番茄采后早疫病菌拮抗菌的筛选及发酵条件优化研究

[目的]筛选番茄采后早疫病菌拮抗菌,并优化其发酵条件。[方法]从番茄果实中分离出15株菌株,通过平板对峙法从中筛选出对番茄早疫病有拮抗效果的菌株,并对其摇瓶发酵培养条件（pH、温度、培养时间、转速、装瓶量和接种量）进行了优化。[结果]从番茄果实中筛选出了对番茄采后早疫病菌具有明显拮抗效果的菌株004,其最佳发酵条件为：初始pH7.0,温度30℃,装液量100/250 ml,接种量2.0%,培养时间48 h,转速210 r/min。通过发酵条件优化,发酵滤液抗菌活性得以提高,抑菌圈从0.20 cm提高至0.70 cm。[结论]为防治番茄早疫病菌提供了参考。     

马铃薯早疫病菌化学防治及抗药性研究进展

综述了生产中马铃薯早疫病化学防治、主要防治药剂及其作用机理、早疫病菌对常用杀菌剂抗性发生现状、抗性菌株生物学特性和抗药性机制的研究进展,并提出了防治早疫病菌的杀菌剂抗性治理策略和研究展望。     

木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌的拮抗作用

为了明确木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌的拮抗作用和拮抗机制,采用平板对峙培养试验和木霉菌T-115D发酵液对马铃薯早疫病菌生长的抑制试验,研究木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌的拮抗作用及其机制。对峙培养结果表明,木霉菌能迅速占领大部分空间,抑制马铃薯早疫病菌的生长,显微镜观察发现,木霉菌菌丝可缠绕和寄生早疫病菌菌丝;木霉菌发酵液对马铃薯早疫病菌菌丝生长有较强抑制作用,在木霉菌T-115D发酵液稀释3倍后对菌丝生长的抑制率为90.4%,发酵原液对马铃薯早疫病菌孢子萌发的抑制率为100%,说明木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌具有明显的拮抗作用,其拮抗机制包括抑制菌丝生长和孢子萌发、营养空间竞争和寄生作用。     

马铃薯早疫病拮抗菌株筛选及其抗菌活性

为更加有效地利用微生物资源控制马铃薯早疫病,采用平板对峙法,筛选马铃薯早疫病病原菌的拮抗菌株,通过含毒介质法探究拮抗菌株的抗菌活性。结果表明:44个供试内生真菌和细菌的菌株中,7株细菌对马铃薯早疫病病原菌有显著的抑菌作用,其中菌株H3的拮抗能力最强,采用平板对峙法显示,菌株H3对马铃薯早疫病病原菌抑菌宽度为5.50 mm;对H3培养基类型进行筛选,含毒介质法显示LB发酵液的抑菌活性最高,16.7%的H3发酵液的抑制率为71.17%;菌株H3发酵液能导致马铃薯早疫病病原菌菌丝形态变化:菌丝顶端出现空泡状的膨大,菌丝隔间细胞变粗变短,原生质收缩。结果说明H3可以拮抗马铃薯早疫病病原菌。     

河北省北部马铃薯早疫病菌对嘧菌酯敏感性的测定与分析

选取2009~2011年采集自河北省张家口、承德两地的74株马铃薯早疫病菌(Alternaria solani),用抑制分生孢子萌发的方法,进行嘧菌酯敏感性测定,旨在为生产上科学使用嘧菌酯提供理论依据。结果表明,嘧菌酯的EC50介于0.01~0.13μg/m L之间,平均EC50为0.04μg/m L。处于敏感基线的菌株(EC500.01~0.07μg/m L)占总数的87.84%。2009~2011年所采集的早疫病菌对嘧菌酯敏感性随年度略微有所下降,不同地区采集的菌株对嘧菌酯的敏感性也有差异。因此,河北省北部地区马铃薯早疫病的防控仍可以使用嘧菌酯,但不可盲目,并实时检测菌株的抗药性。     

代森锰锌和戊唑醇对马铃薯早疫病菌不同菌株的毒力

[目的]明确代森锰锌和戊唑醇对马铃薯早疫病菌不同菌株的毒力。[方法]采用菌丝生长速率法测定了从西南北部马铃薯主产区采集的35株马铃薯早疫病菌对代森锰锌和戊唑醇2种杀菌剂的敏感性。[结果]代森锰锌和戊唑醇对所有菌株均表现出较强的抑制作用。其中,代森锰锌的EC50为1.000 0~10.000 0μg/ml,平均为5.100 0μg/ml;戊唑醇的EC50为1.000 0~7.000 0μg/ml,平均为3.300 0μg/ml。[结论]该区域内马铃薯早疫病的防控仍可使用代森锰锌和戊唑醇,但要注意药剂交替使用,并实时监测菌株的抗药性。     

