U+3B8FNPR1同源基因全长cDNA的分离与表达分析

 NPR1是水杨酸诱导抗病基因表达的重要调控因子之一,主要作用于水杨酸信号转导途径的上、下游。采用稀释池PCR法,筛选U+3B8F（Prunus salicina var. cordata）叶片全长均一化cDNA文库,分离U+3B8F叶片NPR1同源基因的全长cDNA;用不同浓度的水杨酸喷施一年生U+3B8F嫁接苗嫩叶,采用荧光定量PCR技术检测所获得的NPR1同源基因的表达量差异。试验结果表明,共获得了4个NPR1同源基因的全长cDNA,分别命名为PsNPR1、PsNPR3.1、PsNPR3.2和PsNPR3.3,其长度分别为2 442、1 827、2 244和2 615 bp,其ORF长度分别为1 788、1 770、1 767 和1 782 bp,分别编码596、590、589和594个氨基酸的蛋白质;氨基酸序列比对结果表明,U+3B8F这4个NPR1同源基因的编码区均含有BTB/POZ和ANK两个保守域及核定位信号（NLS）;PsNPR1与拟南芥的AtNPR1和AtNPR2聚为一簇,PsNPR3.1、PsNPR3.2和PsNPR3.3与拟南芥的AtNPR3和AtNPR4聚为另一簇。PsNPR1在喷施1.0 mmol ? L-1水杨酸的叶片中表达量最高;PsNPR1、PsNPR3.1、PsNPR3.2在响应1.0 mmol .  L-1水杨酸诱导过程中表达量持续上升, 30 h表达量最高,之后呈下降趋势,因此,水杨酸诱导抗病基因高表达的最佳处理浓度为1.0 mmol ? L-1,最佳响应时间为30 h。     

水杨酸对梨SOD、PPO 同工酶和NPR1 表达的影响

 以鸭梨（Pyrus bretschneideri‘Yali’）为试材,研究外源水杨酸处理后梨叶片中内源水杨酸（SA）及超氧化物歧化酶（SOD）、多酚氧化酶（PPO）同工酶的变化特点以及病程相关基因非表达子1（NPR1）对水杨酸的早期应答反应。结果表明：水杨酸处理后梨叶片中内源SA含量升高,其中游离态SA含量随处理浓度增大而逐渐升高,但均显著低于对照;结合态SA随处理增大而逐渐降低,但均显著高于对照。SOD、PPO同工酶酶谱分析结果显示,水杨酸处理后酶谱带表达量增强。接种病菌试验表明,0.200 mmol · L^-1 SA可以诱导梨增强对轮纹病的抗性,且诱导处理过的叶片受到病菌侵染时SOD、PPO酶活性增强。实时荧光定量PCR分析表明,0.200 mmol · L^-1 SA诱导后梨叶片中NPR1表达量明显升高,但NPR1在茎中的表达受到抑制。     

日本晚樱花器官特征基因ClAP1的克隆与表达分析

用同源克隆的方法和3′ RACE技术,从日本晚樱（Prunus lannesiana）中克隆得到了1个AP1同源基因ClAP1的cDNA全长。其cDNA全长1 005 bp,包括1个编码238个氨基酸共717 bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明,ClAP1是拟南芥的AP1同源基因,其蛋白质的C末端具有一个保守的euAP1模体。半定量RT-PCR分析表明,ClAP1在3个日本晚樱品种‘大岛’、‘一叶’和‘普贤像’的萼片、花瓣、雄蕊和雌蕊中均有表达,在叶中不表达,属参与花发育的转录因子,但其表达模式与拟南芥的AP1有一定差别。     

梨叶片原生质体制备方法的建立及其基因瞬时转化试验

以‘新梨7号’梨叶片为材料，探究影响原生质体分离的主要因素，制备高产优质的叶肉原生质体，并进行基因瞬时转化和表达。将继代30 d的组培苗嫩叶在最佳酶解液(1.0%纤维素酶，0.1%果胶酶，0.4%离析酶，0.5 mol·L^-1甘露醇，20 mmol·L^-1 KCl,20 mmol·L^-1 MES,10 mmol·L^-1 CaCl2,1.0 g·L^-1 BSA)中酶解12 h，可制备出产量为1.09×10⁶ protopl·mL^-1、活力为90%的原生质体。将1～2μg·mL^-1 pROK2-GFP质粒DNA通过40%PEG-4000介导转化至上述原生质体中并培养12 h，可以观察到GFP绿色荧光信号，转化率可达40%。     

