HPLC法同步测定维生素预混合饲料中5种B族维生素

本实验建立同步测定维生素预混合饲料中烟酸、烟酰胺、维生素B6、维生素B2和维生素B1等5种B族维生素的高效液相色谱(HPLC)法。采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.0 mm,5μm),流动相为p H 3.0的磷酸盐缓冲液(0.01 mol/L KH2PO4-0.005 mol/L辛烷磺酸钠-0.5%三乙胺)-甲醇(V/V,75∶25)等度洗脱,柱温为35℃,流速为1.0 m L/min,紫外检测器在波长275 nm进行检测,外标法定量。结果表明,烟酸和烟酰胺的线性范围为75~1500μg/m L,维生素B6、维生素B2和维生素B1的线性范围为25~500μg/m L,线性相关系数为0.9996~0.9999,平均回收率为98.5%~100.6%,相对标准偏差(RSD)为0.21%~0.61%。此方法具有简单、快速和准确的特点,适用于维生素预混合饲料中5种B族维生素含量的同步测定。     

快速测定预混合饲料中维生素B2的含量

采用荧光标准曲线法对预混合饲料中维生素B2进行测定.本法测定线性范围较宽,在0.0～1.0 μg/mL相关系数为0.99998, 平均回收率为94.55%～102.86%.本法简单快捷,能满足预混合饲料中维生素B2的分析要求.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中的喹烯酮

本研究采用超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中喹烯酮的残留量。样品经乙腈-乙酸乙酯（1:1,V/V提取、正己烷除脂净化后，用乙腈-0.2%甲酸作为流动相，经C18分离、LC-MS/MS多反应监测、正离子模式分析，基质匹配外标法定量。结果表明：在浓度为1.035～103.5 ng/mL，四种饲料喹烯酮基质匹配标准工作曲线线性关系良好，相关系数均在0.998以上；方法检出限为6.0μg/kg、定量限为20.0μg/kg，方法加标回收率为89.6%～116.0%、相对标准偏差为3.44%～7.19%，适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中喹烯酮残留量的检测。     

反相高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇的含量

建立了反相高效液相色谱法测定饲料级喹乙醇、预混合饲料和配合饲料中喹乙醇含量的方法。色谱柱为C1 8,1 5 0× 4.6mm ,5 μm ;流动相为甲醇 +水 ( 1 5∶85 ,V/V) ;检测波长为 2 60nm ;柱温为室温。结果表明 :在 0～ 1 83.2 6μg/mL之间呈现良好的线性关系 ,相关系数r2 =1 .0 ;3个不同浓度样品加样回收率分别为 96.1 4%、98.61 %和 99.42 %。本方法简便 ,快速 ,准确度和精密度较高 ,适用于饲料中喹乙醇含量的测定     

高效液相色谱紫外检测法测定添加剂预混合饲料中叶酸含量

本实验建立了添加剂预混合饲料中叶酸测定的高效液相色谱紫外检测测定方法。样品经碳酸钠溶液提取,通过阴离子交换柱净化富集,高效液相色谱紫外法测定。结果表明:叶酸浓度为0.1~250.0μg/m L时,具有良好的线性关系,样品回收率为79.9%~100.4%,相对标准偏差小于10%,定量限可达0.3 mg/kg,适用于添加剂预混合饲料中叶酸含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定预混合饲料中维生素A乙酸酯的含量

建立了反相高效液相色谱法测定预混合饲料中维生素A乙酸酯含量的方法.色谱柱为C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇;检测波长326 nm.维生素A乙酸酯浓度在0.05～100 IU/mL范围内,峰面积与浓度呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 9.2个不同浓度的添加回收率分别为93.6%和98.3%.     

正相液相色谱法测定饲料添加剂天然维生素E中的生育酚和生育三烯酚的含量

天然维生素E因具有促进动物生长、提高肉品质等功能,已被逐步用于宠物及畜禽饲养,但行业中尚无规范该类饲料及饲料添加剂产品的标准及检测方法。本研究旨在建立采用正相液相色谱-紫外检测器(NPLC-UV)测定饲料添加剂中8种天然维生素E含量的分析方法。样品经甲醇浸润后,以乙酸乙酯/正己烷(3∶97,V/V)为提取溶剂在室温下进行超声浸提。使用Kromasil 60-5 diol(4.6 mm×150 mm)色谱柱进行分离,正庚烷/四氢呋喃(100∶4,V/V)等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40℃,紫外检测波长为292 nm。结果表明:生育酚和生育三烯酚含量在0.2～50.0μg/mL时线性关系良好(R2≥0.999 0),方法定量限为0.01%,加样平均回收率为81.3%～109.8%,相对标准偏差(RSD)小于7.9%。通过对实际样品测定,该方法操作简单,结果准确可靠,有助于规范天然维生素E饲料产品市场。     

