杂草对ACCase抑制剂的抗性

以乙酰辅酶A羧化酶（ACCase）为作用靶标的除草剂是高效、选择性的禾本科杂草除草剂,其在全球范围内的广泛、重复使用,导致了抗药性杂草的发生和发展。到目前为止,已经在30个国家有37种抗此类除草剂的杂草生物型。抗药性杂草严重威胁杂草治理和农业生产,由此引发的生态问题及粮食安全问题引起了广泛的关注。文章概述了ACCase抑制剂抗药性杂草的发生现状,从杂草ACCase突变、代谢解毒等几个方面综述了杂草抗ACCase抑制剂的抗性机制,以期为ACCase抑制剂抗性研究提供参考。最后讨论了阻止或延缓抗药性发生的杂草管理措施。     

山东省稻茬麦区菵草对炔草酯的抗性水平

为明确山东省济宁市鱼台县稻茬麦区菵草对炔草酯的抗性水平,采用温室盆栽法和培养皿法,分别测定14个稻茬麦田菵草对炔草酯的抗性水平。结果表明,温室盆栽法和培养皿法测得的菵草对炔草酯抗性趋势基本一致,除采自王庙镇南房村路边的菵草仍处于敏感状态外,其余种群均对炔草酯产生了较高水平的抗性。在13个抗性种群中,中抗种群4个,高抗种群9个,其中老寨乡张埝村的3个种群抗性水平相对较高,温室盆栽法的抗性倍数分别为763.75、2 278.85、4 411.79,培养皿法下的抗性倍数分别为313.75、394.50、624.00。     

猪殃殃对AHAS抑制剂靶标抗性的快速分子检测

为建立猪殃殃靶标抗性快速检测方法,并明确小麦田猪殃殃Galium aparine var.tenerum对AHAS抑制剂靶标的突变类型及分布,从河南、陕西、安徽、江苏和山东5省不同田块采集疑似对AHAS抑制剂产生抗性的猪殃殃植株,采用特异性引物PCR扩增靶标酶AHAS基因保守区片段,并以直接测序法检测采集样品,通过与拟南芥AHAS基因序列比对分析后明确其突变位点。结果显示,在5省25个农田的样品中共有19个农田检测到AHAS突变,分布在河南、安徽和江苏3省;在检测样品中发现突变发生在2个位点,共有3种突变类型,分别是197位脯氨酸(CCC)突变为丙氨酸(GCC)或丝氨酸(TCC),或者是574位色氨酸(TGG)突变为亮氨酸(TTG),检测结果与田间药效反应基本一致。这种用特异性引物扩增目的片段测序的方法,由于其可以在生长当季进行检测,适用于田间靶标突变抗性猪殃殃的快速检测与监测。     

河南省多花黑麦草对ACCase和ALS抑制剂的抗性及其靶标基因突变分析

为明确河南省部分地区的多花黑麦草Lolium multiflorum种群对乙酰辅酶A羧化酶（acetylCoA carboxylase,ACCase）和乙酰乳酸合成酶（acetolactate synthase,ALS）抑制剂类除草剂的抗性水平和抗性机理,采用整株生物测定法测定采自新乡市和驻马店市的多花黑麦草种群对ACCase抑制剂类除草剂精噁唑禾草灵、炔草酯、唑啉草酯和ALS抑制剂类除草剂甲基二磺隆、氟唑磺隆、啶磺草胺的抗性水平,并对多花黑麦草ACCase和ALS靶标酶编码基因进行克隆及氨基酸序列比对,分析其靶标抗性机理。结果显示,与多花黑麦草敏感种群HNXX01相比,HNZMD04和HNXX05种群对6种除草剂均产生了抗性,HNZMD04种群对精噁唑禾草灵和啶磺草胺的相对抗性倍数分别为44.65和40.31,对炔草酯和氟唑磺隆的相对抗性倍数分别为11.91和11.93;HNXX05种群对精噁唑禾草灵和氟唑磺隆的相对抗性倍数分别为27.70和25.67。HNZMD04和HNXX05抗性种群的ACCase基因均发生了D2078G突变,2个种群的突变率分别为55%和70%;HNZMD04...     

4种助剂对异丙隆防除菵草的增效作用

为了比较4种助剂Silwet 806、红太阳A8、激健、安融乐对异丙隆防除菵草Beckmannia syzigachne的增效作用及机制,采用整株生物测定法测定4种助剂与异丙隆混用后对菵草的生物活性及对小麦的安全性;采用仪器分析法测定4种助剂对异丙隆药液的表面张力、叶面接触角、干燥时间和在叶面上的沉积量的影响.结果 表...     

