无籽西瓜子叶离体培养及植株再生研究

以无籽西瓜黑蜜5号无菌苗子叶为材料,对组织培养植株再生的条件进行了详细的研究。研究结果表明：子叶芽诱导的最佳培养基配方为MS＋6-BA3.0mg/L＋NAA0.1mg/L。芽的诱导需要先在黑暗条件下启动,生长分化则须在光下进行。适宜的生根培养基配方为1/2MS＋IAA0.4mg/L和1/2MS＋IBA0.3mg/L。试验初步建立了适用于无籽西瓜遗传转化和快速繁育的子叶再生系统。     

辣椒子叶离体培养再生植株

随着收集到的８个商品辣椒品种的子叶外植体在ＰＤ培养基上形成芽丛，转移到ＰＥ培养基上伸长为具２－３个节的茎芽，茎芽在ＰＲ培养基上生根，得到了再生植株。芽分化率达１００％，移栽成活率１００％。多植体切除芽后回到ＰＤ培养基上的反复操作可重复诱导芽的分化，提高繁殖系数。     

大蒜花梗组织培养再生植株

取生殖期大蒜花梗,在N_6+2,4-D 2mg/L+KT 1mg/L培养基上暗培养30天后,得到微黄色愈伤组织。将愈伤组织转到N_6+2,4-D 0.5mg/L+KT 0.5mg/L培养基上继代二次,然后于N_6+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L,MS(1/2大量元素)+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L和MS+BA 5mg/L+KT 1mg+IAA 0.01mg/L培养基上光照培养。3周后愈伤组织上出现绿色丛生芽,将小芽转到MS(1/2大量元素)+NAA 0.01mg/L培养基上,一周后发生白色根并形成完整植株。2,4-D和KT对大蒜花梗愈伤组织发生是必要的,高浓度的细胞分裂素和低浓度的生长素有利于芽分化,高浓度NH_4~+有利于根分化,低浓度NH_4~+有利于芽分化。愈伤组织低温处理对芽的分化是必要的。另外,对花梗愈伤组织发生进行了细胞学观察。     

裕民无刺红花的组织培养和植株再生

以裕民无刺红花成熟种子胚轴为外植体,在含BA(0.5mg/L)和NAA(1.5mg/L)的MS培养基上每个外植体均可诱导出若干个不定芽,平均每个外植体可产生4个不定芽,健壮的不定芽经过伸长、生根后可移栽成活.本试验利用裕民无刺红花品种获得了其再生植株,为其遗传转化和多倍体的诱导奠定了基础.     

几种抗生素对大白菜种子发芽及离体子叶再生的影响

培养基中添加不同浓度的卡那霉素、头孢霉素和羧苄青霉素，观察抗生素对大白菜基因型GP－11种子发芽以及离体子叶再生的影响。结果表明：GP－11种子在含有200mg/L卡那霉素的MS培养基上发芽生长时，幼苗子叶完全黄化，侧根数为0；随卡那霉素浓度的增加，芽、主根和侧根生长均受到一定程度抑制，但发芽率和发芽势不受影响。4日苗龄的离体子叶在含有10mg/L卡那霉素并附加一定激素的改良MS培养基生长时，基本无绿芽诱出，在含7．5mg/L和5mg/L卡那霉素的培养基中，诱出的绿芽率只有32．5％和40．2％；在仅含3mg/L卡那霉素的生根培养基中，小苗完全丧失生根能力。在添加浓度高至400mg/L的头孢霉素或羧苄青霉素的诱芽培养基中，GP－11诱芽率为0，且它们之间差异不明显，但在添加头孢霉素或羧苄青霉素的生根培养基中，小苗生根依然正常。试验结果表明，在农杆菌介导的基因转化中，对大有转化苗筛选的卡那霉素浓度在10mg/L左右是适宜的，添加的抑菌剂浓度在能控制农杆菌生长的同时，同时降低浓度，最好不超过400mg/L；在诱导生根培养基中，卡那霉素浓度不宜超过3mg/L。另外，对T0代转基因种子进行遗传分析时在发芽培养基中添加卡那霉素浓度应该达到200mg/L。     

紫花地丁的组织培养和植株再生

以未成熟种子萌发的子叶和下胚轴为外植体建立了紫花地丁的组织培养及植株再生体系，结果表明最适愈伤组织诱导培养基为MS＋2，4-D 0．5mg／L＋6．BA0．5mg／L或者MS＋2．4-D1mg／L＋6-BA 0．2mg／L，愈伤组织诱导率可达100％，将生长良好的愈伤组织转入分化培养基可诱导芽或根的分化，其中诱导芽的最适培养基为MS＋6-BA1mg／L＋2。4-D0．5mg／L，诱导根的最适培养基为MS＋2，4-D1mg／L＋6-BA 0．2mg／L，两种器官分化途径均能有效再生成苗。     

椿叶花椒组织培养及植株再生

选用椿叶花椒带腋芽的茎段为外植体,进行组织培养与快速繁殖技术研究.结果表明椿叶花椒初代愈伤组织诱导以WPM 6-BA2.5mg·L-1 NAA2mg·L-1 IBA1mg·L-1效果最好;继代培养采用WPM 6-BA0.2mg·L-1 IBA0.1mg·L-1 NAA0.1mg·L-1,培养30d,增殖在5.6倍以上;生根培养1/4MS I-BA0.5mg·L-1,20d左右生根,平均根量4.6条,生根率95%.     

