野生香蘑属菌株的ITS序列分析

以6个野生香蘑属菌株为研究材料,进行ITS测序,并以10个GenBank香蘑属菌株ITS序列为参照,应用DNA—MAN、MEGA4软件构建系统发育树状图。研究结果表明,No．1、2、4、5、6与GenBank花脸香蘑菌株聚为一类,应视为花脸香蘑菌株,而No．3菌株与肉色香蘑及GenBank中3个水粉杯伞AY521248、DQ149727、DQ149728都具有0．308的遗传距离,其分类地位有待予进一步研究。     

牡丹江2株香蘑属菌株的鉴定及驯化研究

通过表型鉴定和ITS测序相结合的方法鉴定香蘑属2个菌株。结果表明,2个供试菌株1株是花脸香蘑,另1株是紫丁香蘑。对香蘑属菌株进行驯化研究发现,花脸香蘑菌丝体的最适生长温度为24℃,子实体的最适宜发育温度为22℃～26℃,利用玉米秸秆发酵料栽培,成功驯化花脸香蘑菌株。紫丁香蘑菌丝体的最适生长温度为20℃,没有获得子实体。     

一株野生花脸香蘑的生物学特性及其栽培

从采集自云南省临沧市的野生子实体上分离纯化获得菌株YAASM4210,采用形态学法结合ITS序列分子法鉴定为花脸香蘑(Lepista sordida)。对该菌株生物学特性进行研究并对其栽培料进行筛选。试验结果表明:该菌株菌丝生长的最适温度、培养基pH、光照条件、碳源和氮源分别为25℃、6.0~7.0、黑纸包裹、可溶性淀粉和蛋白胨。该菌株在4号配方培养料(40%新鲜牛粪,20%草坪粉,20%米糠,18%木屑,1%蔗糖和1%石膏)上生长优于其它参试培养料:菌丝萌发(2d)、封口(12d)、满袋(40d)以及子实体的采收(9d)均用时最短,头潮菇产量最高(每袋21.1g),但覆土后出菇时间(42d)最长。相对于野生子实体,人工栽培子实体菌盖的紫色减弱,采收后紫色消失较快。     

贵州4株花脸香蘑的分离鉴定及秋栽驯化

以采自贵州黔中地区的4株野生大型真菌（NK、LM、JUF、GS）为研究材料,形态学结合ITS测序进行品种鉴定,并利用茶树枝叶发酵料对其进行秋栽驯化试验。鉴定结果表明,菌株NK、LM、JUF、GS均为花脸香蘑,同源性达99%。以茶树枝叶发酵料栽培4个花脸香蘑菌株发现,其菌丝萌发速度快,发菌时间短。出菇试验中,菌株GS、NK、LM的生物学效率分别达24.5%、25.6%、10.3%;当温度降至10℃时,3个菌株的菇蕾不再生长,因此在黔中地区适宜9月中旬播种,可以采收二潮菇。     

一株野生花脸香蘑的鉴定及其液体培养基的筛选

以1株分离自泰山的野生菌株ts916为供试材料,依据形态学和rDNA ITS序列分析进行分类鉴定。采用液体摇瓶培养法,以菌丝生物量为主要指标,从5种不同液体培养基中筛选出适宜菌丝生长的液体培养基。结果表明,该野生菌株为花脸香蘑(Lepista sordida),适宜其生长的液体培养基配方为马铃薯200 g、葡萄糖20 g、酵母膏3 g、玉米粉20 g、麸皮20 g、KH₂PO₄3 g、MgSO₄1.5 g,加水至1 L,pH自然。菌丝生物量达到2.209g·100^-1mL^-1。试验结果为该菌株的进一步驯化选育和综合开发利用提供参考。     

花脸香蘑优良菌株筛选

比较不同来源菌株母种菌丝生长及杂菌污染情况、不同菌株满袋期、现蕾期及采收期、不同菌株菇体特点及不同菌株生物学效率,筛选出适宜闽北气候条件下栽培的花脸香蘑菌株。     

花脸香蘑高效栽培技术

花脸香蘑(Lepista sordida)又名紫晶品蘑、丁香蘑、花脸蘑、紫花脸香蘑等,是名贵食用菌品种之一,具有很高的食用和药用价值[1-2]。目前国内对花脸香蘑栽培实践的报道很少,仅在浙江、吉林、黑龙江等地有栽培试验报道。湖南省食用菌研究所通过原生质体再生技术对花脸香蘑菌种进行纯化复壮[3],并规模化栽培示范成功,总结出大棚阳畦花脸香蘑高效栽培技术。     

