小檗碱对小鼠感染犊牛源生物被膜阳性、多重耐药大肠杆菌的体内抑菌作用

为阐明小檗碱对小鼠感染犊牛源生物被膜阳性、多重耐药大肠杆菌的体内抑菌作用，试验采用微量肉汤稀释法确定41株分离株的MIC值|采用改良结晶紫染色法，确定其生物被膜形成能力|采用ELISA法检测小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量|采用血常规检测小鼠血液中白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞数目及血红蛋白含量。结果显示：分离菌株对四环素、氨苄西林、甲氧苄啶、磺胺嘧啶耐药率较高，对阿米卡星、米诺环素、头孢西丁较为敏感|生物被膜形成能力无、弱、中、强的菌株数分别为14、10、7、10株|生物被膜阳性大肠杆菌耐10种以上药物的菌株占比73.9%，且多重耐药菌株占比66.7%|生物被膜强阳菌株中的多重耐药菌株占比80%|小檗碱高、低剂量组及联合给药组可不同程度降低小鼠血清中促炎因子的含量，降低血液中白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞数目，并升高血红蛋白浓度。犊牛源大肠杆菌形成生物被膜可增强自身多重耐药性，且小檗碱具有成为临床治疗由生物被膜阳性、多重耐药大肠杆菌引起的犊牛腹泻病药物的潜力。 [关键词] 犊牛|大肠杆菌|生物被膜|小檗碱|促炎因子     

黄芩苷黄芩素小檗碱对LLC-PK1细胞炎症模型中TNF-α IL-1β及IL-6表达的影响

研究中药黄芩苷、黄芩素、小檗碱对细菌脂多糖(LPS)诱导的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)中肿瘤坏死因子-α(TNG-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。用噻唑蓝比色法(MTT法)筛选LPS、黄芩苷、黄芩素和小檗碱对细胞作用的最佳浓度,用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA表达,以确定细胞炎症模型是否建立成功;炎症模型建立后,用最佳浓度的黄芩苷、黄芩素和小檗碱分别作用细胞24h,用qPCR检测TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果LPS刺激组细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达量极显著高于正常对照组(P0.01),黄芩苷、黄芩素和小檗碱作用组细胞TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA表达量比LPS刺激组显著降低(P0.05),与对照组无显著差异(P0.05)。上述结果表明,黄芩苷、黄芩素和小檗碱通过抑制炎症细胞TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达,从而发挥抗炎作用。     

复方术苦芩提取液对腹泻小鼠iIELs及十二指肠INF-γ、IL-4 mRNA转录的影响

旨在研究复方术苦芩提取液对腹泻小鼠小肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocyte,iIELs)及十二指肠INF-γ、IL-4 mRNA转录的影响。将72只小鼠随机分为6个组,分别为空白组、感染组、阳性药物组(黄芪多糖口服液,浓度为1.2 mg·mL~(-1))和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(复方术苦芩提取液,生药浓度分别为0.1、1和10 mg·mL~(-1))。除空白组外,小鼠连续给药7 d [灌胃0.5 mL·(次·d)~(-1)]后腹腔注射5×10~7 CFU大肠杆菌,并将感染组小鼠出现腹泻时设定为试验0 h。于试验6 h和4 d时各处死6只小鼠,制作小肠病理切片并计数iIELs数量,qRT-PCR分析十二指肠段INF-γ、IL-4 mRNA水平。结果显示:阳性药物组和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组对腹泻小鼠的保护率分别为66.7%、50.0%、66.7%、75.0%。试验6 h时,与空白组相比,感染组小鼠iIELs数量增加,十二指肠INF-γmRNA水平降低、IL-4 mRNA水平增高,差异均极显著(P0.01);与感染组相比,阳性药物组和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠iIELs数量减少,阳性药物组和药物Ⅲ组小鼠十二指肠INF-γ mRNA水平增高、IL-4 mRNA水平降低。试验4 d时,与空白组相比,感染组小鼠十二指肠和回肠的iIELs数量增加,空肠iIELs数量减少,其十二指肠INF-γ、IL-4 mRNA水平增高,差异均极显著(P0.01);与感染组相比,阳性药物组和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠十二指肠和回肠的iIELs数量(Ⅰ组十二指肠除外)均减少,空肠iIELs数量增加,阳性药物组和药物Ⅲ组十二指肠段INF-γ、IL-4 mRNA水平均降低。结果表明,复方术苦芩提取液通过调控小鼠小肠iIELs数量,平衡十二指肠INF-γ/IL-4 mRNA转录,达到对小鼠腹泻的保护作用。     

