CXJZ95-198菌株在不同碳源中产β-甘露聚糖酶的规律研究

本文主要研究了在不同碳源条件下,CXJZ95-198菌株产甘露聚糖酶的规律.研究发现CXJZ95-198菌株酶活在葡萄糖和甘露糖培养基中都呈"抛物线"型变化,均在7.5h达到产酶高峰,粗酶液的酶活分别为79.4U/ml和99.4U/ml.在精制魔芋粉、槐豆胶和豆饼粉培养基中,酶活呈"N"型变化.     

CXJZ11-01菌株分泌中性β-甘露聚糖酶的研究

对现有菌种资源进行提纯复壮和筛选，采用透明圈法和发酵液酶活力比较法，获得高产中性β-甘露聚糖酶菌株CXJZ11-01。进而采用单因子和多因子相结合的统计方法以及DNS法，对该菌株β-甘露聚糖酶活力检测体系及其产酶规律进行系统研究。结果表明：该中性β-甘露聚糖酶最适pH值为6．0，最适温度为65℃；菌株CXJZ11-01在适宜条件下培养9小时，发酵液粗酶活力高达3050U／ml。     

CXJZ11-01菌株分泌中性β-甘露聚糖酶的研究

对现有菌种资源进行提纯复壮和筛选,采用透明圈法和发酵液酶活力比较法,获得高产中性β-甘露聚糖酶菌株CXJZ11-01。进而采用单因子和多因子相结合的统计方法以及DNS法,对该菌株β-甘露聚糖酶活力检测体系及其产酶规律进行系统研究。结果表明:该中性β-甘露聚糖酶最适pH值为6.0,最适温度为65℃;菌株CXJZ11-01在适宜条件下培养9小时,发酵液粗酶活力高达3050U/ml。     

木聚糖酶高产菌株的筛选及其产酶规律研究

本研究采用透明圈比较法，从质粒转化变异菌种资源中纯化出1个木聚糖酶高产菌株。同时，采用单因子和多因子相结合的方法及DNS法，对该菌株的适宜发酵条件和产酶规律及木聚糖酶活检测体系进行了初步研究。结果表明：该菌株在改良培养基中的对数生长期在1-7h之间，产酶高峰期在8h左右，发酵液酶活达到344U／ml；木聚糖酶活力检测采用0．1mol·L^-1柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，pH值5．2—5．8，木聚糖浓度0．8％，温度60℃，DNS用量为2．0—2．5ml。     

响应面法优化大麻果胶酶产生菌发酵培养基

果胶酶是影响大麻脱胶的关键酶,应用果胶酶可以降低脱胶成本,提高精干麻的制成率和梳成率,为了使自行分离得到的菌株HDDMG05获得较高水平的产酶能力,优化了此茵株产果胶酶发酵培养基的条件.本项研究主要采用Phckett-Burman(PB)法和响应面分析方法(RSM),对培养基的橘皮粉、酵母提取物、硫酸铵、pH值和NaCl等因素进行优化.结果表明:培养基在橘皮粉16.1%、酵母提取物0.2%、硫酸铵0%、pH值4.98、NaC10.5%、K2HPO4 0.05%、MgSO47H2O 0.01%时,茵株HDDMG05可以获得8100U/mL的最大产酶量.采用基于响应面分析方法能够较大地提高茵株产酶能力.     

黄绿木霉诱变菌株对大豆根腐病镰刀菌的拮抗

以黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)为出发茵株,孢子经紫外线照射,亚硝酸及氯化锂复合处理后获得一株酶活增强的突变株.通过对峙培养与发酵液处理病原茵研究了该诱变株对大豆根腐病几种镰刀茵(Fusarium spp.)的拮抗作用.诱变株经传代30代后,其产酶活性仍保持增强,生防能力有所提高.拮抗试验结果明确了黄绿木霉诱变株对镰刀茵的拮抗机理以生存竞争和接触后对病原茵茵丝破坏的溶菌作用为主,且诱变株产孢速度快,分生孢子梗空间竞争优势强于原始茵株.酶活测定结果表明,诱变株的滤纸酶活提高85.7%,CMC-Na酶活提高26.7%,β-葡萄糖苷酶活提高130.3%.     