拮抗菌对番茄早疫病的防治效果

针对早疫病对番茄生产造成的严重危害,为筛选番茄早疫病的强拮抗菌、探索生物防治的可行性,从不同番茄栽培地土壤中分离微生物,以番茄早疫病菌为指示菌,通过纸片扩散法进行拮抗菌的初筛和复筛,共筛选到3株对早疫病菌有拮抗作用的生防菌株。田间防效试验结果表明,3株生防菌株的防治效果分别是放线菌FX-03为75.6%,细菌XJ-02为67.1%,细菌XJ-11为51.9%,其中,放线菌FX-03的防治效果最好,达到了75%以上。     

对番茄早疫病拮抗菌的筛选

通过拮抗菌—番茄早疫菌平板对峙拮抗试验和拮抗菌液体培养对番茄苗期早疫病的作用试验 ,筛选出 94 - 16 2 ,94 - 16 1,94 - 2 2 2 ,94 - 134′ ,94 - 54′ ,94 - 2 2 7为抑菌效果较好的菌株。在平板对峙拮抗试验中 ,拮抗菌对番茄早疫病菌有致畸作用。细菌计数也表明 ,PDA培养基较NA培养基更适合这些菌株的培养     

YAG激光对番茄早疫病菌拮抗菌WB7的诱变效应

[目的]探明YAG激光对枯草芽孢杆菌WB7诱变作用。[方法]采用YAG激光(波长1060 nm,功率7 W)照射1株对番茄早疫病菌有拮抗作用的枯草芽孢杆菌WB7,综合各辐照时间组里菌株致死率和正变率的大小以及拮抗能力提高程度,分析不同辐照时间对WB7生长以及诱变的影响效果。采用连续传代培养,测定正变株拮抗能力的遗传稳定性。[结果]利用YAG激光辐照枯草芽孢杆菌对WB7有显著的诱变效应,不同辐照时间的诱变率有显著性变化,辐照1.5 min诱变作用最强,且正变率最大;筛选的最佳突变株WB7-L1.5’5高抗番茄早疫病菌,经过7代传代试验证明其可稳定遗传。[结论]该研究建立了YAG激光诱变枯草芽孢杆菌WB7的试验体系,对番茄早疫病的生物防治具有广阔的应用前景。     

21种植物提取物对番茄早疫病菌等3种病原菌抑菌活性的初步研究

[目的]为进一步开发植物源杀菌剂提供理论参考。[方法]采用菌丝生长速率法测定并分析油茶籽等21种植物甲醇提取物对番茄早疫病菌、番茄芽枝病菌、甘蔗凤梨病菌的抑菌活性。[结果]结果表明,浓度为10mg干粉/mL溶剂时,对番茄早疫病菌抑菌活性较强的有油茶、水茄等的提取物,抑菌率分别为76.67%、78.08%;对番茄芽枝病菌抑菌活性较强的有香茅、深山含笑等的提取物,抑菌率分别为100%、69.20%;对甘蔗凤梨病菌抑菌活性较强的有油茶、甘草等的提取物,抑菌率分别为100%、74.02%。[结论]油茶和甘草的甲醇浸提物对供试的3种病原菌具有较强的抑菌活性。     

番茄早疫病菌抗嘧菌酯突变体培养特性研究

通过对番茄早疫病菌抗、感嘧菌酯菌株的培养基营养条件、pH以及温度的改变,了解抗性菌株的生物学特性。结果表明:抗、感菌株之间的营养利用情况不同,敏感亲本在以可溶性淀粉为碳源和以蛋白胨为氮源的培养基中菌丝生长最快,而抗性菌株在葡萄糖和牛肉膏的培养基中生长最快;对pH值的要求也略有差别:抗、感菌株均在pH值为6、7时生长较迅速,抗性突变体在pH值为7时生长最快而亲本菌株在pH值为6时生长最快。二者在不同温度下生长情况基本相似:在4～30℃温度范围内菌丝均能生长,以20～25℃生长最快。其中在4～25℃之间菌丝生长速度随温度升高而加快;在25～30℃之间则随温度升高而减慢,在35℃几乎不生长,各温度下敏感亲本菌丝生长速度均比抗性突变体快。     

