曼氏无针乌贼内脏提取物的抗炎作用研究

研究了天然产物——曼氏无针乌贼内脏脂溶性提取物(the extract from visceral organs of Sepiella maindroni,ESM)的抗炎功效,以探索其作为天然安全无副作用的抗炎营养增补剂的可能。采用二氧化碳超临界萃取法,提取中国产曼氏无针乌贼内脏脂溶性提取物。构建二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶诱导大鼠足肿胀、大鼠棉球肉芽肿这3种炎症模型,将不同剂量组验证模型鼠的疗效与空白对照组、阳性对照组相比较,观察ESM对不同炎症模型的抗炎作用。从上述3项抗炎模型的实验结果发现,当ESM剂量为100 mg/kg时,具有较强的急性及慢性抗炎功效。发现和确认了乌贼内脏脂溶性提取物的抗炎作用,为深入研究乌贼抗炎机理奠定了基础。     

大蝎子草提取物抗风湿活性的初步研究

本研究以抗炎镇痛为指标,探讨大蝎子草提取物的抗风湿作用。用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对大蝎子草95％乙醇提取物进行分段萃取,再用小鼠急性耳廓肿法、棉球肉芽肿法考察各萃取部位的抗炎活性;小鼠热板法、醋酸扭体法考察各萃取部位的镇痛活性。结果表明,乙酸乙酯萃取部位具有显著的抗炎和镇痛活性,能明显抑制二甲苯所致的小鼠急性耳廓肿胀、小鼠棉球肉芽肿;可使醋酸所致的扭体次数明显减少,并使小鼠热板法痛阈明显提高。     

厚壳贻贝低温无水保活技术

[目的]探索厚壳贻贝低温无水保活技术。[方法]以低温驯化后的厚壳贻贝为研究对象,进行了以低温保活技术为主的研究。在不同湿度条件下,对厚壳贻贝在0、4、8℃以及常温条件下的保活效果进行了大量的试验。[结果]成活率为98%时,在-1.5~-0.5℃下可保活9 d,在4和0℃下都可保活7 d,8℃可保活4 d。在生态冰温-1.5~-0.5℃下保活最好;用冰藏0℃的方法最实用。同时,控制湿度对厚壳贻贝保活效果有正面的影响。[结论]低温无水法保活厚壳贻贝技术具有成本较低、无污染等优点。     

厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin真核表达载体构建及表达的初步分析

[目的]研究厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin真核表达载体构建及表达。[方法]通过对前期所获得的厚壳贻贝多条mytilin和myticin抗菌肽基因进行筛选,选择其中5条厚壳贻贝抗菌肽基因,采用PCR技术和DNA重组技术构建了相关的真核表达载体,并采用LiAC转化法将其转化到S78酿酒酵母中并进行初步表达分析。[结果]5种厚壳贻贝抗菌肽基因的真核表达载体构建成功,对转化酵母进行mRNA检测结果表明,5种厚壳贻贝抗菌肽的基因在S78酵母中成功转录。[结论]该研究结果为最终采取基因工程手段表达厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin并在此基础上开展厚壳贻贝抗菌肽的后续研究奠定基础。     

厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin真核表达载体构建及表达的初步分析（摘要）

[目的]研究厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin真核表达载体构建及表达。[方法]通过对前期所获得的厚壳贻贝多条mytilin和myticin抗菌肽基因进行筛选,选择其中5条厚壳贻贝抗菌肽基因,采用PCR技术和DNA重组技术构建了相关的真核表达载体,并采用LiAC转化法将其转化到S78酿酒酵母中并进行初步表达分析。[结果]5种厚壳贻贝抗菌肽基因的真核表达载体构建成功,对转化酵母其进行mRNA检测结果表明,5种厚壳贻贝抗菌肽的基因在S78酵母中成功转录。[结论]该研究结果为最终采取基因工程手段表达厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin并在此基础上开展厚壳贻贝抗菌肽的后续研究奠定基础。     

