2018年西安市牛羊布鲁氏菌病血清学调查与防控对策

为全面了解2018年西安市牛羊布鲁氏菌病(Brucellosis,布病)的流行情况,采用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)对28901份牛羊血清样品进行检测和确诊。结果显示6997份牛血清样品中检出阳性样品150份,21904份羊血清样品中检出阳性样品140份,牛个体阳性率为2.14%,羊个体阳性率为0.64%,牛羊个体阳性率为1.00%。根据调查结果,提出布病防控的建议和对策。     

某地区羊布鲁氏菌病血清学调查与4种血清学检测方法的比较应用

为更好地开展羊布鲁氏菌病防控技术指导,对某地20家养羊场、户采集羊血样328份,同时应用虎红平板凝集试验与胶体金检测卡进行初步检测,并将上述2种方法初检为阳性的样品与随机选取的阴性样品共计60份,分别应用试管凝集试验及cELISA进行确诊。结果显示,虎红平板凝集试验、胶体金检测卡、试管凝集试验与cELISA方法检测结果的总符合率分别为97.0%、98.3%和98.3%,该地区个体阳性率0.91%,群体阳性率10.0%。在此基础上,应用布鲁氏菌病国家标准阳性血清对4种方法的敏感性进行了测定,结果显示,cELISA检测方法敏感性最高,其次为试管凝集试验与胶体金快速检测卡。综上得出,胶体金检测方法既可以作为布病血清学检测的初筛试验,也可以与cELISA检测方法共同用作布病血清学检测的复核试验。     

奶牛布鲁氏菌病三种血清学检测方法的比较试验

采集440头奶牛血清,分别采用 RBPT、SAT 和 cELISA 检测布病非免疫抗体情况,结果采用 RBPT 和 SAT检测的阳性率为2.5%,两种方法的结果符合率为100%,采用 cELISA 检测的阳性率为4.1%,其 RBPT 的结果符合率为98.4%。本结果表明 cELISA 具有较高的敏感性。本研究可为本地区奶牛布病防控工作提供依据。     

猪布鲁氏菌病流行病学调查及3种检测方法比较

为了解南平市延平区猪布鲁氏菌病的感染状态,分别从该地区12个乡镇随机选择1个规模化猪场,每个猪场采集30份血清样品,共采集360份样本。先用布病虎红平板凝集试验(RBPT)筛选,再用间接酶联免疫吸附试验（iELISA）和竞争酶联免疫吸附试验（c ELISA）复核。结果显示,虎红平板凝集试验共检出阳性血清样本54份,阳性率为15%,两种酶联免疫吸附试验检测均无阳性血清样本,表明延平区的猪场未存在布病感染的风险,在3种检测方法中,RBPT操作简单、灵敏性高,但假阳性率高,而ELISA特异性最好。     

2012—2014年新疆动物布鲁氏菌病流行病学调查与分析

为了解新疆地区畜间布病流行情况及病原学特征,提升该病诊断水平,为新疆制定布病防控策略提供科学依据。2012—2014年选定新疆伊犁地区、和田地区、哈巴河县、温宿县为布病流调监测点,共抽检牛血清20 906份,羊血清23 245份。在布病阳性点采集流产胎儿病料和奶样各30份进行病原分离,应用分子生物学方法分析其病原学特征。牛羊布病血清学结果显示,牛羊布病阳性率0.77%~2.87%。从流产胎儿病料和奶样中分离布鲁氏菌11株,经AMOS-PCR鉴定,其中9株为羊种布鲁氏菌,2株为牛种布鲁氏菌。试验结果表明,新疆地区动物布鲁氏菌病疫情有逐年上升的趋势,加强牛羊布病检疫和防控势在必行。     

