卵泡大小和颗粒细胞对山羊卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精的影响

用切割法采集卵泡液,收集卵丘一卵母细胞复合体（Cumulus oocytes comlexs,COCs）和自然裸卵,将部分COCs去除卵丘细胞获得机械裸卵,COCs放入体外成熟培养液中培养为成熟卵母细胞,加入获能的精子液,进行体外受精。结果表明：卵母细胞的体外成熟率和卵裂率与卵泡直径密切相关,大卵泡（80．95％,P〈0．01）和中等卵泡（75．50％,P〈0．05）的卵母细胞成熟率高于小卵泡（50．27％）;犬卯泡（53．53％）和中等卵泡（47．13％）的卵裂率显著高于小卵泡的32．26％（P〈0．05）。COCs、机械裸卵和自然裸卵的体外成熟率分别为75．0％、54．2％和10．5％,差异极显著（P〈0．01）,卵裂率分别为53．8％、10．8％和0％,差异极显著（P〈0．01）。对照组和1×10^5、1×10^6个／mL颗粒细胞组卵母细胞体外成熟率分别为68．6％、69．6％和67．8％,无显著差异（P〉0．05）,但均显著高于1×10^7个／mL（51．5％,P〈0．05）和1×10^10个／mL（35．5％,P〈0．05）颗粒细胞组,但各组间的体外受精率无显著差异（P〉0．05）。结果提示,大卵泡和中卵泡的卵母细胞的体外成熟率和卵裂率显著高于小卵泡,体外成熟培养液中添加高浓度的颗粒细胞能显著抑制卵母细胞的体外成熟。     

BMP-4mRNA在兔卵巢中的定位及其在卵母细胞体外成熟培养中的表达研究

为探索骨形态发生蛋白4(BMP-4)在兔卵巢中的表达模式,揭示其在卵母细胞成熟和卵泡发育以及黄体化等过程中的作用,本研究采用原位杂交方法测定BMP-4mRNA在兔卵巢中的表达定位,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测BMP-4mRNA在卵母细胞体外成熟培养过程中的表达变化。结果表明:BMP-4 mRNA在各级非闭锁卵泡均有低水平表达,在闭锁的初级卵泡、次级卵泡、近成熟卵泡中有极强或较强的表达。兔卵母细胞在体外成熟过程中有BMP-4 mRNA的微量表达,但是与0 h相比较,成熟培养4、8、24 h卵母细胞中BMP-4mRNA表达量没有明显变化,而16 h的表达量明显降低,且与0、4、8、24 h存在极显著差异(P<0.01)。由此推测,兔BMP-4在卵巢卵泡生长发育过程中微量表达可能起黄体化抑制因子作用,并且与BMP-15相互关联对卵丘扩展发挥重要作用。另外,可能高活力的BMP-4以卵母细胞的自分泌方式参与了兔卵巢卵泡的闭锁机制。     

猪卵巢卵母细胞采集方法的比较研究

本试验利用抽吸法和剖切法两种采集方法采集猪卵巢卵母细胞,对获得可用卵丘卵母细胞数和卵丘完整程度的影响进行比较研究,并分析在卵巢收集时不同的保存温度、运输时间对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：剖切法采集细胞数目显著高于抽吸法（P〈0．01）;A、B级卵母细胞的比例在剖切法中显著高于抽吸法（P〈0．05）;抽吸法所采集的c级卵母细胞显著高于剖切法（P〈0．05）;剖切法中卵母细胞卵丘完整率高于抽吸法（P〈O．05）;离体卵巢保存的最佳温度为36℃-38℃;其保存时间为1～1．5h时成熟率57．6％与2—2．5h时成熟率52．8％相比无显著差异（P〉O．05）;保存时间超过6h时卵母细胞的成熟率显著下降。     