四株野生花脸香蘑的人工驯化栽培试验

将采集到的4株野生花脸香蘑进行组织分离、纯化培养和多种方式栽培试验,从中驯化得到了比较适合江苏气候栽培的花蘑1号菌株。此菌株适合夏、秋季栽培,在熟料栽培条件下生物转化率达到26%,在以稻草、麦秸和牛粪为主要培养基质的生料栽培中生物转化率为20%左右,是有待进一步开发研究的食用菌新品种。     

花脸香蘑研究进展

从花脸香蘑(Lepista sordida)的分类学地位及分布、生物学特征、菌株鉴定方法、驯化栽培以及药理活性研究等方面进行论述,并对花脸香蘑的研究方向和发展前景加以展望。     

一株野生食用菌株的种类鉴定研究

以1株来源承德的野生食用菌为试材,研究了其生态环境、形态结构,并从形态学角度对其进行了种类鉴定;同时,提取了其DNA,对其ITS序列进行了扩增、测序,得到其分子鉴定的结果;综合常规形态鉴定和基因序列鉴定,对其进行了种类鉴定。结果表明,该野生菌株为血红铆钉菇(Chroogomphus rutilus),该研究结果为进一步开发其应用价值奠定了基础。     

两株田头菇属野生菌株的鉴定及生物学特性

以采自云南的2株田头菇属野生菌株JZ061和JZ527为试材,采用组织分离法进行菌株分离,按照形态和分子生物学鉴定确定2株菌株的分类学地位,并对菌丝体的生物学特性进行研究,以期为今后进一步开发利用野生田头菇属种质资源提供参考依据。结果表明:菌株JZ061为茶树菇(Agrocybe aegerita),最适碳源为麦芽糖、乳糖和蔗糖,最适氮源为酵母粉和黄豆粉,最适pH为6.0,适宜温度为25~30℃;菌株JZ527为杨柳田头菇(Agrocybe salicacola),最适碳源为麦芽糖,最适氮源为酵母粉和黄豆粉,最适pH为8.0~9.0,适宜温度为20~25℃。     

云南昭通野生紫丁香蘑群体的遗传多样性分析

以采自云南昭通的66株野生紫丁香蘑(Lepista nuda,L.nuda)为研究对象,分析了其ITS序列及其单核苷酸多态性(SNP)。结果表明:经结合形态和分子水平的鉴定,确定所采的野生蘑菇为紫丁香蘑;66个紫丁香蘑的ITS序列长度变化范围为666~671bp,ITS1为241~244bp,5.8S为155bp,ITS2为267~275bp,G+C含量的变化范围为41.5%~42.4%,所有样本的平均遗传距离为0.003 0;通过序列比对,共筛选出7个SNP位点,单突变位点3个,简约信息位点4个;转换与颠换的比值R为0.672;该群体的核酸多态性指数Pi为0.002 91,每位点核苷酸多态性指数Theta(per site from Eta)为0.002 36。采用邻接法(neighbour joining,NJ)构建的系统发育树分支支持率低,表明群体内各菌株遗传距离小,该群体的遗传多样性丰度较低。综上说明云南昭通野生紫丁香蘑群体的遗传多样性水平很低,需要加强保护。     

一株小果蚁巢伞菌株鉴定及其液体培养基的筛选

以云南省临沧市蚁巢伞中分离获得的菌株0820-003为供试材料,根据形态学特征和ITS序列分子鉴定分析,确定其分类学地位,并设计3种不同液体培养基,筛选其最佳液体培养条件。结果表明,该菌株0820-003为小果蚁巢伞Termitomyces microcarpus (Berk.&Broome) R. Heim,在3种配方中,适合菌株0820-003生长的液体条件为配方C,即土豆200 g、葡萄糖20 g、酵母菌2 g、蛋白胨1 g、KH2PO41.0 g、MgSO41.0 g、维生素B110 mg,加水至1 000 mL,pH自然。     

