兔病毒性出血症病毒血凝作用的研究

选用十种动物(鸡、鸭、鹅、鸽、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、绵羊、公牛,每种5个个体)和人(“O”型)的血液,用氰化高铁血红蛋白法监测红细胞悬液的配制,分别在4℃、22℃、37℃条件下,对兔病毒性出血症病毒进行微量HA试验,并对人工感     

人的各型红细胞用于“兔瘟”凝集反应诊断

在常规“兔瘟”凝集反应诊断中,都是采用人“O”型红细胞。笔者使用了“A”型、“B”型、“AB”型人的红细胞悬液作凝集反应,结果表明,“兔瘟”病毒对人的各类血型红细胞的凝集作用没有严格的选择性,红细胞悬液和全血的结果都是一致的。通过凝集与凝集抑制试验的检验,病毒对人不同血型红细胞的凝集现象均能被特异性的免疫血清所抑制。操作方便、取血方便、实用性强,敏感性高,但还有待进一步积累数据深入探讨。     

一株兔瘟病毒野毒株的分离与鉴定

为了对南部县某兔场疑似兔出血症病毒(RHDV)NB毒株进行鉴定,试验采用血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验、家兔接种试验、家兔免疫攻毒试验、VP60基因的同源性比对。结果显示:NB毒株能凝集人"O"型红细胞,HA效价为12 log2,其血凝性能被RHDV疫苗毒株AV33株的抗血清抑制;NB毒株注射健康非免家兔,家兔在48h内死亡,具有典型的兔病毒性出血症(RHD)的临床症状和病理变化;RHDV(AV33)组织灭活疫苗免疫家兔后,家兔能抵抗NB毒株的攻击;NB毒株与AV33毒株的VP60基因同源性为96.12%,氨基酸序列同源性为97.59%。     

兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAh,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条.该试纸条可以检出红细胞凝集试验(HA)效价为1:10的RHDV悬液,即HA检测为阴性的样品,该试纸条检测为阳性,其敏感性高于HA;特异性试验结果显示,该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应.应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测,同时用HA做平行试验,阳性符合率为100％.因此,该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法,为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景.     

肉兔病毒性出血症病毒与A型产气荚膜梭菌混合感染的诊断

云南省曲靖市沾益县某养殖户的300多只肉兔从2009年6月初开始发病,为及时控制疫情,尽量挽回饲养户的经济损失,经流行病学调查,临床症状观察,病理剖解,细菌分离、鉴定,动物接种和家兔病毒性出血症病毒HA试验,结果分离到A型产气荚膜梭菌, 兔病毒性出血症病毒HA试验阳性,诊断为兔病毒性出血症病毒与A型产气荚膜梭菌的混合感染。     

醛化人“O”型红细胞的制备及其在兔出血症HA／HI试验中的应用

在兔出血症的检测和免疫监测中,血凝／血凝抑制试验（HA／HI）是常规有效的检测方法。针对人“O”型新鲜红细胞存在质脆易碎、保存期短的缺点,从醛化人的“O”型红细胞制备方法的优化、工作浓度、保存时间三个方面进行研究,并用于兔出血症的HA／HI试验,同时以新鲜的人“O”型红细胞作为对照。结果表明：经戊二醛-甲醛二次醛化的红细胞的醛化效果与只用戊二醛醛化的红细胞效果差异不显著,均优于甲醛醛化效果,且经戊二醛-甲醛二次醛化或戊二醛醛化后的红细胞不溶血,性质不变,易保存;在兔出血症HA/HI试验中,经戊二醛醛化人“O”型红细胞的试验效果与新鲜红细胞差异不大,结果稳定性好。     

应用醛化人O型红细胞对兔瘟的诊断试验

兔瘟(又称兔病毒性出血症)是兔的一种急性、高度接触性传染病。多年来,一直把使用新鲜人O型红细胞(下简称人红细胞)做血球凝集试验(HA),作为诊断该病的主要手段之一。但由于人红细胞来源困难和不易保存,为此,我们将人红细胞先用醛类进行处理,然后再进行HA试验。同时进行了新鲜人红细胞     

兔出血症的免疫诊断及防治

兔病毒性出血症又称兔瘟。自1984年在我国江苏南部地区首次暴发后,短期内迅速蔓延至全国20几个省(市),严重地威胁着养兔生产。为了有效地控制此病,不少院所进行研究并取得了较好效果。本文就我国对此病免疫诊断及防治方面的研究概况综述如下:兔出血症的免疫诊断一、血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验HA 和 HI 是目前诊断兔出血症最基本方法。刘胜江等(1984)使用高速离心的病兔肝悬液为待检物,以1%人○型红血球在96孔 U 型微量反应板上进行了 HA 和 HI 试验,对江苏南部地区暴发的病兔进行检测,证实本病在我国首次流行。张再清等(1989)用戍二醛处理人红细胞代替新鲜人红细胞     

