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以大蒜为试验材料,分别采用磷酸缓冲液提取法、热变性法对其细胞溶质中的超氧化物歧化酶进行提取分离,然后再利用硫酸铵分级盐析法对经热变性和缓冲液抽提所获得的SOD粗提液进行纯化,配合透析除去残留的小分子物质,最后通过测得的SOD酶活力的大小判断提取大蒜SOD的最佳方法,并通过对2种方法中不同参数的优化,找出最佳提取条件.结果表明:热变性法粗提大蒜SOD,透析法配合硫酸铵分级盐析法纯化SOD为最理想的提纯方法.其中热变性法最适温度为60℃,磷酸缓冲液浸提法合适的缓冲液pH值为7.8. 相似文献
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作者通过工作实践和文献总结,介绍了常用超氧化物歧化酶(SOD)纯化工艺,并对建立和完善制备高纯度SOD的最佳工艺进行了讨论。 相似文献
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皱皮木瓜超氧化物歧化酶分离纯化研究 总被引:6,自引:1,他引:6
[目的]探讨皱皮木瓜超氧化物歧化酶(SOD)分离纯化工艺。[方法]以重庆綦江皱皮木瓜为试验材料,采用硫酸铵分级沉淀、Se-vage法除杂蛋白、丙酮再次沉淀脱色除杂和Sephadex G-100凝胶层析,分离纯化皱皮木瓜SOD。采用Folin-酚法测定蛋白质含量,用改良的邻苯三酚自氧化法测定酶活性。[结果]皱皮木瓜SOD在层析过程中得到较好的分离纯化。其纯化倍数是178.72倍,回收率是4.94%,比活力是303.82 U/mg蛋白。SDS-PAGE纯度鉴定结果表明,电泳图为一条谱带,表明分离纯化到达电泳纯的样品。[结论]采用该分离纯化工艺得到比活力较高,达到电泳纯的皱皮木瓜SOD样品。 相似文献
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以仙人掌为试验材料,采用硫酸铵分级沉淀法得到超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)粗酶液。然后用Sephadex(葡聚糖凝胶)G-75层析柱层析对粗酶液进行进一步纯化,最后用邻苯三酚法测定酶活力,并对酶活力主要影响因素(包括pH值、温度、抑制剂)进行了研究。结果显示仙人掌SOD酶比活力为751.56U.mg-1。pH值为7.5~8.5时酶活力最大,稳定性也好。温度维持在25~30℃时酶活力最高。由于过氧化氢和氰化钾均能使仙人掌SOD的酶活力显著下降,因而可以初步判断从仙人掌中提取到的SOD是Cu.Zn-SOD。 相似文献
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摘 要:[目的]研究低温胁迫对小麦、玉米、萝卜幼苗SOD活性的影响及三种植物受影响程度的差异。[方法]以萝卜,玉米,小麦幼苗为实验材料,采用模拟冷害的实验方法,通过氮蓝四唑自氧化法测定SOD活性,从胁迫温度变化和胁迫时间变化两个角度研究低温胁迫对小麦、玉米、萝卜幼苗SOD活性的影响。[结果]随着胁迫温度的降低,小麦、玉米、萝卜幼苗的SOD活性都呈现先上升后下降的趋势,且0℃胁迫组酶活性低于常温组;随着胁迫时间的变化,小麦、玉米、萝卜幼苗的SOD活性走势不同,但0℃胁迫时,酶活性变化不大,且低于常温组酶活。[结论]适当的低温处理可以增强SOD活性,超过植物耐受范围后,酶活性遭到抑制而降低。 相似文献
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硅对小麦过氧化物酶、超氧化物歧化酶和木质素的影响及与抗白粉病的关系 总被引:41,自引:1,他引:41
以抗 /感白粉病的南农 99 18和苏麦 3号为试验材料 ,研究硅对小麦叶片过氧化物酶 (POD)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性的动态变化和对木质素含量的影响。结果表明 ,在不接种的情况下 ,施硅与否对抗 /感品种植株叶片的POD和SOD活性及木质素含量均无影响。而在感病情况下 ,施硅能显著提高小麦感病品种的POD活性和木质素含量 ,但对抗病品种的POD活性和木质素含量影响不显著 ;可降低小麦感病品种的SOD活性 ,但提高了抗病品种的SOD活性。施硅能显著降低感病品种植株的白粉病病情指数 ,提高其对白粉病的抗病能力 ,相对免疫效果达38.79%,其中硅的浓度以 1.7mmol·L-1为最佳。 相似文献
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【目的】小麦籽粒超氧化物歧化酶活性对小麦面粉色泽和营养品质具有重要影响,挖掘与小麦籽粒超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性显著关联位点及候选基因,为揭示小麦籽粒SOD活性的遗传机理和小麦面粉色泽的遗传改良奠定基础。【方法】采用氮蓝四唑(nitro-blue tetrazolium,NBT)光化还原法对3个环境下种植的212份普通小麦品种(系)进行SOD活性检测,结合90K SNP芯片的16 705个高质量SNP标记对小麦籽粒SOD活性进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),并对稳定遗传的显著关联位点进行候选基因的挖掘。【结果】不同环境下,各小麦品种(系)间的SOD活性表现出丰富的表型变异,变异系数为4.34%—5.23%,相关系数介于0.60—0.90(P<0.001)。多态性信息含量(polymorphic information content,PIC)为0.24—0.29。全基因组连锁不平衡(linkage disequilibrium,LD)衰减距离为7 Mb。群体结构分析表明,供试材料可分为3个亚群。GWAS分析结果显示,共检测到29个与SOD活性显著关联位点(P≤0.001),分布在1A、1B、2A、2B、2D、3B、3D、4B、4D、5A、5B、5D、6A、6B、6D和7B染色体上,单个位点可解释5.47%—32.43%的表型变异,其中14个位点在2个及以上环境下均被检测到。9个显著关联位点在3个环境下被同时检测到,分布于1B、2B、4B、5A、5B、6B和6D染色体,贡献率为6.21%—16.62%。对稳定遗传的显著关联位点进行候选基因的挖掘,共挖掘TraesCS2B01G567600、TraesCS3D01G069900、TraesCS3D01G070200、TraesCS5B01G525700、TraesCS5B01G373700、TraesCS6A01G021400和TraesCS6D01G431500等7个SOD基因和TraesCS5A01G263500、TraesCS6B01G707800等2个与SOD活性相关的候选基因,候选基因的功能主要与抑制细胞活性氧积累及参与抗氧化剂再生过程有关。【结论】检测到与小麦籽粒SOD活性显著关联的29个SNP位点,共筛选出7个SOD基因和2个与SOD活性有关的候选基因。 相似文献
