肝素钙离子载体咖啡因在家畜精子体外获能中的作用

前言自 Brackett 等(1981)通过体外受精(InVitro Capacition,IVF)技术获得首例试管牛以来,已相继通过 IVF 得到了绵羊(花田章1985)、山羊(福田丰,1986)、猪(Cheng等,1986)的试管后代,我国也先后在牛、绵羊、猪取得成功。精子在与卵子受精之前必须发生获能和顶体反应,精子的体外获能和顶体反应是家畜体外受精过程的重要一环。自 Chang 和 Austin(1951)发现精子的获能现象以来,许多学者     

苯甲酸钠咖啡因对牛精子体外获能的影响——牛精子穿入去透明带仓鼠卵实验

K·Goto 等用含咖啡因的 BO 液(Brac-ketl 和 Oliphant,1975)对牛精子进行体外获能处理,成功地完成了体外受精。部分受精牛卵发育至桑椹期。我们用苯甲酸钠咖啡因(上海兽药厂产)作试剂,添加到 BO 溶,液中,对牛精子进行体外获能培养,发现牛精子很快死亡。为此,我们研究了该种试剂对牛精子体外获能的影响及提高苯甲酸钠咖啡因对牛精子体外获能促进作用的方法。     

咖啡因和肝素、钙离子载体对家畜冷冻精子体外获能的协同作用

本文报道了用咖啡因与肝素、钙离子载体(I-A)协同处理诱导马、驴、猪冷冻精子体外获能的研究结果.咖啡因与肝素、I-A均有协同作用.在肝素或I-A处理中添加咖啡因,不仅能提高穿透率,而且能促进卵内雄原核的形成和发育.精子先经洗涤,再用咖啡因与肝素或I-A协同处理,可得到良好的获能效果.     

提高牛体外性控胚胎效率关键技术研究

为了提高牛体外受精效果,试验从性控冷冻精液体外获能方法及抗氧化剂的添加、体外成熟24h后卵母细胞是否部分脱除卵丘细胞3个方面,研究了影响牛性控精液体外受精效率的关键技术。结果表明,一次离心体外获能法体外受精卵裂率[(68.3±3.7)%]、囊胚率[(30.9±2.3)%]与精子上浮获能法体外受精卵裂率[(67.8±2.6)%]、囊胚率[(29.7±3.7)%]无显著差异(P>0.05),但显著高于二次离心体外获能法体外受精卵裂率[(56.1±4.1)%]、囊胚率[(21.6±4.6)%](P<0.05);获能液和体外受精液添加1.0%抗坏血酸组体外受精卵裂率[(70.2±3.2)%]、囊胚率[(35.0±4.7)%]显著高于不添加组体外受精卵裂率[(60.0±4.5)%]、囊胚率[(28.3±3.6)%](P<0.05);在体外受精前,成熟卵母细胞周围的卵丘细胞脱除情况为部分脱除组体外受精卵裂率[(70.1±4.6)%]、囊胚率[(35.5±3.7)%]显著高于不脱除组体外受精卵裂率[(52.9±4.1)%]、囊胚率[(26.1±3.6)%](P<0.05)。由此可见,性控精液体外受精时,获能方法宜采用一次离心体外获能法或上浮获能法,且精子获能液和体外受精液中宜添加抗坏血酸;体外受精前,成熟卵母细胞部分脱除卵丘细胞对于提高性控精液体外受精胚胎发育率具有重要意义。     

猪精子体外获能的研究概况

精子获能现象的发现大大促进了体外受精技术的发展。近年来，在精子体外获能的研究过程中不断加深了人们对精子获能机理的认识，同时也不断提高了精子体外获能的效果．进一步推动了体外受精技术的发展。就当前猪精子体外获能研究概况进行综述，希望能对进一步深入研究有所启示。     

CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响

为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果，新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA，A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精，并利用金霉素荧光染色（chlortetracycline，CTC）法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组, 说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。     

绵羊精子在不同动物生殖道内获能效果的比较

体外获能是哺乳动物体外受精体系中很重要的一步,获能处理的好坏直接关系着受精的成功与否.目前,绵羊体外受精效果与牛相比尚有较大差距,虽然原因是多方面的,但绵羊精子体外获能效果不十分理想是一个重要方面.因此,试验拟从精子获能的角度来探寻绵羊受精效果不理想的原因.     