几种布鲁氏菌病检测方法比对结果分析

为比较几种常用布鲁氏菌病(简称布病)检测方法特性,在某疫苗免疫的奶牛场随机选取40头奶牛,采集血清和奶样各40份,然后对采集的血清进行虎红平板凝集、试管凝集、胶体金、酶联免疫吸附试验(iELISA和cELISA)和琼脂扩散方法检测,对采集的奶样进行病原学检测(qPCR)和抗体检测(胶体金)。结果显示:4种国标方法(虎红平板凝集、试管凝集、iELISA和cELISA)检出的阳性样品数量有较大差距,分别为16、6、23和33份,其中经试管凝集试验检出的阳性血清,经其他3种国标方法也检测为阳性;通过胶体金法检出阳性血清数(9份)略高于试管凝集试验,且血清及牛奶样品经胶体金检测结果基本一致;琼扩法检出12份阳性血清,且显示抽检奶牛中存在野毒感染;qPCR和胶体金试纸条对采集奶样的检测结果有较大差距,经qPCR检测仅1份样品呈阳性。结果表明:国标方法中,试管凝集试验特异性最高,iELISA和cELISA敏感性较高;病原学检测临床样品检出率较低,琼脂扩散试验敏感性有限,胶体金法敏感性适中,操作简便,适合布病免疫奶牛场自检。本研究为牛场布病不同检测目的方法选择提供了参考。     

两种虎红平板凝集试验检测羊布鲁氏菌病效果比较

为比较常规和改良虎红平板凝集试验（RBPT）的羊布鲁氏菌病检测效果,对239份免疫、非免疫场绵羊和阴性绵羊血清进行检测,并通过竞争ELISA试验（cELISA）和试管凝集试验（SAT）进行确诊。结果显示：常规RBPT检测非免疫血清的敏感性为68.85%,特异性为93.55%,与cELISA的符合率为77.17%;检测免疫羊血清的敏感性为75.81%,特异性为73.33%,与cELISA的符合率为75.00%。改良RBPT检测非免疫羊血清的敏感性为91.80%,特异性为70.97%,与cELISA的符合率为84.78%;检测免疫羊血清的敏感性为98.39%,特异性为10%,与cELISA的符合率为69.57%。两种RBPT和cELISA的阴性血清检测结果全部为阴性,符合率为100%。结果表明：改良RBPT法的敏感性要高于常规RBPT法,可以在阳性羊群中筛选到更多抗体效价较低的早期感染动物。但其特异性有一定程度的降低,必须结合SAT、cELISA等特异性高的方法进行确诊。本研究为羊布鲁氏菌病检测方法的选择提供了参考。     

济宁地区猪布鲁氏菌病流行病学调查及3种检测方法比较

为了解济宁地区猪布鲁氏菌病的感染状态,从该地区随机选择5个猪场,采集600份血液样本,以上猪场均未免疫猪布鲁氏菌病疫苗。先用布病虎红平板凝集试验(RBPT)筛选,再用试管凝集试验(SAT)和ELISA(酶联免疫吸附试验)复核。结果表明,虎红平板凝集试验共检出阳性血清样本13例,阳性率为2.17%;试管凝集试验检出阳性血清样本12例,阳性率为2.00%,与虎红平板凝集试验符合率为92%;ELISA试剂盒检出阳性血清10例,阳性率为1.67%,与虎红平板凝集试验符合率为77%。结论为:济宁地区的猪场存在布病感染,种猪的阳性率最高,其次是肥育猪和仔猪,并且在3种检测方法中,RBPT最敏感,而ELISA特异性最好。     

布鲁氏菌4种高通量抗体检测方法的比较研究

旨在科学选择和使用布鲁氏菌抗体检测方法,推动布病诊断试剂标准化。本研究用布病阳性血清标准品测定了国家/OIE布鲁氏菌病参考实验室开发的布鲁氏菌荧光偏振（FPA）抗体检测试剂盒、动物布鲁氏菌病竞争ELSIA （cELISA）抗体检测试剂盒、牛布鲁氏菌病间接ELISA （iELISA）抗体检测试剂盒和改进的微量补体结合试验（mCFT）等4种方法的灵敏度。通过对已知阴、阳性血清样品的检测,比较了各检测方法的敏感性和特异性,并用临床样本进一步比较了各种方法检测结果的吻合性。结果表明,4种方法检测的灵敏度基本一致,当布病阳性血清标准品按1∶20稀释（即50 IU·mL^-1）时均检测为阳性,1∶40稀释（即25 IU·mL^-1）时均检测为阴性。FPA、cELISA、iELISA和mCFT方法的敏感性分别为97.14%、100.00%、100.00%、98.57%,特异性分别为96.34%、95.12%、97.56%、100.00%。对315份临床样本的检测结果显示,各方法之间的符合率均高于90.00%,其中iELISA、FPA、cELISA与mCFT符合率分别为97.14%、96.83%、92.70%;FPA、cELISA与iELISA符合率分别为95.24%、93.65%;FPA与cELISA符合率为91.43%。iELISA、FPA、mCFT 3种方法之间吻合性最高,cELISA与其他3种方法之间的吻合性略低。     

