贵州3种马铃薯病毒的DAS-ELISA检测与分析

应用DAS-ELISA法对从贵州省马铃薯种植区采集带症状的202份马铃薯叶片分别进行了PVX、PVY、PLRV 3种马铃薯病毒的检测。结果表明,3种马铃薯病毒在贵州马铃薯种植区表现出比较显著的田间症状,其病毒的发生与气候类型、种薯品种来源、种植方式存在相关性,并结合马铃薯实际生产对其病毒防治措施做了简要讨论。     

3种检测方法在脱毒马铃薯种薯病毒检测中的应用及检测效果比较

为进一步明确适用于脱毒马铃薯种薯的病毒检测方法,为脱毒马铃薯生产提供更为有效和准确的病毒检测技术指导。应用反转录聚合酶联式反应(RT-PCR)、双抗体夹心-酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)以及胶体金免疫层析技术(GICA)3种方法,对脱毒马铃薯生产中的马铃薯X病毒(PVX)、S病毒(PVS)进行检测,在不同品种及不同繁育等级的种薯中分别比较3种方法的检测效果。结果表明,RT-PCR对马铃薯原原种中的2种病毒检测效果显著优于其他2种方法;3种方法对一级种的2种病毒检测效果无显著差异。RTPCR非常适用于原原种病毒的检测;ELISA方法对原种及一级种大样本抽检更为适用,而GICA因成本高,更适宜一级种小样本的快速抽检。     

马铃薯试管苗病毒检测技术研究

根据大兴安岭马铃薯种薯生产实际,应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)检测茎尖组织培养试管苗的带毒情况,鉴定危害马铃薯生产的6种主要病毒(PVX、PVY、PVS、PVM、PVA、PLRV),并结合指示植物如千日红进行最后鉴定,筛选健康、无毒的试管苗,为切段扩繁及试管薯生产作准备。该方法简单易操作,可作为国内生产脱毒种薯单位的标准检测方法进行推广。     

马铃薯种薯生产中的病毒检测

病毒检测是马铃薯种薯生产中不可或缺的一环,双抗体酶联免疫吸附测定法（DAS-ELISA）是一种简单、灵敏度高、特异性强、安全、快速、结果容易观察、适于商业化大量样品的检测方法。介绍了此方法的操作程序及其相配套的采样方法,并对多年实践中马铃薯组培苗和种薯生产中的检测数据进行了简要的统计分析。     

马铃薯病毒检测技术研究进展

介绍马铃薯病毒种类、马铃薯病毒病发生症状、马铃薯病毒的传播方式,总结马铃薯病毒检测技术的研究进展,并对其发展前景进行了展望。     

牛轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法.该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg·mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5 μg·mL-1,样品反应时间60 mi...     

马铃薯疮痂病菌(Streptomyces scabies)的血清学检测

以马铃薯疮痂病菌RB5(Streptomyces scabies)的菌丝-孢子为抗原免疫家兔,制备了抗血清AsRB5,并采用琼脂双扩散和酶联免疫吸附试验对抗血清进行特异性测定,结果表明,供试的10 株马铃薯疮痂病菌,1 株玫瑰黄链霉菌和1株玫瑰暗黄链霉菌与AsRB5 反应为阳性,其他15 株疮痂链霉菌与AsRB5 反应为阴性,作为对照的棉花黄萎病菌、立枯病菌、炭疽病菌与AsRB5 反应为阴性。以上结果表明,使用抗血清AsRB5 检测马铃薯疮痂病菌,基本上可以将其鉴定到种的水平上。但不能对同种内菌株进一步区分或进行多样性评价,并且这种鉴定与其地理来源及寄主无关。     

海南省辣椒、番茄病毒病病原 DAS-ELISA 定性检测

辣椒和番茄是海南省重要的经济作物,但病毒病的发生导致严重减产。2013-2014年,在全省范围内采集了253份辣椒病毒病样品和289番茄病毒病样品,采用DAS-ELISA对7种主要病毒及病毒的相对含量进行了测定。结果显示,辣椒病毒病的总体检出率为59.68%,CMV的检出率最高,为41.11%,存在7种复合侵染类型,复合侵染率为30.83%,优势毒源为CMV和TMV。番茄病毒病的总体检出率为44.64%,TYLCV的检出率最高,为22.84%,存在10种复合侵染类型,复合侵染率为15.57%,优势毒源为TYLCV和CMV。样品相对含量测定显示,在辣椒中CMV的相对含量最高,BBWV的含量最低;在番茄中TYLCV的相对含量最高,BBWV的含量最低;辣椒样品中除CMV含量高于番茄外,其他病毒的含量均低于番茄。     

保定地区一种新辣椒病毒病的鉴定

从保定东郊温室大棚中典型花叶症状的甜椒病株上得到1个病毒分离物(BD),经枯斑三生烟分离纯化3次后,并保存在茄门甜椒上。通过酶联免疫方法、鉴别寄主反应、电镜观察测定等,确定保定分离物是辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)。用Trizol提取病叶总RNA,反转录为cDNA,通过2对特异性引物,分别扩增出病毒外壳蛋白基因片段和与病毒复制相关蛋白基因片段。保定分离物的病毒外壳蛋白基因,与5个PMMoV分离物核甘酸同源性为94.5%~100%,而与3个TMV分离物核苷酸同源性为65.4%~67.7%,从而进一步验证了保定分离物为PMMoV。     

