提高大白菜游离小孢子胚诱导率的研究

采用游离小孢子培养方法,对提高大白菜小孢子胚诱导和形成的因素进行了研究。结果表明,24个大白菜品种（品系）在NLN-13液体培养基中有21个品种诱导出胚。各品种间小孢子胚产量差别极大,每花蕾产胚在0．1-14．66个之间。比较添加不同浓度蔗糖和激素的NLN培养基的培养效果,以NLN＋13％蔗糖的效果较好。接种后,小孢子在33℃高温预处理24—48h,产胚量较高。B5＋6．BA0．2mg／L＋3％蔗糖＋1％琼脂培养基有利于小孢子胚长成植株。     

大田油菜游离小孢子培养高频胚状体诱导及植株再生

以大田生长的双低油菜品系“9841”为供试材料，研究了影响小孢子培养反应的因素。结果表明：始花期前、后一周的主轴花序为起始材料经1-2d4℃低温预处理，B5培养基为提取液游离小孢子培养于含脯氨酸200mg/L、谷氨酰胺800mg/L、蔗糖13%的NLN培养基，32℃热激1d后转入25℃常温静置培养，二周后进行45rpm振荡培养，可提高胚状体的诱导频率及正常植株再生率。     

小麦游离小孢子培养的研究

在游离小孢子培养过程中认为子房共培养可显著地提高游离小孢子胚状体愈伤率和再生率 ,子房共培养以 2 0个子房为宜。低温子房共培养胚状体发生和愈伤率低 ,但绿苗分化率较高 ,施加PAA、谷氨酰胺对游离小孢子形成的胚状体有促进作用。麦芽糖是游离小孢子培养最好的碳源 ,以蔗糖、葡萄糖以及葡萄糖和果糖搭配作碳源均未获得胚状体。检查培养 3d后的小孢子活力发现 ,唯有麦芽糖作碳源培养的小孢子有活力 ;认为高浓度的蔗糖、葡萄糖以及葡萄糖加果糖对小孢子有毒害作用。当葡萄糖浓度达到 2 0mmol/L时就对小孢子有毒害作用且致死。当在麦芽糖培养基中培养 1d后加入高浓度的葡萄糖发现小孢子存有活力 ,而且随着起始培养天数的增加活力也增加。对Y77品系来讲 ,适宜小孢子培养的麦芽糖浓度为 0 12mol/L。饥饿和热激 (33℃ )预处理对游离小孢子培养有促进胚状体和愈伤形成的作用     

活性炭对小白菜游离小孢子培养的影响

以24个小白菜品种为材料,通过在NLN培养基中添加不同浓度活性炭,研究其对游离小孢子培养的影响.结果表明:在NLN-13培养基中添加活性炭(0.5 g/L),有利于小孢子胚的诱导和形成,供试材料(N4,N8)添加活性炭处理胚诱导率较未添加活性炭的处理分别提高19,66.5倍.采用添加活性炭(0.5 g/L)的NLN培养基对24份小白菜品种进行游离小孢子培养,有20份材料诱导出胚,培养成功率为83.3%.表明添加活性炭的培养基对小白菜游离小孢子培养有较好的效果.不同基因型间胚诱导率差别较大,每花蕾诱导胚数为0.4～86.7个.依据胚诱导率的高低可将其分为极易诱导、易诱导、难诱导和不能诱导出胚4类.B5 6-BA 0.2 mg/L NAA 0.02 mg/L 活性炭0.5 g/L 3%蔗糖 1%琼脂培养基有利于幼胚长成植株.     

小白菜小孢子胚状体诱导影响因素研究

以10个小白菜杂交种为试材,采用游离小孢子培养方法,研究影响小孢子胚状体形成因素的结果表明,不同品种胚状体的诱导率不同;NLN培养基中大量元素减半有利于小孢子胚诱导,其诱导率达到100%;培养基中添加0.05 mg/L的6-BA和0.2 mg/L的NAA可以提高胚状体诱导率;活性炭和琼脂糖对诱导胚状体发生和发育有促进作用,可使子叶胚的比例达90%以上;花蕾经4℃低温预处理24 h后的成胚率显著提高。     

