从消化与代谢两方面看不同蛋氨酸来源的相对生物学效价

蛋氨酸羟基类似物 (DL -MHA -FA)生物学效价较蛋氨酸低的主要原因在于三方面。1　DL -MHA -FA中二聚体与多聚体不易被动物消化与吸收这是导致该产品生物学效价低的一个重要原因。商品液体DL -MHA -FA含 88%的羟基类似物 ,其中包括 65 %的单体和 2 3 %的二聚体及多聚体羟基类似物。在动物肠道内 ,二聚体和多聚体必须先经水解成单体才能被吸收 (Lawson和Ivery,1 986)。用 4至 5周龄的肉鸡试验发现 ,在不同的温度环境下 ,DL -MHA -FA的二聚体和多聚体的吸收率比单体差。虽然二聚体和多聚体约等于液体DL -MHA -FA含量的 2 3 % ,…     

蛋氨酸羟基类似物相对生物学效价、吸收和代谢的刍议

蛋氨酸是一种畜禽必需氨基酸,目前有2种蛋氨酸产品,一种是粉状DL-蛋氨酸(DLM),有效含量为99%;另一种是液体的蛋氨酸羟基类似物(MHA-FA),呈深褐色黏液状,有效成分是2-羟基-4-甲基-丁酸(HMB)的单体、二聚体和多聚体(单体、二聚体和多聚体的含量分别为65%、20%、3%)。DLM和HMB的区     

蛋氨酸羟基类似物的研究进展

蛋氨酸羟基类似物（Methionine Hydroxy Analogue,MHA）化学名为2-羟基-4-甲硫基丁酸（2-hydroxy-4methyl-thio butanoic acid,HMB）,商品名为Alimet,是一种酸性很强的液体有机酸,含水量12％,含活性蛋氨酸羟基类似物88％,其中部分羟甲硫丁酸分子间脱水形成聚合物,商品Alimet中含有大约65％-70％的单体,15％-20％的二聚体和3％的三聚体。聚合体在消化道中,在阳离子,水和酶的参与下均能可逆地水解为单体,羟基蛋氨酸钙盐又名MHA-Ca,蛋氨酸含量80％,为浅灰色颗粒粉末,有硫化物的特殊气味,是由Alimet与氢氧化钙中和反应,经干燥粉碎过筛后制得。     

兔关节软骨细胞的获取及培养

试验采用组织块法和酶消化法获取兔关节软骨细胞,并对这两种方法取得的效果进行对比分析。在酶消化方法上,运用Ham-F12培养液和无Ca2 、Mg2 的PBS液配制2g/L的Ⅱ型胶原酶进行消化,同时结合酶阶段性消化法收获软骨细胞,对细胞成活率进行测定。对最终收获的细胞进行培养观察,测定软骨细胞的分泌活性。结果表明:在获取细胞的数量上,酶消化法明显优于组织块法;在成活率比较试验中,Ham-F12配制组明显高于常规的PBS液(无Ca2 、Mg2 )配制组,两组之间存在显著差异(P<0.05);对体外培养的软骨细胞进行鉴定,结果显示软骨细胞仍具有较强的分泌基质能力。在此试验消化分离体系下,可得到大量的、高活性的软骨细胞,且在体外能维持良好的生长特性。     

猪的营养研究进展

欧洲、北美和亚洲的最新研究,指出了商品猪饲料应用营养学的研究方向。本文介绍猪营养研究最新进展的某些实例。一、体外预测饲料的营养价值猪饲料的消化率能否用酶技术模仿肠道消化在体外正确预测呢?Foulum丹麦国立畜牧研究所的科学家说:“当然能”。用这种方法大量研究证实,该法可预测饲料的回肠消化性(ilealdigestibility)和粪便消化性(faceal di-gestibility)。研究人员说,在过去二十年研究出几种实验室方法预测猪饲料消化能和氨基酸值。方法是饲料样品与酶接触,模仿肠道消化。尽管这些方法大多是很好的,但仍需从更多方面加以     