茶树亚硝酸还原酶基因CsNiR的克隆及表达分析

以‘龙井43’茶树叶片的cDNA为模板,利用RT?PCR技术克隆了茶树亚硝酸还原酶基因（CsNiR）,得到完整的ORF全长为1 764 bp,编码587个氨基酸;所推导的氨基酸序列与垂枝桦（Betula pendula）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）、菠菜（Spinacia oleracea）和水稻（Oryza sativa）的同源性均大于76%。生物信息学分析表明,CsNiR分子量为68.648 kD,等电点为6.12,为亲水性的非分泌蛋白;二级结构的预测显示,CsNiR具有完整的NiR 蛋白结构,含血红素蛋白β–化合物区域和4Fe-4S区域。实时荧光定量结果表明,该基因在成熟叶片中表达量高于一芽二叶和根。采用营养液水培3个茶树品种,在氮饥饿两周后分别供应正常氮素和低氮素（1和0.1 mmol · L^-1 NH₄NO₃）,qRT-PCR测定发现,正常氮素处理的2 h和6 h,诱导根CsNiR表达量显著增加,叶片中的表达量变化延迟到24 h之后,且变化幅度存在基因型之间的差异;低氮处理对CsNiR表达量的影响相对较小。因此,研究CsNiR基因的表达特性及其在茶树氮素利用中所发挥的作用,需结合茶树基因型、组织部位、供氮水平等进行综合评价。     

白菜病程相关蛋白1基因cDNA全长的克隆与分析

 以水杨酸处理后的‘苏州青’白菜为材料, 通过RT2PCR和RACE技术, 获得了白菜病程相关蛋白PR-1基因的cDNA全长序列。该基因与甘蓝型油菜PR-1基因氨基酸序列的同源性为91% , 与拟南芥的同源性为78% , 与其它植物的同源性为57%～60%。Southern杂交表明该基因在白菜基因组中的拷贝数至少为2个。半定量RT2PCR分析表明, 2 mmol/L的水杨酸处理后12 h, 该基因的表达量达到高峰。     

外源甜菜碱提高苹果对炭疽叶枯病的抗病性

【目的】探讨外源喷施甜菜碱(GB)对苹果炭疽叶枯病抗病性的影响。【方法】以苹果嘎拉-3(GL-3)组培生根幼苗为试材,设置不同浓度梯度的外源喷施GB处理组(0、1、2、4、6 mmol·L^-1),通过对接种苹果炭疽叶枯病病原菌叶片的病斑面积、相对电导率(REC)和相对叶绿素含量(SPAD)等指标的分析,筛选出外源喷施GB的最适浓度。随后通过测定抗氧化酶活性、内源激素和氨基酸含量以及病程相关基因的表达量,分析其动态变化规律,为解析外源喷施GB提高苹果炭疽叶枯病抗病机制提供参考。【结果】2 mmol·L^-1为GB的最适喷施浓度。与0 mmol·L^-1浓度处理组相比,2 mmol·L-1GB处理组接病后叶片病斑面积最小、REC值最低,SPAD值最高。与GLS组相比,GLS+GB组叶片抗氧化酶活性提高,水杨酸(SA)含量增加,同时脱落酸(ABA)和1-氨基环丙烷羧酸(ACC)含量降低,茉莉酸(JA)和生长素(IAA)含量先升高后降低,脯氨酸(Pro)含量降低,MdPR1、MdPR4、MdPR8、MdPAL基因表达量上调,几丁质酶...     

‘黄金梨’缺铁黄化叶片受GA3诱导复绿的机理研究

以‘黄金梨’缺铁黄化植株与正常植株为试材,于生长期黄化植株叶面喷施50、100、200和400 mg·L^-1 GA₃溶液,测定叶片中Fe、GA₃、GA₄、IAA和JA含量,对叶绿体进行了电镜显微结构观察,并运用荧光定量PCR技术分析了Fe代谢与GA信号转导相关基因的表达量。结果表明,外源GA₃处理后9 d,黄化叶均有不同程度复绿,叶脉复绿明显,叶身部分复绿,其中400 mg·L^-1 GA₃处理后12 d黄化叶复绿最明显。处理后9和12 d缺铁黄化叶片Fe含量显著高于清水处理对照。外源GA₃能诱导黄化叶片内FER1、FER2、FER3、FRO2、IRT1和FD1的表达,其中12 d各处理FER2和IRT1基因的表达量分别是对照10倍和40倍以上,说明外源GA₃促进了叶片内铁的贮藏、还原与转运相关基因的表达。外源GA₃处理显著提高了叶片中内源GA₃和GA₄含量,迅速诱导GID11和GID13基因的表达,其中50 mg·L^-1 GA₃处理,GID11表达量在3 d是对照的76.45倍。400 mg·L^-1 GA₃处理后12 d的叶片类囊体基粒片层较黄化叶片清晰,断裂片层少。试验结果初步揭示了GA₃诱导‘黄金梨’黄化叶复绿的机理。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。     