益母草碱对LPS诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用研究

【目的】探究益母草碱对脂多糖(LPS)诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用。【方法】将60只6～8周龄雌性C57小鼠随机分为6组：空白对照组,模型组,益母草碱低、中、高剂量组及地塞米松阳性对照组,每组10只。空白对照组经阴道灌注50μL PBS缓冲液,其余组经阴道灌注50μL LPS(1 mg/mL)建立小鼠子宫内膜炎疾病模型。造模后,益母草碱低、中、高剂量组分别腹腔注射7.5、15.0、30.0 mg/kg益母草碱,阳性对照组腹腔注射5.0 mg/kg地塞米松,每6 h 1次,连续3次。造模24 h后处死小鼠,测定各组小鼠子宫指数;通过HE染色观察子宫组织病理变化;采用ELISA法检测子宫组织白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等相关炎症因子含量及髓过氧化物酶(MPO)活性。【结果】与空白对照组相比,模型组小鼠子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量与MPO活性均极显著升高(P<0.01);与模型组相比,不同剂量益母草碱能不同程度降低LPS诱导子宫内膜炎小鼠的子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6...     

天然植物制剂“开口健”对小鼠淋巴细胞功能及营养生长因子的影响

目的：探讨口服＂开口健＂对小鼠淋巴细胞功能以及营养生长因子的影响。方法：36只ICR小鼠随机分为4组,即生理盐水组＂,开口健＂低、中、高剂量组。给小鼠连续灌胃10 d后,用MTT法检测淋巴细胞刺激指数,RT-PCR方法检测ConA刺激后淋巴细胞产生的IL-4、IL-10、IL-12和INF-γmRNA水平,ELISA方法检测小鼠血清胰岛素样生长因子（IGF-1）和生长激素释放肽（Ghrelin）水平。结果：口服＂开口健＂小鼠脾脏淋巴细胞SI显著高于对照组（P〈0.01）,并随＂开口健＂剂量的增加而升高;口服＂开口健＂小鼠脾脏淋巴细胞产生IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γmRNA水平显著高于对照组（P〈0.05）。口服＂开口健＂显著提高了小鼠血清的IGF-1和Ghrelin水平（P〈0.05）,且与＂开口健＂剂量呈正相关性。结论：口服＂开口健＂可增强小鼠淋巴细胞功能并提高血清营养生长因子水平。     

桦褐孔菌多糖对感染弓形虫小鼠治疗作用及其对血清中细胞因子含量的影响

建立小鼠弓形虫病模型后,将小鼠随机分成6组,统计小鼠存活率及时间,再应用ELISA检测血清中IFN-γ、IL-2等细胞因子水平,以检测桦褐孔菌多糖对感染弓形虫小鼠的治疗效果及对小鼠血清中IFN-γ、IL-2细胞因子水平的影响。结果表明,桦褐孔菌多糖中剂量组小鼠存活率最高;桦褐孔菌多糖的高、中剂量组IFN-γ水平极显著高于其他各组(P<0.01),高剂量组IL-2水平与其他各组比较差异极显著(P<0.01);除感染组外,其余各组IFN-γ、IL-2均在第6天出现峰值。说明桦褐孔菌多糖中剂量治疗弓形虫感染小鼠效果最好,并且中剂量可使小鼠血清中IFN-γ、IL-2值升高到适当水平,有效改善弓形虫感染对小鼠的伤害。     