牛卵母细胞体外成熟技术研究

从两方面探讨了牛卵母细胞的体外成熟培养效果,即对不同级别和不同卵巢卵泡直径的卵丘卵母细胞复合体（COCs）进行成熟培养,测定其成熟率。COCs级别不同,培养成熟率之间存在很大差异,A级COCs成熟率为63．81％,B级为47．81％,显著高于C级和D级（P〈0．01）。卵母细胞的成熟率与采集COCs时的卵泡直径关系密切。中等卵泡的卵母细胞的成熟率为61．82％,显著高于小卵泡和大卵泡（P〈0．01）。试验结果表明：A级和B级COCs是卵母细胞体外培养的主要资源;在卵母细胞体外培养过程中,宜选择卵泡发育水平基本正常的中等卵泡采集COCs,而不宜选择发育过大或过小的卵泡。     

罗同丘细胞对小鼠卵母细胞体外成熟及其后续发育的影响

观察了卵丘细胞共培养对小鼠生发泡期部分裸露（PNO）和裸卵（NO）成熟和发育能力的影响；分别用小鼠、大鼠、猪的卵丘细胞与小鼠PNO和NO进行了共培养。检测了小鼠PNO和NO的减数分裂能力、生发泡构型、受精和胚胎发育能力。结果，PNO、NO的减数分裂能力显著（P〈0．05）低于卵丘完整复合体（COCs）的减数分裂能力。COCs中SN型卵母细胞比率显著高于PNO和NO中SN型卵母细胞比率（P〈0．05），大部分PNO和NO的卵母细胞核型为NSN型。与对照组相比，与小鼠或大鼠卵丘细胞共培养的小鼠PNO和NO的减数分裂能力没有显著提高，但是与猪卵丘细胞共培养却可以提高小鼠PNO和NO的减数分裂能力。结果表明，猪卵丘细胞能促进小鼠卵母细胞的体外成熟，但并不影响小鼠卵母细胞的受精和胚胎发育。     

N-乙酰半胱氨酸对不同直径卵泡来源猪卵母细胞体外成熟效果的影响

旨在在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加N-乙酰半胱氨酸(NAC),揭示NAC对不同直径卵泡来源卵母细胞体外成熟效果的影响，解析其对氧化还原平衡的调控作用。本研究收集猪卵巢上大腔(4～6 mm)、中腔(2～4 mm)、小腔(1～2 mm)卵泡中的卵母细胞，在以上3种卵泡来源猪卵母细胞的体外成熟培养液中，均分别添加0、1、2、4 mmol·L^-1浓度的NAC处理，评价卵丘扩展指数、第一极体排出率等成熟指标，检测卵母细胞中ROS水平、谷胱甘肽(GSH)含量和抗氧化基因的表达水平。结果表明，NAC处理对大腔卵泡来源卵母细胞的卵丘扩展指数和ROS水平无显著影响(P>0.05),对大、中腔卵泡来源卵母细胞的第一极体排出率无显著作用(P>0.05);而适量浓度的NAC(2 mmol·L^-1)处理可显著提高中、小腔卵泡来源卵母细胞的卵丘扩展指数(P<0.05),降低ROS水平(P<0.05),提升小腔卵泡来源卵母细胞的第一极体排出率(P<0.05)。同时，NAC处理对大、中腔卵泡来源卵母细胞中的GSH含量和抗氧化基因SOD、CAT...     

C型利钠肽及其受体在水牛卵泡中的表达分析

为了探明C型利钠肽（C-type natriuretic peptide,CNP）及其受体（natriuretic peptide receptor,NPR）在水牛卵泡中的表达模式,本研究首先采用实时荧光定量PCR技术检测水牛卵巢中利钠肽家族主要成员A型、B型、C型利钠肽（ANP、BNP、CNP）及其Ⅰ型、Ⅱ型受体（NPR1、NPR2）的mRNA表达情况,然后利用免疫组化技术对水牛卵泡中CNP及NPR2蛋白进行定位,最后利用实时荧光定量PCR技术检测颗粒细胞和卵丘细胞中CNP及NPR2的mRNA表达规律。结果显示,水牛卵巢主要表达CNP及NPR2,且在各级卵泡中均有表达,其中,CNP主要在壁层颗粒细胞中表达,NPR2主要在卵丘细胞中表达;颗粒细胞上CNP mRNA表达水平显著高于卵母细胞周围的卵丘细胞（P<0.05）,而卵丘细胞上NPR2 mRNA表达水平显著高于颗粒细胞（P<0.05）。综上所述,在利钠肽主要家族成员和受体中,CNP和NPR2在水牛卵巢中呈现强表达,CNP主要在壁层颗粒细胞中表达,而NPR2主要在卵母细胞周围的卵丘细胞中表达。     

