响应面法优化饲用屎肠球菌QW256增殖培养条件

为明确具有益生潜力的屎肠球菌QW256最适培养基与培养条件,利用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、中心组合设计试验以及响应面法探究不同碳源、氮源、营养因子以及培养条件对菌株屎肠球菌QW256活菌数的影响。结果表明：屎肠球菌QW256菌株最佳增殖培养条件为接种量5%、培养温度37℃、初始pH 7.8;最适培养基成分为糖蜜24.7 g/L、酵母粉10 g/L、玉米浆16 g/L、柠檬酸0.25 g/L、柠檬酸钠5.1 g/L、硫酸镁0.6 g/L及精氨酸0.2 g/L。在优化后的培养基和培养条件下培养17 h时活菌数达1.12×10¹⁰CFU/mL,为其工业化应用提供了试验依据和技术支持。     

饲用粪肠球菌EXW27培养条件的响应面优化

本试验旨在通过将单因素、Plackett-Burman筛选与响应面分析3种方法相结合来优化饲用粪肠球菌EXW 27培养条件。以单因素试验为基础,采用Plackett-Burman试验设计筛选显著影响菌株EXW 27发酵活菌数的培养条件,然后用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,最后通过响应面分析确定主要影响因素的最佳值。结果表明:菌株EXW 27发酵培养条件为:初始pH 7.7、培养温度38.3℃、装液量120 mL/250 mL、接种量6%、摇床转速210 r/min、培养时间18 h,在此最佳条件下,菌株EXW27的活菌数为3.18×1010cfu/mL,比优化前提高了近3倍。     

基于响应面法优化饲用粪肠球菌发酵培养基

为了实现粪肠球菌(Enterococcus faecalis)E_(XW)27的高密度培养,对健康仔猪肠道分离的粪肠球菌E_(XW)27发酵培养基进行响应面优化,以MRS为基础培养基,活菌浓度为评价指标,对发酵培养基中碳氮源、微量元素、缓冲盐体系以及促生长因子等通过单因素试验和响应面试验优化高密度发酵培养的培养基配方,确定最佳活菌浓度时的培养基组成。结果显示:蔗糖57.3 g/L、蛋白胨45 g/L、磷酸氢二钾3.75 g/L、柠檬酸铵3.5 g/L、乙酸钠6.25 g/L、硫酸镁1.5 g/L、硫酸锰0.45 g/L、组氨酸1.4 g/L、维生素C 0.01 g/L、碳酸钙10 g/L。发酵液最高活菌数达到1.03×10~(10) CFU/mL,是相同条件下MRS培养基中活菌数的10.61倍,菌体浓度显著提高,具有实际应用价值。     

屎肠球菌的研究进展

屎肠球菌属于肠球菌科,肠球菌属,是人类和动物体内的正常肠道菌群之一。在饲料应用上,屎肠球菌可作为应用广泛的一类益生菌,在宿主体内可以产生多种益生功效。通常情况下该菌并不会引起宿主发病,但当宿主机体免疫力下降时,便可能引起宿主动物发病。由于其具有较强的耐药性,目前并没有可以用来治疗屎肠球菌感染的特效药。本文主要针对屎肠球菌的培养特性、耐药性以及致病性等进行综述,并就目前新型快速检测方法的应用作一简单的介绍和探讨。     

