一品红愈伤组织诱导·增殖及悬浮系建立的研究

[目的]为一品红原生质体融合及遗传转化等相关研究奠定基础。[方法]以一品红品种"喜庆红"的顶芽和带芽茎段为外植体,进行愈伤组织诱导、增殖及悬浮系建立的研究。[结果]以浓度0.1%升汞处理顶芽和带芽茎段的时间分别以6 min和10 min为宜。在MS固体培养基里分别添加活性炭、PVP和Vc后,愈伤组织在培养过程中褐化程度有所减轻,但与对照相比差异并不显著。[结论]一品红愈伤组织悬浮系的适合继代周期为7~8 d。     

太行菊组织培养研究

对太行菊生长期间茎顶芽和带腋芽的茎段进行组培试验。结果表明,对外殖体应用0.1%的HgCl2进行表面灭菌,5min处理茎顶芽和8min处理茎段的死亡率和感染率较低。外殖体组织分化有直接生成愈伤组织、小植株体,愈伤组织和不定芽同时生成三种形式。     

连香树愈伤组织诱导研究

[目的]为珍稀濒危树种连香树寻求组培快繁方法。[方法]以1/4MS、1/2MS、MS添加不同浓度的NAA、KT、GA3为培养基,以连香树当年生带芽茎段为外植体进行愈伤组织诱导。[结果]以4月份采集的带芽茎段作为外植体愈伤组织诱导效果相对较好;在1/4MS+NAA 1.0 mg/L+KT 0.2 mg/L+GA31.00 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果相对较好,但总体而言愈伤组织诱导率较低。[结论]连香树愈伤组织诱导具有可行性,需进一步研究。     

不同培养条件对油茶愈伤组织和芽诱导的影响

[目的]为油茶的快速繁殖提供技术参考。[方法]以油茶品种岑软2号和岑软3号的鲜嫩带芽的茎段和顶芽为外植体,分别设置不同消毒时间,9组培养基激素浓度配置,2个光照条件,进行组织培养。[结果]在其他条件一致的情况下,不同的外植体消毒方式、培养基激素配置和光照条件对油茶愈伤组织和芽的诱导的影响各异。采用0.1%HgCl2对外植体消毒6min的诱导效果最好,岑软2号和岑软3号的成活率分别达71%和73%;激素配置为6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L时,愈伤组织和芽的诱导效果达到最佳,岑软2号和岑软3号的诱导率分别为47.8%、48.5%;接种后直接进行光照培养的效果最好,岑软2号和岑软3号的愈伤组织和芽的诱导率分别为45%、62%。[结论]最佳条件：0.1%HgCl2消毒6min;激素配置为6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L;接种后直接进行光照培养。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

土人参愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

[目的]建立土人参愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。[方法]研究不同植物激素组合对叶片、茎段愈伤组织诱导的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。[结果]叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳诱导、增殖培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋6-BA0.5 mg/L（pH5.8）。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,最适继代周期为15 d。[结论]以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

不同因素对油樟愈伤组织生长的影响

[目的]筛选油樟组培条件。[方法]以油樟带芽茎段为外植体,通过愈伤组织诱导率、污染率、褐变等指标研究无机盐、光照、抗生素等因素对愈伤组织生长影响。[结果]愈伤组织在2种培养基上均能明显增殖,且MS的培养效果好于1/2MS。由带芽茎段诱导的新生愈伤组织略带绿色。继代培养后,黑暗中诱导和培养的愈伤组织为淡黄色或白色,光照下培养的愈伤组织为褐色。愈伤组织诱导率和外植体污染率都随抗生素浓度的增加而降低,25～50mg/L的链霉素处理出愈率最高(60%～72%),污染率最低(0～15%),死亡率也最低(0)。在相同浓度下,使用链霉素外植体死亡率最低。[结论]MS培养基+25～50mg/L链霉素是油樟组培的最佳条件。     

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。     

甘草2种类型愈伤组织的细胞学显微结构观察

[目的]比较甘草茎段愈伤组织和根段愈伤组织在细胞学显微结构方面的差异。[方法]以有再分化能力的甘草芽愈伤组织和无再分化能力的甘草根段愈伤组织为试验材料,利用非生物制片技术与生物制片技术对二者培养24d,再用涂片法和石蜡法分别进行线粒体和细胞骨架的活体染色观察。[结果]观察发现,2种愈伤组织中都存在运动型线粒体,且2种不同类型的愈伤组织细胞中运动型线粒体数目存在显著差异。芽的细胞具有运动活性的线粒体数目多于根细胞,芽较根细胞的细胞骨架网状结构较密集,说明芽诱导的愈伤组织细胞中各项生理活动旺盛,启动分化所需的能量充足,易进行再分化,而胚根诱导的愈伤组织则相反。[结论]2种类型愈伤组织脱分化结构的差异对其再分化有一定影响。     