承德两种野生食用菌的分子鉴定及系统发育分析

以承德红蘑和白蘑子实体为试材,采用真菌通用引物ITS1和ITS4,对其基因组rDNA基因的ITS区段进行PCR扩增、克隆测序,而后与GenBank数据库信息比对,并利用MEGA 5.0软件构建系统发育树,从分子水平上鉴定其种属地位及系统进化关系。结果表明:承德红蘑与血红铆钉菇(Chroogomphus rutilus,Accession No.:KR082876)、白蘑与Hygrophorus queletii(Accession No.:JF908069)的相似性均达到99%。承德红蘑与血红铆钉菇C.rutilus(Accession No.:KR082876),承德白蘑与H.queletii(Accession No.:JF908069)的遗传关系最近,遗传距离为0.002。因此,承德红蘑和白蘑经分子鉴定为C.rutilus和H.queletii,其分类地位的解析,对今后野生红蘑和白蘑种质资源鉴定、生物学特性研究及开发利用奠定了基础。     

中国野生蘑菇属90个菌株遗传多样性的DNA指纹分析

对90个中国野生蘑菇属菌株(其中44株经同工酶初步鉴定为双孢蘑菇菌株)的总DNA进行SRAP和ISSR分析,获得了18条SRAP和12条ISSR标记条带并进行聚类分析,构建了亲缘关系树状图.结果显示这些菌株大体上可分为野生双孢蘑菇和野生蘑菇属其它菌株两大类群,其中来自川藏高原的41个野生双孢蘑菇按照采集地的不同聚为4个群,地域性差异比较明显;部分来自新疆、西藏的白色野生双孢蘑菇菌株新疆野生、AgX04和AgX042具有独特带型,与其它双孢蘑菇菌株的遗传相似值仅为10%～13%.     

木耳属四个野生菌株的RAPD图谱分析

应用RAPD技术对木耳属四个野生菌株进行了DNA指纹图谱分析，综合10个随机引物的RAPD聚类分析结果表明，供试的四化上野生菌株与毛木耳（Auricularia polytricha)归为一类，四个野生菌株间存在一定的遗传差异，不是同一菌株，本研究揭示了木耳属四个野生菌株的类源关系及DNA同质性，为进一步界定其系统分类地位提供了较为重要的科学依据。     

广西野生灵芝菌株的遗传多样性分析

以10个广西野生灵芝菌株为试材,采用酯酶同工酶分析和拮抗试验的方法,研究供试菌株的遗传多样性。结果表明:广西野生灵芝具有丰富的遗传多样性。试验共检测到22条谱带,10个菌株间的谱带均有差异。各菌株间的遗传相似系数在0.36~0.95;在相似系数为0.55时,10个菌株可以分为3类,即菌株C3(红芝)为一类,菌株C9(白芝)为一类,C1、C2、C4、C5、C6、C7、C8、C10(黑芝)为一类;在相似系数为0.64时,黑芝类又可分为2类,即C1、C2、C4、C8、C10为一类,C5、C6、C7为一类。菌株C4与C10、C5与C7间的遗传相似系数大于0.90,亲缘关系很近,且这2对菌株间无拮抗,说明菌株C4与C10为同一菌株,C5与C7也为同一菌株。     

两个牛肝菌分离株的鉴定与培养

采用组织分离法从市售牛肝菌子实体分离得到两株性状稳定的分离株Lq4-2和Be2425,利用ITS序列分析并结合分离子实体的形态特征对两分离株进行鉴定,并对其基础生物学特性进行了研究.分离株Lq4-2鉴定为牛肝菌科(Boletaceae)成员,分离株Be2425鉴定为广义美味牛肝菌(Boletus edulis s.l.);两分离株能在PDA培养基和MRD合成培养基上良好生长;菌丝生长的适宜温度为25～28 ℃,适宜pH为5～6,最佳氮源为酒石酸铵;Lq4-2的最佳碳源为葡萄糖,而Be2425的最佳碳源为果糖和葡萄糖.