用于“兔瘟”HA试验的冻干醛化红细胞的研制

冻干醛化红细胞与新鲜人O型红细胞对“兔瘟”的诊断效果一致,两者呈显著正相关(r=0.9506)。冻干醛化红细胞4℃保存10个月,比在相同条件下保存的醛化红细胞悬液的HA效价高3个滴度。     

抗兔出血症病毒单克隆抗体的应用

采用抗兔出血症病毒的单克隆抗体对来自全国不同地区的12株兔出血症病毒分别进行了血凝抑制(HI)试验,HI 效价达1:100×2~7～1:100×2~9.结果说明,该单抗对这12株病毒都能抑制其血凝现象.应用该单抗制备的荧光抗体检测了兔出血症病毒在感染兔体内主要脏器组织的分布动态。结果提示,该病毒在细胞核内增殖。经消化道感染兔时,病毒首先在入侵局部肠道粘膜内增殖。然后再侵入肝脏和脾脏。大量病毒生成后,又侵入其它的器官组织,病兔处于病毒血症状态。     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱的研究

用家兔A型魏氏梭菌培养液处理的6株鸡传染性支气管炎病毒,以方阵试验分别与人O型红细胞及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、麻雀、小鼠等8种动物的红细胞作血凝试验,结果证明,鸡传染性支气管炎病毒H_(120)株和M_(41)株均能凝集人O型以及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、小鼠的红细胞,而不能凝集麻雀的红细胞;GIBV株和Connecticut株能凝集人O型以及免、鸡、鹌鹑、麻雀的红细胞,而不能凝集猪、羊、鸭、小鼠的红细胞;Gray株能凝集兔、鸡、鹤鹑的红细胞,不能凝集人O型以及猪、羊、鸭、麻雀、小鼠的红细胞;而经家兔A型魏氏梭菌培养液处理的T株和未经处理的6株病毒对人O型以及8种动物的红细胞都没有凝集性。试验还证明,M_(41)株和H_(120)株对人O型及8种动物的血凝活性水平有差异。     

广东江门地区鸭新城疫病毒感染的血清学调查

为了解广东江门地区各县、市(区)鸭的新城疫(ND)病毒感染情况,为动物防疫工作提供参考数据,于2011年1月至12月,每月从各县、市(区)未免疫鸭群中随机采样,应用血凝抑制试验检测ND抗体水平,共检血清样品2 128份。结果显示,江门市鸭ND抗体阳性率平均为24%(501/2128),其中新会区抗体水平最高,阳性率保持在72%以上;鹤山市、蓬江区、开平市、恩平市全年未检出抗体。不同县、市(区)不同月份ND抗体水平的差异与季节、地理因素有关。     

呼吸型IBV-M41血凝抗原的研制与应用

利用A型魏氏梭菌滤液处理100倍浓缩的IBV-M41株病毒液,成功研制出IBV血凝抗原,HA效价为1∶256～1∶1024,且仅与IBV阳性血清发生反应,而不与其它标准阳性血清反应。建立了IBV的血凝抑制(HI)反应条件,以梅里亚公司和荷兰GD公司生产的IBV商品血凝抗原作为对照,对免疫鸡和SPF鸡血清进行了抗体测定,检测结果无明显差异,且HI检测结果与IDEXX诊断试剂盒的结果符合率为94.2%。研究表明:本实验所建立的方法敏感性高、特异性强,适合于SPF鸡监测和IB疫苗免疫效果检测。     

Seroprevalence and risk factors for canine H3N8 influenza virus exposure in household dogs in Colorado

Background: Since 2004, canine influenza virus (CIV) has spread throughout the United States. While studies suggest that CIV is commonly detected in shelter dogs, little is known about its prevalence in household dogs. Objectives: To evaluate the seroprevalence of CIV in pet dogs presented for care in a veterinary hospital in Colorado and to investigate risk factors that might predispose these dogs to CIV infection. Animals: One hundred and forty dogs presenting to the Community Practice service, 110 dogs seen at other clinical services at Colorado State University's Veterinary Teaching Hospital in 2009, and samples from 75 dogs seen before 2004. Methods: In this prospective study, samples were tested with hemagglutination inhibition assays, using 3 CIV isolates. To identify risk factors for CIV infection, 140 owners completed questionnaires at time of sampling. Results: CIV seroprevalence was 2.9% (4/140) for dogs seen by the Community Practice service and 4.5% (5/110) for dogs seen by other hospital services (P= .48). All sera collected before 2004 tested negative for CIV. No differences were seen in antibody titers to the 3 CIV isolates tested. Data from the questionnaires indicated an association between CIV seropositivity and canine daycare visits (P < .001). Conclusion and Clinical Importance: CIV seropositivity in household dogs in Colorado is low, although it has increased since 2004. Antibody titers to the 3 CIV isolates were comparable, suggesting that measurable antigenic drift has not yet occurred. Finally, dogs boarded in kennels or attending daycare might be at an increased risk of CIV infection.     

