玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63发酵液对黄瓜白粉病抗性的影响

药效试验表明,玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63发酵液对黄瓜白粉病有良好的防效,其中发酵液保护作用的防效为88.63%,治疗作用的防效为82.26%,表明该发酵液对黄瓜白粉病的防治既有保护作用又有治疗作用.通过对喷施发酵液后黄瓜叶片内的抗病相关酶的活性的测定发现,喷施Men-myco-93-63发酵液后黄瓜叶片内POD,CAT,PAL,PPO等酶的活性在一定时间内有明显上升的趋势.     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63发酵液对黄瓜白粉病抗性的影响

药效试验表明,玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63发酵液对黄瓜白粉病有良好的防效,其中发酵液保护作用的防效为88.63%,治疗作用的防效为82.26%,表明该发酵液对黄瓜白粉病的防治既有保护作用又有治疗作用。通过对喷施发酵液后黄瓜叶片内的抗病相关酶的活性的测定发现,喷施Men-myco-93-63发酵液后黄瓜叶片内POD,CAT,PAL,PPO等酶的活性在一定时间内有明显上升的趋势。     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63活性成分的初步研究

对拮抗链霉菌Men-myco-93-63固体培养基中活性成分的提取分离进行了初步研究,最后确定乙酸乙酯与丙酮 3∶1(V/V)的混合提取剂为最佳提取剂,并明确了该活性成分属于脂溶性.进行了活性成分存在部位的测定试验,结果发现活性成分既存在于菌丝体中,又存在于培养基中.通过HPLC对活性成分进行检测,确定了其中能够进行纯化的组分.     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63活性成分的初步研究

对拮抗链霉菌Men-myco-93-63固体培养基中活性成分的提取分离进行了初步研究,最后确定乙酸乙酯与丙酮3∶1（V/V）的混合提取剂为最佳提取剂,并明确了该活性成分属于脂溶性。进行了活性成分存在部位的测定试验,结果发现活性成分既存在于菌丝体中,又存在于培养基中。通过HPLC对活性成分进行检测,确定了其中能够进行纯化的组分。     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体形成 和再生条件的初探

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63在温室及大田试验中都对棉花黄萎病菌表现出很强的拮抗作用，是一株很有应用潜力的生防菌株。不论是菌丝体本身还是其代谢产物都对多种植物病原菌有很强的抑制作用。对该生防菌株进行深入研究，尤其是分子水平的研究尤为重要。笔者通过研究影响链霉菌原生质体形成的多种条件和因素，包括培养基的选择、培养时间、甘氨酸浓度、溶菌酶浓度、酶解时间等，最终成功的制备出了生防菌Men-myco-93-63的原生质体，初步确定了其形成条件：TSB培养基一级培养24h，用SGGP作为二级培养基培养菌丝体40h（补加甘氨酸2%），将菌丝体加入2mg/ml溶菌酶37℃水浴60min后即可得到原生质体，涂在再生培养基R5上再生培养，再生数可达4.8×106个/ml。为该生防菌原生质体的转化、基因表达等研究奠定了重要的基础。     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdAmgh的克隆及序列分析

nsdA (Negative regulator of Streptomyces differentiation)基因是天蓝色链霉菌中发现的与抗生素合成相关的负调控基因.根据天蓝色链霉菌 A3(2)的序列设计引物扩增玫瑰黄链霉菌 Men-myco-93-63 菌株中的该基因,经测序和序列分析表明,由保守序列引物nsdA-2R和nsdA-2L克隆到的Men-myco-93-63 菌株中的该基因 800 bp片段与已知nsdA基因核苷酸保守区域序列同源性达到99%,由全长序列扩增引物nsdA WZ-R和nsdA WZ-L克隆到的该基因包含一个完整的开放阅读框,共编码 369 个氨基酸,与变铅青链霉菌和天蓝色链霉菌A3(2)中的nsdA 基因的核苷酸序列同源性达到100%,氨基酸序列同源性达到99%.该全长基因命名为nsdA_(mgh),其在玫瑰黄链霉菌 Men-myco-93-63 中的发现为阻断该负调控基因以期获得抗生素高产工程菌株提供了重要依据.     