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茶叶超氧化物歧化酶的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文调查和比较了3个茶叶品种的超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明,福鼎种的SOD活性最低。茶叶叶片中SOD活性随叶片的成熟和衰老而下降。SOD的最适温度为10℃,最适pH为8.0。茶叶有3条SOD带:1条Mn-SOD和2条Cu、Zn-SOD带。Mn-SOD受氯仿—乙醇的强烈抑制,Cu、Zn-SOD被氰化物抑制。SOD同工酶的分子量分别为70000、34300和29400道尔顿。 相似文献
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超氧化物歧化酶是体内自由基主要清除剂之一,简称为SOD。本文以树莓为原料,对树莓SOD的理化性质进行研究,即SOD敏感性实验,最大紫外吸收峰和温度、pH值及金属离子等因素对SOD的影响,为树莓SOD的进一步深入研究及其在药品、保健食品和化妆品的应用打下基础。三种酶(SODⅠ,SODⅡ和SODⅢ)均对KCN和H2O2不敏感,说明这三种酶都属于Mn-SOD;其最大紫外吸收峰均为280nm;温度对其影响相对稳定,SODⅢ受温度的影响稍大些,而SODⅠ和SODⅡ受温度的影响较小;在pH7~9范围内SOD相对酶活力较高,pH过高或过低SOD均易失活;三种SOD受金属离子的影响没有很大的差异,Al3 、Cu2 、Mg2 、K 、Ca2 、Zn2 都具有一定程度的激活作用,而Pb2 、Fe3 、Sn2 则具有非常明显的抑制作用。 相似文献
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Hg2+胁迫对小麦幼苗POD、CAT和SOD同工酶的影响 总被引:12,自引:0,他引:12
[Objective] This work was aimed to explore the mechanism of Hg2+ toxicity on plants. [Method]Activities of peroxidase(POD), catalase (CAT) and superoxide dismutase(SOD) were investigated in wheat (Triticum aestivum L. )seedlings under Hg2+ stress at different concentrations. [Re-pared to POD and SOD. [Conclusion] The toxic effect was related to the concentration of Hg2+ (0.10 mmol/L). The higher concentration of Hg2+ could affect the expression of POD, CAT, and SOD isozymes in the leaves, roots of wheat seedlings and germinated seeds, which further affect the normal metab-olism of membrane lipid and inhibit the growth of wheat seedlings at last. 相似文献
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采用聚丙烯胺垂直平板凝胶电泳,分析了核果类果树不同器官AMY、SOD同工酶酶谱,结果表明:同一品种不同器官AMY同工酶表现,在不同树种上差异较大;成熟叶片是AMY、SOD酶谱分析的理想试材;花药是AMY分析的理想试材。 相似文献
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3种虾类超氧化物歧化酶同工酶比较(英文) 总被引:2,自引:1,他引:2
[Objective] The aim of the study is to compare the activities of superoxide dismutase(SOD) isoenzymes in three species of shrimps Penaeus japonicus, Procambarus clarkia and Litopenaeus vannamei. [Method] The experimental materials were used to measure SOD activities after pretreatment, meanwhile the differences in SOD isoenzymes from different materials were assayed by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). [Result] There are specific and histological differences in SOD activities of shrimps. With a similar electrophoresis pattern and migration rate, Penaeus japonicus and Litopenaeus vannamei showed remarkable differences with that of Procambarus clarkia. [Conclusion] The result showed the differences of cognation and origin of three shrimps. 相似文献
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超氧化物歧化酶在酿酒酵母碱胁迫抗性中的功能研究 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]研究酿酒酵母超氧化物歧化酶与其碱胁迫抗性的相关性。[方法]采用可见分光光度法,测定碱胁迫条件下酵母菌超氧化物歧化酶活性(SOD)指标;采用平板滴定生长试验,检测酿酒酵母铜/锌超氧化物歧化酶缺失菌株(sod1Δ)和锰超氧化物歧化酶缺失菌株(sod2Δ)的碱胁迫抗性;采用台盼蓝染色,检测碱胁迫条件下酵母细胞的存活率。[结果]在pH值为7.9条件下处理2h可明显诱导酵母细胞内SOD活性升高;与野生型酵母菌株相比,sod1Δ和sod2Δ基因缺失菌均表现碱胁迫敏感表型,并且碱胁迫条件下细胞存活率明显下降。[结论]超氧化物歧化酶在调控酿酒酵母碱胁迫抗性中发挥重要作用。 相似文献