一株饲用贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定及其生理特性

本试验以淀粉培养基和羧甲基纤维素钠培养基为筛选培养基,自AA+白羽肉鸡肠道中分离到1株高产淀粉酶和纤维素酶的细菌菌株CY-03,经形态学和分子生物学鉴定,确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis).对该菌株的产酶能力及其生物安全性进行了初步研究,试验结果表明:菌株CY-03具有高产淀粉酶和纤维...     

一株芽孢杆菌的分离鉴定及其益生潜质分析

 从健康肉鸡的粪便中分离出一株BF3芽孢杆菌,经培养特征、形态观察、生理生化试验以及16SrDNA序列分析相似度为99%,确定该菌株为枯草芽孢杆菌,对该株芽孢杆菌对肠道致病菌的拮抗作用进行研究。结果表明BF3菌株在培养过程中,可以抑制鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌的生长。拮抗作用的强弱与芽孢杆菌和致病菌的接种时间有关。先接种芽孢杆菌后接种致病菌,拮抗作用最强;芽孢杆菌和致病菌同时接种次之;先接种致病菌后接种芽孢杆菌,拮抗作用最弱。并且BF3菌株代谢产物对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌具有非常明显的拮抗作用。     

健康反刍动物源饲用芽孢杆菌的分离筛选和鉴定

为筛选到性能良好的芽孢杆菌,笔者在呼和浩特郊区的几个健康牛羊养殖场采集了粪样、水样等28份样品进行芽孢杆菌资源调查。经分离和纯化培养,共分离出疑似芽孢杆菌35株,并通过16S r RNA及17项生化鉴定对其作进一步的确认和属种鉴定。经16S r RNA分析,有15株为芽孢杆菌属;再经染色镜检,生化试验结果与《常见细菌系统鉴定手册》对比,有枯草芽孢杆菌4株(占26.7%)、蜡状芽孢杆菌5株(占33.3%)、泛酸芽孢杆菌3株(占20.0%)、环状芽孢杆菌2株(占13.3%)、球形芽孢杆菌1株(占6.7%)。说明呼和浩特市郊区健康牛羊养殖场芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌为主,占60%。     

兔巴氏杆菌的分离鉴定及其16S rDNA序列分析

兔巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌(Pm)引起的一种急性、传染性疾病,以败血症和出血性炎症为主要特征,因此又被称为兔出血性败血症[1]。该病的病原为多杀性巴氏杆菌,为革兰阴性、两端钝圆、细小、卵圆形的短杆菌,大小为(1～1.5)μm×(0.25～     

一株贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究

试验旨在从农田土壤中筛选分离得到对革兰氏阳性致病菌具有抑制作用的益生菌.采集农田土壤样本,对样本进行初筛、复筛获得12株菌株.对分离菌株分别进行抑菌能力、产酶能力及安全性测试.结果 显示,测试菌株中的N-3菌株对金黄色葡萄球菌和产气荚膜梭菌均具有较强的抑制能力;具有良好的产蛋白酶、淀粉酶功能,而且无溶血现象,具有一定的...     

一株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及抑菌活性分析

为了对兔源枯草芽孢杆菌进行生化特性及抑菌活性的分析鉴定,试验将1株枯草芽孢杆菌进行扩大培养后,革兰氏染色,镜检,利用PCR技术扩增16S rRNA序列;测序后构建系统进化树,分析遗传变异特性,借助生化管分析生理生化特性,并进行体外抑菌活性分析。结果表明:该菌株为产芽孢的革兰氏阳性菌,在系统进化树中与枯草芽孢杆菌聚为一簇,同源性高达99%,对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌具有一定抑菌活性。     

1株饲用枯草芽孢杆菌培养条件的优化

研究以枯草芽孢杆菌HN-8为菌株,大豆黄浆水为培养基基质,以细胞数为考察指标,利用单因素试验和正交试验考察不同碳源和氮源,不同培养温度、接种量和转速对枯草芽孢杆菌HN-8培养细胞数量的影响。结果表明:最佳碳源为0.5%可溶性淀粉,最佳氮源为0.2%多价胨,最佳培养温度为42℃,最佳转速为210 r/min。     

一株饲用枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

采用响应面分析法对枯草芽孢杆菌L-23产细菌素的培养基成分进行优化。Plackett-Burman试验设计筛选出三个显著因素:豆粕粉、硫酸锌、豆芽汁,在此基础上通过最陡爬坡试验、中心组合设计和响应面分析优化出3个显著因素的最佳浓度。通过验证试验得出最适培养基组成为:葡萄糖1.74%、豆粕2.44%、豆芽汁4.97%、硫酸锌0.06%,混合磷酸盐0.34%,氯化钙0.016%,硫酸镁0.43%,枯草芽孢杆菌L-23摇瓶发酵抑菌圈直径达到41 mm,抑菌圈直径提高52%。     