家蚕丝素蛋白抗氧化肽的制备及其稳定性研究

利用碱性蛋白酶水解家蚕丝素蛋白制备抗氧化肽,考察水解pH、水解时间、加酶量、底物浓度、水解温度5个因素对水解产物DPPH自由基清除率的影响,在此基础上采用响应面试验优化水解工艺条件,并调查家蚕丝素蛋白抗氧化肽对热、酸、碱和体外肠道消化的稳定性,测定不同分子质量范围的家蚕丝素蛋白水解产物组分的抗氧化活性.结果 表明,碱性蛋白酶水解制备家蚕丝素蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为水解pH 8.69、水解时间60 min、加酶量3035 U/g、底物(丝素蛋白)质量浓度26.80 g/L、水解温度53.89℃,在此条件下制备获得的家蚕丝素蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为55.16％.家蚕丝素蛋白抗氧化肽具有良好的热稳定性;在中性环境中抗氧化活性很稳定,但在强酸和强碱环境中抗氧化活性明显降低;经体外模拟胃肠道消化后,对DPPH自由基的清除率比未消化处理对照组提高了9.43百分点.分子质量小于5 kD组分是家蚕丝素蛋白抗氧化肽的主要活性组分.研究结果为家蚕丝素蛋白功能产品的开发提供了试验依据.     

一株产胶原蛋白酶沙雷氏菌的分离及鉴定

从土样和水样中分离具有明胶水解活性的细菌。经活性平板初筛、牛皮消化实验和活性测定表明,菌株Col-C对牛皮具有较强消化能力,对Ⅲ型胶原蛋白的水解活性为21.19 U/mL。经形态学观察、生理生化特性和16SrDNA序列分析,鉴定该菌株为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescen)。该菌株所产胶原蛋白酶可用于饲用皮革蛋白粉的消化降解。     

溶菌酶多聚体对蛋鸡抗氧化、肠道形态及肠道菌群的影响

试验旨在探究溶菌酶单体和溶菌酶多聚体对蛋鸡抗氧化、肠道形态及肠道菌群影响比较。随机选取体重、生理状态基本一致的23周龄360只蛋鸡,随机分为3组,每组6个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础饲粮,处理I组饲喂基础饲粮+500 mg/kg溶菌酶单体,处理II组饲喂基础饲粮+500 mg/kg溶菌酶多聚体。预试期7 d,正试期49 d。结果表明：与对照组相比,溶菌酶单体组和溶菌酶多聚体组蛋鸡血清丙二醛（MDA）含量、回肠隐窝深度以及肠道厚壁菌门相对丰度显著降低,绒/隐、肠道菌群Sobs指数、Shannon指数、Ace指数以及拟杆菌门相对丰富度显著提高,溶菌酶多聚体组蛋鸡血小板总数和粒细胞数目以及十二指肠绒/隐显著显著提高,十二指肠隐窝深度显著降低;溶菌酶单体组和溶菌酶多聚体组蛋鸡血清总抗氧化能力（T-AOC）以及过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性均有上升趋势,十二指肠、空肠、回肠的pH均有下降的趋势（P>0.05）。由此可见,本试验条件下添加溶菌酶多聚体可以提高抗氧化能力,改善肠道形态,提高肠道菌群丰富度,提高机体健康。     

胃蛋白酶法评定反刍动物饲料蛋白质降解率的研究

实验研究了用单一胃蛋白酶法评定反刍动物饲料蛋白质降解率及其主要因素,并研究了三种不同分离方法的稳定性,建立了体外胃蛋白酶法评定饲料蛋白质降解率的方法,用该法研究了六种饲料蛋白质降解的动态规律。同时对酶解法测得的饲料蛋白质降解率进行瘤胃动态消化模型处理,并将处理结果以及酶解法不同时间点蛋白质降解率分别与体内法和尼龙袋法进行比较。     

猪呼吸道上皮细胞的体外原代培养研究

为探索猪呼吸道上皮细胞体外的原代培养,对胶原酶Ⅳ+胰酶消化法、胰酶消化法、胶原酶Ⅳ和胰酶消化结合组织块培养法以及组织块培养法等4种分离细胞的方法进行了比较,同时比较了不同浓度胎牛血清的培养基所培养细胞的纯度及成活率,采用差速贴壁法纯化细胞并对所得的上皮细胞进行冻存复苏研究。结果表明:组织块培养法培养获得的细胞数量和纯度极显著高于胰酶消化法(P0.01),胶原酶Ⅳ+胰酶消化法获得的细胞成活率显著高于胰酶消化法;含有5%血清的培养基培养的细胞成活率及纯度均高于用10%血清培养(P0.01),冻存1个月后的细胞复苏率为85%。     

