牛奶中四环素类抗生素放射免疫检测方法验证分析

验证了牛奶中四环素类抗生素残留检测的放射免疫方法。该法检测牛奶中四环素、土霉素、金霉素3种四环素类药物的最低浓度可分别达到30、100、50μg/L,RSD(n=6)均小于3.9%。该方法特异性强,与环丙沙星、链霉素、青霉素G、阿莫西林、磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、红霉素、螺旋霉素无交叉反应。因此,该法能达到检测牛奶中四环素类抗生素残留的要求。     

胶体金免疫层析法测定牛奶中β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺残留

应用胶体金免疫层析法对牛奶中的β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺残留进行检测,考察该法的灵敏度、假阳性率、假阴性率、特异性及准确性。结果表明：用胶体金免疫层析法测定牛奶中的β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺,检测限分别为青霉素G 2μg/L、氨苄青霉素3μg/L、阿莫西林4μg/L、苯唑青霉素6μg/L、邻氯青霉素6μg/L、双氯青霉素6μg/L、萘夫西林20μg/L、头孢喹肟20μg/L、头孢哌酮40μg/L、头孢曲松50μg/L、头孢噻呋90μg/L、头孢洛宁10μg/L、三聚氰胺50μg/L,假阳性率不大于5%,假阴性率为0;方法特异性较好,与牛奶中常见的其他抗生素无交叉反应;结果准确可靠,对实际样本的检测结果与液相色谱-质谱/质谱法基本一致。该方法简便、快速、准确、稳定,可作为牛奶中β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺残留现场快速检测的一种有效手段。     

ICP—MS法测定两种注射液中铅铋残留量的研究

采用ICP—MS法测定两种注射液中痕量有害重金属元素Pb、Bi的含量。在最优条件下，铅和铋的质量浓度分别在0．03-100．00μg/L和0．02-100．00μg/L范围内呈线性关系，相关系数均为0．999992。检出限分别为0．021μg/L和0．012μg/L。加标回收率为100．4％-103．0％。相对标准偏差小于1．7％。该方法具有简便快速、灵敏度高、准确可靠等特点，可满足临床常用的两种注射液中痕量Ph、Bi残留量的检测要求。     

酶联免疫吸附法测定牛奶中青霉素残留的试验报告

用酶联免疫吸附法对牛奶中残留的青霉素进行了检测,结果得出该方法的最低检出限为2.0μg/L。本方法对牛奶中添加青霉素浓度为2.0～6.0μg/L的检测回收率在65.0%～115.0%范围内,批内变异系数≤14%,批间变异系数小于≤15%。表明该方法可用于青霉素残留量的筛选检测。     

牛奶中氯唑西林残留量的高效液相色谱法测定

为建立高效液相色谱法测定牛奶中氯唑西林残留的方法,牛奶样品用乙腈沉淀蛋白,三氯甲烷反萃取,有机相旋干用流动相溶解,正己烷除脂。0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(pH 5.0)-乙腈(68∶32)比例为流动相,C18反相色谱柱分离,紫外检测。结果氯唑西林在15μg/kg～1 000μg/kg范围内呈现良好的线性关系,相关系数大于0.999 0;在15、30、60μg/kg三个添加水平,氯唑西林在牛奶中的平均回收率为70.25%～94.38%,批内变异系数小于8.34%,批间变异系数小于3.52%。方法检出限为5μg/kg,定量限为15μg/kg。表明该检测方法简单、灵敏、可靠,适用于牛奶中氯唑西林残留的分析检测。     

阿莫西林残留ELISA检测试剂盒质量验证

为了对用于检测牛奶中阿莫西林残留的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒进行质量验证,试验采用不同梯度浓度的方法进行研究。结果表明:阿莫西林标准品浓度在0.5~13.5μg/L范围内具有较好线性关系,50%竞争抑制浓度为2.0μg/L,试剂盒对牛奶中阿莫西林的最低检测限为4.6μg/L。牛奶中分别添加5.0,10.0μg/L的阿莫西林标准品,回收率在72.2%~108.7%之间,批内变异系数小于8.9%,批间变异系数小于11.9%;试剂盒可在37℃条件下保存7 d,可同时检测牛奶中阿莫西林、青霉素、氨苄西林、萘夫西林等药物的残留总量。与仪器方法进行实际样品检测相比,ELISA方法检测结果具有良好的可信度。     

酶联免疫吸附法检测鸡肉中林可霉素

通过对林可霉素分子结构进行改造,制备了半抗原及人工抗原免疫动物,制备了林可霉素的单克隆抗体。该方法的灵敏度为0.2μg/L,对林可霉素的交叉反应率为100%,对克林霉素、红霉素、泰乐菌素、链霉素、卡那霉素的交叉反应率均小于1%,以20μg/kg和40μg/kg添加水平的鸡肉样本回收率范围为83.5%～96.5%,变异系数小于15%,表明该方法快速、灵敏、可靠,适合用于检测鸡肉中的林可霉素残留限量检测的要求。     

