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本研究根据NDV、IBV二种病毒能在鸡胚中繁殖的特点,通过筛选上述二种病毒的最适稀释比例,将混合毒种接种9~10日龄鸡胚尿囊腔内(简称同胚培养)使接种鸡胚尿囊液96h二种病毒毒价同时达到高峰,每0.1ml尿素液含NDV≥10^8EID50,IBV≥10^7EID50。本试验用兔抗NDV,IBV血清抗体封闭相应病毒测定混合毒获得成功,本研究目的在于为制备鸡二联油乳灭活功时改进繁毒方法,降低疫苗成本。 相似文献
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根据NDV、IBV二各病毒混合毒种的最适稀释比例,将混合毒种接种9-10龄鸡胚尿囊腔内(简称同胚培养),使接种鸡胚96h二种病毒毒价同时达到高峰,0.01ml尿囊液含:NDV≥10^8EID50、IBV≥10^7EID50。收获同胚培养的胚毒,制备同胚培养的胚毒,制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫18日龄雏鸡,免疫后4周二联疫苗的有效抗体分别为:ND血凝抑制抗体(HI)≥1:16、IB中和抗体 相似文献
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鸡胚接种NDV病毒后尿囊液量及血凝效价的研究伍富尧,刘治西(莱阳农学院)王元彬,王洪本(临沂市畜牧局)试验I为了解不同来源的鸡胚接种NDV后的尿囊液量及其血凝(HA)滴度的差异,进行本试验。1材料和方法1.1毒种新城疫毒种为LaSota弱毒株,由中监... 相似文献
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本实验目的在于探讨不同毒株鸡传染性支气管炎病毒和鸡新城疫病毒混合接种同一鸡胚尿囊腔培养时二者之间的相互作用。分别将按200倍、500倍、1000倍不同浓度稀释的鸡传染性支气管炎病毒F3株、肾型J株、H12028/86株,H52和H120株和100倍稀释的Lasota鸡新城疫病毒联合接种到10日龄鸡胚尿囊腔,同时设单独培养作对照,96小时后收取尿囊液,用对流免疫电泳法检测鸡传染性支气管炎病毒效价,用血球凝集试验检测尿囊液鸡新城疫病毒效价。结果表明,鸡新城疫病毒对鸡传染性支气管炎病毒增殖无明显促进作用,但无抑制现象;鸡传染性支气管炎病毒浓度过大时,对鸡新城疫病毒有一定抑制作用,在适当浓度时二者之间无干扰作用。以NDV100倍IBV1000倍稀释混合作用后联合接种培养对二者效价均无明显干扰,NDV血凝效价可达11log2,IBV对流免疫电泳沉淀效价可达9log2,效果最佳。联合培养省时、省力、节约鸡胚损耗。 相似文献
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四种消毒剂对鸡新城疫病毒杀灭效果的比较 总被引:7,自引:0,他引:7
应用血凝试验检测中日合资爱丽丝畜牧有限公司送检的四种5%的消毒剂对鸡新城疫病毒的杀灭效果。经过消毒剂对鸡胚致死性实验和NDV城鸡胚中使用浓度的选择实验,确定将消毒剂分别做1:250,1:500,1:1000,1:2000稀释后,与1:500的DNV等量混合,在体外作用不同时间后,接种鸡胚尿囊腔内培养72h,以收取的鸡胚尿囊液血凝价为指标,判断四种消毒剂对NDV的杀灭效果。结果表明Ⅲ,Ⅵ号消毒剂对N 相似文献
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1 材料和方法 11 抗原制备 分别将NDLasota株和EDS76种毒接种9~11日龄鸡胚、鸭胚增殖病毒,收获感染胚液,经检测血凝价(HA)ND为≥1∶640,EDS76≥1∶20480,病毒含量以尿囊腔内注射的感染量≥1060EID50/01ml时,可用于制苗用毒,经甲醛溶液37°C灭活备用。12 油相制备 取10号白油,司本80按一定比例混合后加硬脂酸铝少量,随加随搅拌,煮沸至透明为止,高压灭菌后备用。13 水相制备 将灭活的Lasota.EDS76尿囊液按一定比例混匀后,加入吐… 相似文献
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在对EDS76-NE4株病毒进行血清学鉴定之后,于鸭胚(DE)、鸭胚成纤维细胞(DEF)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肝细胞(ECL)上适应培养。结果表明,EDS76-NE4株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒,该病毒能在DE、DEF、CEL上增殖,在DE上增殖,尿囊液的血凝价(HA)可达1:20480-1:327680倍。 相似文献