不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡检测牛羊布鲁氏菌病的效果分析

为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡（简称试纸条/卡）检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验（RBPT）初筛和竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）复核的临床牛羊血清样品进行检测比较。结果显示：不同试纸条/卡对布鲁氏菌企业标准阴阳性血清检出率均为100%,其中2种试纸条/卡敏感性高,对不同稀释倍数阳性血清均可检出;试纸条/卡对临床阴性血清均100%检出,但对临床阳性血清样品的检测结果差异较大,其中对羊阳性血清样品的检出率为5.88%～70.59%,对牛阳性血清样品为50.0%～100.0%。结果表明,不同品牌试纸条/卡在布病检测时存在一定差异。建议使用试纸条/卡进行布鲁氏菌病初筛后,应结合国家相关布病诊断技术进行复检,以确保检测结果的准确性。     

虎红平板凝集试验和胶体金免疫层析法诊断布鲁氏菌病效果的比较

为了比较虎红平板凝集试验(RBPT)和胶体金免疫层析法(GICA)诊断布鲁氏菌病的效果,658份牛血清和365份羊血清进行了检测,并通过试管凝集试验(SAT)对两种方法筛选到的阳性样品进行了确证。RBPT法检测出103份阳性牛血清,44份阳性羊血清;GICA法检测出129份阳性牛血清,65份阳性羊血清。通过SAT法验证结果显示牛血清有84份为阳性,羊血清有44份为阳性。GICA法的敏感性要高于RBPT法,可以作为家畜布病初筛试验的一种比较理想的检测方法。     

庆阳市2009～2013年间布鲁氏菌病流行病学调查

基于分析庆阳市畜间布鲁氏菌病（Brucellosis）流行特征、疫情变化趋势及原因,为制定布鲁氏菌病防治对策提供科学评价依据.按照《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T 18646～2002）虎红平板凝集试验（RBPT）和试管凝集试验（SAT）操作方法进行采样和检测.共检测羊、牛、猪、犬血清共计209 864份,检出布病阳性血清1415份,阳性率为0.67％.     

黑龙江省某镇肉牛布鲁氏菌感染情况调查

为了解黑龙江省B镇肉牛的布鲁氏菌病流行现状,从而评估该病在当地牛群中的流行状况及人感染布鲁氏菌的风险,本研究以估计个体及群流行率为目的,按照预期流行率0.5%,可接受误差0.3%,置信水平95%对B镇531个肉牛养殖场户养殖的3535头肉牛进行随机抽样,获得血清样本1334份,用虎红平板凝集试验和试管凝集试验两种方法检测均为阳性的牛即为布病患病牛,同时对养殖户就养殖模式、动物来源、更新方式、既往病史、养殖规模等方面进行问卷调查。血清检测结果显示,虎红平板凝集5份阳性,阳性率为0.37%,对5份阳性血清进行试管凝集试验复检,布鲁氏菌抗体全部为阴性。同时回收问卷531份,有效问卷389份,合格率73.3%。根据本次检测结果,B镇肉牛布病个体流行率接近于零,牛群中没有发现利于布鲁氏菌感染的风险因素。     

青海海西州地区牛羊布鲁菌氏病监测方案的研究

目的探索适合青海省海西州地区牛、羊布鲁氏菌病的监测方案,净化布鲁氏菌病.利用琥红平板凝集试验(RBPT)、全乳环状试验(MRT)和试管凝集试验(SAT)对1200份牛血清中376份奶牛血清、677份羊血清,以及376份牛奶进行检测.结果RBPT检测1200份牛血清中9份可疑,3份阳性;376份奶牛血清中3份可疑,1份阳性;其他牛6份可疑,2份阳性;677份羊血清中3份可疑.MRT检测376份奶样中5份可疑,1份阳性.SAT重复检测的20份血清中2份为阳性,RBPT与MRT结果的符合率为100%.结论三种检测方法的联合使用适合大样本的进行布鲁氏菌病的监测,为基层布鲁氏菌病的监测方案的研究提供了理论依据.     