均匀设计在柑橘砧木离体培养再生体系建立中的应用

[目的]建立枳壳离体培养再生体系。[方法]采用均匀设计研究了不同时期枳壳茎尖、茎段、芽的愈伤组织诱导、增殖、分化、及生根情况。[结果]愈伤组织诱导率及生长量由高到低为春梢夏梢秋梢冬梢;不同时期外植体诱导愈伤组织所需生长调节物质种类、浓度、配比不同,春梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好,夏梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 4.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好。愈伤组织增殖的最优配方是MT+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.2 mg/L。在MT+6-BA 0.25 mg/L+IBA 0.3 mg/L培养基上不定芽分化效果好,不定根发生率、根数、根的质量均在1/2MT+NAA 4 mg/L培养条件下最佳。[结论]为枳壳快速繁殖、脱毒技术和相关细胞工程的研究奠定基础。     

雪菊的组织培养研究

以雪菊带芽茎段、茎尖、叶片为外植体以MS为培养基添加不同浓度6BA和NAA进行组织培养实验,结果表明适合带芽茎段愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.3mg/L;适合茎尖愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.1mg/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L,适合雪菊愈伤组织增殖和不定芽诱导的培养基为MS＋6BA2.0mg/L＋NAA0.3mg/L;适合雪菊试管苗生根的培养基为1/2MS＋6BA0.3mg/L＋XAA0.03mg/L,蔗糖减半,以雪菊无菌苗的带芽茎段、茎尖和叶片为外植体成功地诱导出了愈伤组织,其中带芽茎段愈伤组织诱导率最高时间最短效果最好茎尖次之叶片最差.     

欧美杨108离体叶片和茎段再生体系的优化(英文)

[目的]优化欧美杨108的无性繁殖再生体系的培养条件。[方法]以欧美杨108无菌苗为材料,采用正交试验优化叶片直接分化和茎段愈伤组织分化再生体系的培养条件。[结果]欧美杨108的叶片适宜在光照下进行直接再生分化,茎段适宜在光照下进行愈伤组织诱导再生分化。叶片不定芽分化的培养基为MS基本培养基(琼脂7.0 g/L、pH 6.0、蔗糖20 g/L)附加0.6 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA;茎段愈伤组织诱导培养基为WPM固体培养基附加0.75 mg/L KT和1.5 mg/L 2,4-D。不定芽诱导生根培养基为WPM固体培养(蔗糖30 g/L)附加2.0 mg/L IBA。[结论]该研究优化了欧美杨108叶片的直接分化再生体系和茎段愈伤组织再生体系的培养条件,为其组织培养及遗传转化体系的构建提供了基础支持。     

猫须草组织培养研究

[目的]研究猫须草离体培养的最佳激素配比和最佳培养基。[方法]以猫须草幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对茎段腋芽萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。[结果]6-BA可促进腋芽萌发,分化丛生芽。随着6-BA浓度的增加,萌发腋芽的数量反而减少,当6-BA的浓度大于2.5 mg/L时,茎段便不再长出腋芽,而是在其顶端出现愈伤组织。在一定浓度范围内,随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的生长就越旺盛,当2,4-D浓度为2.0 mg/L时,愈伤组织增殖效果最好。NAA浓度为1.0 mg/L时诱导茎段生根效果最好,生根率达到100%。[结论]适宜的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L,适宜继代增殖培养基为MS+2,4-D2.0 mg/L,茎段生根的适宜培养基为MS+NAA1.0 mg/L。     

罗布麻外植体的筛选及愈伤组织诱导

以罗布麻带芽茎段、茎段、幼根为外植体,探讨不同培养基、不同激素配比对罗布麻愈伤组织形成的影响。结果表明:适宜的罗布麻外植体为带芽茎段;适宜的培养基为MS培养基;适宜愈伤组织诱导的激素配比为6-BA0.6mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,其愈伤组织诱导率达到100%。     

山核桃愈伤组织诱导的初步研究

采用正交设计研究了不同植物激素配比、蔗糖质量浓度、外植体取材部位以及单宁含量等因素对山核桃组织培养中愈伤组织形成的影响。结果表明：WPM＋BA8．0mg.L^-1 IB2.0mg.L^-1 GA1.0mg.L^-1＋蔗糖30mg.L^-1是最适培养基；顶芽和第4芽段为较适宜的山核桃愈伤组织诱导的取材部位；不同芽段愈伤组织的形成率与其单宁含量不相关，而与芽段愈伤组织形成的部位有关，且随着单宁含量的减少。愈伤组织形成的部位向切口上升。选取1年生实生苗茎尖和茎段，配比合理的植激素加以诱导，可提高山核桃嫁接成活率。表5参11。     