大鼠体外受精技术

体外受精技术在多种哺乳动物已取得成功并获得广泛应用。大鼠由于其本身的特殊性,体外受精及随后的胚胎培养一直比较困难,国内关于大鼠体外受精方面的研究更是少有报道。文章主要从卵母细胞体外成熟培养、精子获能、受精、受精卵体外培养及胚胎移植等方面着手,对国外大鼠体外受精的研究现状做一概述。     

动物繁殖生物技术中体外受精的操作及其影响因素

20世纪60年代初，人们以家兔、小鼠等为实验材料，进行大量基础研究，在精子由最初在同种或异种雌性生殖道孵育获能，发展到用溶液、卵泡液，子宫内膜提取液或血清在体外培育获能，最后用化学成分明确的溶液培养获能。同时通过射出精子和附睾精获能效果的比较研究，人们发现射出精液中含获能因子，并认识到获能的实质是去除精子表面的去能因子。这些理论和方法上的成功推动了体外受精技术发展。     

BSA在精子获能中的作用及其替代物研究进展

摘　要:精子获能(Capacitation)是受精过程能否完成的一个关键因素,是生殖机理研究和体外受精(IVF)技术研究中的一个重要方面,但精子获能的机理仍然不甚明确。精子获能孵育液和促获能物质的研究是研究精子获能的基础,牛血清白蛋白(BSA)是经典的精子获能液中不可或缺的添加物,具有促使大多数哺乳动物精子获能、防止精子质膜之间发生黏连等作用。但由于BSA 是生物制剂,化学成分不确定并且作用复杂,给试验研究带来不便。因此,成分和功能相对确定的替代物被研究,像聚乙烯醇(PVA),环化糊精(Cyclodextrin)和合成蛋白等。这方面的研究仍处于起步阶段,有必要继续进行。     

水貂银狐精子体外获能前后表面元素变化的研究

哺乳动物精子的体外获能是体外受精中的一个关键问题,而元素成分又在精子获能中发挥着极其重要的作用。Yanagimachi(1982)提出仓鼠精子的体外获能与钙元素有关;Mrsny等(1987)发现钾、镁元素是仓鼠精子获能和顶体反应所必需的;Hyne(1984)又证实钠也是豚鼠精子体外获能或顶体反应最重要的元素。然而,在野生动物水貂和银狐精子获能前后元素成分的变化,至今国内外尚     

家畜体外受精的研究进展

一、前言 1951年,Austin和张明觉首次报道了哺乳动物(兔子)体外受精成功,并最先提出了受精前精子需在母畜生殖道内获能的观点。30年来,体外受精技术已由实验动物发展到大家畜和人类,并在20多种哺乳动物上获得成功,其中兔子(1959)、小白鼠(1968)、大鼠(1974)、人(1978)、牛(1981)、山羊(1984)、绵羊(1986)、猪(1986)等已有正常的体外受精的后代。体外受精技术有助于揭示受精的本质和机理及研究胚胎的发育和分化;便于进行基因导入和卵核移植;同时,也可有效地解决家畜的某些不孕症,并提高优良种畜的利用效率。本文将从卵细胞体外培养和成熟,精子的     

绵羊体外受精及胚胎发育分子调控研究进展

家畜体外受精研究最早的动物是绵羊。与其他动物体外受精过程一样,绵羊体外受精技术也包括卵母细胞体外成熟(IVM)、精子体外获能、体外受精(IVF)、受精卵体外培养(IVC)以及胚胎移植(ET)等过程。因此,绵羊胚胎的体外生产技术的效率受到了这些技术环节当中诸多因素的影响,并且动物胚胎的发育受到多种调控因子的调节。本文就当前绵羊体外受精技术环节中的相关影响因素以及胚胎发育分子调控的相关研究进展作一综述。     