鸡蛋中新霉素残留的微生物学检测方法

以表皮葡萄球菌26069型(Staphylococcus epidermidis,ATCC12228))为测试菌，用琼脂扩散法测定新霉素在鸡蛋中的残留。本方法的最低检测限为0．075μg／mL，标准曲线线性范围0．15～2．4μg／mL，相关系数为0．99997。鸡蛋中的最低检出限为0．25μg／g，可靠检出限0．5μg／g。在鸡蛋中添加新霉素0．5和1．0μg／g的回收率分别为78．6%和80．5%。本方法灵敏度和回收率高，操作简便，不需特殊设备，样品用量少，易于推广，适用于新霉素残留的定量分析。     

牛奶中替米考星残留量的检测方法研究

建立了牛奶中替米考星残留量的检测方法。样品用乙腈提取，C18柱净化，在290nm波长下进行HPLC测定。在空白牛奶中添加0．025、0．05、0．10μg/mL浓度的替米考星时，该方法的平均回收率在72．1％～85．8％之间，日内变异系数在7．0％～10．7％之间，日间变异系数在3.5％～5．4％之间，检测限为0．005μg／mL。该方法适用于牛奶中替米考星残留量的测定。     

ELISA法测定牛奶和鸡肌肉中四环素类药物残留

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了牛奶和鸡肉中四环素、土霉素、金霉素药和多西环素的ELISA检测方法。该方法对牛奶和鸡肉中四环素的检测限为7μg／L（μg／kg）左右。在牛奶和鸡肉中，4种四环素类药物100μg／L（μg／kg）浓度的添加回收率范围为43．6％～101．4％，批内变异系数小于25％，批间变异系数在30％以内。牛奶的临界值为39．5μg／L，鸡肉的临界值为35.3μg／kg。     

氯霉素残留检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定

在建立氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上．研制出CAP残留快速检测试剂盒（CAP-kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP-kit的标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=0．9953，检测范围为1．0μg/L～128．0μg/L，灵敏度为0．85μg／L，半数抑制浓度（IC50）为7．54μg/L，检测限为1．0μg/L；牛奶样、猪肉样的平均添加回收率为88．3％、82．5％，平均批内和批间变异系数均〈15％；CAP-kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应（CR％）为150％，与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应；试剂盒在4℃可保存6个月。     

应用胶体金免疫层析法测定牛奶中的磺胺类药物残留

应用胶体金免疫层析法对牛奶中的磺胺类药物残留进行检测,研究该方法的灵敏度、假阳性率、假阴性率及特异性。结果表明,用胶体金免疫层析法测定牛奶中的磺胺类药物,检测限分别为磺胺嘧啶60μg/L、磺胺二甲基嘧啶20μg/L、磺胺喹噁啉80μg/L、磺胺氯哒嗪30μg/L、磺胺间二甲氧嘧啶50μg/L、磺胺间甲氧嘧啶50μg/L、磺胺甲噁唑80μg/L、磺胺苯酰50μg/L、磺胺对甲氧嘧啶30μg/L、磺胺异噁唑10μg/L、磺胺甲氧哒嗪70μg/L、磺胺多辛70μg/L,假阳性率为2%,假阴性率为0;方法的特异性较好,对其他抗生素无交叉反应;检测实际样本的结果与液相色谱-质谱/质谱法基本一致。可见,该方法简便、快速、准确、稳定,适用于牛奶中磺胺类药物残留的现场快速检测。     

用什么堵住滥用激素“黑洞”？——糖皮质激素类残留检测方法和标准亟待完善

滥用激素对人及动物、社会和生态环境造成直接及潜在的危害,近年来畜产品中的激素残留问题倍受关注。合成类糖皮质激素普遍的非法用途是用于增加家畜的饲料摄入量从而使其达到增重的目的。作为生长促进剂已被欧盟禁用并且建立最大残留限量(maximum residue limits,MRLs)的有地塞米松,倍他米松(肝脏:2μg/kg;肌肉:0.75μg/kg;牛奶:0.3μg/l),甲基波尼松龙(肌肉,脂肪,肝脏,肾脏:10μg/kg)及波尼松龙(肌肉,脂肪:4μg/kg;牛奶:6μg/l;肝脏,肾脏:10μg/kg)。糖皮质激素类作为生长促进剂被各国禁用。专家指出,近几年,国外已研发出专门用于筛选牛奶,尿液,组织及饲料样本中糖皮质激素(地塞米松,倍他米松,双氟米松,曲安西龙,波尼松龙)的ELISA试剂盒,最低检测限达0.125ng/ml～4ng/ml。为了限制糖皮质激素类药物的非法生产与使用,保障消费者的安全和健康,我国有必要建立高效、灵敏的检测方法。迄今为止,我国对糖皮质激素类残留的研究仍然处于初级阶段,我国虽已对倍他米松和地塞米松制定了最大残留限量,但目前仍未见官方颁布相关的检测标准方法。为此,相关标准技术部门应加紧收集和跟踪国外涉及到肉产品的规章和研究方法,加强国际合作与交流,加大兽药残留分析方法的技术研究和引进力度,制订和完善我国药物残留标准,缩小我国标准与国际标准之间的差距。     

