插接与劈接嫁接西瓜对黄瓜绿斑驳花叶病毒病传播的比较

为了明确西瓜嫁接对黄瓜绿斑驳花叶病毒病传播的影响,应用插接法与劈接法中刀片、竹签2种工具分别粘毒后再嫁接西瓜进行传毒能力比较,结果为：插接法嫁接传毒能力强于劈接法嫁接,粘毒竹签的传毒能力强于粘毒刀片,最初嫁接的1、2株瓜苗最容易染毒发病。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒病防治研究进展

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)主要危害葫芦科作物,已被世界上许多国家和地区列为检疫性有害生物。CGMMV目前在我国23个省、市、区已有报道发生和危害,严重影响葫芦科作物的生产;近年来该病害在国内外呈现迅猛扩展的趋势并对生产造成危害。本文综述了防治该病害的种子处理、化学及生物防治、嫁接以及转基因等分子生物学方法;分析了CGMMV与寄主黄瓜互作研究的最新进展,对小分子RNA参与调控寄主对CGMMV病毒的防控策略提出了展望,并概述了下一代测序技术、基因编辑技术在植物新病毒的检测、鉴定以及培育抗病新品种等方面的应用。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒病的鉴定与防治

黄瓜绿斑驳花叶病毒病是1种检疫性有害生物,主要为害葫芦科瓜类作物,在引种和调运种子、种苗时应加强对种苗进行检测,最好实行产地检疫。通常采用生物学、电镜观察、血清学和分子生物学进行鉴定。控制黄瓜绿斑驳花叶病毒病的有效方法是调运无病的种苗和瓜果,其次是合理轮作减少毒源。     

西瓜上黄瓜绿斑驳花叶病毒病的症状及防治措施

黄瓜绿斑驳花叶病毒病(CGbMMV)是全国农业植物检疫性有害生物.该病除为害黄瓜外,还为害西瓜、甜瓜、南瓜等多种瓜类作物.新民市植保站经过3年的试验研究,对西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒的田间症状有了进一步的了解,总结提出了可行的防治措施.     

山东省黄瓜绿斑驳花叶病毒病田间调查与检测鉴定

2008～2011年在山东省葫芦科作物主产区进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒病的田间调查,并对疑似样品进行DAS-ELISA和RT-PCR检测.结果发现,该病害每年在山东省均有不同程度的发生,已给山东省葫芦科作物的生产造成严重威胁,必须采取切实可行的措施,严防其扩散传播,保护农业生产安全.     

黄瓜绿斑驳花叶病毒病的发生特点及综合控制技术

黄瓜绿斑驳花叶病毒病是一种新传入的危险性有害生物.世界上在英国、德国、丹麦、俄罗斯、印度、日本、韩国、希腊、罗马尼亚、匈牙利、捷克、保加利亚、巴西、爱尔兰、摩尔多厄、瑞典、芬兰、波兰等地区以及我国台湾均有发生分布.     

烟草品种对烟草花叶病毒病和黄瓜花叶病毒病的抗性鉴定

由烟草普通花叶病毒(TMV)和烟草黄瓜花叶病毒(CMV)引致的烟草病毒病是世界烟草主产区普遍发生且危害严重的侵染性病害,每年给烟叶生产造成了重大的经济损失。本文采用温室苗期接种鉴定的方法,对16份烟草种质进行了TMV和CMV的抗病性鉴定。结果表明:不同的烟草品种对TMV和CMV的抗病性存在较大差异。在供试种质中,对TMV表现免疫的有‘牛耳烟’、‘8301’、‘台烟7号’、‘三生-NN’共4份材料;表现抗病的有‘吉烟5号’、‘双抗70’、‘大护脖香’、‘秦烟95’共4份材料;表现中抗的有‘铁把子’、‘中烟15’、‘秦烟98’、‘中烟98’共4份材料;表现中感的有‘NC89’、‘翠碧1号’、‘云烟97’共3份材料;表现感病的只有‘秦烟97’。对CMV表现中抗的材料有1份,是‘铁把子’;表现中感的有‘秦烟95’、‘三生-NN’、‘8301’、‘牛耳烟’、‘翠碧1号’共5份材料;表现感病的有‘秦烟98’、‘云烟97’、‘中烟98’、‘NC89’、‘大护脖香’、‘双抗70’、‘秦烟97’、‘中烟15’、‘台烟7号’、‘吉烟5号’共10份材料。研究发现,‘铁把子’是兼抗这两种病毒病的材料。本研究明确了我国16个烟草品种资源的抗病性水平,为抗耐病品种的利用与品种合理布局提供科学依据,同时为烟草抗病毒病育种的亲本选择提供抗源信息。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒导致的西瓜花叶病及其检疫性评估

西瓜 Citrullus vulgaris Schr.是葫芦科Cucurbataceae 西瓜属水果。近年来,我国栽培面积增加较快,已构成十分重要的经济作物种类。目前严重影响西瓜产量、质量的主要因素除品种和栽培管理等措施外,西瓜病毒病的发生也是影响西瓜产量和质量的重要原因。     