厚壳贻贝胚胎发育观察

[目的]研究厚壳贻贝的胚胎发育情况。[方法]选择性腺成熟的厚壳贻贝亲贝,通过催产受精,对厚壳贻贝受精、卵裂、幼体发育等细胞生物学现象用显微镜进行连续观察,经显微摄影,详细记录了厚壳贻贝的胚胎发育全过程。[结果]厚壳贻贝亲贝经阴干刺激,排出精卵,获得成熟受精卵,直径约75μm,在水温13~20℃的条件下,受精卵分裂,经过桑椹期、囊胚期、原肠期、担轮幼虫、D形幼虫、壳顶幼虫、匍匐幼虫等阶段,最后变成附着稚贝,其胚胎发育的全过程历时35 d。[结论]厚壳贻贝亲贝暂养温度要适当,一般在10℃左右。厚壳贻贝胚胎发育的时间与水温密切相关,其适宜温度为13~20℃,并由受精卵开始发育时相对较低的温度逐步升高。     

光照、水温和密度对厚壳贻贝稚贝群聚性的影响

为研究光照、温度和个体密度对厚壳贻贝Mytilus coroscus稚贝群聚性产生的影响,分别在光照强度为0、10、20、60、200μmol/(m~2·s),海水温度为13、18、23℃,厚壳贻贝稚贝密度为5、10、20、30、50个/培养皿(相当于0.28、1.64、3.27、4.91、8.18个/mL)条件下,进行3因素交互作用试验。结果表明:厚壳贻贝稚贝密度与群聚率呈极显著正相关(r=0.736),密度越高稚贝的群聚率越高,群聚性越强;同样,光照对厚壳贻贝稚贝的群聚性具有极显著影响(P0.0001),但光照强度与群聚率呈极显著负相关(r=-0.675),光照越强稚贝的群聚率越低,群聚性越差;海水温度对稚贝的群聚性无显著性影响(P0.05);光照、密度和水温三者的交互作用极显著影响厚壳贻贝稚贝的群聚性(P0.0001)。本研究结果可为今后开展厚壳贻贝稚贝附着机制的研究及水产养殖稚贝中间培育提供理论基础和技术支撑。     

Genetic Diversity Evaluation by the Comparative Analysis on Mitochondrial CO I Gene between Wild and Cultured Populations of Mytilus coruscus

[目的]通过比较分析线粒体COⅠ基因,探讨福州厚壳贻贝野生型和养殖型种群的遗传多样性.[方法]以福建省福州市野生厚壳贻贝(Mytilus coruscus Gould)和养殖厚壳贻贝各20个样本为试验材料,通过设计特异性引物,采用PCR技术对该40个个体的mtDNA COⅠ(线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ)序列进行扩增,通过测序分析和序列比对检索,鉴定扩增的序列,并利用MEGA(version 4.10)和DnaSP(version 4.0)软件对序列进行分析.[结果]测序结果显示扩增序列总碱基数为668 bp,40条序列中T、C、A和G碱基平均含量分别为28.0％、22.8％、32.3％和16.9％,其中A+T的含量(60.3％)显著高于G+C含量(39.7％),表现了明显的碱基偏倚;40个个体表现为26种单倍型,包括408个多态位点,单倍型间平均遗传距离为0.299,单倍型多态性(h)为0.944,核苷酸多态性(π)值为0.153 06.上述结果表明福州厚壳贻贝的遗传多样性水平比较高,并且养殖群体和野生群体无遗传分化.[结论]该研究揭示了福州厚壳贻贝的遗传资源现状,试验结果可为厚壳贻贝良种筛选提供参考依据.     

嵊泗海域厚壳贻贝微塑料污染状况分析

为了解嵊泗养殖海域厚壳贻贝微塑料的污染情况,选取2019年和2020年7月、8月3个站点的厚壳贻贝进行微塑料调查。结果显示,贻贝体内的微塑料丰度变化范围在0.11～0.29个/g软组织和2.00～4.33个/个体;共分离到纤维(57.58%)、碎片(30.30%)、薄膜(9.09%)、微球(3.03%)4种形状的微塑料;微塑料最常见的尺寸为5～200 μm,占总量的45.45%;丰度最高的微塑料的聚合物成分是聚对苯二甲酸乙二醇酯(Polyethylene terephthalate,PET)。总体来说,该海域厚壳贻贝微塑料污染水平较低。     

