在绵羊冷冻精液解冻液中添加复合VB提高冻精解冻后品质的研究

按照L9(34)正交表进行实验设计,将复合维生素B、亚硒酸钠维生素E、谷胱甘肽及抗坏血酸在绵羊冻精解冻液中进行单独或组合添加.6号(50.70%±4.32%)和7号解冻液的解冻后活率(55.35%±2.20%)除与4号解冻液(45.29%±4.11%)差异不明显外,均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于其它解冻液.结果表明在解冻液中添加复合维生素B可明显提高冻精的解冻后活率.推荐在绵羊冷冻精液的解冻过程中使用.     

维生素E提高绵羊颗粒冻精品质的机理研究

以无角多赛特公羊为试验对象,采用2步稀释法,在冷冻精液稀释液中添加维生素E,对维生素E提高绵羊颗粒冻精品质的机理进行初探.试验1证明,试验组的活率(0.435)极显著高于对照组(0.365)(P＜0.01),其精子顶体总异常率(33.72%)极显著低于对照组(44.35%)(P＜0.01),且顶体完整率与冻精活率相关极显著(r＝0.662,P＝0.037).添加维生素E可降低冷冻对精子顶体的损害程度,冷冻精液品质得到显著改善.试验2结果表明添加维生素E后AST、ALP、GGT、CK、LDH与ALT的活性均与对照组无显著差异.但对照组与试验组比较,GOT及CK释放量与解冻精子的活率负相关下降(分别为r＝-0.536,r＝-0.209及r＝-0.419,r＝-0.051),LDH的释放量与解冻精子的活率之间正相关(r＝0.123与r＝0.507).试验3结果证明在绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E可以显著提高精子顶体酶的活力,分别为82.91 mu/ml和99.82 mu/ml(P＜0.05).绵羊冷冻精液精子顶体酶活力与精子活率呈正相关(r=0.490),与精子畸形率呈负相关(r=-0.122),冷冻精子活率随着精子顶体酶活力的提高而提高.     

犬精液冷冻液的优化试验

通过对不同配方的稀释液、添加不同剂量的维生素B12、维生素C和复合维生素B对解冻后精子存活影响的试验,结果表明,配方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种稀释液制作的冻精解冻后精子活率均大于30.00%,Ⅰ液最高,其冷冻精液解冻后活率可达43.35%±0.85%,但Ⅰ液和Ⅱ液差异不显著(P>0.05),Ⅲ液最低,差异显著(P<0.05);顶体完整率和畸形率Ⅰ液最优,差异显著(P<0.05);Ⅱ液与Ⅲ液差异不显著(P>0.05);在Ⅰ稀释液中添加维生素B12对解冻后精子的活率、精子顶体完整率影响不大,但平均值都高于对照组,并且随着维生素B12量的增加,精子畸形率有继续降低趋势;添加复合维生素B 4mL/100mL,维生素C 4mL/100mL对犬精子均有保护作用。     

无角陶赛特羊冻精制作技术

对无角陶赛特种公羊 (n =10 )精液品质、精液保存稀释液和冷冻精液制作技术进行了研究。结果表明 :精液密度为 2 0 .0 3± 0 .2 5亿个 /ml,活率 (冻前为 0 .80± 0 .0 6 ,冻后为 0 .5 1± 0 .0 1) ,畸形率 (冻前为 10 .1± 1.0 3,冻后为 2 9.6±0 .3) ,死精子百分率为 14 .1± 7.1;冻精的平均菌落数小于 5 0 0个 /剂。从 3种精液稀释液中选出了一种最佳稀释液 (三羟基氨基甲烷 卵黄 葡萄糖 柠檬酸 ) ;从 3种冷冻保护剂中筛选出甘油为理想的抗冻保护剂 ,其最佳浓度为 4 %～ 6 %。     