多聚酶链反应在实验动物病毒检测中的应用

多聚酶链反应在实验动物病毒检测中的应用田克恭（军事医学科学院实验动物中心，北京丰台１０００７１）多聚酶链反应（ＰＣＲ）是一种体外酶促扩增ＤＮＡ新技术，具有特异性和敏感性高，快速高效等优点。自Ｓａｉｋｉ等人（１９８５）［１］报道以来，已广泛应用于生物学...     

响应面优化枯草杆菌复合酶法提取罗非鱼皮多肽饲料添加剂工艺研究

本试验以罗非鱼鱼皮为原料,经酸碱处理后,加热熬制得到胶原蛋白,再用复合蛋白酶水解制备罗非鱼皮胶原蛋白肽。研究pH、温度和酶添加量对罗非鱼鱼皮酶解消化的影响,并采用响应面法优化枯草杆菌复合酶法提取鱼皮多肽饲料添加剂工艺。结果表明：枯草杆菌复合酶法提取鱼皮多肽饲料添加剂的最佳工艺参数为：酶解pH7.64、温度50.30℃、加酶量1.55%,在此操作条件下,多肽的提取率最高,为14.63%。此提取工艺参数优良,稳定性强,可以为鱼皮多肽饲料添加剂的研发与运用提供理论依据。     

酶和化学处理对羽毛溶解度和消化率的影响

试验的目的是评价酶和化学方法处理羽毛对营养重复利用的影响。试验分 5个处理组 :1)对照、2 ) 2 4 -h酶水解、3) 2 4 -hNaOH水解、4 ) 2 -hNaOH水解、5 ) 2 -hNaOH和 2 4 -h酶水解。各处理组氮的溶解度分别为 0 .91、2 .5 5、78.83、30 .0 3和 5 0 .0 4 %。对照、2 4 -h酶、2 -hNaOH、2 -hNaOH和 2 4 -h酶处理的羽毛渣用胃蛋白酶消化 ,氮的溶解度分别为 4 .6 7、13.19、5 5 .83和5 9.0 8%。除丙氨酸外 ,2 -hNaOH和 2 4 -h酶处理的体外氨基酸消化率明显高于 2 -hNaOH或2 4 -h酶处理 (p <0 .0 5 )。除蛋氨酸、组氨酸外 ,2 -hNaOH处理的氨基酸消化率明显高于 2 4 -h酶处理。 2 4 -h酶、2 4 -hNaOH、2 -hNaOH、2 -hNaOH和 2 4 -h酶处理每溶解 1kg羽毛的造价分别为 9.6 4、4 .72、12 .39、2 2 .97美元。结果表明 ,延长NaOH处理时间 ,可提高羽毛的溶解度 ;进一步的酶处理可提高羽毛的溶解度、胃蛋白酶的消化率和体外氨基酸的消化率。     

绵羊上皮细胞三种纯化与培养方法的比较研究

为了探索一种简便、高纯度分离子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的方法,以及建立高纯度体外子宫内膜细胞培养模型,该试验将原代细胞的3种培养方法,即组织块贴壁法、胰蛋白酶消化法和胶原蛋白酶消化法进行比较,结果表明胶原蛋白酶消化法对细胞的损伤小,细胞生长良好,相比较而言使用胶原蛋白酶消化法最理想。     

仿生消化法评定猪饲料营养价值的研究进展

基于体外酶法的仿生消化技术评定猪饲料的营养价值已被丹麦、荷兰、法国等发达国家所认同,但该技术仍未脱离传统方法以水解活性无法重复的胰液素为模拟消化液酶源,以"三角瓶+摇床"为全手工测试工具的研究思路。因此,在酶法的创新上,模拟消化液制备的生物学背景与标准化,以及建立规范化的体外模拟消化工具一直是该研究领域的核心与难点。本文综述了国内外猪模拟消化技术的最新研究进展,并对动物营养学国家重点实验室在此方面的研究成果进行了总结和介绍。     