非生物胁迫下BoEPXA2基因对羽衣甘蓝种子萌发的影响

以野生型、BoEXPA2基因过表达和BoEXPA2基因抑制表达的羽衣甘蓝为试材,采用无机试剂NaCl、蔗糖(sucrose)和甘露醇(mannitol)分别设定低浓度和高浓度NaCl(100 mmol·L^-1和200 mmol·L^-1)、蔗糖(150 mmol·L^-1和250 mmol·L^-1)和甘露醇(200 mmol·L^-1或400 mmol·L^-1),分析在不同的胁迫下3个株系种子萌发情况,并测定各基因型不同胁迫下抗氧化酶活性,MDA含量及BoEXPA2的表达,以期探讨羽衣甘蓝BoEXPA2基因在非生物胁迫下对种子萌发的影响。结果表明：在非生物胁迫下,与野生型种子相比,BoEXPA2抑制表达种子的发芽率显著降低,而BoEXPA2过表达系的发芽率显著提高。在干旱胁迫和盐胁迫下,3种基因型种子的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量均有增加,但是BoEXPA2过表达株系种子的SOD、POD、CAT ...     

铝胁迫对柑橘幼苗生长和光合作用的影响

为探讨铝胁迫对柑橘幼苗生物量累积及分配,光合特性[净光合速率(Pn),蒸腾速率(Tr),胞间二氧化碳浓度(Ci)和气孔导度(Gs)]和叶绿素荧光参数[初始荧光(F_0),暗中最大荧光产量(Fm),可变荧光(Fv),最大光化学效率(Fv/Fm)和PSII潜在活性(Fv/F_0)]的影响,本研究以雪柑(Citrus sinensis)和沙田柚(Citrus grandis)实生苗为试验材料,采用砂培法设置不同浓度Al处理[0(对照),0.5,1.0,2.0 mM Al Cl_3]以及不同Al处理时间[短期(15周)和长期(34周)]。研究结果表明,相比对照,短期2.0和0.5mM Al处理分别显著降低了雪柑和沙田柚幼苗的生物量且提高了雪柑和沙田柚幼苗的根冠比。长期0.5 mM Al处理显著降低了两柑橘品种幼苗生物量,提高了沙田柚幼苗的根冠比,但对雪柑幼苗无显著影响。无论是长期或短期Al处理,Pn,Tr,Gs,Fm,Fv,Fv/Fm和Fv/F_0均随Al浓度的升高而表现出下降趋势,Ci和F_0随Al浓度的升高呈上升趋势。综上,长期0.5 mMAl处理对两柑橘品种幼苗的抑制效果比短期处理更显著,柑橘幼苗铝毒害受胁迫浓度和胁迫时间共同调控。     

东方百合‘索邦’GA20ox的克隆及表达分析

以东方百合‘索邦’为材料,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得编码活性GAs合成过程中双加氧酶的基因GA20ox,对其进行生物信息学分析和表达分析。结果表明,GA20ox全长1 502bp,包括1个1167bp的开放阅读框(ORF),编码388个氨基酸。GA20ox编码的蛋白存在多个糖基化位点、磷酸化位点和酰化位点。‘索邦’GA20ox和其他物种的GA20ox蛋白有很高的相似性,均含有保守的PLN02276结构域。‘索邦’GA20ox与姬蝴蝶兰、铁皮石斛、海枣、油棕和椰子等单子叶植物的GA20ox蛋白具有较高的同源性。实时荧光定量PCR分析表明,GA20ox具有时空表达特异性,在萌芽期之后的茎生根、现蕾期的茎、萌芽期和展叶期的叶片、萌芽期的顶芽等快速发育的组织中有较高的表达。在萌芽期对植株进行高浓度(200和400 mg·L^-1)GA3处理对其生长的影响最大,其中200 mg·L^-1 GA3处理最有利于株高的增加,400 mg·L^-1 GA3处理最有利于地下部分干质量的增加。对萌芽期‘索邦’百合进行200 mg·L^-1 GA3处理,显著抑制其GA20ox在除鳞片外其他部位的表达,表达量均在处理后12 h降至最低,其中在茎和基生根中降幅最大,分别下降了96.79%和94.65%。推测GA20ox的表达受活性GAs的反馈调节,在调控体内活性GAs稳态中发挥重要的作用。     