工蜂蛹及其提取物对慢性炎症和免疫性炎症的作用及机理

通过工蜂蛹及其水提物和醚提物对小鼠肉芽肿模型、大鼠佐剂性关节炎模型的作用和对肾上腺中VC及胆固醇含量的影响实验,研究工蜂蛹对慢性炎症和免疫性炎症的作用及其机理.结果发现,工蜂蛹及其中、高剂量的水提物均对小鼠棉球肉芽肿有显著的抑制作用,对大鼠佐剂型关节炎模型的原发性病变和继发性病变具良好的对抗作用,能抑制细胞因子IL-6及炎症介质PGE2的生成,明显改变肾上腺中的胆固醇和Vc含量,并能有效地防止造模期间体重的减轻,且对肾上腺和胸腺指数无明显影响;但中高剂量的醚提物对模型的影响效果不明显.表明工蜂蛹发挥抗炎及免疫作用的大部分活性物质可能存在于其水提物中,其作用机制可能是通过作用于肾上腺皮质系统而发挥抗炎作用.抑制单核巨嗜细胞的活化和分化,抑制炎症介质的产生是工蜂蛹发挥抗炎和免疫调节作用的机理之一.     

蒲公英提取物体内抗炎作用研究

通过建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,蛋清致大鼠足趾肿胀模型及大鼠棉球肉芽肿模型,研究蒲公英提取物对毛细血管扩张和通透性亢进、渗出水肿、白细胞向炎症聚集、纤维组织增生的抑制作用.结果表明,蒲公英提取物具有明显的体内抗炎作用.     

乌苏里瓦韦不同提取物的抗炎作用研究

[目的]对比研究乌苏里瓦韦不同溶剂提取物的抗炎作用。[方法]以浓度70％乙醇与蒸馏水作为溶剂,采用回流提取法对乌苏里瓦韦进行提取,建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型评价乌苏里瓦韦各提取液的抗炎作用。[结果]鸟苏里瓦韦水提液高、中剂量组和浓度70％醇提液高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀均有抑制作用,且浓度70％醇提液高剂量组抑制作用最为显著（P〈0．01）。[结论]乌苏里瓦韦水提液在正常用量（中剂量）下抗炎效果最明显,与相关记载的用法用量及主治相符。     

Influence of gallic acid on porcine neutrophils phosphodiesterase 4, IL-6, TNF-α and rat arthritis model

Our previous studies showed that the anti-inflammatory effects of Paeonia lactiflora roots extract may be mediated, at least in part, through its gallic acid content, and this effect may be regulated in part by an inhibition on cAMP-phosphodiesterase (PDE). To explore the anti-inflammatory effect and mechanism, the influence of gallic acid on neutrophils PDE4 activity and expression, TNF-α and IL-6 content and rat arthritis model were further studied. PDE4 activity and gene express were calculated respectively by substrate cAMP change examined with HPLC and real-time RT-PCR. The concentration of IL-6 and TNF-α in supernatant were assayed by ELISA method. Model of rat arthritis was caused by complete Freund’s adjuvant. Results showed that gallic acid had a dose-dependent restraint on PDE4 activity of neutrophils in vitro, promoted significantly PDE4A expression (P<0.01), and had no influence on the expressions of PDE4B and 4D. However, PDE4C expression was not detected. Gallic acid could promote IL-6 release (P<0.05), and inhibit TNF-α release of neutrophils (P<0.05). The experiment in vivo showed that gallic acid had obvious restraint on local inflammation of animal model (P<0.05). Therefore, the anti-inflammatory effect of gallic acid may be mediated in part through an inhibition on PDE4 activity and further an increase of IL-6 and a decrease of TNF-α of neutrophils, and this effect seemed to have no relationship with PDE4 expression.     

女贞子提取物对大鼠不同组织Ca2+-ATPase活性的影响

研究了女贞子提取物对大强度耐力训练大鼠不同组织Ca2+-ATPase活性的影响,探讨了女贞子提取物对大鼠运动能力的作用机制。结果表明:运动组和运动+女贞子组大鼠各组织Ca2+-ATPasee活性均显著低于安静组,运动+女贞子组大鼠不同组织Ca2+-ATPase活性显著高于运动组;运动+女贞子组大鼠力竭运动时间比运动组延长23.09%。女贞子提取物可以调节大鼠不同组织Ca2+-ATPase活性,延长运动至疲劳的时间。     

