苦瓜愈伤组织的诱导及悬浮培养体系的建立

以苦瓜子叶、上、下胚轴为外植体,在添加不同浓度激素组合的培养基上诱导和继代愈伤组织,比较愈伤组织的状态与生长情况,并对悬浮细胞培养条件进行了优化。结果表明,上下胚轴在添加2,4-D2.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1或NAA1.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1的MS培养基上均可诱导出状态良好的愈伤组织,愈伤组织在添加2,4-D0.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的继代培养基上能长势最好,添加30g·L-1蔗糖和3.0g·L-1活性炭的B5培养基有利于苦瓜悬浮细胞的快速增殖。     

马铃薯松散型胚性愈伤组织的诱导

为了建立马铃薯松散型胚性愈伤组织体系,用于脱毒繁殖和诱变育种,试验采用马铃薯块茎为外植体,在含有不同浓度2,4-D,BA和MS的培养基上进行松软型、松散型和胚性愈伤组织的诱导。结果显示,在1/4 MS+1.0 mg·L~(-1) 2,4-D+15 g·L~(-1)蔗糖的培养基上可以诱导出松软型马铃薯愈伤组织;在MS+0.5 mg·L~(-1) BA+0.25 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,继代3~5次,即可获得松散型愈伤组织;在MS+1.0 mg·L~(-1) BA+1.0 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,继代5~8次,即可获得松散型胚性愈伤组织。而且上述类型的愈伤组织生长迅速,结构特点突出。     

花椰菜松散型胚性愈伤组织的诱导

本研究采用花椰菜组培苗不同外植体诱导愈伤组织,从中筛选出理想外植体类型;将诱导出的愈伤组织转移到不同培养基上进行松散型愈伤组织的诱导,从中筛选出理想的培养基配方;将诱导出的花椰菜松散型愈伤组织转接到不同的胚性愈伤组织诱导培养基上,找到理想的培养基配方。试验结果表明,选用花椰菜组培苗茎段为外植体,在MS+0.5 mg·L~(-1)BA+1.0 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上进行愈伤组织诱导,可以获得松散型愈伤组织;在MS+1 mg·L~(-1)BA+1 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上通过3～4次继代培养,可以诱导出花椰菜松散型胚性愈伤组织。     

裂叶马兰无性系建立的研究

为保护野生资源、满足栽培对种苗的需求,以裂叶马兰的嫩茎为外植体,进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根、试管苗生根继代增殖的研究,以及试管苗移栽和定植的研究,建立起裂叶马兰的无性系。结果表明:MS+蔗糖35 g·L-1+6-BA0.5mg·L-1+2,4-D2.5 mg·L-1是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的适宜培养基;MS+蔗糖30 g·L-1+AgN031.0 mg·L-1+GA31.0mg·L-1+ZT1.6 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1是愈伤组织分化培养的适宜培养基;1/2MS+蔗糖20 g·L-1+NAA 0.6 mg·L-1是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为95.9%;定植成活率98.0%。定植成活的试管苗保持了野生裂叶马兰的所有植物学性状。     

沙芥愈伤组织培养的初步研究

采用沙芥种子作为无菌外植体来源时,以0.1升汞消毒10～12min的效果较好.下胚轴和子叶均在MS+2,4-D 0.01 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+3.0蔗糖+0.5琼脂(pH5.8)中可诱导出愈伤组织.愈伤组织的最佳继代培养基为MS+NAA 2mg·L-1+KT0.5 mg·L-1+3.0蔗糖+0.5琼脂(pH5.8).     

绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织的诱导

以绒毛白蜡组培苗茎段为外植体,建立绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织诱导体系,为绒毛白蜡遗传转化与离体诱变等研究奠定基础。试验结果显示：幼嫩茎段在WPM+0.5 mg·L^-12,4-D+5 mg·L^-1GA₃+30 g·L^-1蔗糖的培养基上可诱导出理想的松散型愈伤组织;将松散型愈伤组织在MS+0.5 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-1KT+30 g·L^-1蔗糖的培养基上继代培养,每15 d继代1次,继代时选择结构松散质地较硬的愈伤组织,3次继代培养后,可获得绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织。     

秦党茎段的组织培养研究

试验研究了利用秦党茎段进行组织培养的方法,结果表明:在光照强度1600 1x,温度25℃的条件下,秦党幼茎诱导愈伤组织及芽较快的初代培养基是MS+2,4-D 0.5 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂8 g·L-1及MS+BA 2.0 mg··L-1+IAA 1.0 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂8 g·L-1;继代培养基为MS+BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂8 g·L-1直接分化形成幼苗,或MS+IBA 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂8 g·L-1诱导形成无根苗再进行生根培养.     