黑龙江省牲畜布鲁氏菌病流行情况调查与分析

布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌引起的人兽共患常见传染病。为了解黑龙江省牲畜布鲁氏菌病的流行情况,采用虎红平板凝集试验和PCR方法对黑龙江省2012—2013年12个规模养殖场12个农村散养户和养殖的牲畜采集血清样品共5 170份进行监测诊断。血清学检测结果表明:黑龙江省2012—2013年牲畜布病平均感染率为2.21%,其中规模场平均感染率为1.91%,散养户平均感染率为3.12%;不同牲畜布病感染率为:羊5.44%、肉牛2.44%、奶牛1.13%、猪0.18%。病原学检测结果表明:PCR阳性样品33份,其中规模场14份,散养户19份。通过牲畜布病的监测和流行病学调查,掌握了黑龙江省牲畜布病流行状况,为制订布病防控策略提供了技术支持。     

海北地区牦牛衣原体和布鲁氏菌病的血清学检测

2010-2012年期间,应用衣原体间接血凝试验和布鲁氏菌病试管凝集试验对采自海北州所属4县的部分牦牛血清进行了衣原体和布鲁氏菌病的检测,结果在3351份牦牛血清中,检出衣原体阳性血清94份,阳性率2.8％;另从采集的6303份牦牛血清样品,检出布鲁氏菌病阳性血清388份,阳性率6.15％.表明,海北州的牦牛群中存在衣原体病和布病的感染.     

山东省部分地区奶牛场布鲁氏菌病血清学调查

2016年5—12月,从山东省泰安市、枣庄市、菏泽市和青岛市等地区6个奶牛场的成母牛群中,随机采集血清1 736份,分别用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)平行检测布鲁氏菌病血清抗体。结果显示:该6个奶牛群的布鲁氏菌病抗体总阳性率为11.12%;3种方法的阳性检出率各不相同,其中RBPT的阳性检出率为12.73%,SAT为11.12%,ELISA为11.75%;5个免疫牛场的布鲁氏菌病血清抗体检测均呈阳性,并且不同地区奶牛场之间的抗体阳性率差异较大,最高的为40.00%,最低的为8.93%;1个非免疫牛场的布鲁氏菌病血清抗体检测结果为阴性。检测结果提示:鉴于当前严重的布鲁氏菌病疫情形势,山东省的布鲁氏菌病防控压力加大;任何一种检测方法都有局限性,3种方法联合应用可有效降低出现假阳性和假阴性的概率;上述检测方法均无法区分免疫和感染,因此免疫给布鲁氏菌病的检测净化带来了极大困难。     

川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行病学调查

同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%（272/1070）,虎红平板凝集试验检测阳性率为12.7%（136/1070）,而试管凝集试验检测阳性率为9.1%（97/1070）。8个县均发现阳性布鲁氏菌病血清。与间接ELISA相比,虎红平板凝集试验的相对敏感性和特异性分别为50%和100%,而试管凝集试验的相对敏感性和特异性分别为35.7%和100%。布鲁氏菌病在川西北地区广泛存在,血清学方法是检测和监测布鲁氏菌病最常用和最简便的方法,其中间接ELISA方法最为敏感。     

青海省天峻县藏羊种公羊布鲁氏菌病的血清学调查

采用布鲁氏菌病琥红平板凝集试验和布鲁氏菌病试管凝集反应方法,对采自祁天峻县织合玛等十个乡镇的种公羊血清,进行了布氏杆菌血清抗体的监测。监测结果:3,456份种公羊血清中,检出布病阳性血清22只,阳性率为0.64%。同时对该地区布病流行现状及防治情况进行了调查,结果表明,该地区的种公羊存在布病感染,需引起相关业务部门的重视。     

青海省三角城种羊场部分流产母羊的血清学检测

应用布鲁氏菌病RBPT、衣原体和弓形虫IHA,对来自青海省三角城种羊场发生流产的23只生产母羊血清进行特异性血清抗体的检测,结果检出衣原体阳性血清3份,阳性率为13.04%:未检出布氏杆菌和弓形虫阳性血清。