甘氨酸对猪卵母细胞体外成熟质量及卵丘细胞的影响

本实验旨在研究甘氨酸对卵丘细胞及卵母细胞体外成熟质量的影响,优化猪卵母细胞体外成熟(IVM)培养体系。在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加6 mmol/L甘氨酸,体外培养至44 h后,通过倒置显微镜测量卵丘细胞扩散直径,结合流式细胞术与qPCR检测卵丘细胞凋亡情况;进一步检测成熟卵母细胞中谷胱甘肽(GSH)、细胞成熟促进因子(MPF)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)水平及细胞成熟相关基因表达。结果表明:甘氨酸能显著提高卵丘细胞扩散直径,减少卵丘细胞的总凋亡率,并能显著提高卵丘细胞中Bcl-2的mRNA表达;甘氨酸能显著增加成熟卵母细胞中的GSH、MPF和MAPK水平以及成熟相关基因BMP15、GDF9、CyclinB1、CDK1、C-MOS的mRNA表达。综上可知,甘氨酸可提高猪卵母细胞体外成熟质量,降低卵丘细胞凋亡率。     

能量水平和来源对后备母猪血液代谢产物、激素分泌及卵泡液成分的影响

选取54头体质量（59&#177;4.2）kg的长白&#215;大白杂交母猪，采用3&#215;2因子设计，研究日粮能量水平和来源对血液代谢产物、激素分泌及卵泡液成分的影响。3个能量水平分别为NRC推荐能量需要的87.5%、100%和112.5%；各能量水平下分别添加淀粉和油脂。第2个发情期开始后的第18和19天分别收集血样和卵泡液。结果表明，能量水平对血液中葡萄糖、甘油三酯等代谢产物的影响差异不显著（P〉0.05），能量来源对血液中葡萄糖浓度无显著影响（P〉0.05），但日粮中添加脂肪极显著提高了血液中甘油三酯、总胆固醇浓度（P〈0.01）。高能组血液中食后胰岛素浓度曲线下面积（Ins AUC）、胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）、瘦素（Leptin）浓度显著高于低能组（P〈0.05），淀粉和脂肪组间差异不显著（P〉0.05）。提高能量水平显著增加促黄体素（LH）的脉冲分泌（P〈0.05），日粮中添加脂肪显著提高血液中雌二醇（E2）浓度（P〈0.05）。随能量水平提高，显著增加大卵泡数和卵泡液中IGF-Ⅰ、E2浓度（P〈0.05），能量来源对大卵泡数和卵泡液成分影响不显著（P〉0.05）。由结果分析可知，日粮提高能量水平促进血液中代谢激素IGF-Ⅰ、LH的分泌并增加大卵泡数及卵泡液中IGF-Ⅰ和E2浓度，日粮中添加脂肪提高血液中甘油三酯、总胆固醇浓度并促进雌激素的分泌。     

BMP15对绵羊卵丘细胞扩展相关基因及激素受体基因表达量的影响

为探究添加骨形态发生蛋白15(BMP15)对绵羊卵丘细胞体外培养扩展相关基因及激素受体表达量的影响,本实验采集健康绵羊离体卵巢,分离卵丘-卵母细胞复合体收集卵丘细胞进行体外培养,分别在培养液中添加终浓度0、25、50、100、200 ng/mL的BMP15,以0 ng/mL为对照组,采用Real-time PCR方法检测BMP15处理的卵丘细胞中扩展相关基因(HAS2、PTGS2、PTX3)及激素受体基因(FSHR、E_2R、LHR)的表达水平。结果表明:相较于对照组及其他浓度处理组,添加100ng/mLBMP15极显著提高了HAS2、PTGS2、PTX3和FSHR、E_2R、LHR表达量。推测BMP15能够促进绵羊卵母细胞体外培养过程中卵丘细胞扩展,添加BMP15不仅能够上调FSHR、E_2R、LHR的表达,还能促进卵丘细胞激素分泌。     