禽波氏杆菌病病原性的研究

从患眼炎、鼻窦炎的不同地点、不同时间、不同发病鸡群的病料共分离到１７株细菌，经形态学、培养特性、生化试验和动物回归试验等结果表明，该细菌能运动、无芽孢的革兰氏阴性小杆菌，即禽波氏杆菌。该菌在鲜血平板上产生β溶血，在麦康凯平板上生长良好，形成光滑中央突起的珍珠状菌落。不利用糖类，不能在６．５％ＮａＣｌ培养基中生长，尿素酶和硝酸盐还原试验均呈阳性，能凝集豚鼠和其他动物红血球。人工接种细菌均能使雏鸡发生相似于自然病例的临床症状和死亡，并且从病变部位回收到相应细菌。     

Non-epidermidis coagulase-negative Staphylococcus isolated from farm animals can inhibit the hemagglutinating activity of Newcastle disease virus and bovine parainfluenza virus type 3

The Embp protein of Staphylococcus epidermidis inhibits the hemagglutination of the H1N1 influenza virus and protects birds from a viral respiratory infection. Several species of Coagulase-negative Staphylococcus (CoNS) are present in the respiratory cavity, particularly in nostrils. We hypothesize that non-epidermidis CoNS found in animals can have the same function as observed in S. epidermidis. Thirty Non-epidermidis CoNS isolates were obtained from poultry, sheep, goat, pig, and dairy cow nostrils. Haemagglutination inhibition (HI) activity was assayed in bacteria-free supernatants from non-epidermidis CoNS against Newcastle disease virus (NDV) and bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV). In 13 of the 30 strains (43.3 %), bacteria-free supernatants showed HI activity for NDV and BPIV-3. Staphylococcus xylosus supernatants from poultry (one isolate), sheep (two isolates), goat (one isolate), and dairy cow (three isolates) had the highest frequency of HI activity on NDV and BPIV-3, followed by Staphylococcus sp. supernatants from goat (one isolate), dairy cow (two isolates), and finally Staphylococcus equorum, Staphylococcus chromogens and Staphylococcus gallinarum supernatants with single isolation from poultry, pig and poultry, respectively. Nine isolates had the homologous gene to the embp gene of S. epidermidis, and it was associated with HI activity in the studied viruses. By Pulsed‐field gel electrophoresis, S. xylosus isolates showed to be different clones and related to the origin of isolation and HI activity. These results demonstrate that non-epidermidis CoNS supernatants from different animals and origins have the ability of HI on NDV and BPIV-3, indicating that not only S. epidermidis has the same function.     

对血凝试验用鸡红细胞保存条件的探讨

对血凝试验所用的鸡红细胞的保存条件进行了比较。在新鲜红细胞液中加入甘油或尿素可以延缓细胞破裂溶血。鸡红细胞经戊二醛处理后，于4℃保存9个月，其凝集特性未发生变化，同时在醛化红细胞中加入甘油更能稳定血凝活性。在4℃、室温和37℃条件下将制备的新鲜红细胞和醛化红细胞用作血凝试验的指示剂，不影响新城疫病毒抗原血凝滴度。结果表明，所制备的醛化鸡红细胞的甘油悬液可以替代新鲜红细胞用于临床实践中新城疫的血凝和血凝抑制试验测定。     

应用电镜技术和血凝试验检测犬细小病毒和犬腺病毒

电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污染情况,这对于动物病毒疫苗种毒质量的检测是十分重要的。     

植物血凝素对仔猪免疫功能的影响试验

从鸡子豆中提取植物血凝素（PHA）,测得血凝效价为28,冻干后每瓶PHA重87mg。以7、14、70mg/kg剂量与猪瘟疫苗同时注射35日龄仔猪,15d后,高剂量组的抗体水平比对照组极显著提高（P〈0.01）,中、低剂量组比对照组显著提高（P〈0.05）;高、中、低剂量组的T淋巴细胞百分率比对照组显著提高（P〈0.05）,以高剂量组效果最好。     

我国出口观赏鸟新城疫病毒血清抗体的监测

2001年月11月-2002年12月间，用血凝抑制试验(HI)对28种出口观赏鸟的600份血清进行了NDV血清抗体监测。结果：阳性抗体1：2滴度的检出率为69．8％、1：4的为15．3％、1：8(含1：8以上)的为4．8％；冬春两季的检出率比夏秋两季高。被检雀形目的10个科28种观赏鸟中全部检出不同程度的NDV血清阳性抗体，抗体滴度在1：4以上的有9个科，分别是雀科、梅花雀科、绣眼科、鸫亚科、鹎科、巫鸟科、书眉画科和百灵科，其中以梅花雀科和百灵科的检出率最高。