黄芩苷对自噬介导H6N6禽流感病毒致病损伤的作用

探究黄芩苷对H6N6亚型禽流感病毒诱导小鼠肺脏致病损伤的作用。选用40只昆明小鼠随机分为4组，即对照组、模型组、黄芩苷治疗组、3-MA抑制剂组。通过HE染色观察肺组织病理形态学变化，ELISA法检测血清中IL-1β、IL-2、IL-6及TNF-α的含量，透射电镜检测小鼠肺脏中自噬体的水平，Western blot检测肺组织LC3、Beclin-1及ATG7蛋白表达水平，免疫荧光法检测肺组织LC3蛋白表达水平，免疫组化法检测肺组织LC3、Beclin-1及ATG5蛋白表达水平，RT-qPCR检测肺组织自噬关键基因LC3、Beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7及ATG12 mRNA转录水平。结果显示，经黄芩苷治疗后能显著缓解H6N6亚型禽流感病毒对小鼠肺组织的损伤，血清中IL-1β、IL-2、IL-6及TNF-α含量显著下降(P<0.01),肺组织中自噬体数量减少，LC3、Beclin-1、ATG5及ATG7蛋白表达水平显著下降(P<0.01),肺组织中LC3、Beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7及ATG12 mRNA转录水平显著下降(P<0.01)。结...     

姜黄素对乳腺炎模型小鼠细胞免疫的影响

探讨姜黄素(curcumin)对致病性金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)所诱导的乳腺炎模型小鼠血液中T淋巴细胞亚群及脾脏中NK细胞活性的影响。构建小鼠乳腺炎模型,分别通过流式细胞术、ELISA法、MTT法和平板计数法检测空白对照组、模型组、阳性对照组、姜黄素组及姜黄乳炎散组血液中CD4^+T、CD8^+T活性和血清中IL-1、IL-2、IL-10的水平,脾脏中NK细胞活性及S.aureus数量的变化差异来监测各组药物抗炎效果。结果显示,相比于模型组,姜黄素组、姜黄乳炎散组和阳性对照组可显著增加乳腺炎小鼠血清中IL-2、IL-10的水平以及脾脏中NK细胞和血液中CD4^+T的活性,显著降低小鼠血清中IL-1的水平以及血液中CD8^+T活性(P<0.05),以姜黄素组效果最佳。结果表明,姜黄素对小鼠乳腺炎具有保护作用,并且姜黄素对S.aureus所诱导的小鼠乳腺炎的抗炎机制可能通过抑制IL-1和CD8^+T水平,增强IL-10、NK、CD4^+T和减少S.aureus的数量而发挥作用。姜黄素可能成为潜在的乳房炎治疗药物。     

苦豆子生物碱抗小鼠溃疡性结肠炎的作用研究

探讨苦豆子生物碱对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用,从而明确其抗炎活性。试验分为对照组、模型组、苦豆子总碱治疗组(60、30、15 mg/kg)。小鼠自由饮用40 mg/mL葡聚糖硫酸钠溶液(DSS)7 d建立溃疡性结肠炎(UC)模型,同时采用苦豆子总碱进行治疗。试验期结束后处死小鼠,观察各组小鼠结肠充血水肿程度以及结肠长度的变化,用HE染色观察小鼠结肠组织病理变化,用ELISA检测小鼠结肠组织炎症因子TNF-α和IL-1β的水平。结果显示,治疗组与模型组相比,小鼠疾病指数评分降低、结肠长度缩短改善、结肠黏膜充血水肿程度减轻以及炎症因子TNF-α和IL-1β的水平降低。结果表明,苦豆子生物碱对UC有较好的治疗作用。     

白头翁汤及其主要成分对LPS诱导内皮细胞分泌NO、E-selectin和IL-8的影响

拟探讨白头翁汤及其主要成分对细菌内毒素(LPS)导致的机体炎症等病理损伤的治疗作用.培养内皮细胞至单层融合状态,加入内毒素刺激,3h后加入高、中、低3种浓度的8种药物,继续培养21 h后收集细胞上清液,用ELISA方法测定NO、E-selectin和IL-8的含量.结果显示,白头翁汤高剂量组、白头翁素高剂量组和小檗碱高剂量组的NO含量极显著低于LPS对照组(P＜0.01),白头翁汤中剂量组、白头翁素中剂量组、小檗碱中剂量组和秦皮乙素高剂量组显著低于LPS对照组(P＜0.05);白头翁汤高剂量组和药根碱高剂量组的E-selectin含量极显著低于LPS对照组(P＜0.01),白头翁皂苷B4高剂量组、小檗碱高剂量组和药根碱中剂量组显著低于LPS对照组(P＜0.05);秦皮乙素高剂量组的IL-8含量极显著低于LPS对照组(P＜0.01),白头翁汤高剂量组、秦皮甲素高剂量组和中剂量组、秦皮乙素中剂量组显著低于LPS对照组(P＜0.05).结果提示白头翁汤及其主要成分具有明显的抗细菌内毒素作用,可在由NO、E-selectin和IL-8介导的机体炎症等病理损伤过程中发挥治疗作用.     