高效液相色谱法同时测定预混合饲料中维生素C、维生素B2及其磷酸盐

本研究建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定预混合饲料中维生素C、维生素B2及其磷酸盐形式维生素C-2-磷酸酯(VCP)、维生素B2-5-磷酸钠(VB2P)的方法。预混合饲料用1.5 mmol/L四丁基硫酸氢铵缓冲溶液提取后,进行HPLC检测。采用Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以1.5 mmol/L四丁基硫酸氢铵缓冲溶液(p H=3.0)与甲醇作为流动相,梯度淋洗。在此色谱条件下,维生素C、维生素B2、VCP和VB2P的线性关系良好,检出浓度分别为3、1、1、3 mg/kg,定量限为10、5、5、10 mg/kg。应用该法测定了预混合饲料中维生素C、维生素B2、VCP和VB2P,平均回收率为81.5%~106%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。     

高效液相色谱法测定预混合饲料中的维生素K_3

采用全新的前处理方法直接提取预混合饲料中的维生素K_3,建立一种快速及准确的液相色谱检测预混合饲料中维生素K_3的测定方法。使用有机溶剂少,对人和环境友好。在0.10~20.00μg/m L内,维生素K3的浓度与峰面积呈现良好的线性关系(r=1.000 0),定量限低至2 mg/kg。     

高效液相色谱法测定维生素E粉含量

用高效液相色谱法测定饲料添加剂维生素E粉中维生素E含量。采用EclipseXDBC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(98∶2,V∶V)为流动相,流速为1.2mL/min,检测波长为285nm,柱温为25℃。在此色谱条件下,维生素E在0.104￣0.602mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9998,平均回收率为100.3%,RSD为0.72%。本法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E粉中维生素E含量测定。     

UPLC-MS/MS同时测定配合饲料中6种水溶性维生素的含量

建立了UPLC-MS/MS同时测定配合饲料中6种水溶性维生素(VB1、VB2、VB3、VB6、VB7、VB12)的方法。饲料样品中水溶性维生素用乙酸铵水溶液(p H=4.0)超声提取,吸取上清液过膜后,供UPLC-MS/MS检测。各待测物用Capcell PAK ADME(2.1 mm I.D×150 mm,3 um)色谱柱进行分离,采用50 mmol乙酸铵-甲醇作流动相,梯度洗脱,串联质谱采用电喷雾离子源正模式,在多反应监测(MRM)模式下对6种水溶性维生素进行测定。结果表明,6种维生素在1~20μg/l范围内线性关系良好,相关系数为0.996~0.999。空白加标浓度为10~1 000μg/kg,这6种水溶性维生素的加标回收率为83.5%~106.4%,相对标准偏差(n=6)为3.5%~9.1%,上述饲料中6种维生素的检出限为0.05~1.97μg/kg,定量下限为0.16~6.5μg/kg。方法快速准确、经济实用,符合法规要求,可满足日常检测的需要。     

超高效液相色谱-串联质谱测定预混合饲料中11种蛋白同化激素

试验旨在建立预混合饲料中11种蛋白同化激素的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。饲料样品经乙腈提取后,使用乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）净化,以Phenomenex C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,2.6μm）作为分析柱,乙腈和0.01%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾正电离模式下进行定性及内标法定量分析。结果显示,11种蛋白同化激素在1～100μg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.993 9。甲基睾酮、司坦唑醇和醋酸美伦孕酮的方法检出限为5μg/kg,定量限为10μg/kg,其余8种蛋白同化激素的方法检出限为20μg/kg,定量限为50μg/kg。11种蛋白同化激素的加标回收率为85.38%～115.72%,相对标准偏差（RSD）为0.5%～14.8%。研究表明,试验所用方法操作简单、灵敏度高且定量准确,适用于测定预混合饲料中11种蛋白同化激素含量,可为预混合饲料中的蛋白同化激素类药物非法添加监管提供一定参考。     

快速测定预混合饲料中维生素B2的含量

试验采用荧光标准曲线法对预混合饲料中维生素B2进行测定。该法测定线性范围较宽,在0-1.0μg/mL范围内,其相关系数为0.99998,平均回收率为94.55%-102.86%。这种方法简单快捷,能满足预混合饲料中维生素B2的分析要求。     