欧文氏杆菌CXJZ95-198基因组文库的构建

采用改良鸟枪法构建了草本纤维精制高效菌种Erwinia carotovora CXJZ95-198的基因组文库，结合透明圈法，筛选到了8个甘露聚糖酶基因阳性克隆，并采用PCR方法对它们进行了分析鉴定，结果表明它们含有同一个甘露聚糖酶基因。     

CXJZ95-198菌株果胶酶活力检测方法研究

本文采用DNS法,对影响CXJZ95-198菌株果胶酶活力测定的酶解反应条件进行了比较系统的研究。结果表明,酶解反应条件对酶活力测定值的影响明显,其中,温度、缓冲液种类、底物种类及其浓度对测定结果影响较大,缓冲液pH及DTT浓度对测定结果也有一定影响。测定该菌株果胶酶活力适宜的酶解反应条件为:温度50℃,底物桔子果胶S(igm a),底物浓度0.2%,缓冲液1/15m ol.L-1KH 2PO4-Na2H PO4(pH 5.2),DTT浓度为1.0m m ol.L-1。     

CXJZ95-198菌株果胶酶活力检测方法研究

本文采用DNS法,对影响CXJZ95-198菌株果胶酶活力测定的酶解反应条件进行了比较系统的研究.结果表明,酶解反应条件对酶活力测定值的影响明显,其中,温度、缓冲液种类、底物种类及其浓度对测定结果影响较大,缓冲液pH及DTT浓度对测定结果也有一定影响.测定该菌株果胶酶活力适宜的酶解反应条件为温度50℃,底物桔子果胶(Sigma),底物浓度0.2%,缓冲液1/15mol·L-1KH2PO4-Na2HPO4(pH5.2),DTT浓度为1.0mmol·L-1.     

木聚糖酶高产菌株的筛选及其产酶规律研究

本研究采用透明圈比较法,从质粒转化变异菌种资源中纯化出1个木聚糖酶高产菌株。同时,采用单因子和多因子相结合的方法及DNS法,对该菌株的适宜发酵条件和产酶规律及木聚糖酶活检测体系进行了初步研究。结果表明:该菌株在改良培养基中的对数生长期在1～7h之间,产酶高峰期在8h左右,发酵液酶活达到344U/ml;木聚糖酶活力检测采用0.1mol.L-1柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,pH值5.2～5.8,木聚糖浓度0.8%,温度60℃,DNS用量为2.0～2.5m l。     

木质纤维素酶高产菌株的筛选和鉴定

从海南省乐东、三亚和儋州等市县采集的23份土样中粗筛获得186株具有纤维素降解能力的菌株,11株具有木质素降解能力的菌株,经进一步筛选获得纤维素酶高产菌和木质素酶高产菌各2株,编号分别为12—4、3—5、6—1和3—3。在以香蕉茎叶粉为主要基质的培养基中30℃、120r/min振荡培养5d,12—4和3—5分解羧甲基纤维素钠(CMC)的酶活分别达到979U和226U,分解滤纸(FP)的酶活分别为46.4U和15.1U,6—1和3—3的木质素酶活分别为32.8U和16.4U。经初步鉴定,这些菌株分别属于Trichodermasp.,Penicillumsp.,Streptomycesflavus和ChoanephoraCurreysp.,可用于发酵香蕉茎叶生产饲料的进一步研究。      

红树林土壤中高产纤维素酶菌株的筛选

红树林生态系统复杂,土壤微生物资源丰富。试验采用唯一碳源平板法,从红树林土壤中筛选得172个菌株,分别进行产内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶的平板鉴定,对较高活力的菌株进行了发酵试验,利用DNS和FPA法测定酶活,获得10株具有高产纤维素酶活性的菌株,其中一株真菌HBZ003分解纤维素能力较强且酶活稳定,其CMC酶活为3 229.67 U,滤纸酶活为1 536.80 U;另一株真菌Z005具有较明显的外切酶阳性特征,其CMC酶活为1 970 U,滤纸酶活为871.67 U,对菌株HBZ003、Z005分别进行形态观察、生化鉴定系统的鉴定,初步确认菌株HBZ003为产紫青霉(Penicillium purpurogenun),菌株Z005为枝状芽枝霉(Cladosporium cladosporioides)。     

一株低温秸秆纤维素降解菌的分离、鉴定及降解特性

本研究在18℃条件下,利用赫奇逊滤纸培养基分离纯化菌株,根据透明圈和滤纸降解情况筛选菌株,最终通过酶活分析和秸秆降解率确定目的菌株,通过形态学观察与ITS基因序列分析对目的菌株进行初步鉴定,分离筛选高效低温秸秆纤维素降解菌并研究其产酶特性。结果表明,从小兴安岭山区土壤中分离到1株在低温下具有较强纤维素降解能力的真菌菌株C1,15 d内对秸秆的降解能力达55.6%,滤纸酶活和CMC酶活分别为18.4 U/mL和54.3 U/mL,初步鉴定菌株C1为青霉菌属(Penicillium sp.),具有进一步研究开发的潜力。     

发酵罐制备大豆异黄酮糖苷转化酶(β-糖苷酶)条件的研究

纳豆菌1号（BJC—1）是一株高产大豆异黄酮糖苷转化酶的菌株。本实验采用正交设计的方法，筛选出该菌的最佳产酶条件为：2％的葡萄糖为碳源；2％的大豆蛋白胨为氮源；发酵液pH值维持在7．0-7．5之间；装液量为2L；接种量为6％；发酵温度34℃；转速180r／min；发酵时间为32h。其产酶的最高酶活可达127．60IU。Ca^2＋、Mg^2＋对产酶有促进作用；Cu^2＋、Fe^3＋对产酶有抑制作用；K^＋、Zn^＋对产酶基本没有影响。     

