弯杆菌富集培养试验

本文报道了一种固－液双相培养系统富集培养弯杆菌的方法。这种双相培养系统系由在扁瓶底层制备的胰胨大豆胨琼脂平板与平板上层覆加的改良布氏肉汤所构成。在常规培养条件下，双相培养系统与单纯改良布氏肉汤进行培养对比试验。结果表明，两种培养方法之间存在着显著差异（ｐ＜０．０５），双相培养系统明显地优于单纯改良布氏肉汤。     

企鹅巴氏杆菌分离鉴定及药敏试验

为探究发病企鹅死亡原因,对病死企鹅进行剖检分析,分离得到一株可疑菌,通过细菌分离与纯化、涂片镜检、细菌生化试验及小鼠回归试验等方法鉴定。结果显示,革兰氏染色呈阴性短小杆菌,瑞氏-吉姆萨染色可见明显两极着色,生化鉴定与小鼠回归试验所得结果与多杀性巴氏杆菌感染的临床特征和特性基本一致,说明引起该企鹅死亡的原因为感染多杀性巴氏杆菌致死。用0.3ml/只、 0.1ml/只皮下注射THB培养基菌液的小鼠分别在18h与24h内全部死亡,并在死亡小鼠的脏器内分离出同种致病菌。通过药敏试验得出该菌对氟苯尼考、环丙沙星、氨苄西林等高敏;新霉素、呋喃唑酮、庆大霉素等中敏;青霉素、链霉素等低敏;对阿莫西林、土霉素等耐药。     

鸭疫里氏杆菌分离鉴定及药敏试验

正1试验材料与仪器1.1试验材料1.1.1病料来源病料来源于临沂市太平镇某养鸭场饲养的18日龄病死肉鸭。2015年8月7日,临沂市太平镇某鸭场饲养的18日肉鸭陆续出现发病死亡。病鸭咳嗽,摇头或点头,昏睡,眼鼻流浆性分泌物,脚软,不愿走动,排白色或黄绿色稀粪。剖检见纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎,心包积液,心外     

草鱼肠道不动杆菌的分离鉴定及药敏试验

从草鱼肠道中分离获得1株细菌,编号为CAX1,进行细菌形态学观察、理化特征、16S r DNA序列分析及药敏试验等研究。结果表明CAX1菌株为革兰氏阴性短杆菌,进一步采用PCR方法扩增其16S r DNA,测序显示其大小为1 531 bp,序列比对表明CAX1分离株与厦门不动杆菌新种(Acinetobacter xiamenensis)16S r DNA同源性达97.1%,系统进化树分析显示CAX1菌株与不动杆菌亲缘关系最近,自然聚类为1支;药敏试验结果显示CAX1菌株对庆大霉素、阿莫西林、氨苄西林、头孢哌酮等药物敏感。     

大肠杆菌噬菌体分离及宿主谱研究

噬菌体具有特异性强、无残留、对人畜无感染性、容易筛选获得等独特优势,在无抗养殖趋势下潜力巨大。本研究从鸡场采集粪便样本,从中分离出大肠杆菌,再从粪便样本中分离、纯化出噬菌体,测定纯化后噬菌体的效价,并对噬菌体的噬菌谱进行研究。结果表明:噬菌体可以裂解大肠杆菌;分离到的噬菌体为宽宿主谱噬菌体,但有一定的局限性。     

黄沙鳖致病性蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及药敏试验

[目的]对广西武宣县某养殖场患病黄沙鳖(Pelodiscus sinensis)进行病原菌分离鉴定及药敏试验,为防治黄沙鳖蜡样芽孢杆菌病提供参考依据。[方法]采用常规方法对患病黄沙鳖进行细菌分离,通过人工感染试验确定其致病性。采用API 50CH生化鉴定和16S rRNA序列分析进行细菌鉴定,并以K-B纸片扩散法及二倍稀释法进行药敏试验。[结果]从患病黄沙鳖肝脏中分离获得1株具有芽孢的革兰氏阳性杆菌GXWXAA,对健康黄沙鳖致死率达100.0%。经鉴定,菌株GXWXAA属于蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),与蜡样芽孢杆菌JY5 (HQ833024)、JY7 (HQ833025)、JY9 (HQ833026)和VBE16 (MG027671)的亲缘关系最近,相似性均达99.9%。菌株GXWXAA对新霉素、恩诺沙星和多西环素等15种抗生素敏感,对头孢曲松、环丙沙星和依诺沙星中介,对青霉素G、氨苄青霉素、复达欣、复方新诺明和多粘菌素B耐药。新霉素、恩诺沙星和多西环素对菌株GXWXAA的最小抑菌浓度分别为0.488、0.122和0.244μg/mL。[结论]引起广西武宣县某养殖场黄沙鳖发病的病原菌属于蜡样芽孢杆菌,建议选择新霉素、恩诺沙星和多西环素等抗生素对患病黄沙鳖进行治疗。     

