‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

‘凤丹’牡丹PoERF113基因的克隆及表达分析

为克隆‘凤丹’(Paeonia ostii)花瓣衰老相关基因PoERF113的序列,分析其编码蛋白性质,探索其在不同发育时期花瓣、不同组织和不同品种的表达模式及对乙烯的响应,采用RT–PCR技术,从‘凤丹’牡丹中克隆到花瓣衰老相关基因PoERF113。该基因属于AP2/ERF家族,其开放阅读框(ORF)为636bp,编码1个由211个氨基酸残基组成的蛋白,含有1个AP2保守结构域,不包含跨膜结构,蛋白相对分子质量约为53 000,理论等电点(pI)为5.13,为不稳定蛋白,具有亲水性;qRT–PCR分析结果表明,PoERF113基因在露色期、初开期、半开期、盛开期、始衰期、衰败期均有表达,主要在‘凤丹’露色期的花瓣和叶片中表达;在早花‘凤丹’突变株系中表达量最高;PoERF113基因在早花‘凤丹’突变株系与‘凤丹’中的序列相同,不存在碱基差异;PoERF113基因对乙烯有响应,其表达量随处理时间和生育进程的延长呈逐渐升高的趋势,推测该基因可能与乙烯诱导后导致花衰老进程相关。     

秦岭地区‘凤丹’牡丹居群果期相关性状的表型多样性研究

为了解位于陕西境内秦岭地区的‘凤丹’牡丹居群果期相关性状的表型多样性变异,对8个居群的叶、果的8个质量性状和14个数量性状进行了系统观察。结果表明:‘凤丹’牡丹株形在居群间与居群内均存在变异,而分枝类型、新枝颜色、叶形、果实颜色等仅在居群间存在明显变异,居群内趋于一致性;数量性状上,除单果荚长度外其他均在居群间和居群内存在显著差异。8个居群间不同数量性状的平均变异系数存在一定差异,其中坐果量、单果内种子数、单果荚长度变异较大,单果荚宽度、种子径长变异较小。分析环境因素与所选性状的相关性可知,‘凤丹’牡丹的单果内种子数对纬度存在极显著的负相关,与年均温存在极显著的正相关。     

干旱胁迫下油用牡丹‘凤丹’基因组DNA甲基化分析

利用甲基化敏感扩增多态性技术探究不同干旱处理下油用牡丹‘凤丹’基因组DNA甲基化的水平及其变异模式。结果表明:‘凤丹’4年生植株的基因组DNA甲基化率为93.24%;随着干旱程度的加强,‘凤丹’基因组DNA发生甲基化变化位点的比率呈先上升后下降的趋势;对不同程度干旱处理后的‘凤丹’进行复水,与对照植株相比,复水后的‘凤丹’植株基因组DNA总甲基化率均表现为上升。干旱胁迫下‘凤丹’基因组DNA甲基化出现4种变异模式,表现为15种条带类型。轻度干旱诱导‘凤丹’基因组39.78%的位点发生了甲基化,40.00%的位点发生了去甲基化;重度干旱诱导‘凤丹’基因组46.00%的位点发生了甲基化,38.60%的位点发生了去甲基化,表明干旱胁迫会诱导‘凤丹’基因组DNA甲基化状态发生改变。     

硝酸银对‘凤丹’牡丹愈伤组织褐变过程中酚类物质及相关酶活性的影响

以‘凤丹’牡丹组织培养获得的增殖幼苗为材料,在含有0~5.0 mg·L^-1硝酸银的初代培养基中进行培养后,通过测量总酚含量、单体酚种类及其含量的变化和相关酶活性变化,确定不同浓度的硝酸银对抑制愈伤组织褐化的作用。结果表明,培养基中加入硝酸银能明显减轻褐变,其中2.0 mg·L^-1的综合效果最好且对组培苗正常生长无影响;硝酸银对组培苗褐变过程中产生影响的单体酚有绿原酸、芦丁、香豆酸、对香豆酸、表儿茶素、二氢槲皮素。愈伤组织中总酚含量与褐变等级呈现极显著相关性（P<0.01）,过氧化物酶（POD）活性与褐变程度呈现显著负相关(P<0.05),多酚氧化酶（PPO）活性与褐变程度呈现显著正相关(P<0.05)。     

遮荫处理对‘血红鸡爪械’叶片色素及碳水化合物含量的影响

研究了不同遮荫处理对鸡爪槭的栽培变种‘血红鸡爪槭’叶片叶绿素、花色素苷以及糖和淀粉含量的影响，结果表明：随着光照强度的减弱，‘血红鸡爪槭’叶片中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素以及类胡萝卜素的含量都增多．但光强太弱含量反而会降低；叶片中花色素苷、糖以及淀粉含量随着光照强度降低而减少。     