复合添加剂对解冻后奶牛性控冻精质量及受胎率的影响

【目的】试验旨在研究以褪黑素和地诺前列腺素组成的复合添加剂对奶牛性控冻精解冻后精子质量及奶牛人工授精后受胎率的影响。【方法】30份奶牛性控冻精样均分为2组：试验组和对照组,试验组添加由24 ng/mL褪黑素、1.5 mg/mL地诺前列腺素及精液稀释液组成的250μL复合添加剂,对照组添加250μL精液稀释液,试验组和对照组均与解冻后的奶牛性控冻精按照1∶1(V/V)进行混合,室温孵育0、2及4 h,通过免疫荧光染色分析精子活率、顶体完整率、高能线粒体活性精子比率;对216头青年奶牛和82头头胎奶牛输精后通过28 d早孕检测来确定受胎率情况。【结果】与对照组相比,经复合添加剂处理0 h的性控冻精活率、顶体完整率及高能线粒体活性精子比率均无显著变化(P>0.05);经复合添加剂处理2 h的性控冻精活率、顶体完整率、高能线粒体活性精子比率均显著升高(P<0.05);经复合添加剂处理4 h的性控冻精活率和顶体完整率均无显著变化(P>0.05),高能线粒体活性精子比率显著升高(P<0.05)。在输精试验中,试验组青年奶牛和头胎奶牛中的受胎率分别为65.22%和48.21%...     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

蓝狐细管冻精的研究

实验对蓝狐细管冻精的冷冻工艺进行了筛选。结果表明:4种以Tris-柠檬酸-甘油稀释液作为细管冻精稀释液效果良好,其中以葡萄糖代替果糖的A1配方及稀释方法效果最佳。常温和冷冻保存中结果发现,虽然乙二醇毒性较大,但含有6%乙二醇的防冻剂的精液解冻后活率最高。冻精平衡以0￣5℃和2 h为宜,初冻温度以-110￣-130℃的冷冻速度最好。解冻时,以38℃水浴中存活指数最高。冷冻过程使精子活率、畸形率、顶体完整率等指标受到明显影响。以A1为冷冻液的冻精人工授精受孕率为73.81%,每胎产仔数为5.81,与鲜精人工授精的结果差异显著(P<0.05)。     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

不同稀释液生理参数对关中奶山羊精液 保存及冷冻效果的研究

[目的]探讨了不同pH值、渗透压的稀释液对关中奶山羊冻精品质的影响,以确定关中奶山羊精液最佳保存与冷冻效果。[方法]通过显微检测在不同pH值、渗透压的稀释液处理对降温前、平衡后与解冻后的精子的活率、复苏率、精子顶体完整率、精子畸形率及精子冻后存活时间等指标进行评估。[结果],关中奶山羊精液稀释液pH值为7.3时,降温前、平衡后与解冻后的精子活率最高,分别达到0.742±0.011%、0.645±0.011%、0.489±0.012%;冻后活率、复苏率及解冻后顶体完整率分别达到0.431±0.009%、63.1±0.427%、65.7±2.018%;精子存活时间在降温前、平衡后及解冻后分别达到12.50±0.141h、11.96±0.186h、11.61±0.753h,冻后 8 h 活率0.52±0.014%;当渗透压为Δ0.754℃时,其精子的保护效果最佳,降温前、平衡后与解冻后的精子活率分别达到0.752±0.045%、0.671±0.024%、0.649±0.036%;冻后活率、复苏率及解冻后顶体完整率分别达到0.481±0.019%、63.6±0.377%、69.9±1.068%;精子存活时间在降温前、平衡后及解冻后分别达到11.82±0.165h、11.94±0.145h、11.70±0.753h,冻后 8 h 活率达到0.43±0.033%。[结论]关中奶山羊精液稀释液最合适的pH值是7.3,最佳渗透压为Δ0.754℃,这一结果对奶山羊稀释液配方优化提供了一定的理论指导。     