小鼠精原干细胞的分离纯化及初步鉴定

用两步酶消化法对昆明白小鼠睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定。经两步酶消化所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为97.03%、2.97%和2.95%;平均每个睾丸可获得4.53×105个细胞。Percoll不连续密度梯度离心初步纯化后得到4个细胞带,精原细胞主要分布在40%~50%Percoll梯度间,得到的精原细胞密度为3.20×106个/mL。因此,采用两步酶消化,结合Percoll不连续密度梯度离心法分离的昆明白小鼠精原细胞能满足体外培养的需要,还可以作为精原干细胞移植的研究材料。     

酶解羽毛粉的体外蛋白质消化率及其在生长猪日粮中的应用效果

试验旨在测定酶解羽毛粉的体外蛋白质消化率,同时研究酶解羽毛粉替代日粮中鱼粉对生长猪生产性能和蛋白质消化率的影响。体外试验采用胃蛋白酶-胰酶水解法对水解羽毛粉和酶解羽毛粉进行消化测定其蛋白质消化率。饲养试验选用135头体重相近的杜×长×大生长猪,随机分成3组,分别为对照组(3%秘鲁鱼粉组),处理Ⅰ和Ⅱ(酶解羽毛粉50%和100%替代秘鲁鱼粉)。结果表明:酶解羽毛粉体外蛋白质消化率比水解羽毛粉提高了15.38%(P<0.05)。处理组平均日增重和平均日采食量与对照组均无显著差异(P>0.05);饲料增重比及蛋白质消化率也与对照组差异不显著(P>0.05)。结合生产性能试验与经济效益分析,酶解羽毛粉100%等蛋白替代秘鲁鱼粉组为最佳,在生产实践中具备实用性和可行性。     

饲料及饲用酶制剂中果胶酶活力的测定

饲用酶制剂作为饲料添加剂在饲料中的应用越来越广泛。果胶酶制剂作为一种重要的添加剂还没有国家标准和测定方法标准。酶活力的测定主要有还原法、色原底物法、粘度法等 (冯涛 ,2 0 0 3)。其中还原法中的 3、5 -二硝基水杨酸(DNS)比色法 (简称DNS法 )作为动物体外测定酶活力的方法具有操作简便 ,对试剂、仪器等条件要求不高等优点 ,该方法是利用果胶酶在一定温度、时间和pH值条件下水解果胶 ,释放出的还原性半乳糖醛酸与 3、5 -二硝基水杨酸发生显色反应 ,水解生成半乳糖醛酸的量与吸光度成正比 ,即与果胶酶活力成正比 ,用分光光度法进…     

草鱼对血球蛋白粉离体消化的研究

试验采用体外消化法研究草鱼(Ctenopharyngodonidella)对血球蛋白粉、普通血粉、红鱼粉和白鱼粉的消化能力。草鱼对4种饲料原料的离体消化率为:血球蛋白粉88.00%、白鱼粉77.48%、红鱼粉70.56%、普通血粉35.42%。结果表明,血球蛋白粉部分替代鱼粉在水产饲料中作为饲用蛋白是可行的。     

几种蛋白质原料体外消化率测定方法的比较

试验分别采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法、肉食性鱼类(如鲈鱼)消化道粗酶提取液消化法和草食性鱼类(如草鱼)消化道粗酶提取液消化法测定了酪蛋白、鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉等7种蛋白质原料的体外消化率。3种测定方法中,鱼粉的消化率差异不显著(P>0.05);豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉用两步法和草鱼消化酶法测定的消化率无显著差异(P>0.05);棉籽粕消化率用两步法测定值高于用消化酶法的测定值,差异极显著(P<0.01);豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉的消化率用两步法比用鲈鱼消化酶测定的值高,差异极显著(P<0.01);草鱼消化酶法和鲈鱼消化酶法对酪蛋白的消化率无显著差异(P>0.05),而对于豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉草鱼消化酶法测定值高于鲈鱼消化酶法的测定值,差异极显著(P<0.01)。结果表明,胃蛋白酶-胰蛋白酶两步体外消化法在测定鱼粉蛋白质消化率时可以替代鱼类消化液粗酶消化法,对于其它蛋白质原料使用该方法应慎重。