利用同源菌株融合改良农抗5102产生菌——吸水链霉菌应城变种的研究

 农抗5102产生菌-吸水链霉菌应城变种(Streptomyces hygroscopicus var.yingchengensis)产生至少3种不同性质的抗生素,分别对水稻纹枯病、棉花立枯病、棉花炭疽病、玉米小斑病、棉花枯萎病等具有良好的防治效果或应用潜力。     

用紫外分光光度法测定农抗120效价

以农抗120的主要组份A的不同浓度单位对其紫外吸收值作曲线,显示浓度与吸收值之间有显著回归关系。对4个厂家的农抗120产品进行分析,证明用紫外分光光度法测定与生测法的结果差异不显著。应用紫外分光光度法测定农抗120效价,速度快、灵敏度高、准确性好、操作简便。因此,紫外分光光度法可以应用于测定农抗120效价。     

农抗120防治小麦白粉病的应用技术研究

1989—1990年在河南省8个县市对农抗120防治小麦白粉病进行了田间试验。结果表明:在4月上中旬,小麦白粉病发生的病株率达15～20％,病叶率10％左右时,应用100ppm农抗120喷雾防治2次,防效达70～85％。防病效果与防治时间、喷药次数和发病程度关系密切。施药越晚,效果越差。农抗120的防治效果优于多菌灵等常用化学药剂,在发病初期喷药2次,防治效果与施用粉锈宁相近,可作为粉锈宁紧缺情况下的首选替补药物。但在病害大流行时施用,作用缓慢,效果较差。     

利用双亲灭活原生质体融合技术选育高效苏云金芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌融合菌株

苏云金芽胞杆菌B7发酵液在药后96 h对小菜蛾2龄幼虫致死率高达85.06%;枯草芽胞杆菌TL2对黄瓜枯萎病和辣椒疫霉病有显著拮抗活性(对峙培养5 d对病原菌的平均抑制率在60%以上)。本文对菌株B7和TL2的原生质体形成、完全灭活及融合的最佳条件分别进行了筛选,研究结果表明菌株B7在溶菌酶1.0 mg/m L、酶解70 min的条件下,原生质体形成率和再生率最佳,分别为85.0%和29.41%;菌株TL2在溶菌酶1.25 mg/m L、酶解50 min的条件下,原生质体形成率和再生率最佳,分别为80.00%和25.00%。菌株TL2原生质体完全灭活的最佳条件为60℃水浴35 min,菌株B7原生质体完全灭活的最佳条件为紫外照射25 min。灭活后的两亲本融合最佳条件为30℃水浴融合20 min后涂布再生培养基,用影印法连续传代10次以上,最后筛选出17株稳定的融合子,经过杀虫防病检测最后筛选到一株兼具两亲本特性的高效融合子TLB15。TLB15发酵液在药后96 h对小菜蛾2龄幼虫校正死亡率为93.44%,TLB15发酵液对黄瓜枯萎病和辣椒疫霉病(对峙培养5 d)的平均抑制率分别为60.00%和62.79%。     

中生菌素高产菌株的选育

通过中生菌素高产菌株初筛研究，得到在培养基的ｐＨ值为７．０时，菌落琼脂柱对指示菌抑制圈的大小与其产素量成正相关；在此基础上，比较了用紫外线处理、低温和紫外线复合处理、原生质体加紫外线复合处理及原生质体融合等４种育种方法，结果所用方法都能有效地提高中生菌素产生菌的效价，其中原生质体加紫外线处理的方法最佳。最终得到了４株高产菌株，产素量比亲株提高了５０％￣９０％，达到５０００￣６５００μｇ／ｍＬ。     

农抗120防治西瓜枯萎病的试验研究

1987～1989年进行了农抗120与常用化学杀菌剂防治西瓜枯萎病的药效对比,及不同使用期农抗120的防病效果试验,结果表明,全省多点用300倍农抗120,施药2次,防治西瓜枯萎病的效果平均为83.91±11.86％,比常用化学杀菌剂高23～43％,农抗120的防效与施药时期关系密切,两次灌根时间都应在发病之前,第一次施药时间:直播西瓜在4～5片真叶期,移栽西瓜在苗床期,右,据河南省120个县市,11万亩西瓜的防治示范结果,隔7～10天,进行第二次施药,病株率已控制在0～8％左平均防效为70～95％,每亩挽回西瓜损失200～400公斤。     