家畜体外受精的研究概况

一、体外受精的实验操作 1.精子的准备供体外受精的精子必须是获能的精子.要得到获能精子方法有二:一是从母体生殖道中回收交配后经过一定时间的精子;二是对公畜直接射出的精子进行适当的处理,在体外诱发其获能.前一种方法较近于自然状态,多种动物都有成功的例子.在实际体内受精过程中,精子从子宫向输卵管移动期间就已获能,到达输卵管的精子已是完全获能的精子,唯实际到     

牛成熟卵母细胞体外受精的研究进展

这篇论文论述了牛成熟卵母细胞体外受精的研究进展,主要从精子的制备方法,获能液的组成、精子获能的判定、受精方,法以及卵母细胞受精与否的评定5个方面加以阐述,并展望了体外受精的研究方向。     

家兔卵子体外受精研究

从供体母兔输卵管冲取成熟的卵母细胞,与体外获能的附睾精子或射出精子体外受精。三种获能方法分别是 His-DM 法、肝素法和附睾精子 DM 预培养法,获能精子与卵母细胞体外受精后的2-细胞胚胎发育率分别是36.37%(24/66)、12.57%(13/102)和35.33%(53/150)。体外受精后体外发育到2-至4-细胞期胚胎经移植给7只同期发情受体母兔,结果有2头怀孕并产仔9只,胚移产仔率为28.57%(2/7),移入胚胎成仔率为11.39%(9/79)。     

不同发情阶段的绵羊血清对绵羊精子获能和体外受精的影响

为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%、5%、10%和20%.利用金霉素荧光染色(CTC,chlortetracycline)法及体外受精2种方法检测不同血清及其浓度对绵羊精子获能的影响.结果表明:1)当在获能液中添加发情当天绵羊血清时,在10%和20%血清浓度下作用45 min的获能效果最好,其获能而且未完成顶体反应的精子率(45.28%和44.52%)显著高于0%、2%和5%血清浓度组(30.14%、28.71%和35.49%,P<0.05);2)当在获能液中添加发情结束时或发情间期的绵羊血清时,在含不同浓度的这2种血清的获能液中作用45 min后,各浓度组引起的获能精子百分率变化均不显著(P>0.05);3)在含20%发情当天绵羊血清的获能液中,精子的存活时间(18 h)显著高于含20%发情结束和发情间期的绵羊血清的获能液(11 h;11 h);4)在不同血清诱导获能后进行的体外受精的试验中,添加发情当天绵羊血清组的卵裂率和囊胚率(62.5%和26.25%)均显著高于发情结束时血清组(42.22%和11.11%,P<0.05)和发情间期血清组(37.36%和15.38%,P<005).以上结果表明:在进行绵羊体外受精试验中,采用20%发情当天绵羊血清作用45 min比采用发情结束和发情间期的绵羊血清能更好地诱导精子获能.     

通过鸡卵体外受精产生雏鸡

通过体外受精(IVF)成功的产生雏鸡可以实现两个重要目标:一是产生转基因鸡,二是解决鸡精子获能的争论。 本研究的目标是通过IVF产生雏鸡,即将受精卵返送回受体鸡的输卵管,以形成蛋和壳,并进行随后的孵化。     

马属动物剖腹产手术的探讨

自抗菌药物问世后,马属动物腹膜炎的治疗效果得到了改善,因此,马、驴的剖腹产手术,越来越广泛地被应用到兽医临床上来。十几年来本人先后做过八例马、驴的剖腹产手术(马4、驴4),其中成功六例,失     

牛羊精子体外获能技术

精子体外获能是模仿体内获能的环境条件,经过一系列的生理、生化过程使成熟卵母细胞受精。精子获能过程中发生了一系列的过氧化过程,产生了过量的氧自由基是导致体外受精率低下的原因之一。本文主要介绍了体外受精用精子的筛选及抗氧化方法、影响体外获能的因素等。