提高甘蓝型油菜小孢子胚状体成苗率的某些培养因素研究

甘蓝型油菜小孢子胚转到固体培养基上可直接发芽成苗或继代1～2次后成苗。直接成苗率与基因型、培养基成分和培养温度有关,与胚状体放置方式无关。(保604×Topas)F_2较DH保604直接成苗率高;1/2MS 0.1mg/L 6-BA较B_5 0.1mg/LGA_3利于胚状体直接发芽。胚状体转到固体培养基上经10℃低温培养5天或10天可提高直接成苗率,且10天效果更好。     

单倍体育种技术在油菜育种材料创新上的应用研究 I．甘蓝型油菜游离小孢子胚状体的诱导发生

利用游离小孢子培养技术，对9个甘蓝型杂交油菜（品种）组合的F1代进行离体小孢子培养。2月底，当供体植株的第一朵花开时，取长度在2．5－3．5mm的花蕾通过离心分离出小孢子，并在NLN13液体培养基中浅层培养诱导胚状体产生，培养30天左右，可见到多种类型的胚状体产生。其中，黔杂991、黔杂271和黔杂18分别诱导出了30个、12个和2个胚状体，其余组合未能产生胚状体。表明：不同基因型材料，不同培养密度和不同生理状态，其小孢子胚状体产生的频率差异较大。     

小白菜小孢子胚状体诱导影响因素研究

以10个小白菜杂交种为试材,采用游离小孢子培养方法,研究影响小孢子胚状体形成因素的结果表明,不同品种胚状体的诱导率不同;NLN培养基中大量元素减半有利于小孢子胚诱导,其诱导率达到100%;培养基中添加0.05 mg/L的6-BA和0.2 mg/L的NAA可以提高胚状体诱导率;活性炭和琼脂糖对诱导胚状体发生和发育有促进作用,可使子叶胚的比例达90%以上;花蕾经4℃低温预处理24 h后的成胚率显著提高.     

影响油菜游离小孢子培养再生因素的研究进展

7胚的培养及植株再生 7．1培养方式 经过高温处理后的小孢子，在24-25℃黑暗条件下静置培养2-3周，并保持良好的通气状况，促进胚的形成。胚龄是指从接种到胚被转移至固体培养基上，这段时间的长短。诱导植株再生最适合的胚龄是27d，0．2-0．3cm大小的胚比0．6-0．8cm的胚好。当肉眼可见胚状体（球状至鱼雷状早期）后，可以采用以下两种方法进行培养：     

影响油菜游离小孢子培养再生因素的研究进展

游离小孢子培养已经成为油菜遗传育种和生物工程的重要内容。由于影响游离小孢子形态发生的因素较多，尤其是生长在大田环境下的植株，小孢子发育不一致，游离小孢子形态发生产生频率低，因此形态发生诱导率低仍然是限制该技术广泛应用的一个问题。为此，深入和全面了解影响小孢子形态发生能力及再生体系的各种因素，掌握这一领域的研究动态和今后发展的方向，有助于优化油菜小孢子的再生体系、促进油菜育种。本文总结了油菜游离小孢子形态发生的研究进展，并认为应用分子技术克服小孢子离体形态发生障碍有极大的发展潜力。     

秋水仙碱及热击与低温诱导对油菜小孢子胚状体成苗率的影响

甘蓝型冬油菜F1杂种分离小孢子直接用500 mg/L秋水仙碱处理15 h,在NLN-13培养液中培养,并于32℃和30℃分别热击暗培养3 d和7 d后转入24℃下培养,胚胎发生好,5周后产生大量正常胚体.将这些发育优异的胚体移入固体MS培养基后即进行10 d低温诱导(2℃),常温(24℃)光下培养能很好地萌发并直接、快速地再生植株,其萌发胚率和成苗率     

低温预处理对甘蓝型油菜小孢子胚胎发生的影响

研究了大田环境下栽培的甘蓝型油菜小孢子胚状体诱导过程中低温预处理的作用,结果表明:两个供试材料经过低温预处理,小孢子胚胎发生能力明显提高,同时,不同基因型要求的预处理时间不同。G369的胚产量在低温3d时达到最高,是对照的27.2倍,而Topas的胚产量在低温2d时达到最高,是对照的15.4倍。试验还统计了子叶型胚状体发生频率,发现与对照相比,处理后子叶型胚状体的频率呈下降趋势,表明低温预处理使小孢子胚发育同步性降低。     