野生盘羊与巴什拜羊杂交F1代精液冷冻保存技术研究

为了充分利用野生动物资源,本试验首次对野生盘羊与巴什拜羊杂交F1代公羊精液低温和冷冻保存方法进行了研究。结果:在低温(4±0.5)℃条件下稀释保存F1代羊精液,其中采用葡萄糖-蔗糖-柠檬酸钠-卵黄稀释液(III液)低温保存绵羊精子的时间和活率(168 h,0.35)显著优于葡萄糖-柠檬酸钠-卵黄稀释液(II液)(72 h,0.30)、葡萄糖-乳糖-卵黄稀释液(IV液)(48 h,0.35)和葡萄糖-乳糖-卵黄稀释液(I液)(18 h,0.42);采用4种不同冷冻稀释液制作杂交F1代公羊细管冻精,用III液冷冻保存后解冻效果最佳,解冻后精子活率为(48.6±0.4)%,畸形率为(11.20±2.02)%、顶体完整率为(58.4±3.68)%。     

近交五指山小型猪精液冷冻保存技术的研究

用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。     

提高绵、山羊颗粒冻精品质的研究

用波德代羊和无角陶赛特羊品质良好的鲜精，研制出9个绵羊精液冷冻稀释液配方，同时对稀释、平衡、解冻、授配等方法和步骤进行相庆优化试验研究，获得冻精解冻后活力在0．45以上，冷冻保存409天的冻精解冻后活力在0．5以上，组织300只当地绵羊授配试验，30天的情期不返情率为65．57％。研制出波尔山羊（Boer)冻精的优化的稀释液配方和优化的冷冻工艺，授配试验结果表明母羊情期不返情率为65．77％。     

不同精液解冻液和解冻速率对猪颗粒冻精品质的影响

为提高猪冻精解冻后的质量,本试验选择5种解冻液配方,对猪颗粒冻精进行解冻,结果表明,Ⅴ号解冻液为最佳解冻液,解冻后精子活率为(34±2.4)%,极显著高于Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ组(P0.01);存活时间为(506.6±40.4)h,极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P0.01),显著高于Ⅳ组(P0.05)。选择9种不同的水温,采用V号解冻液对冻精颗粒进行解冻,记录解冻时间,并计算解冻速率,研究结果表明,以27.5℃/s的速率进行解冻,解冻后精子的活率、弯尾率及顶体完整率均达最优水平。     

维生素E对绵羊鲜精及冻精精液品质的影响

日粮中添加维生素E可以提高绵羊鲜精的活率 ,对照组和试验组的活率分别为 0 72± 0 0 7和 0 78± 0 0 6(P <0 0 5 ) ,显著改善鲜精精液品质。采用两步稀释法在绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E ,可以极显著降低冷冻对精子顶体的冷刺激损害程度 ,试验组的活率 ( 0 43 5± 0 0 2 0 )极显著高于对照组 ( 0 3 65± 0 0 2 6) (P <0 0 1) ,精子顶体的总异常率试验组 ( 3 3 72 % )极显著低于对照组 ( 4 4 3 5 % ) (P <0 0 1) ,其中试验组顶体膨胀率和脱落率与对照组分别为 1 2 8%±0 5 8%、2 3 0 8%± 1 45 %与 2 68%± 0 5 9%、2 8 96%± 3 14 %。冷冻精液品质显著改善。     

精清对大熊猫精子质量的影响

将大熊猫精液分为3组:A组(原始精液),B组(50%精清+50%稀释液)和C组(100%稀释液),在37℃间隔20 min取样检查,评估精子活率、运动速度;B、C组取部分样品制备成冻精,解冻后在37℃比较上述2个指标,一共取样9次。结果显示:鲜精部分60 min以内A、B、C 3个组活率、运动速度无显著差异(P>0.05),第80 min A与B、C组间活率出现差异(P<0.01),但B、C组间无差异(P>0.05),A组的活率在第80 min时开始显著降低,B、C组在20～180 min内均未见显著降低(P>0.05)。速度方面,A与B、A与C、B与C组出现显著差异的时间是第80、60、160 min,A、B、C出现显著降低的时间分别是60、160、180 min。冻精部分,B、C组在活率、运动速度中均未见显著差异(P>0.05)。结果表明:在37℃下,精清不利于延长大熊猫鲜精存活时间也不利于精子保持稳定的快速运动,且精清含量越高其影响越大;冻精解冻后的活力则无显著变化。     