通过体细胞胚发生快繁优良刺五加植株的技术

以刺五加合子胚及无菌实生幼苗为试验材料,研究通过直接和间接体细胞胚发生方式,快速获得大量再生植株的技术。结果表明:直接诱导体细胞胚的培养基为MS+2,4-D1.0 mg.L-1,以胚根或子叶为外植体诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.5 mg.L-1+BA1.0 mg.L-1,下胚轴为外植体诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.5 mg.L-1+BA2.0 mg.L-1。胚性愈伤组织经悬浮培养可发育成成熟体胚,快速获得刺五加幼苗。     

黑莓松散型胚性愈伤组织的诱导

为了诱导出黑莓松散型胚性愈伤组织,试验采用黑莓试管苗叶片、叶柄和茎段为外植体,在含有不同2,4-D及分裂素的MS培养基上进行愈伤组织的初步诱导,从中筛选出松散型愈伤组织的最佳培养基配方;再将诱导出的黑莓松散型愈伤组织转移到含有不同激素种类和浓度的MS培养基上进行松散型胚性愈伤组织的诱导,从中筛选出最佳培养基配方。结果表明,在1/8 MS+3 mg/L 2,4-D+100 mg/L Vc+10 g/L蔗糖的培养基上可以诱导出松散的黑莓愈伤组织;先在MS+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上进行胚性愈伤的诱导继代2~3次,然后转移到MS+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上继续培养并继代3~5次后即可诱导出黑莓的松散型胚性愈伤组织。试验结果将为采用黑莓体细胞诱变育种研究奠定基础。     

冰灯玉露松散型胚性愈伤组织的诱导方法

为了获得冰灯玉露松散型胚性愈伤组织,采用冰灯玉露组培苗叶片为外植体,在含有不同激素的培养基上,通过不同的继代培养,从中找到诱导出松散型胚性愈伤组织的最适条件。结果显示,在1/2 MS+2 mg·L~(-1) 2,4-D+20 g·L~(-1)蔗糖的培养基上可以诱导出松软的愈伤组织。再将这些松软的愈伤组织转接到MS+1 mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,经过3~5次继代培养,继代培养时选择质地较硬、结构松散的愈伤组织进行转移,最终获得结构松散的愈伤组织。再将这些松散型愈伤组织在MS+2 mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上继续培养,经过2~3次继代培养即可获得冰灯玉露松散型胚性愈伤组织。该试验结果可为冰灯玉露离体诱变育种及其相关的科学研究提供良好的试材。     

适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织诱导及增殖技术

用半夏叶片或叶柄作外植体,通过调节植物生长调节物质的种类、浓度及培养条件,以获得适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织。结果表明,添加2,4-D较NAA诱导的愈伤组织疏松,将叶片接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L或叶柄接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L上诱导出的愈伤组织长势较好且疏松,诱导率分别达到100%和95.6%,愈伤组织鲜重分别为0.932 g和0.622 g。将上述愈伤组织以MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L培养基连续继代3次,便获得适于建立细胞悬浮培养体系的疏松愈伤组织,从而为半夏人工种子生产必须的同步化高质量人工种胚的培养提供可靠材料。     

连香树组织培养及植株再生体系的初步研究

连香树是连香树科连香树属、第三纪古热带的孑遗植物,为我国珍稀濒危二级保护树种,具有极高的科研、经济及观赏价值。试验对连香树无菌体系的建立及植株再生技术进行了研究。结果表明:(1)连香树外植体的最佳消毒方法为0.1%升汞消毒12min;(2)芽增殖最佳培养基:MS+6-BA 1.0mg.L-1+NAA 0.5mg.L-1+GA32.0mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂7.0g.L-1,pH 6.0;(3)愈伤诱导的最佳培养基:MS+6-BA 0.1mg.L-1+2,4-D 2.0mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂7.0g.L-1,pH 6.0;(4)生根培养基:1/2MS+IBA 1.0mg.L-1+6-BA 0.1mg.L-1+蔗糖20g.L-1+琼脂6.8g.L-1,pH 6.0。     

变异假酸浆嫩茎组织无性系建立的研究

为保存假酸浆有利变异的种质,满足栽培对种苗的需要,以变异植株嫩茎为材料,进行了嫩茎的愈伤组织诱导和分化培养、分化不定芽生根培养、试管苗生根继代培养、试管苗的移栽和定植的研究,建立起变异植株的无性系。结果表明:MS+6-BA0.2mg·L-1+2,4-D1.2mg·L-1培养基是变异假酸浆嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;MS+GA30.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1培养基是假酸浆嫩茎愈伤组织分化培养的理想培养基;White+IAA0.1mg·L-1+IBA0.4mg·L-1培养基是假酸浆不定芽生根培养的理想培养基;定植的试管苗生长旺盛,保持了假酸浆的所有生物学性状和花期延长的有利观赏变异性状。     