牡丹根腐病拮抗菌的筛选与鉴定

从菏泽曹州牡丹园采集根际土壤样品6个,从中分离出300个分离物,以牡丹根腐病病原菌(Fusarium solani)为靶标菌,通过平板对峙法筛选出27个具有拮抗性能的菌株,其中MD1、MD4、MD7、MD8、MD64、MD68、MD70具有较强拮抗能力,且拮抗性能稳定。经过形态观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列分析,将MD1鉴定为Bacillus amyloliquefaciens,MD4鉴定为Bacillus malacitensis,MD7鉴定为Bacillus subtilis,MD8鉴定为Pseudomonas chlororaphis;MD64鉴定为Streptomyces albireticuli;MD68鉴定为Bacillus tequilensis;MD70鉴定为Bacillus methylotrophicus。它们的16S rDNA序列在GenBank中注册号分别为JN205338、JN205339、JN205340、JN205341、JN205342、JN205343、JN205344。     

植物内生细菌yc8对番茄早疫病菌抑菌作用研究

测定了植物内生细菌yc8对番茄早疫病菌的抑菌活性。结果表明:yc8发酵液对番茄早疫病菌孢子萌发有较强的抑制作用,EC50为4.22%。对菌丝生长亦有一定的抑制作用。光学显微镜观察证实,发酵液处理后可造成病原菌细胞畸形,胞内物质外泄和细胞壁崩溃。植物离体组织抑菌作用测定结果表明:先喷发酵液后接菌与先接菌后喷发酵液均有良好的抑菌效果。     

两种中药提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑制活性研究

[目的]研究白术和白头翁2种中药提取物的杀菌活性,为其在植物源农药上的开发利用奠定基础。[方法]采用菌丝生长速率法,研究了白术和白头翁2种植物提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抗菌活性。[结果]供试2种中药提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌均具有较好的抗菌活性,其中白头翁提取物的抗菌活性最好,72h白头翁正丁醇提取物对番茄灰霉病菌的抑制率达80.25%;白术石油醚提取物对番茄灰霉病菌的抗菌活性较好,EC50为5.31mg/ml,白头翁正丁醇提取物的抗菌活性较强,EC50为2.93mg/ml。[结论]白头翁提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑制活性较好,值得进一步研究。     

马铃薯丝核菌病生防菌株筛选及其拮抗作用研究

[目的]筛选对马铃薯丝核菌病害具有较好防治作用的生防菌株,并研究其拮抗作用.[方法]采用平板抑菌对峙培养法筛选生防菌,并利用梯度稀释法及共培养法对拮抗作用机制进行初步研究.[结果]筛选出2株对马铃薯丝核菌具有抑制作用的生防菌株PB12、CZS;抑菌试验结果表明,在液体培养时,菌株PB12的抑菌率为98.67％,CZS的抑菌率为98.36％,生防菌液稀释度的变化对抑菌效果无明显影响;在固体培养时,随着生防菌液稀释度的增加,抑菌能力稍有下降.菌株PB12和CZS均可抑制丝核菌菌核的形成.[结论]筛选出2株对马铃薯丝核病菌具有较强拮抗作用的生防菌株PB12和CZS,并通过抑制病原菌菌丝生长和菌核的形成达到抑菌效果.     

新疆地区棉花根际拮抗菌的筛选与鉴定

从新疆地区棉花根际分离出4 028个细菌分离物,以棉花立枯病病原真菌立枯丝核菌(Rhizocto-nia solaniK櫣hn)为靶标菌,通过平板对峙法,获得48个具有拮抗性能的分离物,其中MK48、MK49、MK50及MK51具有较强的拮抗性能,且拮抗性能稳定,具有较好的生防潜力。经过形态观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列分析,MK48为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis),MK49和MK51为枯草芽孢杆菌(Bacillus sub-tilis),MK50是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。MK48、MK49、MK50及MK51的16S rDNA序列在GenBank中注册号分别为:EU272855、EU272856、EU272857、EU272865。     

宁夏野生苦豆子中内生菌的分离及拮抗细菌的筛选

[目的]筛选从宁夏苦豆子中分离出的有生物拮抗活性的内生菌菌株。[方法]采用平板划线法从不同组织中分离内生菌,采用对峙生长法将分离得到的内生细菌对宁夏当地作物的病原真菌做拮抗试验。[结果]分离自宁夏各地的苦豆子内生菌在种类上和数量上都有差异,并且苦豆子不同组织内生菌的种类和数量也有差异;从苦豆子各种组织中分离得到180株内生菌,其中10株内生细菌对5种宁夏当地植物病原真菌有拮抗作用,并且抗逆性较高。[结论]该试验从宁夏各地的野生苦豆子不同组织中分离出内生菌,并筛选出有生物拮抗活性的内生细菌菌株,对于合理开发苦豆子资源具有重要意义。