饲料中喹诺酮酸酯药物的测定液相色谱——串联质谱法

建立了饲料中喹诺酮酸酯药物的液相色谱—串联质谱测定方法。样品经氨化乙腈提取,再经C18色谱柱分离,利用液相色谱-串联质谱方法进行定性、定量分析,采用电喷雾正离子扫描,外标法定量。结果表明,10种喹诺酮酸酯在1～50ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r2)为0.9988～0.9999。在加标浓度为20～500μg/kg的预混合饲料中,这10种喹诺酮酸酯的加标回收率为70.1%～98.3%,相对标准偏差为0.42%～4.67%,检出限为20μg/kg。该方法步骤简单,易于操作,准确度、精密度和灵敏性高,适用于预混饲料、配合饲料、浓缩饲料中恩诺沙星丙酯、恩诺沙星乙酯、氟罗沙星乙酯、马波沙星乙酯等10种喹诺酮酸酯药物的测定。     

利用沸石吸氨氮机理解决预混合饲料中维生素B_1测定的准确度研究

沸石粉是目前常用作预混合饲料载体的重要组成部分,但由于沸石粉的吸附作用,常会引起某些预混料中维生素B_1含量测定出现较大偏差,回收率低下。本文采用3 mol/mL的氯化铵甲醇溶液作为提取剂,提取液经高效液相色谱进行分离测定,外标法定量。结果表明:通过氯化铵的解吸附作用,使得维生素B_1的回收率由原来的70%提高到了90%以上。     

高效液相色谱法测定维生素E原料含量

用高效液相色谱法测定饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量。采用ODSC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(98+2,V+V)为流动相,流速为1.2ml/min,检测波长为285nm,柱温为(30±2)℃,在此色谱条件下,维生素E在0.104～0.828mg/ml浓度范围内呈良好线性关系(r=0.99994),经方法评估函数的评价表明,方法不存在恒定系统误差和相关性系统误差,方法准确性较好,且方法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量测定。     

反相液相色谱法测定饲料中的金霉素含量

采用反相液相色谱法测定饲料级、预混合饲料和配合饲料中的金霉素含量方法的研究.色谱柱为C18预柱及分析柱150×4.6mm,5μm;流动相为0.01 mol/L草酸溶液-乙腈-甲醇(1032);紫外检测器,检测波长为360nm;柱温25℃.结果为在0.2～50μg/ml之间呈现良好的线性关系,相关系数r为0.9997,3个不同浓度样品加样回收率(n=5)分别为95.96%,98.32%,95.41%.本法简便,快速,准确度和精密度较高,适用于各种饲料中金霉素含量的测定.     

复合预混合饲料中β-胡萝卜素测定方法研究

本文采用高效液相色谱法建立复合预混合饲料中β-胡萝卜素含量的测定方法。样品经皂化萃取浓缩后,用Aglient C18色谱柱,甲醇-异丙醇-二氯甲烷为流动相,在450 nm检测,外标法定量。结果表明:β-胡萝卜素在0～10μg/mL有较好的线性关系,r~2均大于0.999。方法中β-胡萝卜素线性关系良好,检出限为1 mg/kg,回收率为95%～102%,相对标准偏差小于6%。该方法具有稳定性好、灵敏度高等优点,适用于复合预混合饲料中β-胡萝卜素含量的检测。     

高效液相色谱法测定鸡饲料中噁喹酸的含量

建立了测定饲料中口恶喹酸含量的高效液相色谱分析方法。采用乙酸乙酯提取饲料中的口恶喹酸。检测条件为:磷酸溶液-乙腈-四氢呋喃(69∶16∶15,V∶V∶V)作为流动相;C18色谱柱;激发波长325 nm;发射波长369 nm。结果表明,浓度在10～500 ng/mL,线性关系良好,r=0.999。在不同浓度添加水平下,三种鸡饲料中口恶喹酸的平均回收率为85.75%～96.77%,日内变异系数为2.24%～9.63%,日间变异系数为2.35%～8.35%,方法检测限为5.0μg/kg,定量限为16.0μg/kg。     

高效液相色谱法测定饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量

本实验建立了高效液相色谱法测定饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量的方法。取2 g样品以0.1%盐酸-乙腈沉淀蛋白,8000 r/min高速离心3 min后合并上清液,50℃减压旋转蒸发至干。5 mL 0.1%盐酸-乙腈(90∶10,V/V)溶液溶解后通过混合型阳离子交换柱净化,收集洗脱液于50℃减压旋转蒸发至干,用1 mL 0.1%盐酸-乙腈(90∶10,V/V)溶液溶解后,过0.22μm尼龙过滤膜,上机测定。液相色谱条件为:流动相A为0.1%HCl(pH=2.0),流动相B为乙腈,进行梯度洗脱,色谱柱为十八烷基硅烷键合相,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测器为二极管阵列检测器,检测波长为210 nm。实验结果表明,该方法在1~100 mg/kg线性关系良好(r0.999),在预混合饲料、浓缩饲料、配合饲料中添加量为1、10、100 mg/kg时方法的准确性(回收率70%)和重现性(RSD10%)好,可用于饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量的检测。