复方小檗碱舔剂对新生仔猪血液生化指标的影响

为了探讨复方小檗碱舔剂对新生仔猪血液生化指标的影响,试验以硫酸小檗碱、蒙脱石粉、硫酸黏杆菌素等为主要成分制成复方小檗碱舔剂,同时将新生仔猪分为对照组、黏杆菌素组、复方小檗碱组,于第7,14,21天的清晨未进食情况下前腔静脉采血,收集血清,检测新生仔猪血液生化指标。结果表明:复方小檗碱组仔猪的各项血液生化指标含量与对照组及黏杆菌素组比较差异不显著(P0.05)。说明复方小檗碱对新生仔猪血液生化指标无影响,对新生仔猪的身体机能无伤害,是安全可靠的。     

辣椒碱对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞体外免疫调节活性的影响

为探讨辣椒碱的免疫调节作用。试验利用体外分离培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,辣椒碱单药和辣椒碱与脂多糖(LPS)复合刺激脾淋巴细胞,MTT法检测辣椒碱和复合物对脾淋巴细胞增殖的影响;用辣椒碱单药刺激脾淋巴细胞,酶联免疫吸附(ELISA)法检测辣椒碱对淋巴细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-6(IL-6)的影响;用辣椒碱单药刺激腹腔巨噬细胞,MTT法检测辣椒碱腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;用ELISA法检测辣椒碱对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6的影响。结果表明,辣椒碱单药和辣椒碱与脂多糖复合均能促进脾淋巴细胞增殖,辣椒碱单药能促进淋巴细胞IFN-γ和IL-6的分泌。辣椒碱单药能增强巨噬细胞的吞噬功能,促进巨噬细胞TNF-α和IL-6的分泌。辣椒碱具有免疫调节作用。     

NOD1/NOD2介导的信号通路在小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎中的作用

为研究NOD1/NOD2介导的信号通路在金黄色葡萄球菌(S.aureus)引发小鼠乳腺炎中的作用,本实验通过人工接种不同剂量的S.aureus复制小鼠乳腺炎模型,利用组织切片法观察小鼠乳腺病理变化,采用荧光定量PCR方法检测乳腺组织中NOD1、NOD2、下游的受体作用蛋白2(RIP2)、核转录因子κB(NF-κB)以及炎性细胞因子TNF-α、IL-6的m RNA转录水平。结果显示,接种S.aureus的小鼠乳腺组织中炎性细胞增多,NOD1、NOD2、RIP2、NF-κB、IL-6、TNF-α的m RNA转录水平比未接种对照组均显著升高(p0.05),TNF-α、IL-6的m RNA转录水平变化与NOD1/NOD2相一致。以上结果表明NOD1/NOD2受体及其介导的炎性信号通路参与了S.aureus感染小鼠乳腺的免疫反应。     

羊口疮病毒B2L、F1L基因融合真核表达质粒诱导小鼠的免疫应答及IL-2对其作用影响的研究

为评价羊口疮病毒(OrfV)B2L、F1L基因融合真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L免疫小鼠诱导的体液和细胞免疫应答及IL-2对其免疫作用的影响。本研究将构建的pVAX1-B2L-F1L真核质粒转染MDBK细胞后,采用RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)检测B2L-F1L融合基因在MDBK细胞中的表达;将pVAX1-B2L-F1L、pVAX1-B2L-F1L+pVAX1-IL-2、pVAX1空载体、生理盐水对照组KM系小鼠通过后腿肌肉注射的方式免疫,采用ELISA方法检测免疫小鼠血清中OrfV特异性抗体以及Th1型(IL-2、IFN-γ)、Th2型(IL-4、IL-6)细胞因子;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应。结果显示,pVAX1-B2L-F1L重组质粒能够在MDBK细胞中表达;pVAX1-B2L-F1L+pVAX1-IL-2联合免疫组小鼠血清抗体及IL-2和IFN-γ水平均显著高于pVAX1-B2L-F1L组;该联合免疫组小鼠血清IL-4、IL-6细胞因子水平与pVAX1-B2L-F1L组相比差异不显著(p>0.05);该联合免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖水平高于pVAX1-B2L-F1L组(p<0.05)。由此表明,pVAX1-B2L-F1L能够诱导小鼠产生OrfV特异性体液免疫和细胞免疫应答,联合pVAX1-IL-2诱导的免疫反应以细胞免疫应答为主,且能够促进Th1型细胞因子的分泌。本研究为OrfV基因工程疫苗的研制提供了参考依据。     