牛奶中有机磷农药残留的气相色谱法测定

提出同时测定牛奶中敌百虫、甲胺磷、敌敌畏、马拉硫磷、倍硫磷五种有机磷农药残留的检测方法。在选定的色谱条件下,添加浓度在0.5～10.0μg/mL之间时5种农药的检测限分别为0.031μg/mL、0.013μg/mL、0.023μg/mL、0.019μg/mL和0.014μg/mL,回收率范围分别达81.0%～85.5%、84.5%～89.4%、79.0%～81.8%、77.3%～82.5%和77.9%～89.5%,变异系数在0.29%～3.96%之间。本方法对牛奶中有机磷农药残留的检测分析准确可靠。     

酶联免疫吸附法测定猪尿中安定的残留

用酶联免疫吸附法对猪尿中残留的安定进行检测,结果得出该方法的最低检出限为5．0μg/L;回收率在60％以上,批内变异系数≤17％,批问变异系数小于≤14％。表明该方法可用于安定残留量的筛选检测。     

鸡毒支原体的分离鉴定和最低抑菌浓度测定

从山东、河北、北京和天津等不同地区分离、鉴定了4株鸡毒支原体，通过体外最低抑菌浓度测定发现泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉索、罗红霉素、林可霉素／壮观霉素合剂、氧氟杀星、乳酸红霉素和盐酸林可霉素对该4个菌株的最低抑菌浓度(MIC)平均值分别是0．0062μg/ml、0．0171μg/ml、0．0682μg/ml、8．5248μg/ml、8．5248μg/ml、0．1024μg/ml、0．4550μg/ml和15．4944μg/ml，同时发现不同菌株之间的最低抑菌浓度有明显的差异。该试验结果表明鸡毒支原体容易对抗菌药物产生抗药性，目前临床预防或治疗鸡毒支原体感染可选用泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉素和氧氟杀星等药物，而常规使用的红霉素和罗红霉素效果不佳。     

链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法

建立了链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法.样品用10%(W/V)三氯乙酸提取,通过冷冻离心使牛奶中残留的链霉素得到分离,再用枯草芽孢杆菌作为检定菌进行含量测定.结果显示,链霉素在0.10～3. 20 μg/mL的浓度范围内具有良好线性关系(r=0.998 1),牛奶中3种添加浓度0.20、0.80、1.60 μg/g的平均回收率为97.6%(n=9),RSD分别为1.6 %、3.7 %、1.2 %(n=3).     

牛奶中链霉素的竞争酶标检测方法

链霉素作为奶牛常用的抗生素，其残留不仅危害人类健康．同时也影响牛奶的品质，造成经济损失。本文对牛奶中链霉素竞争酶标检测的方法进行了介绍。     

链霉素残留检测ELISA试剂盒的研制及应用

本研究采用EDC法人工合成链霉素抗原（SM—BSA）,免疫BALB／c小鼠,通过杂交瘤技术获得了分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了快速检测链霉素（SM）残留的酶联免疫方法,并成功研制了试剂盒。然后对其灵敏度、准确度、特异性、基质效应性等技术指标进行检测,同时应用该试剂盒对生长猪尿液中的残留情况进行检测。结果表明：除双氢链霉素外,该试剂盒与其它抗生素类药物均无交叉反应;线性检测范围为1～1289g／L,相关系数R^2=0．9251,灵敏度为0．45μg／L,半数抑制浓度（IC50）为7．769g／L,检测限为19g／L;猪尿样的平均添加回收率为84．1％;基质对该试剂盒的检测结果影响不大。该试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SM残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。     

链霉素残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及其性能测定

链霉素（SM）属于氨基糖苷类抗生素,用于革兰氏阴性菌和结核杆菌感染,在治疗家畜感染性疾病中发挥了重要作用,但其毒副作用较大。1999年农业部在《动物性食品中兽药最高残留限量》的通知中规定牛奶中链霉素的最高残留限量（MRL）为200μg／kg。然而,相应的链霉素检测技术并不完备,由于氨基糖苷抗生素缺少发色基团,应用到HPLC时常要对其衍生化,设备条件过高,难以普及;并且其理化测定方法相当复杂和通用性差。