生防链霉菌Men-myco-93-63遗传转化体系的建立和优化*

摘要：玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是分离自马铃薯疮痂病自然衰退土壤中的一株拮抗菌。该菌株及其发酵液对棉花黄萎病菌、瓜类白粉病菌等多种重要的植物病原菌具有很强的抑制作用,有良好的生防应用潜力。分别以基因整合型质粒pSET152和基因破坏型质粒pKC1139为出发质粒,ET12567(PUZ8002, pSET152/ pKC1139 ) 为供体,Men-myco-93-63孢子和菌丝体为受体,选取MS、PDA、TSB琼脂培养基、燕麦培养基为不同的培养基进行接合转移试验。结果表明MS培养基为接合转移的最适培养基,经验证,已成功地将质粒pSET152/ pKC1139转入到了Men-myco-93-63 中。以孢子为受体时,孢子预萌发条件为50℃热激10 min,.37℃温育2.5 h,转化效率是10-7~10-6。以菌丝体为受体时,转化效率是10-7~10-6,但菌丝培养过程中容易出现污染。另外,抗生素的覆盖时间对接合转移效率的影响较明显,16-18 h覆盖效果最好。     

两株微白黄链霉菌发酵液的稳定性及抑菌效果分析

旨在对2 株微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)的发酵液进行稳定性和抗菌效果分析,为明确其生防潜力和剂型研发奠定基础。采用杯碟法、平板生长抑制法、菌丝体干重法、孢子萌发抑制法检测抗菌活性,采用电导率法测定对膜透性的影响。结果表明：2 株链霉菌的发酵液均能在日光灯照射和低温环境中保持稳定的活性;经蛋白酶K处理后,活性均能保持在80%以上;但对有机溶剂的敏感性不同。HD-103、HD-109 的抗菌活性粗提物对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)菌丝生长的EC50值分别为97.9、120.2 μg/mL,对孢子萌发的EC50值分别为90.57、83.36 μg/mL。电导率测定结果表明,2 株菌的发酵液均可破坏尖孢镰刀菌细胞透性。菌株HD-103 和HD-109 对尖孢镰刀菌菌丝生长和孢子萌发均有抑制作用,其发酵液具有较好的稳定性,具有开发为生防制剂的潜力。     

2株微白黄链霉菌发酵液的稳定性及抑菌效果分析

旨在对2株微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)的发酵液进行稳定性和抗菌效果分析,为明确其生防潜力和剂型研发奠定基础。采用杯碟法、平板生长抑制法、菌丝体干重法、孢子萌发抑制法检测抗菌活性,采用电导率法测定对膜透性的影响。结果表明:2株链霉菌的发酵液均能在日光灯照射和低温环境中保持稳定的活性;经蛋白酶K处理后,活性均能保持在80%以上;但对有机溶剂的敏感性不同。HD-103、HD-109的抗菌活性粗提物对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)菌丝生长的EC_(50)值分别为97.9、120.2μg/m L,对孢子萌发的EC_(50)值分别为90.57、83.36μg/m L。电导率测定结果表明,2株菌的发酵液均可破坏尖孢镰刀菌细胞透性。菌株HD-103和HD-109对尖孢镰刀菌菌丝生长和孢子萌发均有抑制作用,其发酵液具有较好的稳定性,具有开发为生防制剂的潜力。     

Ts-86提取物防治黄瓜白粉病的研究

本文测试了中草药Ts-86提取物对黄瓜白粉病菌的保护活性,并对其稳定性、持效期及抑菌谱等作了进一步研究。结果表明,Ts-86提取物的50倍液防效达93.04%,与粉锈宁(15% WP)1000倍液防效相当;其酸碱稳定性与热稳定性较差,只在中性或微酸微碱条件下活性较高,且经100℃处理的活性最高,而且其光稳定性很好;保护作用的持效期可达3天;抑菌谱相对广泛。     

2%武夷菌素水剂防治黄瓜白粉病田间试验研究

为明确2%武夷菌素水剂在农业生产上的防治效果及对作物的安全性,在烟台芝罘福地果业种植专业合作社进行田间试验,结果表明:在黄瓜白粉病发病初期,喷施试验剂量范围内的2%武夷菌素水剂能很好地控制病害的发生和蔓延,防治效果较好。建议在黄瓜白粉病发病初期用2%武夷菌素水剂有效成分量53~100 g/hm2,制剂量177~333 g/667 m2,兑水50 L/667 m2进行叶片正反面均匀喷雾,间隔7~10 d喷1次,连喷2~3次。     

黄瓜白粉病抗性及生理机制的研究

研究了黄瓜不同抗性品种在接菌前后酶活性与酚类物质含量的变化。结果表明：黄瓜对白粉病的抗性与植株组织中的过氧化物酶、多酚氧化酶、过氧化氢酶活性以及酚类物质含量密切相关。不同抗性黄瓜品种对白粉病的抗性与PPO活性、酚类物质含量可能存在一定的正相关。     

