不同激素对红豆杉愈伤组织诱导及增殖的影响

以南方红豆杉(T.chinensis varmairei)的嫩茎为外植体,探讨了不同激素对愈伤组织诱导及继代增殖的影响。结果表明:以嫩茎为外植体,愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC1g/L+酪蛋白1g/L,但高浓度的2,4-D易使愈伤组织褐化。为了减缓愈伤组织褐化和使细胞持续增殖,继代时选用NAA替代2,4-D,继代培养的最佳培养基为:B,5(去掉Cu2+的B5培养基)+NAA 4.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC0.5g/L+酪蛋白1g/L。     

丝棉木松散型胚性愈伤组织的诱导与增殖

通过建立丝棉木松散型胚性愈伤组织培养体系,为丝棉木组培快繁、体细胞离体诱变育种及遗传转化等研究奠定基础。本试验以丝棉木幼嫩茎段为外植体,研究植物生长调节剂不同种类和浓度对丝棉木松散型胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。结果显示,丝棉木茎段在MS+1.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上可获得胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转接到MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上,每15 d继代培养一次,继代时选择结构松散、质地硬脆的愈伤组织,继代培养2～3次后可获得均质的丝棉木松散型胚性愈伤组织。本研究表明,丝棉木茎段理想的松散型愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D;最适松散型愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D;最适胚性愈伤组织增殖培养基为MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D。     

短柄五加愈伤组织诱导及再生体系的建立

以短柄五加(Acanthopanax brachypus Harms)当年生嫩枝为材料,选择叶片、叶柄为外植体,使用6-BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行短柄五加愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽增殖培养基的最佳配方,建立短柄五加植株的再生体系。结果表明,短柄五加叶片是较适宜诱导愈伤组织的外植体,愈伤组织诱导的培养基是MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率为75.0%;愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,不定芽诱导率为100%;适宜不定芽增殖的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为5.80;同时活性炭能够有效防止愈伤组织诱导过程中的褐化问题。     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

白鹃梅叶片芽再生体系的构建

对白鹃梅叶片芽再生的适宜培养基和适宜条件进行研究的结果表明,2,4-D、NAA、IBA与6-BA组合均可诱导叶片愈伤,但以MS+1 mg/L 2,4-D +0.5mg/L6-BA为愈伤诱导培养基,MS+0.3 mg/L IBA+2mg/L 6-BA+0.1 mg/L TDZ为芽分化培养基,1/2MS+0.3 mg/L IBA为生根培养基最佳.     

杉木愈伤组织诱导及植株再生

以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究了基本培养基、植物激素、凝固剂种类、有机附加物等因素对杉木愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代培养及不定芽分化的影响。结果表明:1/2MS+2,4D2mg/L+6-BA1mg/L+KT1mg/L+糖30g/L是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;1/2MS+2,4-D1mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+糖30g/L适于杉木愈伤组织继代增殖;改良MS+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L+蔗糖30g/L是诱导不定芽发生的最佳培养基。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

丹红杨愈伤组织诱导与器官再生的影响因子分析

采用正交设计,首次建立了丹红杨离体培养技术体系.结果表明:丹红杨叶片最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.20 mg/L+6-BA1.00 mg/L,诱导率为57.50%;叶柄、无芽茎段最佳胚性愈伤组织培养基诱导为MS+6-BA0.30～0.80 mg/L+ZT0.30～0.80 mg/L+NAA0.02～0.05 mg/L,诱导率为82.26%;根最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.00 mg/L+KT0.50～1.00 mg/L+NAA0.50～1.00 mg/L.胚性愈伤组织增殖最佳培养基为MS+BR0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L.胚性愈伤组织分化不定芽最佳培养基为WPM+6-BA0.20 mg/L+TDZ0.001～0.003 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.05～0.10 mg/L.     

紫娇花组织培养中愈伤组织的诱导及植株再生

紫娇花种子经灭菌处理后,于试管内培养基中萌发,取幼苗的下胚轴、子叶,进行愈伤组织的诱导、不定芽的分化及试管苗生根技术的研究。结果显示,紫娇花种子最佳灭菌方式为0.1%升汞浸泡10 min,污染率可控制在37.0%,萌芽率达到86.3%;愈伤组织最适诱导部位为下胚轴,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,诱导率达到83.7%;紫娇花不定芽分化的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,不定芽分化率为48.0%;最适生根培养基为1/4 MS+0.1 mg/L NAA+0.5%AC,生根率可接近100%。     

朱顶红愈伤组织诱导及增殖发育体系的建立及优化

以朱顶红带有小鳞茎的试管苗作为外植体,进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究,结果表明:诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT2.0mg/L。愈伤组织增殖需要的最佳2,4-D 2.0mg/L浓度为1.0mg/L,促进不定芽分化及植株再生的6-BA浓度为0.5mg/L。     

植物生长调节物质对成熟红松合子胚愈伤组织诱导的影响

诱导成熟红松合子胚愈伤组织的关键,是选择正确的诱导培养基以及适宜浓度及配比的生长调节物质。结合松柏类针叶树种体胚发生文献,从7种基本培养基中筛选出LM培养基为最佳诱导培养基;在植物生长调节物质的筛选中,2,4-D优于NAA;LM+2mg/L 2.4-D+(0~0.5)mg/L 6-BA可以诱导出更多的Ⅱ型有效愈伤组织;LM+2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA的诱导培养基中加入0.5mg/L KT或0.5mg/L TDZ,可显著提高有效愈伤组织的诱导率(75.7%)。     

