精子膜凝集素受体定量的酶标凝集素分光光度法

为了对精子膜凝集素受体进行定量测定,建立了一种 HRP-凝集素分光光度法,并筛选确定了适宜的测定条件。该方法的主要步骤为:①调节精子浓度;②用 HRP-凝集素孵育精子样品及对照;③加入底物显色;④离心后以分光光度法测定样品和对照上清中游离 HRP-凝集素量。精子膜凝集素受体量以精子样品 OD 值与对照 OD 值之差(即标记到精子膜上的凝集素量)表示。对同一精子样品分别进行三种凝集受体定量的重复试验表明,该法具有良好的再现性。本方法可用于精子膜特性的研究和某些雄性(或男性)不育的诊断。     

芸豆凝集素受体在小鼠生殖细胞上的分布及作用研究

[目的]探讨芸豆凝集素（PHA）受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布及作用。[方法]应用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的芸豆凝集素作为分子探针,确定其PHA受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布。通过不同浓度PHA处理精子和卵母细胞,研究PHA预处理对精子获能和顶体反应,以及对卵母细胞FITC—PHA染色的影响。l结果]PHA受体主要表达于小鼠精子整个尾部区域和顶体反应后的头部质膜,2mg／mlPHA预处理有抑制顶体反应的作用;卵母细胞透明带和细胞膜都有PHA受体的存在。不同浓度PHA处理卵母细胞对其透明带阿FTIC—PHA染色影响不大,但对其细胞膜染色有较大影响,且不同浓度之间差异明显。[结论]芸豆凝集素受体是小鼠精子和卵母细胞受体的重要组成部分,且在精卵质膜融合过程中发挥重要作用。     

牛精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白的分离与定位

牛精子膜用非离子去污剂ＮＰ－４０增溶，经固相凝集素亲和层析，初步分离了精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白，经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色显示出了四条蛋白质带，分子量分别为７８，６０，４２和３３ｋＤ。用分离到的糖蛋白制备抗血清，对牛精子进行免疫细胞化学标记，结果顶体区显示为强阳性，与麦芽凝集素亲和细胞化学的染色一致。用抗血清处理精子再进行亲和细胞化学染色时，顶体区的麦芽凝集素结合糖残基多数被封闭，揭示     

鸡小肠和气管凝集素受体的观察

本用4种辣根过氧化物酶标记植物凝集素（COnA,WGA,SBA,RCA)作探针，观察了小鸡肠壁和气管植物凝集素受体的变化。结果发现，在小肠壁的不同部位，凝集素受体分布有差异，同一部位，凝集素的染色强度亦不尽相同，气管凝集素受体也有类似变化，肠壁和气管凝集受体分布的差异，可能与这些部位的功能有关。     

人体精子冷冻前后超微结构的变化

将１０例正常生育男性的精液标本进行冷冻保存、复温后电镜观察。结果,冷冻精子复温后精子超微结构发生了不同程度的改变,其主要改变为精子顶体肿胀,顶体内、外膜分离,外膜形成波浪状皱褶,有的核局部出现凹陷,线粒体改变呈基质密度降低,结构模糊等。但是,精子基本结构保持完整。研究结果表明：冷冻精子超微结构改变的主要原因是在冷冻过程中,由于冰晶形成的影响,水分内移,细胞肿胀,因而造成其活动率的明显下降。但并不影响授精能力。     

鸡精子冷冻前后的形态学变化

本文比较观察了用甘油和二甲基亚矾(DMSO)处理的鸡精子冷冻前后形态结构的变化,以阐明甘油的冷冻保护效果。结果表明,a.用甘油或DMSO作为冷冻保护剂,冷冻前后的畸形精子主要表现为颈部弯曲,甘油处理的精子这种颈部弯曲的畸形率明显增加(P<0.05),b.甘油处理的精子,解冻后表现为明显的头部原生质膜破裂,常伴有中段膨大和线粒体鞘裸露的现象。由此推测,甘油对鸡精子结构的不良作用可能与冷冻解冻过程中稀释液的渗透压变化有关。     

牛精子体外获能前后元素变化的研究

 本文应用x射线能谱技术，对获能前后精子质膜表面（头部、中段）和内部（顶体内、中段线粒体内）的元素进行了分析测试。结果表明，牛精子用肝素+咖啡因体外获能后，头部、中段质膜表面的Na、Al、S、K含量升高，Cl、Ca含量降低；顶体内Na、Mg、Si、P和Fe含量降低，而Ca、K、Cl和S含量升高；精子中段线粒体内Na、P、Si、Cl和Ca升高，而Mg、S、K和Fe却降低。获能过程中精子顶体内Na/Ca、Na/K、Cl/Ca、Cl/K和Na/Cl的浓度比分别为42.13、12.43、15.36、45.31和2.74；而摩尔比又分别为73.42、21.13、17.37、4.99和4.23。本文并对可能的获能机理进行了讨论。     