屎肠球菌CCTCCM2017191发酵培养基的优化

为了实现屎肠球菌CCTCCM2017191的高密度工业化生产,必须提高该屎肠球菌的发酵活菌量,因此对其发酵培养基进行了优化筛选。首先在MRS培养基的基础上进行单因素试验以确定适合该屎肠球菌生长的最优pH值和培养温度以及该菌的最适发酵碳源和氮源;再利用Plackett-Bur-man试验设计分析筛选培养基成分中影响屎肠球菌发酵活菌数的显著影响因子,设计最陡爬坡试验逼近显著因子的最大活菌数响应区域,最后采用中心复合序贯试验设计(central composite circum-scribed design,CCC)和响应面分析法得到显著影响因子的最优配比浓度。获得发酵优化培养基配方为:麦芽糊精20 g/l、酵母浸粉77.22 g/l、结晶乙酸钠6.42 g/l、柠檬酸二铵2.0 g/l、磷酸氢二钾2.0 g/l、无水硫酸镁0.2 g/l、硫酸锰0.04 g/l、吐温-80 0.99 g/l。培养基pH值为8.0,培养温度为37℃。经验证,优化后培养基的发酵菌液活菌数可达6.136×109CFU/ml是相同条件下MRS培养基发酵菌液活菌数的4.63倍,优化方案及所得回归模型切实可靠,成功实现了该屎肠球菌CCTCCM2017191的高密度发酵培养。     

屎肠球菌益生作用研究概述

屎肠球菌是一种益生菌,可以通过吸收动物体内的养分来维持体内肠道菌群的平衡,同时也可以调节动物小肠绒毛的发育,增强其抗病能力等.本文对屎肠球菌的生物学特性、调节胃肠道菌群作用、营养调控作用、益生作用机理、作为饲料添加剂的独特优势以及在药品和食品中的应用等进行了综述,以期为广大同行提供有益参考.     

微胶囊化屎肠球菌及其特性研究

试验采用发酵前包被的工艺,对所筛得屎肠球菌进行微胶囊化,并对微囊化菌体的特性进行了研究。结果表明:所制得微胶囊粒径大小合适,形态好;微囊化培养的屎肠球菌对致病型大肠杆菌K88、K99、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌及沙门氏菌都有较强的抑制作用,其中对大肠杆菌K99的抑菌效果最好;与游离培养状态下相比,微囊化培养的屎肠球菌具有更好的生长优势,更好的抵御高铜、模拟胃液的能力(P<0.01);储存试验表明,4℃条件下,储藏2个月,活菌数基本没有下降。由此可见,微胶囊包被能明显提高屎肠球菌在极端环境下的存活率。     

屎肠球菌发酵工艺优化及菌粉的制备

为应用高活性的屎肠球菌菌粉制作畜禽饲料添加剂,试验对屎肠球菌的发酵培养基、发酵时间、喷粉载体等发酵和制粉条件进行优化。结果表明：最优发酵培养基选用32.50 g/L低蛋白乳清粉、30.00 g/L葡萄糖、2.00 g/L酵母提取物、5.00 g/L蛋白胨、0.15 g/L硫酸镁、0.03 g/L硫酸锰、2.00 g/L磷酸氢二钾,发酵时间为15 h,喷粉载体选用13%扶态粉、2%白炭黑作为保护剂制备菌粉。该方法制备的屎肠球菌菌粉中活菌数约3.46×10⁸CFU/g,可添加于畜禽饲料。     

响应面法优化醋糟发酵条件的研究

[目的]利用响应面法对醋糟发酵条件进行优化。[方法]以Van Soest法测定醋糟中纤维素含量并将其作为考查指标,利用响应面Box-Behnken设计法优化影响醋糟发酵的主要因素。[结果]优化后的最佳发酵条件为:温度36℃、pH值6.5、水分42%;在该条件下,发酵后的醋糟纤维素含量为19.58%,与碱化未发酵醋糟的纤维素含量(27.43%)相比下降了7.85%。[结论]响应面法拟合性良好,可用于醋糟发酵条件的优化。     

响应面法优化蛋黄粉冲调条件的研究

蛋黄粉含有丰富的磷脂,营养价值较高,但在应用过程仍存在溶解度低、黏度大、易结块、易分层等不利于冲调性的问题。本文重点探讨了影响蛋黄粉冲调性的因素,通过单因素试验和响应面优化试验研究冲调水温、冲调水量、蛋黄粉颗粒度对蛋黄粉冲调性的影响规律。单因素试验结果表明,随着冲调水温、冲调水量、蛋黄粉颗粒度的增加,蛋黄粉的冲调性均呈先上升后下降的趋势,且分别在冲调水温为70℃、冲调水量为蛋黄粉质量的20倍、颗粒度为50目时,其溶解度和稳定系数达到最大值。响应面优化试验结果表明最适的冲调条件为:冲调水温70℃,冲调水量为蛋黄粉质量的22倍,颗粒度为60目。在此条件下,蛋黄粉的溶解度为75.86g/100g,稳定系数为78.04%,蛋黄粉的冲调性最佳。     