珍稀濒危植物异形玉叶金花组织培养初步研究

以异形玉叶金花幼嫩茎段为外植体,研究不同组合的激素组合及外源物对异形玉叶金花愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+5 g/L椰乳,诱导生根的最佳培养基组合为1/4 MS+0.5mg/L NAA+0.2 mg/L IBA。     

红国王愈伤组织的诱导与植株再生

以"红国王"1年生盆栽的幼嫩叶片、叶柄为外植体,对其进行愈伤组织诱导及植株再生进行了研究,建立了"红国王"高效再生体系。结果表明:以茎段和叶片为外植体时最适宜诱导愈伤组织的培养基均为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.4mg/L;叶片较茎段更易获得愈伤组织;最适宜芽分化的培养基为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0 mg/L+6-KT1.5mg/L+CH100mg/L;继代增殖培养基和生根培养基分别以MS+6-BA0.2⁰.8mg/L和1/2MS+NAA0.5mg/L为最佳;以泥炭与珍珠岩4∶1配比,pH值调制5.8左右,移栽成活率达95%以上。     

“红国王”红掌愈伤组织的诱导与植株再生

以"红国王"红掌1年生盆栽的幼嫩叶片、叶柄为外植体,对其进行愈伤组织诱导及植株再生进行了研究,建立了"红国王"高效再生体系。结果表明:以茎段和叶片为外植体时最适宜诱导愈伤组织的培养基均为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.4mg/L;叶片较茎段更易获得愈伤组织;最适宜芽分化的培养基为:MS(1/2NH4NO3)+6-BA1.0mg/L+6-KT1.5mg/L+CH100mg/L;继代增殖培养基和生根培养基分别以MS+6-BA0.2~0.8mg/L和1/2MS+NAA0.5mg/L为最佳;以泥炭与珍珠岩4:1配比,pH值调制5.8左右,移栽成活率达95%以上。     

不同激素浓度配比对贯叶连翘茎段离体培养不定芽形成和生长的影响

为规模化工厂化快速繁殖贯叶连翘(Hypericum perforatum),满足国际市场日益增长的需求,保护贯叶连翘野生种质资源,用野生贯叶连翘嫩梢带节茎段诱导形成愈伤组织,将愈伤组织作为外植体,继代增殖;以MS(MuraShige and Skoog)为基本培养基,采用随机区组试验设计,3次重复。研究6-BA 3.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L、6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L、6-BA 1.0mg/L+IBA 0.2mg/L对贯叶连翘嫩茎切段愈伤组织诱导形成不定芽数量和高生长的影响,结果显示:3种处理诱导形成不定芽数量、不定芽高生长处理间差异均达显著水平,其中:6-BA 3.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L诱导愈伤组织形成不定芽数量最多,平均为6.971 7±3.463 8个,最高可达24个;6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L对促进不定芽高生长最有利,平均芽长3.333 3±0.738 2cm。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

樟叶越桔愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养体系建立

以樟叶越桔组培苗幼嫩叶片为外植体,研究了植物生长调节剂对其愈伤组织诱导和增殖的影响,建立樟叶越桔的细胞悬浮培养体系。结果表明,樟叶越桔的愈伤组织诱导的适宜培养基为WPM+2.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D+30%蔗糖。樟叶越桔愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合为2.0mg/L ZT+0.4mg/L NAA,得到的蓬松愈伤组织适宜进行其悬浮培养。WPM 3/5有机为适宜的改良培养基,通过细胞悬浮生长曲线的测定,确定樟叶越桔细胞悬浮培养较适宜的继代周期为14d,最长不宜超过21d。     

二穗短柄草植株再生体系的建立

以成熟种子为外植体建立二穗短柄草植株再生体系,结果表明:二穗短柄草成熟种子经1%次氯酸钠消毒液处理20min,接种于MS+4%蔗糖(pH 5.5)培养基中培养5d,萌发率为90%,褐化率为10%,污染率为0;萌发种子转入到愈伤组织诱导培养基MS+1mg/L 6-BA+1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)上继代培养,光照条件下愈伤组织诱导率为86%,黑暗条件下愈伤组织诱导率为64%;二穗短柄草愈伤组织在MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)进行不定芽诱导,不定芽发生率为90%;无根丛生芽继代转入到不定根诱导培养基1/2MS+0.5mg/L IBA+0.25mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)中,5d以后可以见到不定根的形成,15d后不定根发生率为91%;在研究中还发现,二穗短柄草种子萌发后可直接继代转入不定芽分化培养基形成健壮不定芽,不定芽诱导率为94%。     

翡翠珠继代培养技术研究

取翡翠珠茎段为外植体,在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上诱导出愈伤组织,然后分别接种于试验培养基中。结果表明翡翠珠最适继代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+10%椰乳,30d后产生的愈伤组织绿色紧密无褐化,质量增殖13.01倍,体积增殖16.11倍。综合而言,各处理要素对翡翠珠增殖效果均达到显著水平,顺序依次是:NAA6-BA添加物。不同添加物中以10%香蕉泥对翡翠珠的增殖效果最佳。