施肥对油菜菌核病和养分吸收利用的影响

以"中双11"油菜为试验材料,采用大田试验,设CK(不施肥)、PKB、NKB、NPB和NPKB 5个处理,在盛花期、末花期、结荚期、灌浆期和成熟期调查不同处理菌核病发病程度,研究不同施肥处理油菜菌核病发病规律,菌核病的发生对油菜产量和养分吸收利用的影响。结果表明:不同施肥处理的油菜菌核病从盛花期到成熟期病情指数均表现为先上升后下降的趋势,成熟期病情指数大大降低。CK、PKB、NKB、NPB和NPKB处理的发病植株产量比正常植株产量分别降低了1.6%、7.7%、27.9%、14.5%和21.2%;农学效率分别降低了28.31%、60.73%、29.66%、36.83%;氮、磷、钾肥的利用率平均分别降低了13.43%、1.83%、10.54%。NPKB处理菌核病发病程度处于中间地位,产量、农学效率、肥料利用率均高于其它处理,因此生产中应通过肥料的合理配施减轻油菜菌核病的发生,提高油菜产量。     

不同温度和包装对桔红心大白菜销售过程的品质影响研究

为研究包装和温度对桔红心大白菜销售过程品质的影响,本文以天正桔红62号大白菜为试验材料,采用4℃加PE收缩膜包装、4℃不加PE收缩膜包装、20℃加PE收缩膜包装和20℃不加PE收缩膜包装四种方式进行销售试验的比较,定期测定不同处理方式下的失重率、可溶性固形物、VC含量、还原糖含量、可溶性蛋白含量以及进行感官评价,分析处理方式对桔红心大白菜主要品质指标的影响。结果表明,4℃+PE收缩膜包装最佳,其感官评价最高,失重率和营养成分损失最少,适合于销售时间较长的情况,销售时间在3d以内可选择20℃温度加PE收缩膜的方法。     

柑橘精油研究进展

JIN jia-jia;WEI jie(College of Agriculture, Guangxi University, Nanning 530000, China)     

籽莲新品种——渝鲜莲1号的选育

渝鲜莲1号是从鄂杂3号籽莲品种的变异单株中选育出来的优良鲜食籽莲品种。该品种植株较早熟,定植后约60 d始花,叶上花,花朵粉红色,单瓣,碗状,爪深粉色,每1 hm^2商品莲蓬数约74500个,每只莲蓬平均实粒数22.3个,平均结实率85%,鲜籽百粒质量约302 g。一般鲜莲子平均产量4500 kg/hm^2,鲜食甜脆,可溶性固形物约12.3%。该品种鲜食品质好、产量高,适宜在重庆地区推广种植。     

紫藤属植物的文化内涵及在风景园林上的应用

紫藤属是豆科落叶木质藤本植物,在我国拥有悠久的栽培历史,在观赏、芳香、药用、食用、文化内涵方面都有重要价值。本文简要介绍了紫藤属在风景园林中的栽培与应用,并以紫藤主题公园为例,分析日本和国内几个紫藤主题公园的管理方式。最后借鉴日本紫藤主题公园及欧美地区紫藤属应用的可取之处,为进一步发展国内紫藤属植物品种分类研究和建设国内紫藤公园提供参考。     

大粒板栗新品种‘秦栗2号’

（西北农林科技大学林学院,陕西杨凌 712100）     

红枣发酵制品研究进展

红枣的营养价值及药用价值很高,集药、食、补三大功能为一体,被誉为"木本粮食,滋补佳品"。随着生活水平的提高,人们对食品的要求逐渐转向天然、营养和健康的方向,益生菌类保健食品也随之走红,红枣发酵制品越来越受到人们的喜爱。本文通过对近几年发酵红枣汁、枣酒、枣醋、红枣酸奶、发酵枣粉的分析,提出了红枣发酵制品的研究方向,为红枣产品的系列开发提供参考。     

抗旱性复混肥对土壤物理性状、持水量和马铃薯经济效益的影响

采用田间试验方法,研究抗旱性复混肥配方及其对土壤物理性质、持水量和马铃薯经济效益的影响,以期筛选出抗旱性复合肥最佳配方和施用量。结果表明:影响马铃薯产量的因素由大到小依次为:马铃薯专用肥>废弃物组合肥>保水剂,抗旱性复合肥最佳配方组合为废弃物组合肥3 000 kg/hm^2、保水剂37.50kg/hm^2、马铃薯专用肥2 230 kg/hm^2。随着抗旱性复混肥施用量的增加,土壤总孔隙度、持水量、马铃薯块茎质量和产量在增加,土壤容重在降低。经回归统计分析,抗旱性复混肥与马铃薯产量间的回归方程为:y=28.87+1.771 3x-0.035 4x2,最佳施肥量为5.28 t/hm^2,计算结果与田间施用抗旱性复混肥5.28 t/hm^2相吻合。