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巢式PCR快速鉴定鸡传染性支气管炎病毒的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
鸡传染性支气管炎病毒(IBV)经鸡胚增殖后,直接用尿囊液提取RNA后反转录成cDNA,用IBV基因3’端的UTR1-/UTR2+和UTR3-/UTR4+两对引物进行巢式PCR,所检测的4个IBV标准参考株和16个IBV野毒株均得到了预期的174bp大小的片段,而鸡新城疫病毒(NDV),鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)及正常鸡胚尿囊液经同样处理没有可见片段出现。本试验不需纯化册毒只需05ml病毒尿囊液即可在24小时内得到准确的试验结果。这表明与其它IBV鉴定方法相比,该法具有快速、灵敏、特异的优点。 相似文献
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采用鸡减蛋综合征(EDS-76)K-11株细胞毒为种毒,通过鸭胚盲传5代,使其扩增,收获尿囊液作为基础种子毒。基础各 非免疫歪 增殖动态的试验表明,EDS-76病毒在羊水、尿囊膜(包含羊膜)、尿囊液中含量较高,增殖动态趋于一致;接种病毒后120h为最佳收毒时间,突破了传统的只收集尿囊液作为病毒材料的做法,使收 病毒材料由原来的每胚5.2mL增加到每胚49.4mL,显著降低了研究费用和制苗成本。确定 相似文献
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禽流感RT-PCR诊断法的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
根据禽流感病毒(AIV)A/Chicken/Breslin/1902(H7N7)株的血凝素(HA)基因参考序列设计合成一对H7HA特异引物,并应用SDS-蛋白酶K法提取病毒RNA,建立了逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测AIVRNA的方法。应用此法对鸡胚培养的AIV尿囊液、SPF感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、减蛋综合征病毒(EDS-76V)等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明,AIV尿囊液RT-PCR全部阳性,SPF感染鸡粪便87份,RT-PCR检出69份阳性,样品处理浓缩后琼脂扩散检出11份,电镜检测了23份样品,仅检出2份阳性。非特异性对照样品经RT-PCR检测全部阴性。将AIV感染鸡胚尿囊液作10倍系列连续稀释,可检出稀释度为10-2的病毒尿囊液。RT-PCR最早检出时间为感染后第3天,而琼扩和电镜均是7天。该法具有高度的特异性和灵敏性,且节约时间(只需8小时左右),可从分子水平上对AIV进行早期快速诊断和流行病学调查 相似文献
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用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种10-12日龄鸭胚盲传,分离到一株EDS-76·EXK2病毒。自第3代起至第10代,均从鸭胚尿囊液中检出血凝素,凝集鸡红细胞的特性可被EDS-76阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集免红细胞。应用第3和第4代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡,成功地复制了EDS-76。攻毒后35天内11只试验鸡的总产蛋数无明显变化,产蛋率为85~94%, 相似文献
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用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种10~12日龄鸭胚盲传,分离到一株EDS-76·EXK2病毒。自第3代起至第10代,均从鸭胚尿囊液中检出血凝素.凝集鸡红细胞的特性可被EDS-76阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集兔红细胞。应用第3和第4代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡.成功地复制了EDS-76。攻毒后35天内11只试验鸡的总产蛋数无明显变化.产蛋率为85~94%,但产各种异常蛋占总产蛋数的29%。电镜下发现原囊液中病毒颗粒呈球形、大小为70~80nm、无囊膜。 相似文献