甘肃河西地区农田生态系统能量投入产出及效率分析

应用生态学能流研究方法 ,对河西 4 5年农田系统能量输入输出及效率进行了力能学分析。结果表明 ,总投能逐年增加 ,1994年总投能最高的县为张掖市 (131.5 9× 10 3MJ/ hm2 )。无机能在总投能中所占比例依次呈现出平稳、快速、缓慢增长的变化趋势 ,天祝县无机能投入远远低于其它县市 ,1994年为总投能的 18%。总产能呈现出递增趋势 ,但自 2 0世纪 80年代中期以后增长缓慢 ,4 5年来不同县市总产能增加以酒泉市和张掖市最大 ,1994年酒泉市和张掖市总产能分别为2 35 .93× 10 3和 2 32 .38× 10 3MJ/ hm2 。 4 5年中 ,能量产投比出现 2个高峰和 1个低谷 ,自 80年代高峰过后 ,大多数县市产投比下降 ,其中天祝县产投比最低 ,1994年仅为 0 .83。 7县市中酒泉市、民乐县、天祝县、武威市、张掖市农田单位面积投能分别超出其临界值 :5 .66× 10 3、4 .61× 10 3、8.73× 10 3、15 .91× 10 3和 36.84× 10 3MJ/ hm2。     

育肥后期锦江牛能量代谢规律及需要量的研究

本试验旨在研究育肥后期锦江去势公牛的能量代谢规律及需要量。在育肥前期不同能量水平饲喂的基础上(育肥前期5种肉牛日粮综合净能(NE_mf)依次为6.02、6.38、6.74、7.10、7.46 MJ/kg,每组10头牛,育肥116 d)继续育肥,育肥前期试验结束后,保持分组不变,挑选35头体型接近、体重(355.94±35.11) kg锦江牛继续育肥。按照中国《肉牛饲养标准》(NY/T 815-2004)中350 kg肉牛日增重1.2 kg/d所需净能的100%(A组)、106%(B组)、112%(C组)、118%(D组)、124%(E组)配制5种不同能量水平的试验日粮,5种日粮的NE_mf依次为6.21、6.58、6.95、7.33、7.70 MJ/kg。采用饲养试验和消化代谢试验测定育肥后期锦江去势公牛生长性能及能量代谢指标,并建立消化能和代谢能能量需要模型。预试期10 d,正试期128 d。结果表明:①D、E组育肥后期锦江去势公牛的总能采食量较其他组显著降低(P<0.05)。②B组肥后期锦江去势公牛能量利用效率最高,总能消化率、总能代谢率分别为90.59%和83.36%。③育肥后期锦江去势公牛日增重与消化能采食量和代谢能采食量存在高度线性正相关(R^2=0.997、R^2=0.993),其消化能、代谢能需要量的回归方程分别为:DE_m=0.770W^0.75+40.088×ADG;ME_m=0.645W^0.75+38.603×ADG(其中DE为消化能总需要量(MJ/d);ME为代谢能总需要量(MJ/d);W^0.75为单位代谢体重(kg);ADG为平均日增重(kg/d))。综上所述,育肥后期锦江牛的维持消化能总需要量(DE_m)和代谢能总需要量(ME_m)分别为0.770、0.645 MJ/(kg W^0.75·d),每千克增重的消化能和代谢能需要量分别为40.088、38.603 MJ。     