丹皮酚对烟草花叶病毒的抑制作用

从牡丹皮中提纯的丹皮酚结晶(0.6 mg.mL-1)与烟草花叶病毒(Tobacco m osaic virus,TMV)混合10 m in后对TMV枯斑抑制率达80%以上,说明丹皮酚对叶圆片中的病毒复制具有抑制作用;电镜下观察丹皮酚与TMV混合对粒体形态没有影响;丹皮酚与TMV混合后透析病毒可恢复侵染力,表明丹皮酚对病毒没有直接毒害作用;用丹皮酚喷施叶面不影响病毒侵染;低含量丹皮酚可阻碍TMV-CP的体外聚合,对TMV-RNA无体外抑制侵染作用.据此推测,丹皮酚对TMV的抑制作用可能主要是通过其与TMV-CP结合而影响病毒粒体对叶片表面侵染位点的识别,或影响植株体内TMV-CP亚基的体内聚合.     

凤丹与洛阳红根际微生物及其与根皮中丹皮酚含量的关系

用涂布平板法测定牡丹品种凤丹与洛阳红根际微生物种类及数量,用高效液相色谱仪测定其根皮中丹皮酚的含量,研究牡丹根际微生物及其与根皮中丹皮酚含量的关系。结果表明,凤丹根皮中丹皮酚含量(24.688 g/kg)高于洛阳红(13.024 g/kg);凤丹品种根际微生物数量明显低于洛阳红;丹皮酚含量与根际真菌、细菌数量呈负相关。凤丹和洛阳红根际真菌、细菌与放线菌总量均大于非根际;凤丹根际真菌、细菌数量均小于洛阳红,而放线菌数量大于洛阳红。     

外植体取样时间对‘玉妃’和‘超红’桃初代培养的影响

从2012年7月到2013年10月,以‘玉妃’和‘超红’桃当年生枝上带腋芽的茎段为外植体,研究了不同取样时间对初代培养的影响。结果表明,5月份取样‘玉妃’和‘超红’桃的污染率最低,分别为16%和10%;成活率最高,分别为84%和60%以上。5月份是最佳取样时间。     

水蒸气蒸馏法提取丹皮酚的研究

本实验设计用水蒸气蒸馏法提取牡丹皮中的丹皮酚,选定加水量,加硫酸钠量和温浸时间作为考察的3个因素,各取3个水平.结果发现,提取时加一定量的硫酸钠和延长温浸时间可以提高丹皮酚的提取率.     

水蒸汽蒸馏法提取丹皮酚工艺的研究

通过L16(45)正交试验设计,研究了丹皮粉粒径(A)、浸润时间(B)、氯化钠用量(C)和馏出物量(D)对丹皮酚提取量的影响。结果表明,影响丹皮酚提取量的主次因素为A>D>B>C;最佳工艺条件为丹皮粉粒径0.45mm,氯化钠用量60g/kg,浸润时间3h,收集馏出物量300mL。按筛选的最优工艺重复提取2次,结果表明,第1次蒸馏丹皮酚的平均提取量达23.72g/kg,第2次蒸馏丹皮酚的平均提取量为1.69g/kg,说明第1次蒸馏基本代表了样品内丹皮酚量。     

丹皮提取物和丹皮酚蒸气对药材甲的产卵忌避作用研究

在选择性或非选择性试验条件下,药材甲雌虫对丹皮提取物和丹皮酚蒸气均有明显的忌避行为和产卵忌避反应;在非选择性试验条件下,上述２种物质蒸气对药材甲雌虫还具有一定的杀卵、杀幼虫活性,且丹皮酚的活性明显高于丹皮提取物     

修剪模式下3～4年生‘凤丹’生长规律及产量预测模拟

于2013年每年10月底从育苗基地移栽品质一致的3年生‘凤丹’植株,定植株行距为1 m×1 m,后期生长管理水平一致,对其栽植后进行连续两年平茬,2017年以修剪模式下3、4、5、6年生的‘凤丹’为试验材料,以栽植后平茬过一次的6年生‘凤丹’和未进行修剪6年生"凤丹"为对照组,探究幼年‘凤丹’在修剪模式下的生长状况和生物量分配情况。试图建立一个描述多个生长因子与产量的拟合模型。结果表明:修剪模式下,随着株龄的增加各生长指标、果实各项指标、总生物量、各器官生物量随之增大,根冠比随株龄增大而减小,生物量分配更多的由根系向果实转移,茎和果生物量分配逐渐增大。同株龄植株相比,修剪模式下的植株各项生长指标均大于对照组,且差异性显著(p0.05);果实各项指标以修剪模式下植株均大于对照组,且差异具有显著性(p0.05),修剪模式下6年生籽粒产量能达到2 173.20 kg·hm~(-2);总生物量、各器官生物量也以修剪模式下大于对照组,且差异性显著(p0.05),根冠比以修剪模式下6年生植株最小,为1.07,生物量分配能够使根系向地上部分转移较多。单株产量预测模型为Y=-314.422+102.62B+1.048H-1.093D。拟合优度R~2=0.811(式中:B.株龄;H.株高;D.冠幅;Y.单株产量)。修剪模式下能提高‘凤丹’生长指标,总生物量积累及各器官生物量积累增加,生物量分配能更多的向果实转移,进而提高产量。     