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不同新城疫病毒F48E8、N-79、LaSota和分离株X以1∶10000稀释接种9日龄SPF鸡胚,每胚0.2ml,结果发现,F48E8和分离株X毒力较强,可在50小时左右致死鸡胚,LaSota和N-79较弱。F48E8和X株接种鸡胚的肌肉、肝脏、脑和尿囊液均有大量病毒存在,而N-79和LaSota只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。 相似文献
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不同新城疫病毒F48E8、N-79、La Sota和分离株X以1:10000稀释接种9日龄SPF鸡胚,每胚0.2ml,结果发现,F48E8和分离株X毒力较强,可在50小时左右致死鸡胚,La Sota和N-79较弱,F48E8和X株接种鸡胚的肌肉,肝脏,脑和尿囊液均有大量病毒存在,而N-79和La Sota只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。 相似文献
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鸽新城疫病毒野毒PB9601株的致病性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用不同方法测试了从新城疫患鸽分离到的新城疫病毒(NDV)野毒PB9601株的致病性。结果,该毒株对1日龄SPF雏鸡的脑内接种致病指数为2.00,对6周龄SPF鸡静脉接种致病指数为0.00;该毒株对6周龄左右鸽有很强的致病性,有的血清中已有一定量的抗鸽NDV抗体;经SPF鸡胚传13代的尿囊液病毒对鸽的半数致死量约为12个TCID50。由此认为,PB9601株NDV是对鸡致病性很弱但对鸽呈高度致病性的毒株,可作为国内鸽NDV强毒的参考株。 相似文献
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本研究根据NDV、IBV二种病毒能在鸡胚中繁殖的特点,通过筛选上述二种病毒的最适稀释比例,将混合毒种接种9~10日龄鸡胚尿囊腔内(筒称同胚培养),使接种鸡胚尿囊液96h二种病毒毒价同时达到高峰,每0.1ml尿囊液含NDV≥10~8EID_(50)、IBV≥10~7EID_(50).本试验用兔抗NDV、IBV血清抗体封闭相应病毒测定混合毒获得成功.本研究目的在于为制备鸡二联油乳剂灭活苗时改进繁毒方法,降低疫苗成本. 相似文献
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鸡新城疫,减蛋综合征,传染性支气管炎三联油佐剂灭活苗的研究… 总被引:2,自引:0,他引:2
用新城疫病毒克隆79株,减蛋综合征病毒NE4株和传染支气管炎病毒M1株分别接种于鸡胚和鸭胚,并收取其鸡,鸭胚尿囊液毒,经甲醛灭活,按一定经例配比,以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡,免疫后7天产生免疫应答,免疫后30天保护率达90%-100%,免疫后六个月攻毒,ND和IB保护率100%,EDS76为95%。1992-1994上半年,本苗在江苏,安徽,山东等省的一些鸡场免疫十万 相似文献
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以正常鸡胚尿囊液和环磷酰胺预处理试验兔, 再以Ⅰ型鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus Type Ⅰ, DHV Ⅰ) 标准强毒(ATCC, C9/D2) 接种后致死鸡胚的尿囊液, 经灭活、乳化制成油佐剂抗原多次免疫试验兔, 获得了鸡胚中和效价(EPD50) 达1∶32 以上的兔抗Ⅰ型鸭肝炎病毒高免血清(DHV ⅠS) 。 相似文献
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用新城疫病毒(NDV)Lasota株尿囊腔接种10月龄非免疫鸡胚,以血凝(HA)试验检测接种后24、48、72、96、120、144和168小时所收集的鸡胚液(尿囊液和羊水)、胚体、尿囊膜的HA价。结果表明,在上述时间内,胚体、尿囊膜的含毒量很低,无收获价值;病毒在鸡胚液中自接种后24小时繁殖呈线性上升,至120小时,胚液中含毒量最高,以后则下降,故此时是收获的最佳时间。 相似文献