屎肠球菌自溶的基因表达差异分析

为探讨屎肠球菌自溶状态下基因表达变化,利用高通量测序技术进行RNA-Seq分析。差异基因分析显示,自溶状态下共有783个基因表达出现差异,其中在自溶状态下上调和下调的基因分别为689和94个。GO功能聚类分析显示,差异基因主要富集在细胞、细胞组分、生物合成、有机物质生物合成几个方面。KEGG富集分析发现,差异基因主要参与了核糖体、氨基酰基-tRNA生物合成、嘌呤代谢、肽聚糖生物合成、嘧啶代谢、同源重组、氨基酸合成等通路,且下调的差异基因主要富集在碳代谢、糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢等能量代谢相关通路。说明屎肠球菌自溶状态下代谢出现了明显改变,对碳源的利用不足和合成能力的下降可能是导致屎肠球菌自溶发生的重要原因。通过分析屎肠球菌自溶状态下基因的表达情况,得到了充分的基因数据,为进一步研究屎肠球菌的自溶发生机制提供了基础。     

响应面法优化菜籽粕的酶解条件

菜籽粕因粗蛋白质含量(32%～40%)较高可作为动物潜在饲料来源,但由于纤维含量较高,限制了其在猪和禽饲粮中的应用.本试验采用响应面法对复合纤维降解酶(纤维素酶+果胶酶)酶解菜籽粕的条件进行优化,以期提高菜籽粕的还原糖产量、降低其纤维含量.方法:1)通过响应面试验优化酶解条件——pH(3.2～4.8) 、温度( 45～...     

赛马肠道屎肠球菌的分离鉴定

为初步了解赛马肠道细菌的种类分布情况,以及与赛马细菌性疾病的关系,本试验采集昆明某马场赛马粪便样品进行了细菌的分离培养及16S rRNA基因序列分析,并对筛选出的1株可疑细菌进行了药敏试验。结果显示:该菌的菌落形态、生化特性与屎肠球菌相符;16S rRNA分析表明该菌株与屎肠球菌同源性为100%,即在赛马肠道菌群中存在有屎肠球菌;药敏试验显示该菌对目前常用抗生素仍保持较高的敏感性。本文通过对赛马肠道菌群结构的研究,为赛马可能出现的病症及细菌性疾病的预防和治疗提供一定的指导。     

响应面法优化青贮饲料乳酸菌的培养条件

为更好地提高青贮饲料的质量,降低微牛物接种剂的生产成本,本研究对采集自德国青贮窖中的主导菌群中一株乳酸菌GLP01进行了分子学鉴定,并对培养条件进行了优化.通过单因素试验设计研究培养基组成(碳源,氮源)和培养条件(温度、接种量,起始pH等)对GLP01乳酸菌生长繁殖的影响;采用二次响应面分析方法对GLP01培养条件进行优化,得到GLP01生长模型,以及取得模型最优值时各因素的水平.单因素试验结果表明,GLP01的最适碳源是果糖,最佳氮源是酵母粉;二次响应面分析确定的GLP01最佳培养条件是起始pH 5.47、培养温度35.3℃、接种量8.16%.结果提示,乳酸菌GLP01可以作为微生物接种剂制作青贮饲料,但青贮效果仍有待研究.     