矾根‘莱姆里基’愈伤组织诱导及快速繁殖技术

[目的]本文旨在通过组织培养的方法,建立矾根‘莱姆里基’(Heuchera micrantha‘Lemriki’)愈伤组织诱导和快速离体繁殖技术体系。[方法]以矾根‘莱姆里基’的幼嫩茎段、叶柄、叶片为外植体进行组织培养,明确0.1%的升汞溶液不同消毒时长的灭菌效果以及对3个外植体愈伤诱导的影响,研究不同配比的激素对3个外植体愈伤组织诱导,对茎段不定芽及不定根诱导的影响。[结果]结果表明,消毒时长对矾根‘莱姆里基’不同部位外植体的消毒效果影响显著,幼嫩叶柄、茎段和叶片的最佳消毒时长分别为:0.1%升汞6 min,8 min,10 min。叶柄和叶片诱导愈伤的最佳激素配方为:1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,愈伤率为91.11%、90.00%。幼嫩茎段诱导愈伤的最佳激素配方为:1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,愈伤率为75%。幼嫩茎段诱导不定芽的最佳激素配方为:0.1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,诱导率为72.2%;茎段不定芽诱导生根的最佳激素配方为:1.0 mg·L~(-1)IBA,生根率为100%,且根系健壮。[结论]本研究通过组织培养的方法初步建立了矾根离体繁殖技术体系,可为矾根资源保护和分子育种提供技术支撑,并且有效解决了矾根传统繁殖方式速度慢的难题,对矾根的标准化、规模化生产和新品种的开发和应用具有重要的现实意义。     

永福杜鹃离体再生与组培快繁技术

[目的]研究永福杜鹃组织培养离体再生体系。[方法]以永福杜鹃的带腋芽幼嫩茎段、带顶芽茎尖和不带顶芽茎尖为外植体,采用不同激素配比进行组培快繁研究,建立永福杜鹃离体快繁技术体系。[结果]适宜永福杜鹃离体培养的外植体为带顶芽茎尖,外植体消毒以0.1%氯化汞消毒5 min为宜,芽诱导最适培养基为1/2MS+2-ip 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+活性炭0.5 g/L,生根最适培养基为1/2MS+NAA 0.8 mg/L。[结论]建立了永福杜鹃组织培养离体再生体系,为永福杜鹃离体快繁技术研究提供理论依据。     

欧美杨108离体叶片和茎段再生体系的优化

[目的]优化欧美杨108的无性繁殖再生体系的培养条件。[方法]以欧美杨108无菌苗为材料,采用正交试验优化叶片直接分化和茎段愈伤组织分化再生体系的培养条件。[结果]欧美杨108的叶片适宜在光照下进行直接再生分化,茎段适宜在光照下进行愈伤组织诱导再生分化。叶片不定芽分化的培养基为MS基本培养基(琼脂7.00 g/L、pH 6.00、蔗糖20 g/L)附加0.60 mg/L 6-BA和0.20 mg/L NAA;茎段愈伤组织诱导培养基为WPM固体培养基附加0.75 mg/L KT和1.50 mg/L 2,4-D。不定芽诱导生根培养基为WPM固体培养(蔗糖30 g/L)附加2.00 mg/L IBA。[结论]优化了欧美杨108叶片的直接分化再生体系和茎段愈伤组织再生体系的培养条件,为其组织培养及遗传转化体系的构建提供了基础支持。     

绿玉菊离体培养与快速繁殖

用绿玉菊叶片、不带腋芽茎段、带腋芽茎段和茎尖为外植体进行离体培养研究,分析了影响愈伤组织形成的因素及分化困难的原因.研究结果表明:在愈伤组织诱导时,不带腋芽茎段较嫩叶易产生愈伤组织,是首选外植体;6-BA1. 0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1的激素配比对茎段愈伤组织诱导有利,诱导率高达100%;在MS基本培养基中,pH值为5.4较适宜愈伤组织的分化,且6-BA3.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1对愈伤组织分化不定芽的效果较好,分化不定芽均数达11.10个.茎尖及带腋芽茎段在MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1的培养基上,能直接诱导出大量生长健壮的丛生芽,生根在MS+NAA0.05mg·L-1的培养基上进行,生根率高达100%,根多而壮,植株长势好.     

马铃薯东农303对两种抗生素敏感性的研究

[目的]探讨马铃薯东农303对两种抗生素敏感性,为进一步改良与利用东农303提供依据。[方法]以马铃薯东农303无菌苗的无腋芽茎段和单芽茎段为外植体,研究东农303在诱导愈伤组织和芽的过程中对卡那霉素或头孢霉素的敏感性。[结果]东农303无腋芽茎段对两种抗生素的敏感性存在一定差异,东农303以卡那霉素作为无腋芽茎段诱导愈伤组织的抗性筛选时适宜浓度为50 mg/L,作为单芽茎段芽生长的抗性筛选时适宜浓度为100 mg/L。东农303对头孢霉素也较敏感。无腋芽茎段在含头孢霉素100 mg/L的培养基中培养时芽的诱导率受到明显抑制。[结论]东农303对两种抗生素均较为敏感,对头孢霉素的抗性要高于卡那霉素。