马铃薯晚疫病菌对甲霜灵抗性的快速检测方法

为快速检测马铃薯晚疫病菌——致病疫霉Phytophthora infestans对甲霜灵的抗性,基于已知致病疫霉RPA190基因的T1145A变异引起的F382Y氨基酸点突变与甲霜灵抗性有关,通过设计4对特异性引物F382Y-F1/F382Y-R、F382Y-F2/F382Y-R、F382Y-F3/F382Y-R和F382Y-F4/F382Y-R建立等位基因特异性PCR(allele specific-polymerase chain reaction,AS-PCR)快速分子检测法,其中F382Y-R引物在4对引物里保持不变,并分析所建分子检测法的特异性和灵敏度。结果表明,正向特异性引物F382Y-F2、F382Y-F3和F382Y-F4的3''末端在致病疫霉抗甲霜灵菌株原有核苷酸突变位点1145A(对应引物为F382Y-F1)的基础上,再人工引入第1144位的核苷酸突变,将1144T分别突变成1144G、1144C和1144A,并优化退火温度和特异性引物与内参引物ITS1/ITS4比例,最终确定最适退火温度分别为54、60和58℃,特异性引物与内参引物最适浓度比例均为5∶1。以该3条引物对应的3对特异性引物和内参引物ITS1/ITS4组成的3组多重AS-PCR引物对甲霜灵敏感和抗性菌株具有良好的特异性,敏感菌株的扩增产物含1条879bp的内参片段,抗性菌株的扩增产物为1条879bp的内参片段和1条461bp的目的片段。3组AS-PCR检测体系均具有较高的灵敏度,其中引物F382Y-F4/F382Y-R对致病疫霉DNA的检测灵敏度达0.4pg/μL,引物F382Y-F2/F382Y-R和F382YF3/F382Y-R的检测灵敏度达4pg/μL。     

7种苗后除草剂对菵草的除草活性以及对小麦的安全性评价

为了筛选对菵草高效且对小麦安全的除草剂品种,采用温室盆栽法测定了 7种苗后除草剂对菵草的除草活性以及对小麦的安全性.结果表明,5％唑啉草酯EC和15％炔草酯WP对菵草防效优异,ED90仅为各自田间登记低剂量的1/3和1/2;50％异丙隆WP和7.5％啶磺草胺WG对菵草防效较好,ED90与各自田间登记高剂量相当;69 g...     

稗草对二氯喹啉酸抗性鉴定方法研究

本文对稗草对二氯喹啉酸的抗性方法进行了研究，结果表明小杯法、等浓度效果法和茎叶喷雾法和琼脂法都可以来鉴定稗草对二氯喹啉酸的抗性，其中琼脂法相关性高、试验条件一致性好、重复性好和操作简便，是一种快速的鉴定方法。琼脂法以芽长为指示参数选取发芽刚露白的稗种在27℃温度下培养72h。     

抗性和敏感生物型菵草代谢精噁唑禾草灵的速度差异

为了测定菵草抗性生物型SD-04-SS和敏感生物型SD-12对精噁唑禾草灵代谢速度的差异,建立了精噁唑禾草灵及其主要代谢产物精噁唑禾草酸、6-氯苯并噁唑酮的高效液相色谱(HPLC)分析方法。结果表明,在0.123~30.000μg/m L范围内、0.977~1 000.000μg/m L范围内、0.469~30.000μg/m L范围内6-氯苯并噁唑酮、精噁唑禾草酸、精噁唑禾草灵浓度与响应值线性关系良好,相关系数(r)分别为0.991 2、0.972 2、0.996 3。应用上述方法分析发现,精噁唑禾草灵处理后2 h在菵草体内即可检测到精噁唑禾草酸和6-氯苯并噁唑酮,药后2~96 h抗性生物型SD-04-SS体内精噁唑禾草灵的含量始终略高于敏感生物型SD-12,药后24~72 h抗性生物型SD-04-SS体内精噁唑禾草酸的含量显著低于敏感生物型SD-12,说明抗性生物型降解精噁唑禾草酸的速度比敏感生物型更快。     

抗性和敏感生物型菵草代谢精唑禾草灵的速度差异

为了测定菵草抗性生物型SD-04-SS和敏感生物型SD-12对精唑禾草灵代谢速度的差异,建立了精唑禾草灵及其主要代谢产物精唑禾草酸、6-氯苯并唑酮的高效液相色谱(HPLC)分析方法.结果表明,在0.123~30.000 μg/mL范围内、0.977~1 000.000 μg/mL范围内、0.469~30.000 μg/mL范围内6-氯苯并唑酮、精唑禾草酸、精唑禾草灵浓度与响应值线性关系良好,相关系数(r)分别为0.991 2、0.972 2、0.996 3.应用上述方法分析发现,精唑禾草灵处理后2 h在菵草体内即可检测到精唑禾草酸和6-氯苯并唑酮,药后2~96 h抗性生物型SD-04-SS体内精唑禾草灵的含量始终略高于敏感生物型SD-12,药后24~72 h抗性生物型SD-04-SS体内精唑禾草酸的含量显著低于敏感生物型SD-12,说明抗性生物型降解精唑禾草酸的速度比敏感生物型更快.     