农抗120应用技术中的几个问题

通过近5年的大量田间试验和20万公顷作物上的防治实践,作者认为农抗120对枯萎病的主要抑菌机理是通过植物体的吸收,在体内产生尚未知的生理生化过程,显著提高植物的抗病和免疫能力。因此,在农抗120应用中应贯彻防重于治的原则。作者对防治瓜、菜枯萎病提出了一套浸种,苗床处理,移栽浇穴,苗期灌根等技术措施,并对施药时机和用药量等因素与防治效果的关系做了详细讨论。文章对农抗120防治其它作物叶部病害及果树腐烂病试验、示范及技术要点也做了说明。还讨论了农抗120使用中应注意的事项。     

农用抗生素120有效成份的研究

刺孢吸水链霉菌北京变种（即农抗１２０产生菌）发酵代谢产物具有多种成份，脂溶性成份是其中一类活性物质。作者采用溶媒提取法，一次性提取收率超过５０％。分离纯化后的纯品（Ａ）的紫外、红外光谱图与Ａｎｉｓｏｍｙｃｉｎ相同。（Ｂ）为四烯类物质。（Ａ）对水稻纹枯病等几种作物病原真菌，在平皿中抑菌测定有很高活性     

4%增效农抗120对几种主要果树病害的试验效果

利用 4%增效农抗 1 2 0水剂 ,针对苹果轮纹病、苹果轮斑病、苹果炭疽病和梨黑星病 4种病害开展了室内和田间试验。对苹果轮纹病菌、炭疽病菌和轮斑病菌的室内抑菌试验采用平板稀释法测定 ,对梨黑星病菌采用孢子萌发法测定。室内对 4种病菌的EC50 分别为 1 .92、5.56、1 7.1 4、4 3 6mg/L。田间试验结果 :4%增效农抗 1 2 0浓度为 68mg/L防治 4种病害的效果分别为75 3 3 %、90 1 6%、73 2 2 %、81 61 % ,均高于对照药剂多菌灵 560mg/L防治 4种病害的效果     

农抗120对苹果树腐烂病菌的作用研究

试验表明:农抗120单用,和农抗120加助剂B,对苹果树腐烂病菌菌丝的生长,均有明显的抑制作用。最小抑菌浓度为250μg/ml和125μg/ml;最小杀菌浓度为2000μg/ml和1000μg/ml。其杀菌作用机理是使病菌体的原生质凝集,小分子物质外流,形成大量空泡,菌体重量剧减。病菌在该浓度中浸泡12小时后便失去致病力。涂药试验:先刮除病斑,再用农抗120 1000μg/ml或农抗120加助剂B500μg/ml涂抹处理,16天后复发率仍为零,不刮除病斑,只用刀划刻病枝再涂药液,4天后病斑又继续扩展。     

农抗120防治花生叶斑病药效试验

在山东省经多点试验,用200倍农抗120防治花生叶斑病,防效达69.6～78.1％,比500倍多菌灵防效57.4～66.5％,高11.6～12.2％。并对花生有刺激生长的作用,喷施农抗120的主茎高26.2厘米,侧枝长31.4厘米,单株果重18.8克,比对照主茎高1.3厘米,侧枝长2.3厘米,单株果重增加2.7克,增产11.6～18.5％。     

农抗120对水稻纹枯病菌抗生活性试验

采用平板培养法测定农抗120对水稻纹桔菌的抗生试验结果,表明农抗120对水稻纹枯病菌的抗生作用为抑制菌丝生长,使菌丝畸变。菌丝顶端产生不正常的分枝,分枝与主轴成直角,菌丝先端扭曲变形,不形成菌核。农抗120对纹枯菌的抑制生长最低浓度为12.5μg/ml,抑制纹枯菌核形成的最低浓度为100μg/ml,可推迟形成菌核,有效地控制水稻纹枯病流行和扩展。     

农抗120防治西瓜枯萎病菌的室内药效实验

实验室内观察农抗120(500ppm)不能完全抑制西瓜枯萎病菌孢子萌发,但萌发的菌丝出现变形现象(菌体原生质凝集,内含物清晰可见),直接抑病效果比双效灵(2000ppm)差(25℃培养7天抑菌半径差8毫米),但两者都能使西瓜枯萎病菌变形生长。农抗120(100ppm)对土壤中的西瓜枯萎病菌的抑制作用比双效灵(500ppm)强。其预防作用大于治疗作用。     

生物药剂防治苹果树腐烂病的田间试验

河南省自1987年开始在孟县、卢氏等县265亩苹果园中进行生物药剂治疗苹果树腐烂病的试验示范。以刮皮法和划刻法用农抗120、S-921和843康复剂涂抹病疤,一年后在发病季节调查。以刮皮法用农抗120处理的病疤,治愈率达100％,无一复发。以划刻法用农抗120处理的病疤治愈率为78-90％,以S-921和843康复剂处理的治疗效果达100％。作者认为这些生物药剂可取代福美砷治疗苹果树腐烂病。