葡萄糖对组成型毕赤酵母发酵产α-葡聚糖酶的影响

本文主要考察葡萄糖对毕赤酵母生长和组成型表达α-葡聚糖酶的影响。采用单因素实验法考察初始发酵培养基中葡萄糖浓度、补料阶段葡萄糖残留、通气量等对α-葡聚糖酶产量的影响。结果表明发酵培养基中初始葡萄糖浓度50g/L最佳,提高初始葡萄糖浓度,毕赤酵母生长和α-葡聚糖酶产量都明显受到影响。补料过程葡萄糖残留越小越有利于酶的表达,最理想的控制应该是葡萄糖残留几乎为零,但又保证能满足菌体的生长和表达需要。提高通气量有利于增加α-葡聚糖酶的产量,发酵时间66h为宜。在优化条件下,α-葡聚糖酶酶活达16537U,为利用葡萄糖生产α-葡聚糖酶打下基础。     

富硒巴西蘑菇菌丝胞外酶活性研究

采用含梯度浓度硒的液体培养基培养巴西蘑菇菌丝体,研究茵丝胞外蛋白酶、淀粉酶、羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、漆酶和愈创木酚氧化酶的活性变化。结果表明：添加适当浓度的硒对巴西蘑菇菌丝这6种胞外酶的活性均有促进作用,其中淀粉酶活力的最合适硒浓度是10μg／ml,其它5种酶活力的最合适硒浓度均是20μg／ml：低于最适硒浓度时,硒对酶活性的促进作用随着硒浓度的增大而增强,高于最适硒浓度时,硒对酶活性的促进作用逐渐降低,并最终产生抑制作用。     

大豆三类共生体生理生化特性变化规律研究 Ⅰ

本文报道了从我国１５个省（区）分离的大豆三类共生体５４个菌株的部分生理生化特性及其变化的研究结果。菌株的世代时间测定表明，２６株快生菌株为２．６～４．７ｈｒ，１２株慢生菌株多数为８．５～１２．０ｈｒ，１６株超慢生菌株在１８．２～３９．６ｈｒ之间；改变碳源对代时有影响，但仍在各自的代时范围内，证明世代时间是大豆根瘤菌菌株间比较稳定的重要表型特征之一；在ＹＥＭ培养基上快生菌株产酸，超慢生菌株产碱能力比慢生菌株强，碳源不同使其产酸碱能力发生变化；三类共生体中都存在尿酶、硝酸还原酶、过氧化氢酶和β—半乳糖苷酶的活性，快生菌株这些酶活性较强，超慢生菌株较弱，慢生菌株基本介于二者中间。     

甜菜种植密度试验

通过试验和调查研究，明确了内蒙古达拉特旗原料区甜菜纸筒育苗移栽的适宜种植密度为64442-67340株／hm^2，产量达到67t／hm^2以上，产糖量达10．876-12．51t／hm^2；比密植和稀植分别提高含糖率0．5度和1．04度；产糖量分别提高13．5％和8．4％。     

麦芽中内—β—葡聚糖酶的研究

本文研究了麦芽内—β－葡聚糖酶的提取方法和作用条件，用0．2MHAC－NaAC缓冲液（PH7．0，含0．1MAcl）40℃搅拌萃取50分钟制备粗酶液：内—β－葡聚糖酶作用的最适温度45℃，最适PH4．6；原料大麦中该酶活性35U／g，发芽3天达到150U／g，绿麦芽中134U／g，经焙燥后活性降低38％。     

茶树内生真菌菌株CSN-4产谷氨酸脱羧酶条件优化

从茶树中分离到一株相对较高谷氨酸脱酸酶活力的内生真菌菌株CSN-4,对该菌株产谷氨酸脱羧酶的发酵培养基及发酵条件进行优化。采用单因素—响应面法对以YPD为基础的发酵培养基及发酵条件进行优化。结果为每200 m L的发酵培养基:乳糖5 g,酵母膏1.6 g,蛋白胨5.4 g,NH4NO3 2 g,KH2PO4 0.9 g,Mg SO4 0.4 g,谷氨酸钠1 g。发酵条件为:装液量40 m L,转速180 rpm,p H值6.0,发酵温度28℃,发酵时间72 h。葡萄糖,酵母膏,KH2PO4为3个最显著因素。在优化后的培养基和培养条件下,谷氨酸脱羧酶酶活力达到98.63 U/m L,是优化前的2.26倍。单因素和响应面结合的方法优化发酵培养基组分和发酵产酶条件,是一种简单有效的方法,可以较大幅度地提高产酶量。