蝉蜕水提物对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用

探讨不同浓度蝉蜕水提取物对小鼠D-氨基半乳糖(D-GalN)急性肝损伤的保护作用。将60只小鼠随机分为空白对照组、D-GalN模型组(模型组)、联苯双酯滴丸组、蝉蜕水提取物低、中、高3个剂量组,共6组。每组小鼠均按每千克体重剂量灌胃给药,连续给药13 d,末次给药12 h后,按600 mg/kg腹腔注射10%D-GalN诱导急性肝损伤模型。造模24 h后,计算小鼠肝指数,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及心肌组织、肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,HE染色观察肝组织病理学变化。结果表明,与空白对照组比较,模型组小鼠肝脏指数及血清ALT、AST活性升高(P0.01),肝脏、心肌组织中SOD活性降低,MDA含量增高(P0.01),肝组织炎症坏死广泛。与模型组比较,蝉蜕水提取物的低、中、高剂量组及联苯双酯组小鼠肝脏指数及血清ALT、AST活性降低(P0.01或P0.05),肝脏、心肌组织中SOD活性升高,MDA含量降低(P0.01或P0.05),肝组织损伤程度显著改善。蝉蜕水提取物对D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤有一定的保护作用。     

苦瓜水提物对拘束应激小鼠脂代谢紊乱的改善作用

【目的】探讨苦瓜水提物（Momordica charantia fruit aqueous extract,MCFE）对拘束应激小鼠体内脂代谢及抗氧化水平的影响,为揭示苦瓜对脂代谢紊乱的改善作用提供理论依据。【方法】选用6周龄的雌性昆明小鼠,随机分为5组,包括正常对照组（NC）、拘束应激组（Mod）及-MCFE低（250 mg•kg-1）、中（500 mg•kg-1）和高（750 mg•kg-1）剂量组,每组12只,连续灌胃7 d后,置于50 mL带孔的塑料离心管中拘束20 h,尾静脉注射10% 脂肪乳剂Interlipids,15 min后检测小鼠血脂消除能力,肠系膜脂肪组织脂肪酶活力,血清、肠系膜脂肪组织及肌肉组织的脂蛋白酯酶活性,同时测定血清的氧化状态及抗氧化水平。【结果】拘束应激模型组小鼠甘油三酯(Triglyceride,TG)的含量为正常组小鼠TG含量的1.27倍,而低、中、高剂量MCFE组的小鼠TG含量分别为正常组小鼠TG含量的0.63、0.57和0.55倍,表明MCFE各剂量组均能显著提高拘束应激小鼠甘油三酯的清除率（P<0.05）,提高其脂肪代谢能力,并呈现剂量依赖性趋势;同时,拘束应激模型组小鼠的脂肪酶活性为正常组的0.52倍,而MCFE各剂量组的脂肪酶活性分别为正常组的0.77、0.98和1.06倍,明显高于拘束应激组（P<0.05）,且中、高剂量组基本达到正常水平,表明MCFE各剂量组均能提高肠系膜脂肪组织的脂肪酶活性（P<0.05）;此外,与拘束应激组相比,MCFE的低、中、高剂量组小鼠的血清脂蛋白酯酶（Lipoprotein Lipase,LPL）活性和肠系膜脂肪组织的LPL活性明显有所提高（P<0.05）,亦表现剂量效应,其中MCFE各剂量组的血清LPL活性达到正常组水平,但MCFE各剂量组对肌肉组织的脂蛋白酯酶的活性影响不显著（P>0.05）;另外,拘束应激组小鼠的脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量是正常组的1.37倍（P<0.05）,总抗氧化能力（ORAC）是正常组的0.65倍（P<0.05）,而MCFE各剂量组小鼠体内的MDA含量明显低于拘束应激组（P<0.05）,且MCFE的中、高剂量组基本达到正常水平,MCFE各剂量组ORAC明显高于拘束应激模型组,但尚未达到正常水平,表明MCFE能明显提高拘束应激小鼠体内总抗氧化水平（P<0.05）。【结论】苦瓜水提物能从氧化应激水平和脂质代谢两方面改善拘束应激小鼠脂代谢紊乱。     

黄花铁线莲乙酸乙酯组分的抗炎作用研究

[目的]研究黄花铁线莲乙酸乙酯组分的抗炎作用。[方法]将试验动物随机分为4组,每组10只,分别为模型对照组、复方七叶皂苷钠凝胶组和黄花铁线莲高、低剂量组(0.08和0.04 g/kg),连续外涂给药7 d,采用二甲苯诱发小鼠耳肿胀法和交叉菜胶诱发大鼠足跖肿胀观察抗炎作用。[结果]黄花铁线莲乙酸乙酯组分可以明显抑制二甲苯诱发小鼠耳肿胀和交叉菜胶诱发大鼠足跖肿胀。[结论]黄花铁线莲乙酸乙酯组分具有良好的抗炎活性。