鸭铜绿假单胞杆菌的分离鉴定及药敏试验

铜绿假单胞杆菌（Pseudomonas aeruginosa）,也称绿脓杆菌（Bacillus pyocyaners）,1882年首先由Gersard氏从伤口脓液中分离到。该菌在自然界中分布广泛,分布于空气、水、土壤及人畜皮肤、呼吸道、消化道中,可引起多种动物的脏器脓肿,如奶牛的子宫炎和乳房炎等。     

犬源空肠弯曲杆菌的分离鉴定及药敏试验

空肠弯曲杆菌是一种分布十分广泛的人畜共患病原菌,能随粪便排出体外.本研究随机采集了病犬的血便8 份,进行该病原菌的分离、鉴定,结果分离到3株,检出率为37.5%.药敏试验显示该菌对头孢哌酮、头孢曲松、 庆大霉素、洛美沙星、氟哌酸敏感,对阿莫西林、头孢唑啉氨苄西林中等敏感,对复方新诺明、林可霉素等耐药.     

烟草青枯病菌噬菌体分离及其生物学特性研究

【目的】烟草青枯病是我国南方烟区发生普遍而严重的细菌病害,目前尚未有理想的化学防治药剂,筛选青枯病菌噬菌体,为作物青枯病的防治提供噬菌体资源。【方法】从江西省吉安市烟田采集土壤样本,采用双层平板培养分离方法,分离青枯菌噬菌体,进一步比较物理和化学因素对噬菌体活性的影响。【结果】从吉安烟田土壤中分离获得6个青枯菌噬菌体,编号为PTb7-1、PTb1521、PTb1553、P1Tb1556、P2Tb1556和PTb574,其生物学特性存在差异。结果显示,多个噬菌体的最适生长温度约为35℃,致死温度为55～60℃,适宜酸碱度为pH 5～9,且对紫外光、乙醚和氯仿敏感。然而,噬菌体PTb7-1只适合于酸性环境条件下生长繁殖,噬菌体P2Tb1556对紫外光和乙醚不敏感,但对氯仿敏感。【结论】烟草土壤中具有丰富的青枯菌噬菌体资源,是筛选噬菌体的材料来源。6个青枯菌噬菌体生物学特性存在差异,噬菌体P2Tb1556对紫外光和乙醚不敏感,但对氯仿敏感。     

1株耐药性大肠杆菌烈性嗜菌体的分离与生物学特性分析（英文）

该试验从鸡粪样品中分离到一株耐药性大肠杆菌的烈性噬菌体,用单层琼脂微量点板法测定其嗜菌谱范围,用双层琼脂平板法对其裂解效价、最佳感染复数以及对温度、酸碱度的耐受性进行了测试。结果显示,该噬菌体嗜菌谱范围较广,对另外2株大肠杆菌呈现完全裂解,对1株大肠杆菌呈现弱裂解;对宿主菌的裂解效价为1.20×108PFU/ml,最佳感染复数为1;最适温度为40℃,噬菌体效价能够达到8.90×10~9PFU/ml,在80℃时即失去感染活性;p H值为5~11,噬菌体效价在106~10~9PFU/ml,p H值等于4,12,噬菌体则失去感染活性。     

鸡肉中弯曲杆菌属的分离与鉴定

对从长春地区某一肉鸡屠宰加工厂在９个月期间内抽取的１５２份冻鸡肉样品进行弯曲杆菌检查,发现３８．２％的样品为弯曲杆菌属阳性。经ＡＰＩ Ｃａｍｐｙ鉴定系统鉴定,其中３２．９％为空肠弯曲杆菌（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）和大肠弯曲杆菌（Ｃ．ｃｏｌｉ）阳性。本次调查结果证实：在我国市场上销售的鸡肉中存在弯曲杆菌属的污染,如果加工不当或加工卫生不良,会对消费者的健康构成潜在的威胁。     

空肠弯曲杆菌PCR-ELISA检测方法的建立

针对空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)旋转酶基因(gyrA gene)设计特异性引物和探针,将生物素和地高辛分别标记上游引物5＇端和核酸探针3 ＇端,并对反应条件进行优化,建立空肠弯曲杆菌PCR-ELISA检测方法.结果表明:该方法能特异的检测空肠弯曲杆菌基因组DNA,检测阈值为2fg,敏感性是常规PCR的10倍.对模拟泄殖腔样本进行检测,检测限为50 cfu/mL.对100份临床样品进行检测,PCR和PCR-ELISA方法阳性检出率分别为60％和69％.     