稻田稗草对噁唑酰草胺的抗药性水平和ACCase活性

为明确稻田稗草Echinochloa phyllopogon(Stapf.)Koss.对噁唑酰草胺的抗药性水平,在对采自辽宁省、黑龙江省、湖南省和江西省共20个水稻产区的稗草种群按田间推荐剂量筛选后,测定了疑似抗药性稗草种群BN-1、BN-16、BN-17和疑似敏感性稗草种群BN-20的整株抗药水平,并离体测定了不同种群体内乙酰辅酶A羧化酶(acetyl co-enzyme A carboxylase,ACCase)对噁唑酰草胺的敏感性。结果显示,在田间推荐剂量下,种群BN-1、BN-16、BN-17和BN-20相对鲜重分别为92.6%、86.6%、64.9%和1.1%。相比种群BN-20,种群BN-1、BN-16和BN-17对噁唑酰草胺敏感性较低,抗性指数分别为33.83、30.07和14.87;ACCase活性测定结果显示,种群BN-1、BN-16和BN-17的抗性指数分别为33.71、27.16和15.23。结果表明稗草种群BN-1、BN-16和BN-17均对噁唑酰草胺产生了抗药性,抗性程度依次为BN-1BN-16BN-17,而其体内ACCase敏感性降低可能是其产生抗药性的原因之一。     

安徽省部分稻茬麦田看麦娘种群对常用ACCase类抑制剂的抗性现状及茎叶处理混用配方筛选

为明确看麦娘对乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)抑制剂类除草剂的抗性现状,在安徽省看麦娘发生严重的稻茬麦田共采集30个种群,采用整株生物测定法分别测定了其对精噁唑禾草灵、炔草酯和唑啉草酯3种ACCase类除草剂的抗性水平。另选择三甲苯草酮、啶磺草胺等7种茎叶处理剂针对发现的高抗种群AHCZ-2进行了生物活性测定,同时将5种药剂与异丙隆混用开展了田间药效评价。结果显示：供试30个田间看麦娘种群中,26个种群对精噁唑禾草灵表现为高水平抗性,占供试种群总数的86.67%,GR50值(有效成分,下同)在230.93～1755.54 g/hm²之间,抗性指数(RI)达12.58～95.66;21个种群对炔草酯表现为高水平抗性,占种群总数的70.00%,GR50值在147.18～1213.44 g/hm²之间,RI达11.93～98.36;19个种群对唑啉草酯表现为高水平抗性,占种群总数的63.33%,GR₅₀值在107.63～614.18 g/hm²之间,RI达12.21～69.69;此外,采自相同地区的看麦娘...     

一种简便,快速的棉铃虫抗性监测方法

一种简便、快速的棉铃虫抗性监测方法湖北省植保总站（４３００７０）彭超美近几年我省棉铃虫持续大发生，用于防治棉铃虫的化学农药量逐渐增加，棉铃虫对农药的抗性也在发生变化。据１９９３年～１９９４年荆州抗性监测站对公安和潜江棉铃虫抗药性监测结果，表明棉铃虫对...     

高粱田主要杂草对HPPD抑制剂类除草剂喹草酮的抗性

为明确高粱田主要杂草对HPPD抑制剂类除草剂喹草酮的抗性,采用整株生物测定法测定马唐Digitaria sanguinalis、稗Echinochloa crusgalli、狗尾草Setaria viridis、野稷Panicum miliaceum、反枝苋Amaranthus retroflexus和藜Chenbopodium alum六种主要杂草的敏感种群对喹草酮的敏感基线,同时测定全国不同生态区高粱田中这6种杂草对喹草酮的抗性水平。结果显示,喹草酮对野稷、稗、反枝苋和藜的防除效果较好,GR₅₀介于12.76～32.72 g (a.i.)/hm²之间,GR₉₀介于68.04～193.54 g (a.i.)/hm²之间,对马唐的防除效果略低,GR₅₀介于44.23～56.19 g (a.i.)/hm²之间,GR₉₀介于472.26～849.24g(a.i.)/hm²之间。采自全国不同生态区高粱田的马唐、稗、狗尾...     