丹皮提取物和丹皮酚对几种中药材害虫的毒杀作用研究

采用熏蒸法和点滴法测定丹皮提取物和丹皮酚对几种中药材害虫的熏蒸及触杀毒力试验结果表明,丹皮提取物对４种仓虫成虫的熏蒸活性大小顺序为：赤拟谷盗＞谷蠹≥药材甲＞玉米象,对药材甲成虫的熏蒸活性丹皮酚明显高于丹皮提取物,随着药物浓度或熏蒸时间的增加,试虫的死亡率明显增加丹皮提取物对药材甲成虫的触杀作用高于赤拟谷盗;对药材甲成虫的触杀作用丹皮提取物高于丹皮酚;随着药物点滴剂量或点滴处理后时间的增加,试虫的死亡率明显增加并利用毒力回归式Ｙ＝Ａ＋ＢＸ中Ｂ值及由此求出的ＬＣ５０或ＬＤ３０值大小比较不同药物对不同虫种的毒力大小     

丹皮酚与牛血清蛋白相互作用的电化学研究

在pH 6.0的B-R缓冲溶液中,采用电化学方法研究了丹皮酚(PAE)与牛血清蛋白(BSA)的相互作用。结果表明:PAE与BSA形成了一种非电活性的超分子化合物,结合常数为7.71×105L/mol,结合位点数为2。PAE与BSA分子上的结合位点可能在BSA疏水腔内。     

丹皮酚及其包合物对葡萄果实脂氧合酶(LOX)的影响

丹皮酚及其包合物明显抑制葡萄果实中LOX酶上升的趋势,对葡萄的保鲜效应与所应用的丹皮酚及其包合物浓度呈显著的正相关。     

牡丹皮中丹皮酚含量的测定

采用紫外分光光度法对牡丹皮中丹皮酚进行测定.牡丹皮中丹皮酚平均检出量为6.142 μg/mL,平均回收率为101.4％(RSD=0.75％).该方法准确、简便、重复性好,可用于牡丹皮中丹皮酚含量测定.     

限根栽培对杂交番茄‘松田粉玉’和‘松田粉娜’产量品质的影响

为解决新疆番茄生产产量及果实品质降低的问题,以新疆主栽品种无限生长型杂交番茄品系‘松田粉玉’和‘松田粉娜’为试验材料,研究不同营养条件下限根栽培对番茄果实可溶性糖、可滴定酸、VC、番茄红素含量等内在品质,单果质量、果实硬度等外在品质以及产量的影响,探讨限根栽培在番茄生产上的可行性。结果发现：限根栽培对杂交番茄品系‘松田粉玉’和‘松田粉娜’产量和品质均有显著的影响。普通栽培模式下,尤其是普通模式低营养或高营养条件下,番茄生长竞争强烈;同一品系在同一营养条件下,不同番茄树果实品质和产量差异均较大,即商品性低,影响果实产量和品质;与普通栽培模式相比,限根栽培能够显著提高番茄产量,改善果实品质。综上,限根栽培是番茄较理想的新型栽培模式。     

三种酶对采后‘海沃德’和‘华特’猕猴桃AsA的氧化作用

【目的】探究‘海沃德’‘华特’猕猴桃果实采后影响抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)氧化的相关酶活性及基因表达差异,为猕猴桃采后AsA氧化机制的系统研究,调控果实成熟和衰老进程,并有效保持果实采后品质和延长贮藏时间等研究提供理论依据。【方法】以‘海沃德’‘华特’猕猴桃作为试验材料,测定两个品种的果实在采后25℃贮藏条件下AsA、总抗坏血酸(total ascorbic acid,T-AsA)、脱氢抗坏血酸(dehydroascorbic acid,DHA)、AsA/DHA、与AsA氧化相关的抗坏血酸氧化酶(ascorbic acd oxidase,AO)、漆酶(Laccase)、抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)的活性及相关酶基因的表达,研究两个品种猕猴桃果实AsA含量变化与AO、漆酶、APX活性及相关酶基因的相关性。【结果】‘海沃德’猕猴桃采后初期AsA含量为86.9 mg/100g FW,到贮藏末期损失约45%,而‘华特’猕猴桃在采后初期AsA含量较高,为610 mg/100 g FW,中期上升至峰值886 mg/100 g FW,末期...     

六味地黄丸中丹皮酚含量的测定

采用紫外分光光度法测定六味地黄丸中丹皮酚含量.结果显示:六味地黄丸中丹皮酚平均检出量分别为5.173 μg/mL,平均回收率分别为101.6％(RSD=1.9％),丹皮酚平均含量分别为9.221 μg/g.该测定方法简便、可靠、准确,可用于该中成药的质量控制.