紫山药愈伤组织的诱导及其分化

以紫山药无菌苗为试材,研究了植物生长调节剂种类、材料类型、光暗条件等对其愈伤组织诱导及其分化的影响。结果表明:(1)细胞分裂素6-BA和KT对紫山药愈伤组织的诱导效果差异不显著,适合紫山药茎段愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为KT 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1或6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1;(2)同一培养基上不同外植体愈伤诱导效果存在差异,在植物生长调节剂配比6-BA 2.0mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1下,微型块茎、茎段的愈伤组织诱导率比叶片高,分别为91.167%、86.300%、45.167%;(3)添加0.25g·L-1的活性炭能明显减轻紫山药茎段愈伤组织的褐化,愈伤生长良好,且愈伤组织的诱导率较高;(4)光暗条件对紫山药茎段愈伤组织诱导率的影响差异不显著,但暗处有利于愈伤组织的增殖生长;(5)不同植物生长调节剂配比对愈伤组织不定芽分化的影响显著,适合紫山药愈伤组织再分化的最佳植物生长调节剂配比为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.02mg·L-1,诱导率达50%以上,芽苗生长粗壮。     

思茅松成熟胚的胚性愈伤组织诱导与增殖1）

以思茅松（Pinus kesiya var．langbianensis）成熟合子胚为外植体,1／2MSG培养基为基本成分,采用正交试验设计研究2,4－D、6－BA和TRIA 3种植物生长调节剂对其胚性愈伤组织诱导的影响并获得最优诱导培养基,通过改变生长调节剂种类和降低其质量浓度的方式研究胚性愈伤组织增殖效果,筛选适宜的增殖培养基。结果表明：1／2MSG＋2,4－D 5．000 mg· L－1＋6－BA 4．000 mg· L－1＋TRIA 0．005 mg· L－1为最佳诱导培养基;2,4－D对思茅松成熟胚诱导胚性愈伤组织的影响最大,其次是TRIA,6－BA的影响最小;最佳的增殖培养基为P6＋NAA 2．0 mg· L－1＋6－BA 0．6 mg· L－1。     

小麦成熟胚离体培养研究

以美国小麦品种Overley成熟胚作为外植体进行离体培养,研究外源激素对小麦成熟胚诱导愈伤组织、分化出苗以及试管苗增殖的影响。试验结果表明,在MS培养基中添加2,4-D3mg·L-1愈伤组织诱导频率较高,成愈率为84.0%;在添加有KT2～3mg·L-1的MS分化培养基中愈伤组织分化率较高,可达85%以上;将试管苗转接至添加0.2mg·L-1的NAA和0.5～2.0mg·L-1的6-BA的培养基中,试管苗有一定的分化增殖,但最高分化率仅为33.3%,增殖系数2.05。     

鲜食山楂新品种蒙山红组织培养初探

为获得适宜山楂蒙山红快速繁殖的最佳培养基组合,以山楂新品种蒙山红和大金星的当年生带芽茎段为外植体,设置8种培养基组合进行愈伤组织诱导和芽增殖培养,分析两个山楂品种的组织培养的最适培养条件。结果表明:蒙山红诱导愈伤组织的最适培养基是MS+KT 1.0mg·L-1+IBA 0.1mg·L-1,最适宜的芽诱导培养基是MS+KT 1.0mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1。大金星诱导愈伤组织的最适培养基是MS+KT0.5mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1,最适宜的芽诱导培养基是MS+KT 1.5mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1。全部培养基均附加蔗糖30g·L-1,琼脂7g·L-1,pH5.8。     

都儿菜组织培养及快速繁殖的研究

本试验以都儿菜的嫩茎为材料,对愈伤组织的诱导、不定芽的分化,不定芽的分化继代培养、试管苗的生根、试管苗移栽所需要的条件进行了研究,建立起都儿菜嫩茎的愈伤组织培养及快速繁殖技术体系.结果表明:MS+BA0.5mg.L-1+2,4-D1.4mg.L-1为诱导都儿菜嫩茎愈伤组织的理想培养基;MS+BA0.5mg.L-1是都儿菜愈伤组织和不定芽分化的理想培养基;1/2MS+IAA0.5mg.L-1是都儿菜不定苗生根的理想培养基;与实生苗相比,定植于田间的试管苗生长旺盛,肉质茎单位面积产量提高14%,单株增产24%.