经济动物的空肠弯曲菌带菌调查和细菌分离培养研究

本文对伊沙褐蛋鸡、乌骨鸡、锦鸡、蓝马鸡及银黑狐等动物的空肠弯曲菌带菌率进行了调查,其结果分别为66.19％、13.33％、20％、10％和6.19％。同对对微需氧培养方法和培养时间、TTC琼脂平板、蛋鸡采样时机、样品运送以及增菌培养等一系列影响检出率的因素进行了研究。结果认为该菌微需氧培养时间以48小时为宜;TTC琼脂平板不宜做该菌的初次分离培养;产蛋前采样要比产蛋后采样的检出率高,差异极显著(P<0.01);样品运送时间、Cary-Blair运送培养基以及增菌培养等对检出率影响不显著(P>0.05),但同一样品的重复分离培养,明显提高了该菌的检出率。     

青岛地区空肠弯曲菌的分离鉴定及Jej基因序列分析

为调查青岛地区空肠弯曲菌(C.jejuni)的流行状况,采集青岛地区不同分离地点的鸡盲肠棉拭子及内容物98份,经分离鉴定得到23株C.jejuni,分离率达到23.47％.应用C.jejuni的马尿酸酶(Jej)基因作为分子标记,对分离到的23株C.jejuni分离株和4株C.jejuni上海分离株进行分析,并与8株已知的C.jejuni序列进行相似性比较,构建系统进化树,对其系统进化关系进行分析.结果表明,分离菌株及已知菌株均能扩增出774 bp的Jej基因片段,得到11个不同的序列,有11个核苷酸变异位点,变异率为0.13％～1.42％;基于Jej基因构建的进化树表明,分离株分为2个分支,其中4株分离株与C.J-NCTC11168和C.J-IA3902亲缘关系近,1株与C.J-RM1221、C.J-S3亲缘关系近,2株与上海分离株亲缘关系比较近;2株与C.J-81116、C.J-M1组成另外一个分支.     

新疆部分地区牛源空肠弯曲菌分离鉴定及耐药性分析

【目的】研究新疆部分地区牛空肠弯曲菌污染及耐药性。【方法】从乌鲁木齐、昌吉、石河子3个地区共采集牛肛拭子171份。用布氏肉汤初步增菌后,用改良CCD琼脂基础和哥伦比亚血平板2种选择培养基培养,用聚合酶链式反应(PCR)鉴定,最后参照2010年美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐使用的琼脂扩散法进行药敏试验。【结果】从乌鲁木齐牛场肛拭子分离鉴定到1株空肠弯曲菌(编号为N22),检出率为1.11%(1/90);昌吉牛场肛拭子分离鉴定到1株空肠弯曲菌(编号为C25),检出率为3.33%(1/30)。石河子牛场肛拭子没有分离到空肠弯曲菌。2株空肠弯曲菌对单环β内酰胺类、氨基糖苷类抗生素高度敏感;对喹诺酮类抗菌药物、大环内酯类和大部分头孢菌素类抗生素产生了不同程度的耐药。【结论】新疆牛群存在空肠弯曲菌的感染,感染菌株可用单环β-内酰胺类、氨基糖苷类抗生素进行防治。研究结果可为评价新疆牛群空肠弯曲菌的流行状况和制定防控措施提供科学依据。     

1株可提高植物耐盐能力菌株的分离

应用植物器官的内部组织,经过高盐培养基,分离出组织内部的共生性菌株的技术,获取具有耐盐、共生、提高植物在盐协迫条件下能成活的菌株。获得的菌株经过培养过程中的系列观察、分析确认其属于细菌界;经过耐盐性试验,得出在35%的过饱和盐浓度下仍能正常生长,不同盐浓度仅对其恢复生长的时间有影响的结论;经过0.6%植物耐盐性试验,得出其具有提高植物耐盐成活率的能力;经过基因测序、拼接、16S DNA片段分析、NCBI数据库BLAST对比分析,鉴定其为Pseudomonas属下的1个未见报道的种,暂名为Pseudomonas G.