20～50 kg川藏黑猪的能量代谢与沉积规律研究

本试验旨在研究20~50 kg川藏黑猪的能量代谢与沉积规律。试验一:选择体重接近[(20.17±3.46)kg]的川藏黑猪配套系商品猪64头,预试7 d后屠宰4头猪测定胴体成分;其余试验猪按公母随机分成5个组,每个组4个重复,每个重复3头,各重复单圈饲养,自由采食消化能(DE)水平分别为13.79、13.37、12.96、12.54和12.12 MJ/kg的饲粮。试验猪体重达50 kg时,结束试验一,测定平均日采食量、平均日增重和料重比,并在各组选择1头猪屠宰测定胴体成分。试验二:选择试验一中15头体重接近[(48.34±4.07)kg]的公猪,随机分成5个组,每个组3个重复,每个重复1头,单独饲养于代谢笼,分别采食上述5种DE水平的饲粮,进行消化代谢试验。预试期3 d,正试期4 d。采用析因法建立能量需要量预测模型。结果表明:饲粮DE水平影响了20~50 kg川藏黑猪的平均日采食量、平均日增重和料重比;饲粮DE转化为代谢能(ME)效率(ME/DE)为97.26%~98.10%,ME用于沉积产品能的效率(DED/ME)平均值为41.71%;此阶段川藏黑猪维持需要ME平均值为0.49 MJ/W~(0.75)或0.85 MJ/W~(0.60)(按DE计为0.50 MJ/W~(0.75)或0.87 MJ/W~(0.60)),增重需要DE和ME平均值分别为18.91和18.47 MJ/kg。由此得出,20~50 kg阶段川藏黑猪能量需要模型为:DE(MJ/d)=0.504 W~(0.75)+18.91ΔW或DE(MJ/d)=0.867 W~(0.60)+18.91ΔW;ME(MJ/d)=0.492 W~(0.75)+18.47ΔW或ME(MJ/d)=     

能网自组织与生态系统耦合

生态系统通过会聚、超循环和耦合而重组联合，从而形成新的能网结构。能网中某些能量作为体现能转化成较高质量的能量形式。这一高质能具有反馈放大器的作用，帮助系统达到最大功率，所以系统耦合必然导致生态效益的放大。     

优质肉鸡的能量需要量研究进展

能量是家禽日粮的第一限制性养分,确定优质肉鸡能量需要量是合理配制优质肉鸡饲料、提高饲料利用效率的重要前提。优质肉鸡在我国家禽产业体系中占有重要的地位,研究其能量需要量对提高优质肉鸡的生产性能具有重要意义。文章主要就优质肉鸡能量需要量方面的研究进展进行了综述,对能量需要量的研究方法和影响因素进行分析,对研究优质肉鸡能量需要量的相关原始文献中的数据、观点和结论进行整理和归纳,为优质肉鸡精细化饲养和日粮的精准配制提供参考。     

生长期秦川牛能量代谢规律与需要量研究

本试验旨在研究生长期秦川牛能量代谢规律与需要量。选择30头体况良好、体重[(336.33±18.28)kg]相近的生长期秦川牛公牛,随机分为5组,每组6头牛,分别饲喂按我国《肉牛饲养标准》(NY/T 815—2004)提供的预期平均日增重900 g/d所需净能的85.0%(Ⅰ组)、92.5%(Ⅱ组)、100.0%(Ⅲ组)、107.5%(Ⅳ组)、115.0%(Ⅴ组)配制的5种试验饲粮。采用饲养试验和消化代谢试验测定秦川牛生长性能及能量代谢指标,并建立消化能和代谢能需要量预测模型。预试期10 d,正试期42 d。结果表明,Ⅲ组秦川牛平均日增重为880.15 g/d,较预期的结果略低;Ⅳ组平均日增重达到最大值(1 160.10 g/d),能量利用效率最高;总能消化率、总能代谢率和消化能代谢率平均值分别为(76.44±3.23)%、(66.75±3.16)%、(87.31±0.54)%;秦川牛的消化能和代谢能需要量的回归方程分别为:DER=0.778W0.75+37.05ADG;MER=0.668W0.75+33.49ADG[DER为消化能需要量(M J/d),MER为代谢能需要量(M J/d),W0.75为单位代谢体重(kg),ADG为平均日增重(kg/d)]。综合得出,生长期秦川牛的维持消化能和代谢能需要量分别为0.778、0.668 MJ/(kg W0.75·d),每千克增重的消化能和代谢能需要量分别为37.05、33.49 M J。     