中草药制剂对江汉土鸡免疫、血脂及肠道酶活的影响

选取同一鸡舍同一批的1200只44周龄的江汉鸡随机分成5组,每组5个重复,每重复48只鸡,试验期9周,自由采食饮水。第1组为空白对照组,第2、3、4和5组为试验组,试验组在基础日粮中分别添加100mg/kg黄芪多糖+30mg/kg小檗碱、200mg/kg黄芪多糖+30mg/kg小檗碱、100mg/kg黄芪多糖+60mg/kg小檗碱及200mg/kg黄芪多糖+60mg/kg小檗碱。试验结束时每重复杀1只鸡,采血,分别取小肠三段的食糜备用。试验结果表明:黄芪多糖和小檗碱复合制剂对各处理组的总蛋白、球蛋白和碱性磷酸酶(ALP)都有显著影响;对血脂各指标都有一定的影响,但结果没有一定的规律性;对十二指肠的淀粉酶活和蛋白酶活影响显著,对空肠及回肠的淀粉酶活和蛋白酶活影响不显著,但均有一定的增加。     

地黄提取物对小鼠免疫功能的影响

为研究地黄提取物对小鼠免疫功能的影响,灌胃给予小鼠地黄提取物,通过免疫器官指数、小鼠碳粒廓清指数、白细胞总数,流式细胞仪检测NK细胞活性,ELISA试剂盒检测血清中IL-2、TNF-α生成水平评价地黄提取物对小鼠非特异性免疫的影响;通过流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群(CD4~+T/CD8~+T),MTT法检测脾淋巴细胞增殖水平、血清溶血素抗体生成水平以及血清中IgG、IgA含量评价地黄提取物对小鼠特异性免疫的影响。结果显示,地黄提取物可显著提高免疫器官指数,提高碳粒廓清指数,IL-2和TNF-α水平也明显提高。T淋巴细胞比值、血清溶血素水平及脾淋巴细胞增殖率显著提高;地黄提取物不同剂量组小鼠血清IgG、IgA水平也有不同程度地提高。结果表明,地黄提取物能促进小鼠免疫功能。     

太子参多糖对环磷酰胺所致肠道黏膜损伤小鼠SIgA、IL-2、IL-6含量的影响

试验将36只18~22 g雄性昆明小鼠随机分为空白对照组、太子参多糖对照组(400 mg/kg体重)、环磷酰胺(CY)模型组、太子参多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg体重),上述各组分别灌喂蒸馏水和多糖,连续灌胃19 d,第20天,除空白对照组和太子参多糖对照组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射CY(100 mg/kg体重),24 h处死小鼠,取十二指肠和回肠,放免法测定分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,研究太子参多糖对CY所致肠道黏膜损伤小鼠中SIgA、IL-2、IL-6分泌的影响。结果显示,与CY模型组相比,太子参多糖高、中剂量组十二指肠SIgA含量显著升高(P<0.05),太子参多糖高剂量组回肠SIgA含量极显著升高(P<0.01);太子参多糖高剂量组中十二指肠和回肠IL-2含量显著升高(P<0.05),十二指肠IL-6含量极显著升高(P<0.01),回肠IL-6含量显著升高(P<0.05)。上述结果表明太子参多糖在一定程度上能颉颃CY所致的肠道黏膜免疫损伤。     