三种霉菌发酵液对作物的促长作用初报

摘要：本文采用盆栽试验的方法研究了三种霉菌发酵液对玉米、大豆生长的影响。结果表明,适宜浓度的三种霉菌发酵液可以显著提高玉米、大豆的株高、根长,干重及叶绿素含量。对作物具有显著的促长作用。     

哈茨木霉菌株TRI2的鉴定及其对黄瓜根结线虫的防治作用

为在生产上更好的防治根结线虫病害,同时为新型、高效的生物杀线剂的研制和开发提供一定的理论基础。采用形态学观察及ITS、tef1序列分析方法鉴定木霉菌株TRI2为哈茨木霉,测定了其发酵液对南方根结线虫2龄幼虫的作用,并进行了盆栽试验及田间试验。结果表明,木霉菌TRI2发酵液在48 h时可以100%杀死根结线虫,在盆栽试验中使黄瓜根结减退率达到63.5%,在田间对黄瓜根结线虫的防治效果达到72.2%,且在田间与阿维菌素具有相似的防治效果。菌株TRI2的鉴定及防治效果的确定为研究其生防机制及开发应用提供了依据。     

几种化学诱导物对黄瓜白粉病抗性的诱导作用

在建立简单、有效、准确的叶圆片检测黄瓜白粉病抗性的基础上,系统地比较了７种化学诱导物及其组合对黄瓜白粉病抗性的诱导作用。结果表明,草酸、水杨酸、苦参碱、苯基硫脲、复合磷均能显著诱导黄瓜对白粉病的抗性。其诱导效果为草酸〉水杨酸〉苦参碱〉苯基硫脲〉复合磷,氯化钾和硫酸锰的诱导效果不明显。当苯基硫脲、苦参碱与硫酸锰、氯化钾和复合磷分别组合时与单一诱导物相比,诱导效果明显增强;而当水杨酸、草酸与之组合时诱导效果明显减弱,这可能与离子间相互作用有关。     

Harpins蛋白防治黄瓜霜霉病机理研究 Ⅰ黄瓜接种Harpins蛋白后PAL酶活性的变化

通过分析棚室黄瓜在喷施不同浓度的Harpins蛋白后，叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化的规律，探讨了Harpins蛋白防治黄瓜霜霉病的机理，研究结果表明：黄瓜在喷施Harpins蛋白后不同时期PAL活性变化是不一样的，0.005g/L浓度的Harpins蛋白接种后，叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化的规律与空白对照无显著差异，0.015、0.045g/L浓度的Harpins蛋白接种后，叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化的规律与空白对照差异显著。黄瓜接种Harpins蛋白后PAL活性的变化，可作为一种生化指标来作为Harpins蛋白防治黄瓜霜霉病的一个证据。     

Harpins蛋白防治黄瓜霜霉病机理研究I黄瓜接种Harpins蛋白后PAL酶活性的变化

通过分析棚室黄瓜在喷施不同浓度的Harpins蛋白后,叶片中苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性变化的规律,探讨了Harpins蛋白防治黄瓜霜霉病的机理,研究结果表明：黄瓜在喷施Harpins蛋白后不同时期PAL活性变化是不一样的,0.005g/L浓度的Harpins蛋白接种后,叶片中苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性变化的规律与空白对照无显著差异,0.015、0.045g/L浓度的Harpins蛋白接种后,叶片中苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性变化的规律与空白对照差异显著.黄瓜接种Harpins蛋白后PAL活性的变化,可作为一种生化指标来作为Harpins蛋白防治黄瓜霜霉病的一个证据.     

链霉菌702发酵液对提高水稻种子耐贮藏性的研究

用不同药剂和链霉菌702发酵液处理水稻种子,贮藏4个月后测定种子带菌情况和发芽率。研究发现,链霉菌702发酵液能显著降低水稻种子贮藏中带菌率;与对照相比,不同药剂及链霉菌702发酵液处理对贮藏后种子的发芽率影响无显著差异。     

链霉菌S-101是防治黄瓜枯萎病的潜在生防菌株

<正>为了获得抑制黄瓜枯萎病的高效生防菌,内蒙古师范大学生命科学与技术学院、北京市农林科学院植物保护环境保护研究所合作通过平板对峙法,分离筛选出一株生防链霉菌S-101,测定了拮抗菌的抑菌活性及其对黄瓜枯萎病的防控效果。研究表明,该菌株对供试的几种病原真菌都有较好的拮抗作用。其中对尖镰孢菌黄瓜专化型的抑制率为