棉花组织培养高效植株再生体系的建立

通过对影响棉花体细胞胚胎发生和植株再生关键因素的研究,建立了适用于广泛基因型的棉花组织培养高效胚胎发生与植株再生体系。从中棉所12、中棉所19、泗棉3号等20余个主栽品种诱导获得了胚胎发生和植株再生,有效地突破了棉花组织培养植株再生的基因型控制,使占我国棉田面积50%以上的品种均能诱导获得胚胎发生和再生植株。首次诱导获得直接胚胎发生,使棉花组织培养的周期由180d缩短到120d左右,减少了培养过程中变异的发生。该结果的获得必将大大促进植物细胞工程和基因工程在棉花遗传改良上的应用。     

影响小白菜子叶再生的因素

本研究以小白菜“杭州油冬儿”品种为试材,研究了不同激素组合、子叶不同部位、不同接种方式对不定芽再生的影响,并且还筛选了种子表面消毒的最佳方法和不定芽生根的最佳培养基。研究结果表明,白菜种子表面消毒的最佳方法为用70%的乙醇浸泡30s,再用20%的次氯酸钠消毒20min或用0.1%升汞消毒10min;以完整的带柄子叶为最佳外植体,接种时将子叶背面朝上放置比正面朝上放置更有利于不定芽的分化;子叶再生的最佳培养基为MN＋BA2mg/L＋NAA0.5mg/L,不定芽生根的最佳培养基为1/2MS＋IAA0.2mg/L。此研究为小白菜再生体系的建立奠定了基础。     

不结球白菜小孢子胚成苗及倍性变异研究

以不结球白菜小孢子胚为外植体,对胚发育成苗过程中基本培养基、激素配比、基因型及生根条件进行了研究,并对再生植株的染色体倍性进行了鉴定。研究表明：适于小孢子胚芽分化的培养基为B5＋GA30.1 mg/L＋蔗糖3%＋琼脂1.2%,在此培养基上6号、14号、31号的子叶型胚状体的出芽率分别为53.33%,85.24%,75.55%,平均出芽数分别为5.66,3.83,3.28个;为了诱导获得健壮新根,提高植株再生率,最适宜的生根培养基为MS＋IBA 0.1 mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.6%,生根率达100%,平均根数9.70条。对133株再生植株进行了染色体倍性鉴定,结果发现不结球白菜自然加倍率很高,且倍性变异情况比较复杂,其中四倍体植株所占比例最高,达到56.39%,二倍体植株占39.10%,三倍体植株占3.01%,而单倍体植株仅占1.50%。     

不同基因型对白菜子叶培养不定芽再生的影响

探讨了基因型对白菜子叶培养不定芽再生的影响。结果表明，不同基因型的不定芽再生率和平均每子叶生芽数差异极大，在被检索的123个大白菜和20个小白菜品种中，芽再生率为0－97.5%，平均每子味生芽数为1.0-10.7个。17个大白菜和5个小白菜品种的不定芽再生率在80％以上。芽再生率与品种起源地、结球类型及熟性无相关。     

大白菜游离小孢子胚再生植株能力的遗传分析

以大白菜小孢子植株再生能力不同的材料为亲本,采用双列杂交方法,研究了小孢子植株再生能力的遗传特性。大白菜小孢子植株再生能力的遗传符合加性-显性模式,主要受核基因控制,基因作用以加性效应为主,高植株再生能力由隐性基因控制,狭义遗传力为70.6%。     

不结球白菜游离小孢子培养成胚影响因素的研究

以17个不同基因型的不结球白菜为供试材料,对影响小孢子胚胎发生频率的若干因素进行了研究。结果表明:在秋冬季日光温室内,供试植株主花序第一朵花开后第7~14天取样,即初花期是最佳取样时期;不同基因型间小孢子胚胎发生能力差异很大,在接种的17个基因型中,有12个诱导出胚,诱导成功率71%;其中102号产胚量最高,达到32.78个/蕾;在已产胚材料中,产胚量最高的基因型是产胚量最低的基因型的546倍;较易抽薹型材料的产胚能力大于易抽薹型和不易抽薹型。以B5有机成分代替NLN有机成分,能够提高产胚量,尤其是对难成胚基因型的小孢子胚胎发生有较好的促进作用,甘露醇对小孢子分裂无促进作用。     

春化天数对大白菜、小白菜现蕾和开花的影响

采用0，15，20，25，30d5种不同春化处理天数对5份大白菜和5份小白菜抽薹和开花的影响进行了研究。结果表明，对大白菜而言，冬性强的和较强的材料（B，D，E），春化时间以20d为宜，冬性弱的材料（A，C）以15d为佳，冬性强的材料初花天数为50d左右，冬性弱的材料为37d。对小白菜而言，春化天数以15d为佳，冬性强的材料初花天数为46d，其他为38d左右。春化天数长，开花略早，但差异不显著。在试验中，小白菜除J的冬性较强外，其他各材料冬性相差不大，不易分开，这可能与小白菜现蕾和开花需一定光照有关。可见小白菜在春化天数满足条件下，光照才是影响现蕾和开花的关键因子。     

小白菜小孢子胚状体诱导影响因素研究

以10个小白菜杂交种为试材,采用游离小孢子培养方法,研究影响小孢子胚状体形成因素的结果表明,不同品种胚状体的诱导率不同;NLN培养基中大量元素减半有利于小孢子胚诱导,其诱导率达到100%;培养基中添加0.05 mg/L的6-BA和0.2 mg/L的NAA可以提高胚状体诱导率;活性炭和琼脂糖对诱导胚状体发生和发育有促进作用,可使子叶胚的比例达90%以上;花蕾经4℃低温预处理24 h后的成胚率显著提高。