肝素和羊血清对绵羊附睾精子体外获能的影响

通过体外受精试验检验了肝素和羊血清在绵羊附睾精子体外获能中的作用。结果表明,在获能液ＳＯＦＭ＋０．６％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）中加入５、１５、２５、５０ＩＵ／ｍｌ肝素不能有效诱导精子获能,所得卵裂率（１６．１％,１１．２％,１４．５％,１５．８％）与不加肝素的对照组（１０．０％）相比,差异不显著;获能液ＳＯＦＭ＋２０％羊血清（ＳＳ）对精子获能效果优于ＳＯＦＭ＋０．６％ＢＳＡ＋肝素,二者卵裂率差异显著（５０％ＶＳ１４．７％Ｐ＜０．０５）;获能液ＳＯＦＭ＋２０％ＳＳ中再加入５、１５、２５ＩＵ／ｍｌ肝素可明显增强获能效果,所得卵裂率（８１．４％,８０．４％,８１．３％）与不加肝素的对照组（４６％）相比,差异显著（Ｐ＜０．０５）。     

锰对公鸡乳酸脱氢酶活性和精子密度的影响

本文就日粮锰对公鸡乳酸脱氢酶(LDH)活性及生殖功能的影响进行了研究。结果表明日粮中锰缺乏或过多引起血清、肝脏和睾丸 LDH 活性同步下降。精子数/睾丸Ⅰ组(添加 Mn 0ppm)、Ⅳ组(添加 Mn 300ppm)比Ⅲ组(添加 Mn100ppm)分别降低了35.06%和31.55%,表明精子生成过程对锰的需要量有一定的范围。睾丸 LDH 活性和精子数/睾丸之间 r=0.6791(P<0.05),提示锰缺乏或过多造成睾丸生精功能下降的重要原因之一是由于锰影响了睾丸 LDH 活性。     

公牛的自身免疫反应与精液品质的关系

为了进一步了解公牛在自身免疫学反应中对其本身精液品质的影响,本试验应用Kibrick和F-D法分别测定了不同季节和不同年龄公牛血液中抗精子抗体效价及对精子的凝集度。在相同的饲养条件下4头同龄公牛血液中抗体效价和凝集度夏季高,冬季低。而精子顶体完整率则是夏季低,冬季高。从年龄上根据试验分析,老龄公牛血液中抗体效价和凝集度均高,青年公牛低,中年公牛介于中间,精液品质中的顶体完整率老龄牛最低（成不可逆的）,中年和青年公牛较高。     

青花菜抗冻性的遗传分析

在不同低温条件下，测定青花菜５个亲本及２０个组合离体幼叶的细胞膜伤害率，并配以改进后的ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程，求得它们的低温致死温度。以低温致死温度为抗冻指标，运用（Ｖｒ，Ｗｒ）图表、双列方差分析、配合力分析等方法，研究其抗冻遗传规律。结果表明：在参试的５个亲本中，低温致死温度范围在－７．０～１１．５℃之间；ｈ２（Ｂ）为９５．９６％；Ｈ／Ｄ０．６３３。青花菜的抗冻性呈数量性状遗传方式，经检验，符合加性－显性遗传模型，以加性效应为主，显性效应也有一定作用。     

猪精子体外获能及异种穿卵的超微结构研究

 研究结果表明，猪精子头部长7.6微米，宽4.1微米。主要由核、顶体及顶体后区组成。顶体的内、外膜结构不同于质膜。颈部由中心粒和9条纵行分节的节柱组成。尾部全长49.4微米，其中，中段长11.4微米，线粒体较发达，约为52-55旋；主段中央是“9+2”的微管结构，其外方被9条致密纤维和纤维鞘包裹。体外获能前的猪精子群集成簇，运动缓慢。获能后运动方式发生变化，呈超激活运动特征。获能后的猪精子主要是以顶体外膜囊泡化的形式发生顶体反应。质膜是否参与囊泡化尚待进一步观察。顶体反应完成后，仅有顶体内膜包在精子核膜的外面。顶体内膜可与去透明带的金黄地鼠卵的细胞膜相融合，穿入卵内的精子核能在卵内去浓缩并发育成雄原核。本研究共分4批，对120枚金黄地鼠卵进行了观察，平均穿透率为84.8±10.2%。     

松杉柏的抗冻性研究

松、杉、柏在历次冷冬中,都发生了不同程度的冻害。本文探索研究了26种松、杉、柏的抗冻性,并计算出了各树种的半致死温度,可为云南松、杉、柏树的合理布局提供科学依据。     

牛卵丘－卵母细胞复合体体外成熟前后超微结构

实验用透射电镜技术研究了牛卵立－卵母细胞复合体（ＣＯＣ）体外成熟前后卵母细胞、卵丘细胞及它们之间联系的结构特征．体外培养前,卵母细胞微绒毛数量较少,有的伸入秀明带中;各种细胞器集中分布于皮质区,形成“细胞器带”;核膜可打褶,核仁致密化．卵母细胞与卵丘细胞间及卵丘细胞之间形成间隙连接;卵丘细胞中线粒体致密、形态多样．成熟培养后．微绒毛增多．卵周隙形成;高尔基复合体消失,脂滴伴随着线粒体内迁．少数线粒体转变为幼稚型,皮质区形成“细胞器游离带’;皮质颗粒开始沿质膜下呈线状排列,但有的仍成团分布;排出第一极体处无微绒毛．中期赤道板附近无细胞器;卵丘细胞间及卵丘细胞与卵母细胞间联系中止;卵丘细胞中线粒体转变为幼稚型．