屎肠球菌在蛋鸡上的应用效果研究

选取327日龄海兰褐蛋鸡480只,随机分为2组,每组设5个重复,每重复48只鸡。对照组以玉米、豆粕为基础日粮,试验组在基础日粮的基础上添加0.02%的屎肠球菌。预饲期7天,正饲期30天。结果表明,与对照组相比,屎肠球菌组蛋鸡产蛋率提高了1.73%,破蛋率和料蛋比分别降低了25.93%和2.10%。此外,试验组平均蛋重、蛋壳强度和哈氏单位等蛋品质指标均较对照组有所提高,但差异不显著。总之,在蛋鸡日粮中添加屎肠球菌能够提高产蛋率和饲料转化率,改善蛋品质。     

羊源肠球菌属与屎肠球菌双重PCR检测方法的建立

[目的]建立羊源肠球菌属与屎肠球菌的双重PCR检测方法,对临床分离的菌株进行快速检测。[方法 ]设计肠球菌属特异性和屎肠球菌种特异性引物,建立双重PCR反应体系;评价双重PCR反应的特异性和敏感性;利用混合菌液制备模拟感染样品,确定双重PCR反应对模拟感染样品检测的特异性和敏感性。[结果]建立的双重PCR反应能够特异性的扩增肠球菌属(294 bp)和屎肠球菌(557 bp)DNA片段;该方法对常见的动物源细菌无交叉反应,对肠球菌属的最低检测量为5.71×10-5 ng/μL,对屎肠球菌的最低检测量为5.71×10-4ng/μL;双重PCR反应能够特异性的检测模拟感染样品中的肠球菌属和屎肠球菌,对于模拟感染样品中的屎肠球菌检测量为1×101CFU/m L。[结论]建立的双重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点,为快速鉴定屎肠球菌提供了快速、准确的方法。     

响应面法优化牛血二次发酵条件

在牛血二次发酵过程中会产生出更多的小分子蛋白质,有利于提高动物对牛血蛋白质的吸收和利用,提高牛血在饲料中的利用价值。试验在首次发酵牛血的基础上进行二次发酵,利用响应面法更加准确地寻找出高效的二次发酵工艺及最适宜的发酵条件。试验结果表明:在发酵时间为50 h、温度为30℃和黑曲霉接种量为0.3%时,发酵后牛血小肽含量最高,最大预测值为提高7.7%,实测值为提高7.9%,两者基本相符。     

屎肠球菌QW256冻干保护剂优化及菌粉贮藏稳定性研究

试验旨在探究屎肠球菌QW256菌粉制备工艺。研究屎肠球菌QW256菌粉制备过程中的离心条件、保护剂与复配、菌粉贮藏稳定性等因素对菌体存活率的影响。结果显示：菌体收集的最佳离心条件为6 000 g、10 min,悬浮基质为1.9%硫代硫酸钠溶液,优化后的最佳冻干保护剂配方为甘露醇25.38 g/L、蔗糖34.65 g/L、甘氨酸4.17 g/L和抗坏血酸钠1.57 g/L;在该条件下,屎肠球菌冻干存活率达95%以上,菌粉在25℃保藏100 d的存活率达85%以上。研究表明,复合冻干保护剂的研发对屎肠球菌的冻干及贮藏稳定性具有良好的保护作用。     

屎肠球菌对仔猪肠道健康的影响

屎肠球菌是仔猪生产中常用的益生菌之一。该益生菌不仅能够在仔猪的胃肠道中存活,并维持仔猪肠道菌群平衡,还可以调节仔猪的小肠绒毛发育、养分吸收、免疫功能以及抗衣原体、轮状病毒和鼠伤寒沙门氏菌感染的能力,对仔猪肠道健康有重要影响。本文就上述研究进展进行综述。     

响应面法优化果渣培养生态型菌剂条件研究

通过响应面分析法优化了乳酸菌和酵母菌联合在苹果渣中液态发酵培养的条件,确定最佳培养条件为:料水比1∶10、发酵温度37℃、菌种比例1∶1∶1∶4、培养时间4d,在此条件下活菌总教可达2.39× 108 cfu/mL.