日粮铁缺乏与补充甘氨酸螯合铁对小鼠十二指肠抗氧化能力、铁转运和炎性细胞因子表达的影响

试验旨在探究铁缺乏和补充甘氨酸螯合铁（Gly-Fe）对小鼠十二指肠抗氧化能力、铁转运、炎性细胞因子表达的影响。将18只4周龄的C57BL/6J雄鼠根据体重随机分为对照组、5 FeSO4组和45 Gly-Fe组，每组6只。对照组小鼠饲喂含有45 mg/kg FeSO4的AIN93G日粮，5 FeSO4组小鼠饲喂含有5 mg/kg FeSO4的AIN93G日粮，45 Gly-Fe组小鼠饲喂含有45 mg/kg Gly-Fe的AIN93G日粮。适应期为7 d，试验期为20 d。结果表明：与对照组相比，5 FeSO4组小鼠十二指肠绒毛高度降低、隐窝深度增加、绒毛高度与隐窝深度比值降低（P<0.05），十二指肠铁含量降低（P<0.05），铁转运蛋白1(Fp1)基因表达水平升高（P<0.05），十二指肠组织中过氧化氢（H2O2）含量升高（P<0.05）；与对照组相比，上述指标在45 Gly-Fe组中均无显著变化。与对照组相比，5 FeSO4组小鼠十二指肠中抗氧化相关基因Nrf2、NQO1、GSTA4无显著变化，白介素6(IL-6)和IL-22基因表达水平升高（P<0....     

表达猪圆环病毒2型cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌在小鼠诱导的免疫应答分析

旨在构建表达猪圆环病毒2型（PCV2）cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri,L.reuteri）,并评价其在小鼠体内诱导的免疫应答效果。利用PCR扩增实验室分离保存的PCV2b型毒株的cap蛋白基因,以猪源L.reuteri为宿主菌,构建表达cap蛋白的重组菌株pPG-T7 g10-PPT-cap/L.reuteri,通过口服免疫BALB/c小鼠。采用间接ELISA方法测定免疫后小鼠血清中抗原特异性IgG抗体水平,粪便、鼻腔洗液、生殖道洗液、肠黏液中抗原特异性sIgA抗体水平,小鼠血清中各细胞因子水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平;流式细胞技术检测小鼠脾淋巴细胞中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞的水平;荧光定量PCR检测免疫后攻毒的小鼠体内器官的病毒载量。结果显示,口服免疫重组乳酸菌组小鼠血清IgG抗体水平显著高于对照组（P<0.01）;小鼠粪便、鼻腔洗液、生殖道洗液、肠黏液中sIgA抗体水平显著高于对照组（P<0.01）;小鼠血清中细胞因子水平和对照组相比,IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-12水平升高,IL-10水平降低,IFN-α无显著变化;体外孵育PCV2和小鼠脾淋巴细胞结果表明,重组乳酸菌组小鼠脾淋巴细胞增殖刺激指数显著高于对照组（P<0.01）;流式细胞技术检测结果显示,口服免疫重组乳酸菌组小鼠脾细胞中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞含量高于对照组;荧光定量PCR结果显示,相比于对照组,口服免疫重组乳酸菌组小鼠体内的病毒载量明显低于对照组。综上所述,本研究成功构建了表达PCV2 cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌,经口服途径免疫动物,构建的重组乳酸杆菌能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,且具有一定的免疫保护效果。     

山豆根多糖对感染PRRSV小鼠脾脏细胞因子水平的影响

探讨山豆根多糖对PRRSV感染小鼠脾淋巴细胞分泌细胞因子水平的影响。将70只昆明种小鼠随机分为7组(A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组),每组10只,雌雄各半,依据前期已经建立氧化应激模型的感染条件,D组、E组、F组、G组小鼠于试验第1、2、3天分别采用口服、滴鼻和腹腔注射3种途径联合感染PRRSV病毒原液1.0mL/只,A组、B组、C组给予生理盐水1.0mL/只。第4、5、6天,A、D组小鼠分别腹腔注射生理盐水,0.2mL/10g。B组小鼠腹腔注射5.0mg/kg的脂多糖(LPS)溶液,C组、E组、F组、G组小鼠分别腹腔注射不同剂量的山豆根多糖(200、50、100、200mg/kg)。供试小鼠均于第14天处死,并取其脾脏制备匀浆。采用ELISA检测脾匀浆中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和MCP-1等细胞因子的水平。结果显示,PRRSV感染小鼠后能升高小鼠脾脏匀浆内TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和MCP-1水平,50mg/kg~100mg/kg剂量的山豆根多糖能降低上述细胞因子的水平。结果表明,山豆根多糖能有效降低PRRSV感染小鼠脾脏细胞因子的水平。