用酶联免疫吸附试验检测马铃薯卷叶病毒

本文介绍用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法快速检测马铃薯叶片及块茎内的马铃薯卷叶病毒(PLRV),检测叶片的最高稀释倍数为1/128,检测块茎的最高稀释倍数为1/64。马铃薯病株的顶部叶片和底部叶片的病毒含量不同,而又没有一定的规律性。马铃薯感染PLRV后可表现为底叶卷叶、部分全株卷叶或顶叶卷叶,有的品种无症;还有一部分植株虽然表现出各种卷叶症状,但并不是由PLRV所致。我院马铃薯育种圃内常用的杂交亲本的带毒率为31.21％;在黑龙江省的几个主栽品种上均可检测到PLRV。     

热带兰花引入品种的病毒检测

采用植物病毒抗血清技术对引入的４２６个热带兰花品种进行两种主要病毒的检测,结果表明,引入品种中蕙兰花叶病毒（ＯＲＳＶ）总感病率为３８．０％,齿舌兰属环斑病毒（ＣＹＭＶ）总感病率为２７．７％。其中蝴蝶兰、卡特利亚兰、文心兰两种病毒感病率均较高,而且较为接近,在４０％～６０％范围内;石斛兰感病率较低,对两种病毒具较强的抗性;大花蕙兰易感ＯＲＳＶ,感病率高达４２．８％,较抗ＣＹＭＶ,感病率仅６．８％。     

北京、宁夏甜椒上分离的黄瓜花叶病毒CP基因序列分析及亚组鉴定

从宁夏和北京地区甜椒上分离到3个黄瓜花叶病毒分离物(宁夏分离物为CMV-NX1,NX2;北京分离物为CMV-BJ)并保存在普通烟上。从叶片中提取该病毒RNA,经RT-PCR扩增到780bp的全长CP基因的cDNA,PCR产物纯化并测序。2个宁夏分离物(NX1,NX2)核甘酸序列同源性为100%,它们为同一株系。与已报道的部分CMV株系的CP基因序列相比较,表明3个分离物与CMV亚组I同源关系比亚组II更密切,因而3个分离物都属于黄瓜花叶病毒亚组I,通过DAS-ELISA进一步验证它们都属于亚组I。     

两种检测罗氏沼虾诺达病毒方法的比较

分别用三抗体夹心酶联免疫吸附测定、逆转录聚合酶链式反应两种方法,检测20尾采集自广东省肇庆市的典型白肉病症状罗氏沼虾肌肉中的诺达病毒。检测结果是两种方法阳性检出率均为95%。结果表明,两种方法均能有效的应用在实验室检测罗氏沼虾诺达病毒。     

黄曲霉毒素的检测技术

目前黄曲霉毒素（AF）的测定方法很多,主要有薄层层析法（TLC）,酶联免疫吸附法（ELISA）,高效液相色谱法（HPLC）等。本文结合国内、外有关文献,对黄曲霉毒素的检测技术的研究进展进行了综述,并且在此基础上探讨了未来对饲料安全研究的方向,旨在使人们更好的保障饲料安全,预防黄曲霉毒素中毒。     

浙江海宁月季上发现李属坏死环斑病毒

采用双夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA),对杭州、嘉兴、绍兴3市6县(市、区)的果树园林植物进行李属坏死环斑病毒病的病情调查,采集检测样品包括樱桃、桃、李、杏和月季等12种寄主植物共计102个.结果表明,10个海宁月季样品的ELISA结果呈阳性,其他样品呈阴性;阳性样品经RT-PCR检测和CP基因测序验证,确认海宁月季感染了李属坏死环斑病毒.     

免疫胶体金技术在马铃薯病毒检测上的应用

免疫胶体金技术是一种快速、简便、结果容易判定的新型免疫标记技术,应用免疫胶体金技术制备试纸条具有特异性强、价格低、灵敏度高的特点,适用于马铃薯病毒检测,特别广泛适用于田间和口岸现场检测等工作。文章对免疫胶体金技术的基本原理、制备方法以及其目前在马铃薯病毒检测中的应用情况进行了综述。     

百合脱毒及病毒检测技术研究进展

百合是重要的观赏花卉，百合的繁殖主要通过无性繁殖方式进行，由于病害的侵染，常常造成植株体内的病毒积累。导致植株发生病毒病，最终严重降低百合植株的经济价值和观赏价值。因此，防止百合感染病毒病的应对策略是采用脱毒培养技术获得脱毒苗，并在各个生产环节进行严格的病毒检测。作系统地介绍了常用的脱毒技术——茎尖培养、珠芽培养、化学处理和热处理，以及主要病毒检测方法一指示植物法、电镜技术、酶联免疫法和分子生物学技术。     

DAS-ELISA在检测马铃薯病毒操作中应注意事项

内蒙古乌兰察布市是我国马铃薯主产区之一。了解当地马铃薯脱毒种薯的质量,从源头上控制马铃薯种薯病毒是提高马铃薯种薯质量的关键。同时也大大提高了马铃薯的产量,为马铃薯的增产增收提供了保障。酶联免疫吸附试验法具有准确度高,操作简单,适用性强等优点,能快速而准确的检测出马铃薯中含有的主要病毒类型。目前此法已经成为我国马铃薯病毒常规检测的标准方法(GB18133-2000)。本人从事马铃薯病毒检测工作多年,现     

用酶联免疫吸附试验检测马传染性贫血病毒抗体

用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测马、骡传染性贫血抗体,并与琼脂扩散沉淀试验(AGID)相比较,结果ELISA检出率为84.26％—96.45％,AGID相应为25.67％—47.87％,前者检测效果优于后者。