鹅和鸡4种常用饲料原料的代谢能比较

本试验旨在比较鹅和鸡常用饲料原料的代谢能差异.选用体重为(3.76±0.23)kg的成年扬州鹅(公)和体重为(2.57±0.17)kg的成年新扬州鸡(公)各10只,采用Sibbald真代谢能法测定玉米、豆粕、稻谷、麦麸4种常用饲料原料的代谢能值,内源能测定采用饥饿法.结果表明:玉米、豆粕的表观代谢能(AME)鹅与鸡差异不显著(P＞0.05),真代谢能(TME)鹅显著低于鸡(P＜0.05);而稻谷、麦麸的AME鹅显著高于鸡(P＜0.05),TME鹅与鸡差异不显著(P＞0.05).每小时内源能排出量,除强饲豆粕条件下鹅略高于鸡但差异不显著外(P＞0.05),强饲其他3种饲料条件下,鹅均显著高于鸡(P＜0.05).由此表明,鹅的饲料代谢能与鸡的并不完全相同,部分饲料的代谢能鹅和鸡之间存在显著差异,并且鹅的内源能排出量高于鸡.     

Predicting metabolizable energy from digestible energy for growing and finishing beef cattle and relationships to the prediction of methane

Reliable predictions of metabolizable energy (ME) from digestible energy (DE) are necessary to prescribe nutrient requirements of beef cattle accurately. A previously developed database that included 87 treatment means from 23 respiration calorimetry studies has been updated to evaluate the efficiency of converting DE to ME by adding 47 treatment means from 11 additional studies. Diets were fed to growing-finishing cattle under individual feeding conditions. A citation-adjusted linear regression equation was developed where dietary ME concentration (Mcal/kg of dry matter [DM]) was the dependent variable and dietary DE concentration (Mcal/kg) was the independent variable: ME = 1.0001 × DE – 0.3926; r² = 0.99, root mean square prediction error [RMSPE] = 0.04, and P < 0.01 for the intercept and slope. The slope did not differ from unity (95% CI = 0.936 to 1.065); therefore, the intercept (95% CI = −0.567 to −0.218) defines the value of ME predicted from DE. For practical use, we recommend ME = DE – 0.39. Based on the relationship between DE and ME, we calculated the citation-adjusted loss of methane, which yielded a value of 0.2433 Mcal/kg of dry matter intake (DMI; SE = 0.0134). This value was also adjusted for the effects of DMI above maintenance, yielding a citation-adjusted relationship: CH₄, Mcal/kg = 0.3344 – 0.05639 × multiple of maintenance; r² = 0.536, RMSPE = 0.0245, and P < 0.01 for the intercept and slope. Both the 0.2433 value and the result of the intake-adjusted equation can be multiplied by DMI to yield an estimate of methane production. These two approaches were evaluated using a second, independent database comprising 129 data points from 29 published studies. Four equations in the literature that used DMI or intake energy to predict methane production also were evaluated with the second database. The mean bias was substantially greater for the two new equations, but slope bias was substantially less than noted for the other DMI-based equations. Our results suggest that ME for growing and finishing cattle can be predicted from DE across a wide range of diets, cattle types, and intake levels by simply subtracting a constant from DE. Mean bias associated with our two new methane emission equations suggests that further research is needed to determine whether coefficients to predict methane from DMI could be developed for specific diet types, levels of DMI relative to body weight, or other variables that affect the emission of methane.     

Digestible and metabolizable energy in corn grains from different origins for growing pigs

An experiment was conducted to determine the digestible energy (DE) and metabolizable energy (ME) concentrations in nine sources of corn grains fed to growing pigs and to compare the energy values among their countries of origin. A total of nine sources of corn grains including five sources of yellow corn from the United States (USY), two sources of yellow corn from South Africa (SAY), and two sources of white corn from South Africa (SAW) were used. Nine barrows with an initial body weight of 37.1 ± 8.6 kg were allotted to a 9 × 9 Latin square design with nine diets and nine periods. The DE concentration in SAY (3347 kcal/kg) was greater (P < 0.001) than in USY (3269 kcal/kg), but was less (P < 0.001) than in SAW (3436 kcal/kg) on an as‐fed basis. Similarly, the ME concentration in SAY (3291 kcal/kg) was greater (P < 0.001) than in USY (3209 kcal/kg), but was less (P < 0.001) than in SAW (3386 kcal/kg). In conclusion, the DE and ME concentrations in nine sources of corn grains are different among their countries of origin.