嫁接西瓜的大棚地杂草黄瓜绿斑驳花叶病毒染病性研究初报

为了明确棚栽嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒发病地杂草染病情况,采集3个镇(街道)5个村的发病地杂草样本进行种类识别与酶联免疫双抗体夹心(DAS-ELISA)法检测。结果发现82份杂草有18科39种,其中37种杂草78个样本染病,染病率分别为94.8%和95.1%;且在染病的杂草中有12种杂草表现着不同程度的黄瓜绿斑驳花叶病毒疑似症状,以繁缕症状表现最早,也较严重。说明棚栽西瓜田内杂草种类繁多,且很多都能感染或携带黄瓜绿斑驳花叶病毒。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒对西瓜产量、品质及种子带毒的影响

研究了西瓜不同时期接种黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)后对其生长、产量、品质和种子带毒的影响。西瓜植株接种CGMMV越早其生长受到抑制越明显,砧木期、嫁接后定植前、定植期、压蔓期、授粉期各处理的株高、叶片数、叶片长与对照相比差异极显著(p0.01),而结瓜以后接种CGMMV对西瓜生长状况无显著影响。压蔓期前3个生育期接种该病毒,西瓜产量损失分别为56.49%、55.48%和51.14%。而压蔓期以后接种该病毒,西瓜产量损失与对照相比仍分别降低17%、13.1%和14.35%。关于倒瓤情况,压蔓期前接种该病毒可导致西瓜果实100%倒瓤,压蔓期、授粉期接种处理西瓜倒瓤率分别为48%和34%,即使结瓜后再接种病毒西瓜倒瓤率仍高达18%。血清学检测表明,压蔓期前接种的西瓜其果肉和种子均携带CGM-MV,带毒率达100%;结瓜后再接种CGMMV西瓜种胚和果肉的带毒率仍然高达64%。检测种胚和果肉病毒含量表明,接种时期越早病毒含量越高,但结瓜后接种仍有较高的病毒含量,种胚和果肉的病毒含量分别达5.98 mg/mL和5.64 mg/mL。     

西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒后糖分代谢与倒瓤的关系

为揭示人工接种黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)后西瓜糖分代谢与倒瓤的关系,采用高效液相色谱法测定了接种CGMMV后西瓜的葡萄糖、果糖、蔗糖含量变化,采用比色法测定了糖酵解途径关键酶及蔗糖代谢相关酶活性的变化。结果显示,西瓜苗感染CGMMV后,果实中葡萄糖、果糖、蔗糖含量均较对照发生明显变化,接种处理后葡萄糖含量在授粉7~28 d显著高于对照,之后迅速下降,35 d时显著低于对照,仅为对照的24.87%;果糖含量仅在授粉后7~14 d高于对照,21~35 d显著低于对照;接种处理和对照的蔗糖含量在授粉后14~35 d均逐渐上升,但14~35 d接种处理显著低于对照。接种处理后己糖激酶、磷酸果糖激酶和果糖激酶活性均在授粉后7~14 d显著低于对照,21~28 d显著高于对照,35 d时显著低于对照;丙酮酸激酶活性授粉后7~21 d显著低于对照,35 d时显著高于对照;酸性转化酶和中性转化酶活性在授粉后7~21 d显著低于对照,35 d时高于对照;蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶活性均显著低于对照,其中蔗糖合成酶活性在授粉后28 d时仅为对照的21.32%。推断西瓜苗接种CGMMV后糖酵解的4个关键酶协同作用,调控糖酵解,进而调控葡萄糖和果糖的积累与代谢,同时蔗糖代谢相关酶活性降低,阻碍蔗糖合成,即西瓜苗感染CGMMV导致倒瓤与其糖分的合成与代谢密切相关。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒山西西瓜分离物外壳蛋白基因序列分析

通过病毒dsRNA分离技术、非序列依赖性PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)技术和RTPCR等手段对采自山西太谷的西瓜病样进行了检测与鉴定,确定其为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)所侵染。为明确CGMMV西瓜分离物(CGMMV-SXTG)的分类地位,本研究进一步克隆了CGMMV-SXTG的外壳蛋白基因(coat protein,CP)全序列并进行序列分析,系统进化树分析显示该分离物与亚洲分离物亲缘关系较近,而与欧洲分离物亲缘关系较远,表明该病毒的不同分离物在分组上可能与地域有一定的关系;接着对不同分离物的CP基因核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比对分析,结果表明该分离物与中国山东分离物(TANG)同源性最高,分别达到99.8%和99.6%。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体的研制

将纯化的黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)制剂免疫BALB/c小鼠,最后一次免疫后第3天取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经采用选择性培养基、有限稀释法克隆和间接ELISA方法进行筛选,成功获得了3株分泌CGMMV特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株并分别命名为3C9,3F7,2G10。用ELISA方法对所获得的3个杂交瘤细胞株进行亚型鉴定均为IgG2a,kappa链。 间接ELISA效价测定结果分别为3C9：1.024×107,3F7：2.56×106,2G10：1.28×106。此3株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体均能与本研究室保存的其他3种不同的CGMMV分离物发生特异性反应,而不与其他3种同属成员病毒 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)、辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus, PMMoV)、齿瓣兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV) 发生反应。     