大白菜对软腐病抗性的快速鉴定方法研究

通过3个试验研究各种因素对活体接种软腐细菌后的大白菜软腐病发病的影响,建立了一套大白菜对软腐病抗性的快速鉴定方法。通过接种后空气湿度对软腐病发病的影响,得出最佳发病湿度在90%以上;通过L9(34)有重复的正交试验,研究接种方法、苗龄、接种液对软腐病发病的影响,得出最佳接种方法是用刀片轻划4道小伤口、最佳苗龄为7~8叶期、适宜接种液为液体培养基悬浮液;通过接种浓度对软腐病发病的影响试验,得出最佳接种液孢子量为1013个/mL;病情指数调查均在接种后第7天。     

3种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立及应用

正病毒病是引起甘薯品质降低和减产的重要原因之一,现已报道30多种能侵染甘薯的病毒~([1,2])。山东省是甘薯种植大省,病毒种类近10种~([3,4])。甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFM V)、甘薯潜隐病毒(Sweet potato latent virus,SPLV)是为害甘薯的主要病毒,在全国甘薯种植区广泛分布~([5,6])。甘薯病毒2(Sweet potato virus 2,SPV2)为Potyvirus的一个暂定种,多与同属的其他病毒混合侵染~([7])。多重PCR技术由Chamberian等~([8])1988年首次提出,可实现多基因的同时扩增,具有节省时间、提高效率的优点,已初     

宝应县麦田杂草发生特点及除草剂对菵草的防除效果

于2014年运用七级目测法及W形倒置9点取样法,对江苏省宝应县不同土壤类型麦田杂草种类、田间杂草优势种群、分布状况进行了调查,并通过田间试验验证了不同除草剂对优势杂草种群的防效。结果表明,宝应县麦田杂草为禾本科及阔叶类杂草并存,其中以禾本科为主,主要涉及13科28种,优势种为牛繁缕、日本看麦娘、菵草,其发生频度分别为66.6%、33.0%、22.0%;7.5%啶磺草胺WG与8%炔草酯EW 900 m L/hm2及以上混用、单用8%炔草酯EW 600 m L/hm2及以上、5%唑啉·炔草酸EC 1 200 m L/hm2、15%炔草酯WP480 g/hm2处理区在药后45 d,其对菵草株防效均在95%以上,鲜质量防效均在94%以上,明显好于单用7.5%啶磺草胺WG 187.5 m L/hm2、6.9%精唑禾草灵EC 1 500 m L/hm2处理区。     

上海市水稻田千金子对3种乙酰辅酶A羧化酶抑制剂的抗性现状及酶突变机制

为明确上海市水稻田千金子对乙酰辅酶A羧化酶 (ACCase) 抑制剂类除草剂的抗性发生情况及可能存在的抗性机制,在上海市千金子发生严重地区的水稻田共采集51个种群,采用单剂量抗性甄别法测定了不同千金子种群对3种ACCase抑制剂类除草剂的抗性水平,扩增和比对了靶标酶ACCase基因部分片段的差异。结果显示:在氰氟草酯105 g/hm2有效成分剂量选择压下,8个千金子种群标记为抗性种群,6个种群为发展中抗性种群;在噁唑酰草胺 120 g/hm2有效成分剂量选择压下,4个千金子种群标记为抗性种群,5个种群为发展中抗性种群;在精噁唑禾草灵62.1 g/hm2有效成分剂量选择压下,6个千金子种群标记为抗性种群,2个种群为发展中抗性种群。对15个抗性千金子种群靶标酶基因片段的测序发现,9个种群共发生了4种ACCase基因突变类型,分别为ACCase基因 1999 位点色氨酸 (TGG) 突变为丝氨酸 (TCG)、1999位点色氨酸 (TGG) 突变为半胱氨酸 (TGT)、2027位点色氨酸 (TGG) 突变为丝氨酸 (TCG) 以及2027位点色氨酸 (TGG) 突变为半胱氨酸 (TGT/TGC)。其中,5个抗性千金子种群ACCase 基因突变频率均大于60%。研究表明,ACCase抑制剂类除草剂抗性千金子在上海市部分地区发生已较为严重,ACCase 基因突变是导致不同千金子种群对该类除草剂产生抗性的重要原因之一。     

樱桃灰霉病菌LFD-RPA快速检测方法的建立

 灰霉病是樱桃的主要病害,由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)侵染所致。该病菌可为害樱桃的花、叶、果实等多个部位,尤其在樱桃生长中后期及贮藏期发病率极高,危害严重。依据樱桃灰霉病菌内转录间隔区(ITS)序列设计引物,建立了樱桃灰霉病菌的重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(LFD-RPA)检测方法。结果表明,该方法检测条件为37℃扩增30 min,能特异性地检测灰葡萄孢,灵敏度为100 fg·μL^-1,略低于常规PCR(10 fg·μL^-1)和荧光定量PCR(7.43 fg·μL^-1);检测方法用时短,PRA扩增仅需30 min,LFD检测仅需10 min。本研究建立的快速检测方法可用于樱桃灰霉病菌的实时监测及病害的田间快速诊断。