的影响。结果表明,不同分子量的PEG对栀子花粉离体萌发率的影响不同,PEG-6000较其他3种分子量的PEG促进花粉萌发的效果要好;PEG4种分子量的最适浓度不同,其中PEG-4000和PEG-6000促进栀子花粉萌发的最佳浓度为15 g/L,而PEG-2000和PEG-10000促进栀子花粉萌发的最佳浓度分别为20g/L和10g/L。以0.8%的琼脂+30 mg/L蔗糖+15 mg/L硼酸+15 g/L PEG-6000为基本培养基组分,分别添加不同浓度的CaCl₂,发现适宜浓度的钙有利于栀子花粉萌发,但钙浓度过高抑制萌发,栀子花粉萌发的最适Ca²⁺浓度为2.0 mmol/L。     

肉果秤锤树花粉活力测定方法

本研究以离体培养萌发法为参照,从TTC法、I2-KI法、过氧化物酶沉淀法和醋酸洋红法4种方法中筛选出适宜快速测定肉果秤锤树(Sinojackia sarcocarpa L.Q.Luo)花粉活力的方法。结果表明:肉果秤锤树花粉离体培养萌发的最适条件为23℃培养下15%蔗糖、0.01 mg/m L硼酸,萌发率达84.85%;过氧化物酶沉淀法、TTC法、I2-KI法和醋酸洋红法测定的萌发率分别为78.45%、0、100%和37.01%。过氧化物酶沉淀法测定结果与离体培养萌发法的测定结果最接近(p0.01),是简单快速测定肉果秤锤树花粉活力的最适方法。本研究筛选出的花粉离体培养萌发条件和花粉活力快速测定方法,可为进一步开展肉果秤锤树育种工作提供理论依据与技术支持。     

花粉活力不同测定方法的比较和离体培养初探——黄山玉兰

为了比较不同花粉活力测定方法的应用效果,本研究利用黄山玉兰(Yulania cylindrica)花粉作为实验材料,采用MTT染色法、TTC染色法、醋酸洋红染色法分别测定黄山玉兰自然盛开、室内水培盛开、室内培养萎蔫时的花粉活力;同时采用不同浓度梯度的硼酸、蔗糖溶液进行花粉离体培养。结果表明：醋酸洋红染色法测得的活力偏高,均值为96.94%;TTC染色法所测活力偏低,为39.52%;MTT染色法所测活力最为合适,均值为85.46%;而花粉离体培养最佳的溶液浓度是5%的蔗糖溶液和0.01%的硼酸溶液。黄山玉兰花粉活力的不同测定方法比较和花粉离体培养为其他物种繁育相关研究提供了借鉴。