现场条件下几种绵羊冻精稀释液的冻精效果比较

在现场条件下进行绵羊精液冷冻。采用国内常用的四种稀释液：１、葡萄糖,柠檬酸钠;２、乳糖,葡萄糖,柠檬酸钠;３、乳糖;４、乳糖,葡萄糖。４种稀释液均以甘油为抗冻剂,１、２和４组采用１步稀释法,３组采用２步稀释法,然后进行细管冷冻。并进行鲜精、平衡后和解冻后的活力检查。３组和４组精解冻后活率为０．４,并用于现场生产。     

细管冻精稀释液以果糖部分替代乳糖配方试验初报

用果糖部分替代乳糖进行牛细管冻精稀释液的选优试验,对5种稀释液配方所生产冻精活力进行测定,结果表明:用20%的果糖替代乳糖效果较好,冻精当天解冻活力、48 h后解冻活力分别为0.375、0.373,与对照组比较,分别提高了3.02%和2.47%,差异显著(P<0.05)。     

猪精液冷冻技术研究

手握法采集约克种公猪(12月龄)精液,于37℃离心后弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,采用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。通过对不同稀释液及冷冻保护剂进行筛选研究,结果表明,Ⅶ号稀释液优于其他6种稀释液(P<0 05);甘油为较佳的冷冻保护剂(P<0 01),其适宜浓度为2%;干解冻效果优于湿解冻,其适宜温度为40～45℃,解冻后精子活率达0 46～0 52;稀释液中添加安钠咖可有效延长精子的冻后存活时间(P<0 01)。     

波尔山羊冻精解冻方法效果的分析

本文针对影响冻精配种受胎率的各种因素 ,总结分析了几年来在波尔山羊冻精配种中 ,采用不同解冻方法解冻冻精对精子活力、存活时间、顶体完整率、死活染色率以及受胎率几方面的影响 ,结果表明 ,80℃高温干解冻最理想 ,活力 0 3～ 0 4 ,存活时间 1 2～ 1 8h ;80℃高温干解冻优于 4 0℃低温湿解冻(P <0 0 5) ;干解冻效果与温度呈正相关关系 ,以 80℃为最好 ,湿解冻与温度呈负相关关系 ,以 4 0℃为最好 ;精子存活时间与受胎率呈正相关关系 ;一次性解冻一粒冻精活力最好 ,两项指标均超过一次解冻多粒冻精 (P <0 0 5) ,一次干、湿解冻 2、3、4粒冻精 ,各项指标间差异不显著 (P >0 0 5) ,且活力、存活时间、顶体完整率、活精子染色率等指标均达到冻精配种要求 (活力 0 3) ,实际配种情期受胎率达 50 %以上。因此 ,在实际生产中 ,可采用高温 ( 80℃ )干解冻和低温 ( 40℃ )湿解冻两种方法 ,一次性解冻 1～ 4粒冻精 ,既能保证受胎率 ,又可节省精液和时间 ,提高工作效率     

稀释液中添加维生素E对绵羊冷冻精液品质的影响

采用两步稀释法 ,在绵羊冷冻精液中添加维生素E ,精液稀释平衡后精子活率 ,试验组 (0 .6 35 )高于对照组(0 .5 75 ) ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而解冻后 ,试验组活率 (0 .4 35 )极显著高于对照组 (0 .36 5 ) (P <0 .0 1) ;精子顶体总异常率 ,试验组 (33.72 % )极显著低于对照组 (4 4 .35 % ) (P <0 .0 1) ,其中试验组顶体膨胀率和脱落率与对照组分别为 1.2 8% ,2 3.0 8%与 2 .6 8% ,2 8.96 %。添加维生素E可以降低冷冻对精子顶体的损害程度 ,提高精液品质。试验也证明在解冻后保存 1h内 ,精子活率呈现缓慢下降的趋势 ,但 1h后活率急剧下降 ,因而 ,绵羊冻精颗粒解冻后应在 1h内输精完毕