甘蓝型黄籽油菜的遗传研究

从1975—1990年作者及其研究集体系统坚持了甘蓝型黄籽油菜的遗传育种研究。15年来取得了以下主要研究结果: 1.甘蓝型黄籽油菜的种皮色泽不同于白菜型、芥菜型和埃塞俄比亚油菜,为土黄或姜黄,而没有纯黄,只有杂黄,即在黄色种皮上有黑色斑点、斑块或褐色环带。 2.长期自交后仍得不到遗传上稳定的纯黄后代;在大群体中,不论是自     

甘蓝型油菜小孢子培养胚发生能力的遗传分析

用 4× 4完全双列杂交研究了甘蓝型油菜小孢子培养胚状体发生能力的遗传规律。结果表明 :多数F1的胚产量与具高胚发生能力的亲本相近 ,部分F1的胚产量与双亲中亲值接近。胚状体发生能力主要由基因的加性效应控制。高胚发生能力由显性核基因控制。广义和狭义遗传力分别为 97 2 %和 81 1%。由Lisandra(高胚发生能 )×Kamikita(低胚发生能 )的F2 群体胚发生数的分离结果得出小孢子胚状体发生能力由具加性效应特点的两个基因位点控制     

甘蓝型油菜生态雄性不育两用系的研究：Ⅰ.雄性不育两用系的遗传

ＡＢ１是从甘蓝型油菜品系８４－１与８４－２杂交Ｆ３群体中分离出的雄性不育两用系。ＡＢ１在昆明或西宁夏播时表现为雄性不育，在武昌秋播时则表现为雄性可育。ＡＢ１雄性育性的变化是细胞质、细胞核基因（环境条件敏感基因）与环境条件（可能是温度）互作的结果。ＡＢ１的雄性育性恢复基因为一对主效基因，当细胞核内有一个显性基因时，环境条件敏感基因的作用被掩盖。环境条件敏感基因可能是微效多基因。     

Production of Spontaneous Diploid Lines from Isolated Microspores Following Cryopreservation in Spring Rapeseed (Brassica napus L.)

Cryopreservation of microspores provides a potentially powerful means for increasing percentage of spontaneous diploids in microspore-derived populations in rapeseed (Brassica napus L.). This study was to investigate the production of spontaneous diploid lines in relation to steps of cryopreserving micro-spores of two spring rapeseed breeding lines G-231 and M3-124. Microspores of both genotypes were isolated and subjected to Cryopreservation. The step of cooling process (before liquid nitrogen immersion) in a Cryopreservation protocol resulted in high percentages of spontaneous diploids in lines regenerated from frozen microspores in both genotypes. Liquid nitrogen immersion and subsequent thawing process had no influence on the percentage of spontaneous diploids. A linear relationship between percentage of spontaneous diploids and cooling temperatures was detected. The lowest cooling temperature of ?40 °C yielded the highest percentages of spontaneous diploids (51.1 % in G-231 and 47.7 % in M3-124, respectively), which were more than doubled in comparison to those in the corresponding unfrozen controls. The current study indicated that cold treatment may be utilized to greatly enhance the percentage of spontaneous diploids in rapeseed breeding programs.     

利用小孢子培养选育榨菜胞质甘蓝型油菜CMS恢复系研究

以榨菜胞质甘蓝型油菜恢复系材料“06 B033”为母本,优质油菜新品种(系)为父本配制7个杂交组合,并对其F1代进行小孢子培养.结果发现,不同父本的杂交组合在小孢子培养成胚率上表现极显著差异;对获得的DH群体进行对榨菜胞质甘蓝型油菜CMS的恢保性鉴定.结果表明,有5个DH株系对榨菜胞质甘蓝型油菜CMS表现良好的恢复性.     

甘蓝型油菜轮回选择研究

以同时携带显性核不育基因Ms和显性不育抑制基因Rf的甘蓝型油菜为父本,含有相应隐性等位基因的同类型油菜为母本,经一代杂交成功地把显性核不育基因导入具不同细胞质来源的基因型中.90%以上的杂种一代\回交和复交组合均表现为1可育:1不育的分离.在第一批转育所用的15个亲本中,有3个对由Ms基因控制的雄性不育性有抑制作用,它们