地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其抑菌活性分析

为了研究不同来源的地衣芽孢杆菌对常见致病菌的抑菌效果等生物学特性，试验采用细菌形态学、生理生化、16S rRNA基因测序、系统发育树分析、牛津杯抑菌试验等检测技术，对5株不同来源(鸡粪、羊粪、牛瘤胃内容物、猪肠内容物及土壤)的地衣芽孢杆菌进行了分离鉴定及体外抑菌活性检测。结果表明：5株分离株B₁₇(鸡粪)、B₃₀(羊粪)、B₃₂(牛瘤胃内容物)、B₃₅(猪肠内容物)和B₃₈(土壤)均可在LB固体培养基上生长，其中有3株不同来源的分离株B₃₀、B₃₅和B₃₈菌落形态相同；镜检可见分离株均为革兰氏阳性杆菌、均有近中生的孢子，符合芽孢杆菌的菌体特征；生理生化特性与芽孢杆菌相符；PCR扩增均得到约为1 500 bp的目的片段;所有分离株与GenBank中的地衣芽孢杆菌在同一簇，均鉴定为地衣芽孢杆菌；在5株地衣芽孢杆菌中，除猪源地衣芽孢杆菌B₃₅外，其余4株均有抑菌作用，羊源及牛源地衣芽孢杆菌B     

6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究

本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨大芽孢杆菌、1株死谷芽孢杆菌、2株解淀粉芽孢杆菌和2株枯草芽孢杆菌;分离菌对多黏菌素和青霉素耐药性较强,对其他12种常用药物较敏感,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好;4种芽孢杆菌均可在酸性、高胆盐和高温条件下生存,特别是巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌耐受能力较强;分离的芽孢杆菌对小鼠均无致病性,其中巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌有较明显的促进试验动物生长的作用。结果提示,巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌可作为益生性芽孢杆菌的初步选择。     

1株牛蛙源贝莱斯芽孢杆菌的分离、鉴定及其生物学特性分析

试验从健康牛蛙（Rana catesbiana）肠道内容物中分离出12株内源菌,筛选对牛蛙病源性嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、铜绿假单胞菌（seudomonas aeruginosa）的拮抗菌株后对其生物学特性进行分析,发现其中1株菌对蛙源嗜水气单胞菌、铜绿假单胞抑制效果最好,抑菌圈直径分别为12 mm和14 mm。通过革兰氏染色镜检、生理生化、16S rRNA鉴定、药物敏感性、生物学特性如菌液接种量、培养温度、转速、初始pH、生长特性等生物学特性进行分析。确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,并取名为G1。此菌株在LB培养基上菌落呈乳白色,向上凸起,表面湿润、光滑、不透明、有黏液性,是革兰氏阳性菌。菌液最适接种量为3%、培养温度为30℃、培养转速为180 r/min、初始pH为7和培养时间为18 h。     

一株新饲用乳杆菌的分离鉴定及益生性研究

从猪粪便中分离得到一株新饲用乳杆菌,对其16S rDNA基因进行了测序,该段基因序列已提交GenBank,登录号为HQ641209。将该菌株16S rDNA基因序列进行在线BLAST比对并与其他乳杆菌属菌株的16S rDNA序列建立系统发育树,结果显示该菌16S rDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii (AB295648)的同源性为99.7%,因此该菌鉴定为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),将其命名为"Lactobacillus johnsonii Sun001"。经测试,该菌株对E.coli K88、K99菌株的生长有抑制作用,在pH为2.5的模拟胃液中处理3 h存活率为68.8%,在0.3%胆盐浓度的模拟肠液中处理3 h存活率为21.4%。     

1株马源致病性蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定

<正>蜡样芽孢杆菌(bacillus cereus)是革兰阳性需氧产芽孢杆菌,一种广泛分布于土壤、水、空气、饲料、食品和环境中产芽孢杆菌。该菌为条件致病菌,容易污染食物和饲料,也可引起牛乳房炎、子宫内膜炎,但还未见马感染该菌的报道。2015年5月,北京市某马术俱乐部赛马皮肤下有直径2~3 cm大小的脓肿结节。结节逐渐增大,突起于皮肤表面,变成脓肿,然后破溃流出黄白色或淡红色脓液,逐渐形成溃疡。溃疡高于皮肤表面     

鸡源芽孢杆菌的分离鉴定与益生菌株筛选

芽孢杆菌广泛存在于自然界中,能够形成内生孢子,有很强的可逆性,而且能在肠道内产生多种消化酶,为动物机体提供多种维生素等营养物质,有效提高动物生长速度和饲料利用率,是制备微生态制剂的理想菌株.     