黄河三角洲西瓜花叶病毒病的综合防治措施

黄河三角洲地区属于黄河下游冲积平原 ,土壤为砂壤土 ,水浇条件好 ,适宜西瓜规模化生产。年种植西瓜 3 3万ｈｍ2 左右 ,露地西瓜栽培面积占 80 %左右。近年来 ,西瓜花叶病毒病 (ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ ,ＷＭＶ)发生严重 ,发病面积近 2万ｈｍ2 ,西瓜减产 2 0 % ,严重影响西瓜优质、高产。1　病害症状病株呈系统花叶症状 ,顶部叶片呈浓淡相间的花叶 ,病叶窄小或皱缩畸形。感病较轻植株尚能结瓜 ,但瓜个头很小 ,数量也少。感病重的植株萎缩、节间变短、新生茎变细且节间短 ,纤细纽曲、叶小、皱缩严重 ,蔓叶全部失绿变黄 ,…     

西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒后糖的变化与倒瓤关系的研究

 By high performance liquid chromatography (HPLC), the contents of glucose, fructose and sucrose, and the sweetness were analyzed in watermelon inoculated with Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV).The relationship between sugar change and blood-flesh of watermelon was determined. The results indicated that the content of glucose was apparently increased compared to that of the control before maturity (within 28 days after pollination), but reduced to 24.8% of the control after maturity (at 35 days after pollination). The content of fructose was higher than that of the control within 14 days after pollination, and then decreased with a significant difference. In all cases, the content of sucrose increased with the growth of watermelon. However, compared with the control, the sucrose content of watermelon inoculated with CGMMV was lower. The ratios of glucose, fructose and sucrose in the total sugar were abnormal. Coincidence with the changes of the total sugar, the fruit sweetness before maturity was higher than that of the control, whereas decreased sharply after maturity (lower than that of the control). The inner pulp of the mature fruit appeared to be water-soaked and dirty red with no edibility. In a word, after inoculation with CGMMV, the changes of sugars and sweetness affected the watermelon quality.     

黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子鉴定及葫芦科不同品种对其抗性评价

黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)在世界范围内对葫芦科作物造成严重危害,其危害症状因寄主而异,包括严重花叶、变色及畸形。运用RT-PCR技术,对黄瓜绿斑驳花叶病毒进行分子鉴定,并与其他CGMMV分离物进行系统发育分析。同时,以14个不同的葫芦科品种为试材,在苗期人工摩擦接种CGMMV,通过Dot-ELISA技术对接毒幼苗进行带毒率检测。结果表明,本实验(浙江杭州)CGMMV分离物与我国其他省份(海南、广东、辽宁、安徽)及韩国的分离物亲缘关系较近,相似度为99.9%~100%,与来自中国浙江杭州地区(建德、萧山)、江苏、山东的分离物相似度为99.5%~99.6%,与俄罗斯、美国的分离物亲缘关系较远,相似度在95.3%~95.4%之间,表明本实验分离物可能与同源性较高的其他地区的分离物具有相同的侵染来源。抗性评价结果显示,在西瓜的9个品种中,浙蜜二号、丰乐五号为中度抗病,而最易感病的品种是抗病京欣,为中度感病;而在其他瓜类品种中,黄瓜津优一号和津绿一号为中度抗病;蒲瓜浙蒲六号和青蒲一号分别表现为低度感病和中度感病;瓠瓜圆瓠一号表现为低度感病。     

黄瓜中与黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染相关的miRNA表达特征分析

MicroRNA作为一种内源小分子非编码RNA,在植物生长发育、信号转导、转录调控、新陈代谢及各种胁迫条件下发挥重要作用。本研究通过生物信息学技术对黄瓜miR159和miR858的靶基因进行预测和功能分析,结果显示miR159和miR858的靶基因主要为MYB类转录因子家族成员,参与植物生长发育和抗病过程。实时荧光定量PCR分析黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)不同侵染时期在黄瓜不同组织中目的miRNA的表达特征,结果表明黄瓜miR159和miR858的表达具有时空特异性和组织特异性,二者均可对CGMMV侵染做出响应并存在显著差异表达。     

新入侵的有害生物——黄瓜绿斑驳花叶病毒

黄瓜绿斑驳花叶病毒是我国局部地区新发现的病毒病害，对部分地区葫芦科作物造成严重危害。2006年国家有关部门启动了铲除计划，疫情得到了有效控制。本文在收集了国内外资料的基础上描述了该病毒的分类地位、分布、寄主范围和症状、传播途径等生物学特性，并介绍了国内外发生情况及防控措施。为控制和防止该病的发生和蔓延提供参考。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒疫情处置效果的研究

通过对经焚烧深埋处理的CGMMV染疫甜瓜植株和用土壤消毒剂处理的土壤的连续取样;提取土壤和病残植株样品的RNA;经RT-PCR检测和汁液摩擦接种植株的方法,检测了带有CGMMV植株残体和土壤中病毒核酸的存在和其侵染活性。结果表明:经过通常检疫销毁的病植株残体和土壤可以检到病毒RNA,但已没有侵染活性。