鸡源巴氏杆菌GZ-TZ2017株的分离及其16S rRNA序列分析

为了探明贵州某肉鸡养殖场突发疾病病因,试验通过解剖、细菌分离、染色镜检、药敏试验、生化试验、16S rRNA的PCR扩增及序列分析等方法对病原进行分析。结果表明:从病鸡内脏中分离得到1株革兰氏阴性、两极浓染的球杆菌,将其命名为GZ-TZ2017;该菌株的培养特性、菌体形态、生化试验特征均与已报道的巴氏杆菌相似;GZ-TZ2017菌株对米诺环素、氧氟沙星和诺氟沙星等抗生素较为敏感,对头孢拉啶、苯唑西林、卡那霉素、青霉素等抗生素耐药;16S rRNA PCR扩增得到大小为1 400 bp左右的目的片段,分离菌GZ-TZ2017与各地分离的多杀性巴氏杆菌的同源性极高,均在99.0%以上;GZ-TZ2017与多杀性巴氏杆菌属细菌属于一个分支,和重庆分离株PM-LK(GenBank登录号为KX579746)、安徽滁州分离株CZ-6(GenBank登录号为KY673151)在同一小分支上,属于禽巴氏杆菌。说明该肉鸡场鸡群感染了禽巴氏杆菌。     

生牛乳中芽孢杆菌的分离鉴定及其耐热性

生牛乳杀菌后残留少数芽孢具有极强耐受性,在一定条件下芽孢大量繁殖,使牛乳发生变质,严重影响产品品质和消费者健康。采集并选择含有芽孢杆菌的生牛乳样品,进行需氧芽孢杆菌和嗜热需氧芽孢杆菌的分离,通过形态学、生理生化和分子生物学方法对分离菌株进行鉴定,同时对分离到的嗜热需氧芽孢杆菌进行耐热性研究。结果表明：共分离出10?株芽孢杆菌,其中3?株为嗜热需氧芽孢杆菌,7?株为需氧芽孢杆菌,其中能耐受115?℃/15?min热处理的有凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌,121?℃/20?min热处理可以将生牛乳中芽孢杆菌全部杀灭,致死率达100%,芽孢数下降4?个数量级;生牛乳中芽孢杆菌的优势菌有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、明胶芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌;耐热性较强的有凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌,最高能耐受115?℃/15?min热处理。     

一株仔猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其益生特性研究

为了筛选优质猪源益生菌菌种资源,为畜禽微生态制剂的研究与开发提供优质候选菌株,试验以健康仔猪新鲜粪便为分离材料,通过高温处理分离芽孢杆菌,并对其进行形态特征、生化及分子生物学鉴定与益生特性研究。结果表明:从健康仔猪新鲜粪便中分离获得多株细菌,选取其中1株生长快速、形态特征典型的菌株进行鉴定,确定该分离菌为枯草芽孢杆菌。益生特性研究表明,该分离菌菌株具有较强的耐热、耐酸、耐胆盐等益生特性,同时具有一定的拮抗致病菌作用,对大部分抗生素敏感,对小鼠无毒副作用,可作为畜禽微生态制剂菌种的候选菌株。     

副鸡嗜血杆菌的分离鉴定及16SrRNA序列分析

从云南省和四川省规模化养鸡场鸡传染性鼻炎疑似病例鸡鼻窦分离到2株革兰氏阴性小杆菌,并对其进行生化鉴 定、PCR鉴定和16SrRNA序列比对鉴定.16SrRNA分析表明两分离株与GenBank中的其他副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,HPg)参考株核苷酸同源性为94.2％～99.2％.两分离菌株鉴定为副鸡嗜血杆菌,分别命名为YNAN20120110和SCPZH20120120株.16SrRNA遗传进化关系表明:分离株与NAD非依赖型副鸡嗜血杆菌血清A型代表株GU951543(HP105strain)的16SrRNA序列位于一个分支上,遗传进化关系最近,它们之间的核苷酸同源性为99.2％;与副鸡嗜血杆菌血清A型参考株AY498867(0083株)核苷酸同源性为96.9％.致病性实验表明分离菌株对成年产蛋鸡有强致病性.抗生素药物敏感试验表明:分离菌株对头孢吡肟、头孢噻吩、氯霉素、卡那霉素和氧氟沙星高敏,对四环素中敏,对磺胺甲唑耐药.     

一株猪源棒状杆菌的分离及其16S rRNA基因分析鉴定

四川某商品猪场仔猪出现以体温升高,背、腹和腿部皮肤发绀,淋巴结出血肿大,肺、脾脏出血、化脓为主要特征的疾病。通过对分离细菌的纯化培养、形态学观察、生化试验、致病性试验和药物敏感性试验,鉴定出一株致病菌。应用通用引物对其16S rRNA基因进行克隆和序列分析,序列在NCBI上进行BLAST比对,选择同源性较高的棒状杆菌属中25株不同种的菌株16S rRNA序列进行比对分析,构建遗传进化树。分离纯化的细菌在鲜血琼脂平板厌氧条件下生长良好,为革兰氏染色阳性杆状菌,能发酵部分糖类,能致死小白鼠,对头孢类抗生素敏感,16S rRNA序列与棒状杆菌属细菌的同源性最高,在78.2%~98.0%之间,遗传进化树分析结果表明,该菌株与棒状杆菌属细菌属于同一分类群,分离菌鉴定为棒状杆菌。